WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 73 | 74 || 76 | 77 |   ...   | 101 |

Биохимическая часть методов исследования. Отбор проб из плодов томатов для биохимического анализа проводили согласно методике[3, 4]. Определение содержания -каротина и аскорбиновой кислоты проводили в томатной массе плодов. Количественное определение содержания -каротина проводилось путем хроматографического разделения в тонком слое на силикагеле Merck-Silica Gel-60 в системе легкий петролейный эфир – бензол (1:1) [5]. Определение содержания аскорбиновой кислоты проводили методом титрования краской Тильманса. Пектиновые вещества определяли карбазольным методом.

Показано (табл.1.), что содержание -каротина в плодах гибридных форм в четвертом поколении с комбинацией генов B и dg значительно превосходит его содержание в плодах родительских форм Dark Green и Барон (в 4,4 и 1,8 раза сответственно). Содержание аскорбиновой кислоты в гибридах также превосходит ее содержание в плодах родительских форм (в 1,2 раза по сравнению с плодами Dark Green и в 1,8 раза по сравнению с плодами Барон). Выявленное значительное повышение содержания -каротина и аскорбиновой кислоты в плодах с комбинацией генов B и dg позволяет говорить о аддитивном эффекте их неаллельного взаимодействия [6].

Таблица 1. Содержание -каротина и аскорбиновой кислоты в плодах томатов сорта Барон, линии Dark Green и их гибридов (F4).

Родительские и гибрид- Маркерные гены -каротин, мг% Аскорбиновая ные формы кислота, мг% Барон B, sp, u, j-2 1,36±0,30 23,21±2,Dark Green dg, u 0,55±0,12 33,35±2,F4 (Барон Dark Green) B, dg 2,23±0,42* 40,72±1,30* F4 (Барон Dark Green) B, dg, u 2,60±0,18* 44,86±4,40* Среднее по F4 B, dg 2,41±0,30* 42,79±2,85* Примечание. В табл.1-3: * - достоверно (р < 0,05) относительно родительских форм.

Кроме того было показано, что носители рекомбинации (gs/gs//hp/hp) характеризовались повышенным содержанием аскорбиновой кислоты и -каротина (табл. 2.). Существенное увеличение этих показателей, даже в сравнении с лучшей родительской формой по каждому из компонентов, можно объяснить благоприятным сочетанием «диких» факторов генетической среды сорта Tigerella (имеющего полукультурное происхождение) с геном hp, активирующим биогенез комплекса каротиноидов и витаминов.

Таблица 2. Содержание -каротина и аскорбиновой кислоты в плодах томатов сортов Очарование, линии Т-3627 и их гибридов (F4).

Родительские и гибридные формы Маркерные гены -каротин, мг% Аскорбиновая кислота, мг% Tigerella gs, u 0,36±0,02 28,09±0,Т-3627 hp, Bc 0,15±0,06 33,11±0,F4 (Tigerella Т-3627), (gs/gs//hp/hp) gs, hp 0,39±0,08* 34,62±0,12* F4 (Tigerella Т-3627), (gs/gs//hp/hp//Bc/Bc) gs, hp 0,13±0,04 39,14±0,15* Вместе с этим тройная гомозигота (gs/gs//hp/hp//Bc/Bc) в отличии от дигомозиготы (gs/gs//hp/hp) имела более низкое, почти в два раза, содержание -каротина. При этом полностью сохранялся эффект увеличенного содержания аскорбиновой кислоты. Это можно объяснить присутствием гена Bc, который как в сочетании с геном hp в родительской форме Т-3627, так и в гибридной тригомозиготе, корректирует синтез каротиноидов в сторону уменьшения уровня -каротина.

Каразинские естественнонаучные студии Каразінські природознавчі студії Karazin natural science studios Таблица 3. Содержание -каротина, аскорбиновой кислоты и пектиновых веществ в плодах томатов сорта Сornell, линии Dark Green и их гибридов (F4).

