WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 |
удК616-097:621.375.826 Оригинальная статья кинетика клеточных попУлЯций тимУСа под влиЯнием инфракраСного лазерного излУчениЯ И.О. Бугаева – ГОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава, проректор по общественным связям и воспитательной работе, заведующая кафедрой гистологии, профессор, доктор медицинских наук; А.В. Егорова – ГОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава, ассистент кафедры гистологии, кандидат медицинских наук;

О.В. Злобина — ГОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Роcздрава, ассистент кафедры гистологии.

kINetIkS OF CeLLULAR POPULAtIONS UNDeR INFLUeNCe OF INFRA-ReD LOw-POweR LASeR IRRADIAtION I.O. Bugaeva – Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovskiy, Pro-rector of Public Relations and Educational work, Head of Department of Histology, Professor, Doctor of Medical Science; A.V. Egorova — Saratov State Medical University n.a. V.I.

Razumovskiy, Department of Histology, Assistant, Candidate of Medical Science, O.V. Zlobina — Saratov State Medical University n.

a. V.I. Razumovskiy, Department of Histology, Assistant.

дата поступления — 01.12.09 г. дата принятия в печать — 15.02.10 г.15.02.10 г.

И.О. Бугаева, А.В. Егорова, О.В. Злобина. Кинетика клеточных популяций тимуса под влиянием инфракрасного лазерного излучения. Саратовский научно-медицинский журнал, 2010, том 6, № 1, с. 23–26.

Исследовано влияние низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучения на морфокинетику клеточных популяций тимуса здоровых экспериментальных животных. установлено, что число тимоцитов коркового вещества тимуса под влиянием низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучения стресса снижается, что связано с миграционными процессами и уходом тимоцитов на другие территории. Проникновение тканевых базофилов в строму тимуса и их контакт с ретикуло-эпителиальными клетками является важным фактором для стимуляции процессов пролиферации и дифференцировки тимоцитов.

Ключевые слова: низкоинтенсивное инфракрасное лазерное излучение, тимус, клеточные популяции.

I.O. Bugaeva, A.V. Egorova, O.V. Zlobina. Kinetiks of cellular populations under influence of infra-red low-power laser irradiation. Saratov Journal of Medical Scientific Research, 2010, vol. 6, № 1, p. 23–26.

the morphokinetiks of cellular populations under the influence of infra-red low-power laser irradiation has been studied. our researchers evidenced, that the number of cortical thymocytes decreases under the influence of infra-red low-power laser irradiation. invasion of Mast cells in to the stroma of thymus and their contact with the reticuloepitheliocytes are the important factors for the stimulation of proliferation and differentiation of thymocytes.

Key words: infra-red low-power laser irradiation, thymus, cellular populations.

Введение. тимус как орган обнаружен первыми мы, где они включаются в функциональный рециркуанатомами эпохи Возрождения. Однако до послед- лирующий пул т-клеток. это делает тимус чрезвычайнего времени роль его в организме оставалась за- но чувствительным к различного рода воздействиям гадочной. В начале 60-х годов xx века были полу- и, в частности, к лучевым.

чены факты, доказавшие участие тимуса в процессе ИК лазерное излучение обладает высокой пронииммуногенеза. По современным представлениям, кающей способностью [4]. т.о., при облучении передтимус — это центральный орган системы иммуни- ней брюшной стенки мышей, воздействию ИК излутета, контролирующий созревание и функциональ- чения подвергаются все органы и ткани животного.

ную активность лимфоцитов, которые осуществля- В современной научной литературе крайне скудны и ют иммунный надзор в организме [1, 2]. тимоциты противоречивы сведения о влиянии низкоинтенсивпо своим морфологическим свойствам практически ного лазерного излучения на структуру и функции не отличаются от обычных лимфоцитов и характевилочковой железы.

ризуются округлыми ядрами с грубым глыбчатым целью нашего исследования явилось комплексстроением хроматина и небольшим количеством циное изучение морфокинетики тимуса здоровых экстоплазмы. тимус является лимфоэпителиальным орпериментальных животных под влиянием низкоинганом, эпителиальная часть которого — стабильная тенсивного инфракрасного лазерного излучения с составляющая, имеющая местное происхождение.

использованием терапевтического лазерного аппаОсобенностью тимоцитов является высокая митотирата «узор». Основными параметрами исследуемой ческая активность и повышенная чувствительность проблемы явились: изучение кинетики клеточных к действию ионизирующего излучения, химических популяций тимуса, измерение относительной массы канцерогенов и стероидных гормонов.

вилочковой железы, подсчет корково-мозгового инлимфоидные элементы (собственно тимоциты) декса в процессе воздействия низкоинтенсивного лаопределяются как транзиторные [3]: их предшествензерного излучения на экспериментальных животных.

