WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 |
14 БиохимиЯ 4. Глущенко, Н.Н. Сравнительная токсичность солей и 7. Глущенко, Н.Н. Снижение бактериальной резистентнонаночастиц металлов и особенность их биологического дей- сти к антибиотикам за счет их синергизма с медью / Н.Н. Глуствия / Н.Н. Глущенко, О.А. богословская, И.П. Ольховская // щенко, л.А. Володина // биотехнология: состояние и проспекНанотехнология – технология xxi века: тез. докл. – М., 2006. тивы развития: Материалы ii Московского международного – С. 93-95. конгресса: тез. докл. – ч. 1. – М., 2003. – С. 88.

5. Аттестация и применение наночастиц металлов в ка- 8. Глущенко, Н.Н. Физико-химические закономерности честве биологически активных препаратов / И.П. Арсентьева, биологического действия высокодисперсных порошков мее.С. Зотова, Г.э. Фолманис. и др. // Нанотехника. Спец. выпуск таллов / Н.Н. Глущенко, О.А. богословская, И.П. Ольховская «Нанотехнологии-медицине». – 2007. – № 2 (10). – С. 72-77. // химическая физика. – 2002. – т. 21 (4). – С. 79-85.

6. байтукалов, т.А. Физико-химические особенности 9. Роль активных форм кислорода в медь-индуцированной ранозаживляющих свойств наночастиц железа и магния проницаемости плазматической мембраны бактерий в составе различных полимеров: Автореф. дис. … к. х. н. / escherichia coli / В.С. лебедев, А.В. Веселовский, е.ю. дейнет.А. байтукалов. – М., 2006. – 20 с. га., ю.И Федоров // биофизика. – 2002. – № 2. – С. 295-299.

удК616.61-002.151-056.7-037-07:577.21 Оригинальная статья молекУлЯрно-генетичеСкаЯ оценка риСка детерминированноСти повышенной активноСти ангиотензинпревращающего ферментапри геморрагичеСкой лихорадке С почечным Синдромом А.А. Байгильдина – ГОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию, доцент кафедры биологической и биоорганической химии, кандидат медицинских наук; Д.В. Исламгулов – Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН, лаборатория молекулярной генетики человека, научный сотрудник, кандидат медицинских наук; Ф.Х. Камилов – ГОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию, заведующий кафедрой биологической и биоорганической химии, профессор, доктор медицинских наук; Т.А. Хабелова – ГОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию, ассистент кафедры инфекционных болезней, кандидат медицинских наук; И.Р. Минниахметов – Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН, лаборатория молекулярной генетики человека, лаборатория молекулярной генетики человека, аспирант.

MOLeCULAR-geNetIC ASSeSSMeNt OF ANgIOteNSIN-CONveRtINg eNZYMe HYPeRACtIvItY DeteRMINANCY RISk At HeMORRHAgIC FeveR wItH ReNAL SYNDROMe A.A. Baygildina – Bashkiria State Medical University, Department of Biological and Bioorganic Chemistry, Assistant Professor, Candidate of Medical Science; D.V. Islamgulov – Ufa scientific centre of the RAS, Institute of biochemistry and genetics, laboratory of human molecular genetics, researcher, Candidate of Medical Science; F.Kh. Kamilov – Bashkiria State Medical University, Head of Department of Biological and Bioorganic Chemistry, Рrofessor, Doctor of Medical Science; T.A. Khabelova – Bashkiria State Medical University, Department of Biological and Bioorganic Chemistry, Assistant, Candidate of Medical Science; I.R. Minniakhmetov – Ufa scientific centre of the RAS, Institute of biochemistry and genetics, laboratory of human molecular genetics, post-graduate student.

дата поступления — 04.09.09 г. дата принятия в печать — 15.02.10 г.15.02.10 г.

А.А. Байгильдина, Д.В. Исламгулов, Ф.Х. Камилов, Т.А. Хабелова, И.Р. Минниахметов. Молекулярно-генетическая оценка риска детерминированности повышенной активности ангиотензинпревращающего ферментапри геморрагической лихорадке с почечным синдромом. Саратовский научно-медицинский журнал, 2010, том 6, № 1, с. 14–17.

цель работы – изучение активности ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) в сыворотке крови и полиморфизма гена рецептора ангиотензина ii (Ат ii) 1 типа при геморрагической лихорадке с почечным синдромом (ГлПС) как возможного предиктора заболевания. Обследованы 409 больных в возрасте от 15 до 65 лет. Активность АПФ определялась кинетически с использованием набора фирмы bьhlmann (швейцария). Геномная дНК из периферической крови выделялась методом фенол-хлороформной экстракции, генотипирование локусов изучаемой дНК проводилась методом ПцР синтеза дНК. cтатистически незначимое снижение активности АПФ наблюдается только в лихорадочный период среднетяжелой и тяжелой формы без осложнений; во все остальные периоды и при всех формах наблюдается статистически значимая гиперактивность АПФ. При тяжелой форме без осложнений наблюдаются резкие колебания активности АПФ в динамике болезни. При осложненной форме имеет место статистически значимая стабильно высокая активность фермента на всем протяжении болезни. Анализ полиморфизма гена рецептора Ат ii 1 типа свидетельствуют о том, что аллели *a1166 и *c1166, а также, генотипы *a1166/*a1166 и *c1166/*c1166 не ассоциированы со степенью тяжести течения ГлПС. Повышение активности АПФ при ГлПС не носит адаптивный характер из-за дефектов в рецепции Ат ii и является адекватным метаболическим ответом организма в ответ на внедрение эндотелиотропного вируса.

