WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 18 | 19 || 21 | 22 |

• вмодельных экспериментах: неинвазивные ис­следования можно повторятьнесколько раз, используя одну группу животных (при этом fc» уменьшаетсяколичество животных, необходи­мых для данного исследования);

• в ходе Iфазы клинических испытаний (назна­чение препарата здоровым добровольцам или больным лицам) дляизучения физиологиче­ских механизмов действия препарата;

• припроведении II фазы клинических исследова­ний (проведение контролируемыхклинических исследований в параллельных группах, перекре­стные клинические исследования):использова­ниевоспроизводимых и объективных методов позволяет сократить количество включенныхв исследование лиц. Кроме того, радиоизотопные методы легко поддаютсястандартизации и мо­гут быть использованы при проведении много­центровых клиническихисследований;

• в ходеIII фазы клинических испытаний: при проведении крупных многоцентровыхклини­ческихисследований, в которых анализируют­ся параметры, измеряемые радиоизотопными методами (кровоснабжениемиокарда, функ­циялевого желудочка сердца и пр.).

В настоящее время синтезированы новыерадио­активныесоединения для адекватной и воспроиз­водимой оценки физиологических ибиохимиче­скихпараметров:

• приизучении патофизиологических механиз­мов развития данного заболеванияили синдро­ма(например, при ишемии миокарда или при нарушении кровоснабжения мышц на фонефизической нагрузки);

• приизучении механизмов действия лекарст­венного средства (например,влияние ингиби­торовАПФ на почечный кровоток);

Радиоизотопные методы исследования илекарственные средства — Р ТеШег

• приизучении механизмов развития побочных реакций. Например, у некоторых больных нафоне приема препаратов из группы фторхино-лонов могут развиваться судороги.Используя метод ПЭТ, удалось показать, что эти препара­ты, не влияя на мозговой кровоток,способны снижать метаболизм глюкозы в структурах го­ловного мозга. Такой методическийподход по­зволяетрационально отбирать препараты уже на ранних этапах производства.Радиоизотоп­ные методыприменяются при оценке функци­ональной активности разных органов и систем в норме и патологии, втом числе - у экспери­ментальных животных-на фоне приема новых препаратов."Фармакологический скрининг" на ранних этапах приводит к значительной экономиисредств, так как для поиска наиболее эффективных препаратов можно использоватьболее действенные и адекватные критерии. Бо­лее того, радиоизотопные методыпозволят изу­чатьфармакокинетику препаратов в условиях in vivo, на уровне специфическихрецепторов. Безусловно, для этих целей лучше подходит ме­тод ПЭТ, однако в ряде случаев(если соединение мечено изотопом 1231) можно использовать и од­нофотонную эмиссионнуюкомпьютерную томо­графию. Например, метод ОЭКТ позволяет полу­чить количественную информацию обособенно­стяхсвязывания лекарственных препаратов со специфическими рецепторами,расположенными в структурах головного мозга. Если такое связы­вание носит обратимый характер,избыток неме­ченогопрепарата (как правило - терапевтическая доза) вытесняет меченое соединение излиганд-ре-цепторного комплекса. В этом случае можно рас­считать параметры, характеризующиесвязыва­ние препаратасо специфически^ рецептором (на­пример, константу диссоциации Kd и количество специфических местсвязывания Втах).

Радиорецепторный анализ в условиях in vivo -это новое важное направление молекулярной фарма­кологии. Однако в настоящее времятакой подход далек от совершенства, а все методы радиорецеп-торного анализануждаются в дальнейшем разви­тии (особенно, если учитывать чрезвычайную сложность биологическихпроцессов). Более того, при проведении фармакологических исследова­ний удобнее использовать не ПЭТ, аобычные ра­диоизотопные методы, которые широко распро­странены и легко доступны вбольшинстве разви­тыхстран. К сожалению, производители лекарст­венных средств мало знакомы как сОЭКТ, так и с ПЭТ. Внедрение этих методов требует согласо­ванной работы фармацевтическихкомпаний и на­учныхорганизаций, занимающихся исследовани­ями в области фармакологии иклинической фар­макологии. Роль, которую могут играть ОЭКТ и ПЭТ при разработкеновых препаратов, в значи­тельной степени зависит от заинтересованности фармакологическихкомпаний в данных, полу­ченных этими методами.