ники мигрируют в тимус из красного костного мозга, Методы. эксперименты проведены на 570 беа большая часть созревших в тимусе т-лимфоцитов лых крысах-самцах массой 180-200 г. Облучение мигрирует в периферический отдел иммунной систепередней брюшной стенки животных проводилось Ответственный автор — егорова Анна Валериевна контактно-зеркальным методом при помощи аппара410012 г. Саратов, ул. б. Казачья, 112, та Алт «узор», который является полупроводникоГОу ВПО Саратовский ГМу им. В.И. Разумовского Росздрава вым лазерным инжектором на арсениде галлия. Пател.: (8452) 66-98-05, 66-98-e-mail: aV_egorova @ bk. Ru раметры лазерного излучения, генерируемого этим Saratov Journal of Medical Scientific Research. 2010. Vol. 6. № 1.

24 макро- и микроморфологиЯ аппаратом: длина волны 890 нм импульсная частота ливали в парафин. Серийные срезы тимуса толщи1500 Гц; экспозиция 128 с. Средняя мощность излу- ной 5-7 мкм окрашивали:

чения (Р, по паспорту прибора) составляла для ча- - гематоксилином-эозином (для подсчета клеточстоты излучения 1500 Гц - 4 мВт. Плотность энергии ных элементов);

излучения на поверхности кожи животного (е) рас- - толуидиновым синим (для выявления метахросчитывалась по формуле мазии тучных клеток).

e = fpt, Подсчет клеточных элементов (малых, средних, больших лимфоцитов, плазмоцитов, тучных клеток, где е – плотность энергии излучения на поверхности иммунобластов) проводили в различных функциокожи (дж/см2); f – частота следования импульсов изнальных зонах тимуса стандартным методом при лучения (Гц); t – длительность лазерного импульса увеличении 200,400,900,1350 с использованием спе(с); p – средняя мощность лазерного излучения (Вт).

циализированной морфометрической сетки (АвтанПоглощенная доза (w) рассчитывалась по фордилов Г.Г., 1972, 1992) в 10 полях зрения на условной муле:

единице площади (6400 мкмІ). Фотосъемка гистолоW = IT (1 – Kft), гических препаратов проводилась с помощью цифровой фотокамеры Scopetek dcM 35 с програмSix мой обработки изображений MiniSee 2.0.

где w – поглощенная (введенная) доза энергии (дж/смІ); x - глубина расположения объекта; i – мощ- Результаты. При измерении относительной массы вилочковой железы облученных животных во все сроность излучения на данной глубине (Вт) (выбирается ки наблюдения существенных изменений, по сравнеиз специальных таблиц в зависимости от импульсной воздействующей мощности излучения и глубины рас- нию с контролем, выявлено не было. Подсчет корковоположения объекта); t - время экспозиции; k – ко- мозгового индекса выявил некоторое снижение этого эффициент отражения кожи для длины волны 890нм показателя через сутки после 1-го сеанса облучения с (0,38); f - частота следования импульсов излучения тенденцией к его увеличению на 3-и сутки опыта. На (Гц); S - площадь воздействия на поверхность био- 7-е (7 сеансов облучения) и 15-е (спустя 5 дней после ткани (смІ). В условиях проводимого эксперимента t окончания облучения) сутки наблюдалось увеличение = 128 с, f = 1500 Гц, t = 200 x 10-8 c, S = 6 см, плотность корково-мозгового индекса (табл. 1).

энергии на поверхности кожи для частоты 1500 Гц со- К 21-м суткам данный показатель приближался к ставила 12,6х10-3 дж/см2. Облучение животных прово- контрольному и оставался таковым до 30-х суток надилось ежедневно в течение 10 дней (10 сеансов). блюдения.

Группу контрольных животных составили 80 крыс- Морфокинетика клеточных элементов тимуса хасамцов линии Вистар массой 180-200 г, что соответ- рактеризовалась незначительным угнетением лимствует возрасту около 3-х месяцев. фоцитопоэза в корковом веществе в 1-е и 3-и сутки для гистологических и гистохимических исследо- наблюдения: количество малых лимфоцитов составаний выделенный у животных тимус фиксировали вило, соответственно, 120,0±4,4 и 115,4±3,06 (при в 7% нейтральном формалине. После стандартной 144,6±3,1 в контроле, p<0,01). уменьшалась плотгистологической проводки в спиртах возрастающей ность расположения тимоцитов, что было наиболее концентрации материал просветляли в ксилоле и за- заметно в субкапсулярной зоне, где обнаруживались Таблица Значения корково-мозгового индекса в тимусе мышей после воздействия НИЛИ (M±m) ИК лазерное облучение (сутки эксперимента) Контроль 1 3 7 15 21 2,05±0,09 1,2±0,09* 3,1±0,1* 3,3±0,08* 2,9±0,09* 1,95±0,06 2,0±0,Примечание: * – различия достоверны по сравнению с контролем (p<0,05).

Таблица Количественная динамика тимоцитов в корковом веществе вилочковой железы экспериментальных животных при облучении ИК лазером. (абс.число/ед.площади, M±m) Название клеточных элементов Группы сутки эксперимента Малые Средние бласты 144,6±3,1 17,2±0,8 4,8±0,Контроль 24 часа после первого 120,0±4,4* 8,3±0,5* 2,1±0,сеанса (1 сутки эксперимента) 3 сутки 115,4±3,06* 10,3±0,8* 6,5±0,Облучение 7 сутки 149,4±4,3 26,7±0,9* 8,6±0,3* 15 сутки 150,6±3,6 19,4±1,1 7,1±0,21 сутки 145,2±4,1 17,9±0,7 4,9±0,30 сутки 144,6±3,1 17,2±0,8 4,8±0,Примечание: * – различия достоверны по сравнению с контролем (p<0,05).