Ключевые слова: ангиотензинпревращающий фермент, ген рецептора ангиотензина ii 1 типа, геморрагическая лихорадка с почечным синдромом.

A.A. Baygildina, D.V. Islamgulov, F.Kh. Kamilov, T.A. Khabelova, I.R. Minniakhmetov. Molecular-genetic assessment of angiotensin-converting enzyme hyperactivity determinancy risk at hemorrhagic fever with renal syndrome. Saratov Journal of Medical Scientific Research, 2010, vol. 6, № 1, p. 14–17.

The research aimed to explore the changes of angiotensin-converting enzyme (ACE) blood activity and polymorphism of the angiotensin II type 1 receptor gene as disease predictor at hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS). In examination 409 patients at the age of 15-65 years were involved. ACE blood activity with the help of Bьhlmann (Switzerland) ACE kinetic test was determined. Blood genomic DNA by phenol- chloroformic extraction was isolated, genetic locuses by polymerase chain reaction of DNA synthesis were researched. It was shown that the ACE blood activity at HFRS is risen and these changes the significanter the severer form of disease. Nonsignificant rising of enzyme activity only in feveric period of both ungravic and gravic forms was observed. In gravic form significant changes of ACE activity are observed, in complicated form – stable high enzyme activity during all disease took place. Analysis of angiotensin II type 1 receptor gene polymorphism shown that alleles *A1166 and *C1166, genotypes *A1166/*A1166 and *C1166/*C1166 are not associated with HFRS severity. Made conclusion that high ACE activity is not adaptive reaction due to defect in angiotensin II binding and it is an adequate metabolic response of an organism to endotheliotropic virus action.

Key words: angiotensin-converting enzyme, gene of angiotensin ii type 1 receptor, hemorrhagic fever with renal syndrome.

Саратовский научно-медицинский журнал. 2010. том 6. № 1.

BIOCHeMIStRY Введение. Основными детерминантами здоро- (швейцария). Абсорбцию света регистрировали с повья являются немодифицируемые и некоррегируе- мощью ИФА-ридера «bench mark» компании «bioмые факторы риска, и ведущим среди них, помимо Rad». для генетического исследования пробы венозпола и возраста, является наследственность [1]. В ной крови брали в пробирки типа вакутейнера с эдтА.

настоящее время широко изучается вклад наслед- дНК выделяли из периферической крови методом ственных характеристик, влияющих на тяжесть те- фенольно-хлороформной экстракции [10]. Анализ почения заболеваний, вызванных воздействием раз- лиморфизма A1166С гена AGTR1 проводили методом личных – физических, химических, биологических полимеразной цепной реакции синтеза дНК с последу– факторов окружающей среды с целью выделения ющим ферментативным гидролизом с использованием групп повышенного риска развития той или иной па- эндонуклеазы рестрикции BstDEI «Сибэнзим». Результологии. Не случайно в последние годы значитель- таты амплификации оценивали с помощью электрофоное количество исследований посвящено поиску реза в 2% агарозном геле с последующим окрашиванигенов-кандидатов, ответственных за развитие раз- ем бромидом этидия и визуализацией в проходящем личных заболеваний, в частности заболеваний, при ультрафиолетовом свете. В результате амплификации которых основные патологические процессы разво- участка гена AGTR1, содержащего нуклеотидную замерачиваются прежде всего на уровне эндотелия сосу- ну А1166С, получали ампликон длиной 225 п.о. Амплидов, поскольку дисфункция эндотелия может иметь кон, содержащий аллель *С1166, несет сайт узнавания генетическую основу. есть ряд работ, свидетельству- фермента рестрикции BstDEI, и, расщепляясь, образующих об ассоциации полиморфных маркеров генов, ет продукты размером 110 и 115 п.о., в то время как кодирующих компоненты ренин-ангиотензиновой си- фрагмент дНК, содержащий аллель *А1166, остается стемы (генов ангиотензинпревращающего фермента нерасщепленным. Наличие фрагмента длиной (АПФ), ангиотензиногена, рецептора ангиотензина ii п.о. после обработки BstDEI соответствует генотипу (Ат ii) типа 1), с развитием артериальной гипертонии *А1166/*А1166, двух фрагментов (110 и 115 п.о.) – гено[2, 3, 4], с ИбС [5, 6], с дисфункцией эндотелия [7], с типу *С1166/*С1166 и трех (110, 115 и 225 п.о.) – гетерохронической почечной недостаточностью и анурией зиготному генотипу *А1166/*С1166.