Радиоизотопиые методы и исследованияфункции головного мозга

Метод ПЭТ наиболее эффективен приисследова­нии функцийголовного мозга, в том числе при оценке мозгового кровотока, изученииметаболи­ческихпроцессов, нейромедиаторных и нейроре-цепторных систем. Большинствоэнергетических субстратов, использующихся клетками головного мозга, а такжемногие психотропные препараты можно пометить радиоактивными изотопами сбе­та-распадом.Медиаторные системы играют важ­ную роль в функционировании центральной и пе­

риферической нервной системы, и оценкаособен­ностеймоноаминергической передачи представля­ет собой одно из наиболееинтересных направле­ний современных исследований. В настоящее вре­мя синтезирован ряд соединений,позволяющих исследовать различные рецепторные системы го­ловного мозга. При изучениимозгового кровото­камогут применяться как ПЭТ, так и ОЭКТ, од­нако ОЭКТ оказывается менеечувствительным методом и не позволяет рассчитывать абсолютную концентрациюмеченого соединения. С помощью метода ОЭКТ можно исследовать распределениенекоторых психотропных препаратов в структу­рах головного мозга (например,бензодиазепинов, меченных изотопом 123!). В последнее время воз­можности радиорецепторного анализазначитель­норасширились. Были синтезированы соедине­ния (меченные изотопами сбета-распадом или 123!),позволяющие исследовать ранее недоступные медиаторные системы. Кроме того, прирадиоре-цепторном анализе ПЭТ и ОЭКТ имеют ряд преи­муществ по сравнению с другимиметодами. Так, использующиеся при этом меченые соединения более специфичны, аметоды регистрации более чувствительны. Данные, полученные методами ПЭТ и ОЭКТ,оказываются статистически досто­верными и могут быть использованы для анализа функциональнойактивности отдельных рецептор-ных систем в норме и патологии (например, прирасчете количества связывающих мест и аффин­ности специфическихрецепторов).

Исследования нейрорецепторных систем играютважную роль в понимании физиологических ос­нов функционирования головногомозга. В то же время, анализ этих систем чрезвычайно сложен, а полученныеданные часто не однозначны. Именно поэтому выводы о состоянии рецепторныхсистем или их вовлеченности в патогенез заболеваний следует делать состорожностью. Например, при проведении радиорецепторного ' анДвиза нельзяиспользовать меченые эндогенные нейромедиато-ры, так как чувствительностьметода в этом слу­чаеоказывается недостаточной (эндогенный мече­ный лиганд не может связываться соспецифиче­скимрецептором в присутствии избытка немече­ного соединения). Как следствие,для анализа функционирования рецепторных систем исполь­зуют синтетические высокоаффинныесоединения (агонисты и антагонисты рецепторов), к числу ко­торых могут относиться илекарственные препа­раты. Наконец, благодаря достижениям молеку­лярной фармакологии и биологии,удалось выяс­нить, чтовсе нейрорецепторные системы являют­ся гетерогенными, и каждый медиатор нервной системы можетсвязываться с несколькими под­типами специфических рецепторов. Поиск селек­тивных лигандов, специфичных дляданного под­типарецепторов, представляет собой одну из ос­новных задач современныхисследований.

Впервые метод ПЭТ был использован дляанализа связывания "С-фторнитрозепама в структурах го­ловного мозга. Это соединениеотносится к груп­пебензодиазепинов и в условиях in vivo вытесня­ется из лиганд-рецепторногокомплекса под дей­ствием избытка лоразепама. Действие всех клас­сических препаратовбензодиазепинового ряда опосредуется центральными бензодиазепиновымирецепторами, которые представляют собой часть ГАМК-бензодиазепинового-С!рецепторного комп­лекса. В настоящее время при исследовании бен-зодиазепиновыхрецепторов наиболее широко ис­пользуют антагонист флумазенил и его меченый аналог ^Ч-йомазенил.Эти соединения можно ис­пользовать при проведении ОЭКТ для характери-

Радиоизотопные методы исследования илекарственные средства — Р. Tellier

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ

стики бензодиазепиновой рецепторной системыв условиях in vivo и in vitro. Несомненную пользу может принести и метод ПЭТ,который позволяет оценить функциональную активность бензодиазе-пиновыхрецепторов при некоторых неврологиче­ских и психических заболеваниях,включая эпи­лепсию,тревожные состояния, болезнь Гентинг-тона (хорея Гентингтона) и болезньАльцгеймера. Однако на сегодняшний день наиболее изученной являетсядофаминергическая система, в частно­сти дофаминовые рецепторы Dg.