Родительские и гибрид- Маркерные -каротин, Аскорбиновая Пектиновые ве- Титруемые ные формы гены мг% кислота, мг% щества, мг% кислоты, мг% Cornell alc 0,18±0,03 19,16±0,11 278±21 0,33±0,Dark Green dg, u 0,55±0,12 33,35±2,50 176±24 0,20±0,F4 (CornellDark Green) alc, dg 0,62±0,08 45,31±0,15* 283±19 0,48±0,(alc/alc//dg/dg) Исследования по биохимическому обоснованию возможности создания лежких красноплодных форм томата (табл.3.), показали, что плоды дигомозиготы (alc/alc//dg/dg) характеризуются нормальным (для лежких сортов таких как Cornell) содержанием пектиновых веществ и титруемых кислот. Известно, что содержание кислот в плодах томатов напрямую связано с сроком их хранения, так как органические кислоты (высокое содержание которых характерно для лежких сортов) ингибируют размножение анаэробных микроорганизмов. Вместе с этим дигомозиготный гибрид характеризовался высоким содержанием -каротина (на уровне лучшей по этому признаку высокопигментной родительской линии Dark Green ) и более высоким содержанием аскорбиновой кислоты чем у родительських форм.

1. Рябчун В.К. Використання генетичних ресурсів рослин для селекції сільськогосподарських культур в Україні/ В.К. Рябчун, Р.Н. Богуславський// Вісник аграрної науки. – 2002. - №12. – С.12-14.

2.Куземенский А.В. Использование мутантных генов для повышения качества плодов томата/ А.В.

Куземенский// Овочівництво і баштанництво. – 2005. – Вип. 51. – С.198-212.

3.Доспехов Б.А. Методика полевого опыта/ Б.А. Доспехов. - М.: Агропромиздат. – 1985. – 350с.

4.Методика проведення експертизи сортів на відмінність, однорідність та стабільність// Охорона прав на сорти рослин. – Т.1., ч.2. – 2004. – 252с.

5.Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография/ Ю. Кирхнер. – Т 2. - М.: Мир. – 1981. – 257с.

6.Куземенский А.В. Неаллельное взаимодействие мутантных генов у томатов/ А.В. Куземенский// Цитология и генетика. – 2002. - №1. – С.32-39.

ДОСЛІДЖЕННЯ ПОЛІСАХАРИДНОГО СКЛАДУ ВЕГЕТАТИВНИХ ТА ГЕНЕРАТИВНИХ ОРГАНІВ DUSChEkIa VIrIDIS (ChaIx) opIZ КулагінА М.А., Радько О.В., Сербін А.Г.

Національний фармацевтичний університет, м. Харків Душекія зелена – Duschekia viridis (Chaix) Opiz відноситься до секції Alnobetula родини Betulaceae.

Розповсюджена в Західній Україні, де займає від 4% до 6% загальної площі високогір’я Українських Карпат. Відомо, що кора, листя та супліддя рослин роду Duschekia містять поліфенольні сполуки, вуглеводи, мікроелементи, амінокислоти, жирні кислоти і використовуються в народній медицині як ранозагоюючий, кровоспинний, бактерицидний, протизапальний та інші засоби [3, 4]. Потенційна можливість застосування рослин роду Duschekia Opiz як сировини для виробництва лікарських препаратів комплексної терапії зумовлює дослідження цих рослин. Останнім часом увагу багатьох дослідників привертають роботи з виділення та вивчення полісахаридів рослинного походження, бо вони виявляють протизапальні, імуномодулюючі та інші біологічні властивості [1]. Рослинні полісахариди в композиціях з флавоноїдами здійснюють потенціюючий вплив на імунну систему. Є думка, що це пов’язано зі впливом полімерних речовин на розчинність поліфенолів у водних розчинах [1, 3]. В зв’язку з цим особливий інтерес становить пошук і вивчення біологічно активних речовин, в дії яких спостерігається специфічність у відношенні імунної системи або її компонентів, що дозволяє отримати бажаний вплив при мінімальних побічних ефектах [3].

Для виділення, очистки та аналізу полісахаридів використовували відомі методики [5], а саме:

для очищення від ліпофільних речовин сировину обробляли хлористим метиленом та фракціонували в залежності від властивостей. Спирторозчинні цукри (СЦ) екстрагували 82% спиртом етиловим;