Саратовский научно-медицинский журнал. 2010. том 6. № 1.

MACRO- AND MICROMORPHOLOgY единичные тучные клетки с признаками дегрануляции (рис. 1). угнетение сменялось выраженным усилением пролиферативной активности корковых тимоцитов на 15-е сутки: число малых лимфоцитов составило 154,1±3,6 (при 144,6±3,1 в контроле, р<0,01). эта тенденция отчетливо проявлялась в наиболее репродуктивной подкапсульной зоне тимуса.

Клеточность в этой области увеличивалась, тканевые базофилы сохраняли нетипичную локализацию, оставаясь в субкапсулярной зоне (рис. 2). эпителиальные клетки на гистологических препаратах были гипертрофированы, в некоторых из них отмечались фигуры митоза.

В кортико-медуллярной зоне на 3-7-е сутки облучения выявлялись признаки активации тимоцитов в виде увеличения размеров, вплоть до бластной трансформации. Иммунобласты составляли 6,5±0,на 3-и сутки и 8,6±0,3 - на 7-е сутки (при 2,1±0,в контроле, р<0,01). эти показатели приближались к Рис. 1. тучные клетки тимуса с выраженными признаками дегрануляции (7-е сутки лазерного воздействия). Мазок отконтрольным на 21-е и 30-е сутки (табл. 2).

печаток. Окр. по Романовскому-Гимза. Об.90, ок. Мозговое вещество тимуса, в первые сутки наблюдения, содержало большее по сравнению с контролем количество средних и малых тимоцитов, что указывает на усиление процессов миграции зрелых клеток в мозговое вещество уже через 24 ч после первого сеанса облучения.

В последующие сроки эксперимента отмечалась тенденция к нарастанию интенсивности дифференцировки и миграции тимоцитов в мозговое вещество.

С 7-х по 15-е сутки содержание мозговых тимоцитов было максимальным. В дальнейшем число малых лимфоцитов этой зоны нормализовалось, а уровень средних лимфоцитов оставался существенно выше контрольного.

Содержание тканевых базофилов увеличивалось спустя 24 ч после первого сеанса облучения, нарастало на 3-и и 7-е сутки. Гипертрофированные тучные клетки с признаками дегрануляции в эти сроки наблюдения обнаруживались в паренхиме тимуса в подкапсульной зоне и хорошо выявлялись при окрашивании толуидиновым синим, а также метиловым Рис. 2. тучные клетки в субкапсулярной зоне тимуса зеленым и пиронином по браше.

(1-3и сутки облучения). Окр. метиовый зеленый, пиронин.

В последующие дни исследования количество Об.90, ок.этих клеточных форм заметно снижалось (ниже конко, исследования последних лет [7], показывают, что трольного показателя) к 15-м суткам эксперимента.

клеточный состав тимуса на фоне воздействия стресВосстановление содержания тканевых базофилов соров различной природы (звук, вибрация, введение происходило к 30-м суткам наблюдения (табл. 3).

вакцин, помещение в электромагнитное поле) претерОбсуждение. таким образом, низкоинтенсивное певает самые разнообразные изменения, трактовка ИК лазерное излучение оказывает выраженное влиякоторых неоднозначна. В соответствии с представление на клеточный состав паренхимы и стромы тимуниями авторов, эти изменения носят фазный харакса. Обнаруженное нами на 3-и сутки эксперимента тер и касаются всех ростков, а также ретикулоэпитеуменьшение клеточности тимуса может являться лиальной стромы. Одним из наиболее характерных следствием активации под влиянием НИлИ стрессмоментов при этом является накопление в ткани тиреализующих систем и включения механизмов общемуса широкоплазменных лимфоцитов с повышенной го адаптационного синдрома [5]. Возникающая при пиронинофилией цитоплазмы. Одновременно наблюэтом стимуляция структур гипоталамо-гипофизарнодаются изменения, характеризующие некоторые поднадпочечниковой системы приводит к освобождению вижки в метаболических процессах. число тимоцитов глюкокортикоидов, которые уменьшают количество коркового вещества тимуса на ранних этапах стрестимоцитов в корковом веществе тимуса [3, 6]. ОднаТаблица Динамика содержания тканевых базофилов в мозговом веществе тимуса при облучении ИК лазером (абс.число/ед.площади, M±m) ИК лазерное облучение Контроль (сутки эксперимента) 3,7±0,1 1 3 7 15 4,4±0,2* 5,3±0,09* 5,8±0,08* 1,4±0,1* 2,2±0,1* 3,6±0,Примечание: * – различия достоверны по сравнению с контролем (p<0,05).

Saratov Journal of Medical Scientific Research. 2010. Vol. 6. № 1.

Pages:     || 2 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.