Так, во многих исследованиях дляхарактеристи­киВд-рецепторов дофамина использовали нейро-лептик бутирофенон и ПЭТ.Холинергические ре­цепторы играют важную физиологическую и пато­генетическую роль, участвуя ввыполнении когни­тивных функций, процессах памяти, развитии де-менции и пр. В своюочередь, ОЭКТ и ПЭТ позво­ляют дать качественную и количественную оценку функциональнойактивности холинергических ре­цепторов в структурах головного мозга. Эти мето­ды могут быть использованы нетолько в диагно­стических, но и в терапевтических целях, напри­мер, при разработке новых, болееспецифичных способов лечение больных с деменцией. Существу­ют несколько лигандов мускариновыххолинерги­ческихрецепторов, которые могут быть использо­ваны совместно с ПЭТ или ОЭКТ.Так, при прове­денииПЭТ у людей с успехом был использован ли-ганд "С-скополамин. Оказалось, что этосоедине­ниеизбирательно накапливается в коре головного мозга, стриатуме, таламусе иваролиевом мосту. В последние годы было синтезировано достаточно много лигандовсеротонинергических рецепторов (5-ГТ), но лишь некоторые из них могут бытьис­пользованысовместно с ПЭТ или ОЭКТ. На сегод­няшний день описано пять подтипов серотонАо-вых рецепторов.Например, в развитии аффектив­ных расстройств решающую роль играют 5-ГГд (или Sg) рецепторысеротонина (при этих расстрой­ствах эффективны антагонисты 5-ГТд-рецепторов). Кроме того,5-ГТ^-рецепторы участвуют в проведе­нии эффектов галлюциногенов. Недавно синтези­ровано соединение "Ч-кетансерин,обладающее высокой удельной активностью, которое было ус­пешно использовано при проведенииОЭКТ для ви­зуализациисеротониновых рецепторов в структу­рах головного мозга обезьян-бабуинов.

Интенсивные исследования в этой областипозво­лилисинтезировать ряд других лигандов - "С-ме-зулергин, "Г-сетоперон и"С-метил-бромо-ЛСД. Однако, по результатам предварительных иссле­дований, эти лиганды связываютсяне только с D^-дофаминовыми, но и с альфа-1-адренергиче-скими рецепторами,причем такое перекрестное связывание наблюдается не в коре головногомоз­га, а в другихструктурах, например, в базальных ядрах. Хотя специфичность данных лигандовока­зывается все женесколько выше, чем производ­ных спиперона, полученные с их помощью дан­ные достаточно сложноинтерпретировать. Ана­лиз серотониновых рецепторов в условиях in vivo будет иметь важноеклиническое значение для больных, страдающих депрессией, аутизмом,бо­лезнью Альцгеймераи болезнью Паркинсона.

В 1985 г. метод ПЭТ и "С-карфентанил(высоко­аффинныйлиганд мю-рецепторов) были использо­ваны для характеристики опиодных рецепторов человека. Оказалось,что у больных с типичными проявлениями височной эпилепсии в височно-те-меннойобласти повышено содержание мю-рецеп­торов. Несколько позже былосинтезировано со­единение - "С-дипренорфин, который образует комплекс, легкодиссоциирующий в присутствии

некоторого избытка эндогенных опиоидов. Этотлиганд, по-видимому, можно будет использовать для оценки концентрации опиоидовв разных от­делахголовного мозга в условиях in vivo. Радио­изотопный анализ мю-рецепторовможет быть применен при исследовании патогенеза эпилеп­сии, болезни Альцгеймера илидеменции.

Качественная и количественная оценка местоб­ратного захватанейромедиаторов в пресинаптиче-ских окончаниях - это относительно новоенапра­влениерадиорецепторых исследований. Основное внимание исследователей направлено внастоящее время на изучение дофаминергической системы, и уже получен рядданных, характеризующих особенности пре- и постсинаптической передачи дофамина,в частности описаны специфические рецепторы, участки и механизм обратногозахва­та этогомедиатора, места хранения дофамина и пр.

Радиоизотопные исследования - этомногообещаю­щийинструмент молекулярной фармакологии, имеющий особое значение при изучениифункци­ональнойактивности структур головного мозга. Несмотря на сложность кинетическихмоделей, использующихся для количественной характери­стики рецепторных систем, методыПЭТ и ОЭКТ все чаще будут применяться при изучении меха­низмов действия лекарственныхсредств. В неда­лекомбудущем эти методы позволят проводить испытания новых препаратов на уровнеотдель­ныхнейромедиаторных систем или метаболиче­ских процессов.

Радиоизотопные исследования вкардиологии:

общепринятые методы

Радиоизотопные методы, например -сцинтигра-фия миокарда с радиоактивным таллием (201Т1), широко используются вкардиологии. Такие со­единения, как ""Те, ""Тс-тебороксим позволяют оценитьметаболическую активность миокарда ^» или коронарный кровоток, используяобычные гамма-камеры.

Сцинтиграфия миокарда с радиоактивнымталли­ем во времяпробы с физической нагрузкой или при в/в введении дипиридамола обладаетдоста­точнойчувствительностью и позволяет:

•диагностировать или прогнозировать развитие ишемической болезнисердца;

• вестинаблюдение за больными после проведе­ния баллонной ангиопластики илиаорто-коро-

Pages:     | 1 |   ...   | 18 | 19 || 21 | 22 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.