водорозчинні полісахариди (ВРПС) – водою; пектинові речовини (ПР) – сумішшю 0,5% розчинів кислоти Каразинские естественнонаучные студии Каразінські природознавчі студії Karazin natural science studios оксалатної та амонію оксалату; геміцелюлозу (ГЦ) – 7% розчином калію гідроксиду. СЦ очищали від неводних компонентів 10% розчином оцтовокислого свинцю та натрію сульфату. Після фільтрації і згущення залишку цукри осаджували з метанольного розчину ацетоном (1:3), осад промивали безводним ацетоном, потім сушили ефіром над фосфору оксидом (V) у вакуум-ексикаторі. Після висаджування метанолом речовини ВРПС, ПР і ГЦ гідролізували 10% розчином сірчаної кислоти у стандартних умовах та вивчали їх моносахаридний склад методами паперової хроматографії в системах розчинників: н-бутанол – піридин – вода (6:4:3) для нейтральних моносахаридів; етиловий ефір кислоти оцтової – кислота оцтова – кислота мурашина – вода (18:3:1:4) для кислих моно сахаридів і в тонкому шарі сорбенту на пластинках «Silufol» в системі розчинників спирт пропіловий – піридин – вода (5:3:2); в ролі проявника цукрів використовували розчин анілінфталату. Кількісний вміст полісахаридів у речовинах визначали гравіметричним методом [2] після процесу фракціонування 95% спиртом. Кількість відновлюючих та кислих цукрів знаходили за допомогою спектрофотометричних методів з використанням пікринової кислоти і карбазолу [5]. Вміст золи і вологи визначали за ДФУ [2]. Результати визначення вуглеводів різних фракцій душекії зеленої представлені в табл. 1 та 2. Мономірний склад вивчених фракцій схожий, так як їх вуглеводний ланцюг складається з таких моносахаридів: D-глюкози, D-галактози, L-арабінози, D-ксилози, L-рамнози і D-галактуронової кислоти. Але отримані комплекси відрізняються різним співвідношенням моносахаридів, що на хроматограмах виражено різною інтенсивністю забарвлення плям.

Таблиця 1. Полісахаридний та моносахаридний склад вегетативних органів D. viridis Вміст в корі(к) та листі(л) за відношенням до Фракція полісахаридної фракції, % Вміст ПС в кожній Моносахаридний полісафракції, % склад кислих моноса- нейтральних золи, харидів харидів,% моносахаридів,% % СЦ (к) - - - - Gа1, Аrа СЦ (л) - - - - G1с Gа1, G1с, Аrа, Хуl, ВРПС (к) 82,87±1,33 14,06±0,14 23,33±0,23 27,Fuс, Rhа, GalUA Gа1, G1с, Arа, Ху1, ВРПС (л) 61,64±1,05 25,42±0,2 34,26±0,31 18,Rhа, GalUA Gа1, G1с, Arа, ІІР (к) 63,86±1,09 17,95±0,16 10,69±0,13 14,Ху1, Rhа, GalUA Gа1, Arа, Rhа, ПР (л) 54,61±0,93 40,25±0,28 25,64±0,26 10,G1с, Ху1, GalUA Gа1, G1с, Arа, Ху1, ГЦ (к) 36,36±0,65 18,2±0,16 28,2±0,28 28,Rhа, GalUA ГЦ (л) 62,4±1,06 10,12±0,1 32,33±0,29 22,12 ХуПримітки: підкреслений найбільший вміст речовин; СЦ – спирторозчинні цукри; ВРПС – водорозчинні полісахариди; ПР – пектинові речовини; ГЦ – геміцелюлози.

Як свідчать отримані дані (табл. 1) СЦ фракцій кори і листя душекії зеленої відрізняються тим, що в СЦ кори знайдені галактоза та арабіноза, а в СЦ листя – глюкоза. ВРПС кори містять, в основному, наступні моносахариди: галактозу, арабінозу, залишки глюкози, ксилози, фруктози, рамнози та галактуронову кислоту. Отримана фракція ВРПС кори представлена галактоарабанами. ВРПС листя складаються з галактози, арабінози, ксилози, рамнози і містять залишки глюкози та галактуронової кислоти. Результати досліджень дають підставу зробити висновок, що ВРПС листків відрізняються від ВРПС кори більш різноманітним моносахаридним складом. Фракція ПР кори представлена, в основному, галактоарабінозою, що дозволяє віднести її до галактоарабанів. Фракція ПР листя складається, в основному, з арабінози та галактози і відноситься до галактоарабанів, що відрізняє її від фракції ПР кори. Фракція ГЦ кори за виявленою арабінозою відноситься до арабанів, а фракція ГЦ листя за виявленою ксилозою – до ксиланів.