[8] и др. Однако в доступной литературе отсутству- Обработку результатов исследования проводили ют сведения о влиянии генетических характеристик с использованием стандартного статистического пана развитие дисфункции эндотелия при заболева- кета программ Statistica 7.0 for windows и SpSS 13.

ниях инфекционной природы. В этой связи целью Результаты исследования активности АПФ оцениванастоящего исследования явилось изучение активли методами непараметрической статистики: опрености АПФ и полиморфизма гена рецептора Ат ii деляли медиану (Ме), интерквартильный интервал типа (AGTR1) как возможного предиктора развития [25% и 75%], достоверность межгрупповых различий гипертензии различной степени выраженности при средних величин оценивали при помощи критерия заболевании вирусной этиологии – геморрагической Манна-уитни. Результаты исследования представлялихорадке с почечным синдромом (ГлПС).

ли как Ме [q1; q3]. При сравнении частот генотипов, Методы. В исследование включили 409 больных аллелей в группах больных ГлПС с различной стес серологически подтвержденным методом непряпенью тяжести заболевания использовали критериймых флюоресцирующих антител диагнозом ГлПС (хи-квадрат) Пирсона. для всех видов анализа раз(346 мужчин и 63 женщин) в возрасте от 15 до личия принимали за значимые при р<0,05.

лет (средний возраст 33,6±3,5 лет), находившихся на Результаты. Определение активности АПФ в сыстационарном лечении в Му «Инфекционная клиниворотке крови больных ГлПС показало, что она в равческая больница № 4» г. уфы и в отделении гемодианой степени зависит и от периода заболевания, и от лиза Республиканской клинической больницы им. Г.Г.

степени его тяжести (табл. 1). лихорадочный период Куватова в 2003-2008 годах. Критериями исключения заболевания при среднетяжелой форме характеризуиз групп исследования были наличие в анамнезе ется статистически незначимой тенденцией к снижегипертонической болезни, болезней сердца и сосунию активности АПФ, в остальные периоды данной дов, сахарного диабета, ревматизма, злокачественформы наблюдается статистически значимый рост ных заболеваний, заболеваний печени и почек. При активности фермента с пиком в период полиурии – в определении степени тяжести ГлПС использовали 3,1 раза выше значений для контроля (рис. 1). Анаклассификацию б.З. Сиротина [9]. Среднетяжелая логичная тенденция к изменению изучаемого показаформа выявлена у 252 больных (61,6%), тяжелая теля имеет место и при тяжелой форме болезни без без осложнений – у 109 больных (26,7%), тяжелая осложнений. Однако, несмотря на динамику, сходную с осложненным течением – у 48 больного (11,7%).

со среднетяжелой формой, активность фермента в Группу контроля составили 52 практически здоровых полиурический период и в период восстановленного лица, сопоставимых по полу и возрасту.

диуреза неосложненной формы ГлПС достигает бодля определения активности АПФ взятие крови лее высоких значений (в 3,5 раз выше контрольных объемом 5 мл производили путем венепункции локтезначений) вплоть до статистически значимых развой вены утром натощак. Собранную в специальные личий в последний период не только с группой конпробирки без антикоагулянтов кровь выдерживали троля, но и между данными группами больных при часа при температуре 18°С, после чего центрифугировосстановлении диуреза. Осложненная форма ГлПС вали при температуре 4°С и 1000g и собирали сывоимеет отличную от остальных форм болезни динаротку. Образцы сыворотки крови для анализа хранили мику изменения активности АПФ: гиперактивность при температуре -20°С не более 6 месяцев. Активность энзима без значительных колебаний от периода к пеАПФ в сыворотке крови определяли кинетическим мериоду регистрируется в течение всей болезни также тодом с использованием набора фирмы «bьhlmann» с максимумом в полиурический период – в 3,3 раза Ответственный автор – байгильдина Асия Ахметовна выше контрольных значений – и со статистически не450097 г. Республика башкортостан, г. уфа, бульвар х. давлетшиной, значимой тенденцией к снижению в период восстад.18., кв. 101.

новленного диуреза. При присоединении осложнений тел. 89173484738;

e-mail: baigildinaasia@mail.ru статистически значимыми становятся не только разSaratov Journal of Medical Scientific Research. 2010. Vol. 6. № 1.

16 БиохимиЯ личия с контролем, но различия со среднетяжелой и неосложненной формами болезни. Нормализации изучаемого показателя к периоду восстановленного диуреза при всех формах тяжести ГлПС на фоне базисной терапии не происходит.

тип полиморфизма, последовательность праймеров и номенклатура аллелей анализируемых полиморфных локусов гена ген рецептора (тип 1) ангиотензина ii (AGTR1) представлены в таблице 2.

Результаты оценки распределения частот аллелей и генотипов полиморфного локуса А1166С гена AGTRу больных ГлПС в зависимости от степени тяжести заболевания представлены в таблице 3. Во всех изученных выборках распределение частот генотипов соответствовало распределению харди-Вайнберга.

Pages:     || 2 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.