Вміст кислих моносахаридів фракцій ВРПС та ПР кори (табл. 1) душекії зеленої в 2 рази менший, ніж у цих же фракціях з листя, в той час як вміст кислих моносахаридів у фракції ГЦ кори в 2 рази більший, ніж у фракції ГЦ листя. Кількість нейтральних моносахаридів у фракціях ВРПС, ПР та ГЦ кори також менша, ніж у цих же фракціях з листя.

Порівнюючи кількісний вміст кислих та нейтральних моносахаридів у вегетативних та генеративКаразинские естественнонаучные студии Каразінські природознавчі студії Karazin natural science studios них органах душекії зеленої, можна відзначити схожість показників полісахаридних фракцій, отриманих з листя та стиглих суплідь, а схожість показників фракцій кори та зелених суплідь, спостерігається лише за кількісним вмістом нейтральних полісахаридів.

Таблиця 2. Полісахаридний та моносахаридний склад генеративних органів D. viridis Вміст в зелених(з) та стиглих(с) супліддях за відношенням до сумарного комплексу Вміст ПС Фракція полісахаридів, % в кожній поліса- Моносахаридний склад фракції, кислих харидів нейтральних золи, % моносамоносахаридів,% % харидів,% СЦ (з) - - - - Glс СЦ (с) - - - - Sach, Glс, Fruk Gаl, Glс, Аrа, Хуl, ВРПС (з) 36,4±0,66 - 23,9±0,24 18,Rhа, GalUA Gаl, Glс, Arа, Хуl, ВРПС (с) 35,58±0,64 14,24±0,14 34,66±0,31 20,Rhа, GalUA Gаl,Glс,Arа, ПР (з) 27,17±0,52 24,56±0,2 13,02±0,14 14,Rhа, GalUA Gаl, Arа, Rhа, ПР (с) 44,82±0,81 39,84±0,28 32,52±0,29 18,Glс, GalUA Glс, Arа, Хуl, ГЦ (з) 60,36±1,03 7,48±0,08 31,6±0,28 24,GalUA ГЦ (с) 44,23±0,8 5,58±0,06 34,6±0,31 24,18 Arа, Хуl, Gаl Примітки: підкреслений найбільший вміст речовин; СЦ – спирторозчинні цукри; ВРПС – водорозчинні полісахариди; ПР – пектинові речовини; ГЦ – геміцелюлози.

Аналізуючи дані (табл. 2) можна відзначити, що СЦ фракції зелених і стиглих суплідь д. зеленої відрізняються між собою. У зелених – ідентифікована тільки глюкоза, а у стиглих – сахароза, глюкоза і фруктоза. Фракції ВРПС, ПР і ГЦ зелених та стиглих суплідь не відрізняються між собою у домінуванні цукрів: арабінози, галактози і ксилози.

Вміст кислих та нейтральних моносахаридів в генеративних органах д. зеленої (табл. 2) виявляє тенденцію до збільшення у фракціях ВРПС, ПР та ГЦ стиглих суплідь у порівнянні із зеленими супліддями.

Таким чином з кори, листя, зелених та стиглих суплідь д. зеленої виділені полісахаридні комплекси, в них встановлений кількісний вміст золи, суми полісахаридів, кислих і нейтральних цукрів, а також моносахаридний склад. Отримані дані свідчать про те, що душекія зелена може бути використана як перспективна лікарська рослина.

Література.

Антонюк В.О., Дубицький О.Л. Вивчення вуглеводної специфічності лектинів рослин роду Artemisia / В.О. Антонюк, О.Л. Дубицький // Укр. біохім. журн. – 2002. – Т. 74, № 4б (дод. 2). – С. 114.

Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». – 1-е вид. Харків: РІРЕГ, 2001. – 556 с.

Кюсев П.А. Полный справочник лекарственных растений / П.А. Кюсев. – М.: Эсмо-Пресс, 2001. – 992с.

Малиновський К.А. Рослинні угруповання високогір’я Українських Карпат / К.А. Малиновський, В.В. Крічфалушій. – Ужгород: Карпатська вежа, 2002. – 243 с.

Чушенко В.Н. Углеводы корней Symphytum officinale L / В.Н. Чушенко, Т.С. Прокопенко, Н.Ф.

Комиcсаренко // Химия природ. соедин. – 1990. – № 4. – C. 542-543.

Pages:     | 1 |   ...   | 73 | 74 || 76 | 77 |   ...   | 101 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.