WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Фармако-токсикологические свойства новых препаратов селена и их применение в регионе Северного Кавказа

Автореферат докторской диссертации по ветеринарии

  СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА  
Страницы: | 1 | 2 | 3 |
 

Беляев Валерий Анатольевич

ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВЫХ ПРЕПАРАТОВ СЕЛЕНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В РЕГИОНЕ СЕВЕРНОГО КАВКАЗА

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

06.02.03 -  ветеринарная фармакология с токсикологией

Краснодар – 2011


Работа выполнена в

ГНУ «Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт РАСХН»

 

Научный консультант:              заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных наук,

член-корреспондент РАСХН,  профессор

Антипов Валерий Александрович

                                                                   

Официальные оппоненты:       доктор биологических наук, профессор

                                                        Родионова Тамара Николаевна

                                                        доктор ветеринарных наук, профессор

                                                        Уразаев Дмитрий Николаевич

                                                         доктор биологических наук, профессор

                                                         Беляев Василий Иванович

Ведущая организация:   ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана»

        Защита состоится «24» марта   2011 года  в 10 часов на заседании диссертационного совета  Д 220.038.07 при ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» по адресу: 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, д. 13.                                                  

        С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ФГОУ  ВПО «Кубанский государственный аграрный университет».

       Автореферат разослан «___»_______________ 2011 года

Ученый секретарь

диссертационного совета                                                              И.А. Родин                    


1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность темы. Проблема гипоселенозов животных и птиц остается актуальной для животноводства страны. До сих пор четко не регламентирована нозология заболеваний, существуют трудности с их диагностикой. Остаются нерешенными вопросы комплексных мероприятий по фармакопрофилактике и терапии данных патологий ввиду недостаточного выбора эффективных малотоксичных и доступных лекарственных средств. Отсутствие полноценно разработанной системы диагностики не позволяет четко представить истинной картины ситуации.

Необходимо учитывать, что недостаток селена в организме животных способствует проявлению как истинных гипоселенозов, так и связанных с нарушением антиоксидантной защиты и иммуносупрессией патологий других систем организма (В.А.Тутельян и др., 2002; И.В. Саноцкий, 2004). Таким образом, широкий круг заболеваний репродуктивной и сердечно-сосудистой систем, патологий печени можно связать с недостатком селена в организме животных.

В связи с этим фармакокоррекция гипоселенозов в эндемичных регионах крайне важна для обеспечения ветеринарного благополучия отечественного животноводства и птицеводства.

Решением обозначенной проблемы в России занимались многие ученые. С 70-х годов прошлого века был проведен ряд серьезных  исследований, посвященных диагностике, лечению и профилактике заболеваний селеновой недостаточности, в первую очередь, в регионе Урала, Сибири, Дальнего Востока (Л.А. Кудрявцева, 1967; А.П. Кудрявцев, 1974, 1975, 1879, 1984; Л.А. Минина, 1973, В.Д. Мисайлов и др., 1986). В центральном регионе исследования, посвященные селенодефицитам, были проведены Т.Н. Родионовой (2003, 2004), В.И. Беляевым (2005, 2006, 2007), В.Т. Самохиным (1996, 1997), Ю.П.Балым (2008) и др.

Исследования по определению  селеновой недостаточности  на территории Северного Кавказа не проводились, поэтому изучение данной патологии в регионе, а также разработка эффективных лечебно-профилактических схем с использованием новых лекарственных препаратов является важной задачей для современной ветеринарии.

Цель работы. Разработать новые  селенсодержащие препараты и обосновать комплексную систему их применения при гипоселенозах, с учетом изученных фармако-токсикологических свойств.

Для достижения поставленной цели были поставлены следующие

задачи исследования:

  • определить содержание селена в кормах и крови продуктивных животных региона Северного Кавказа;
  • разработать новые лекарственные средства для коррекции гипоселенозов;
  • изучить основные физико-химические и фармако-токсикологические параметры препаратов ДАФС-25, антавин, МПОС, экстраселен, ЮТ;
  • определить показания к применению новых селенсодержащих препаратов и разработать схему их использования при гипоселенозах животных;
  • предложить комплексную систему борьбы с гипоселенозами животных в условиях региона Северного Кавказа.

Научная новизна. Впервые комплексно изучена проблема гипоселенозов животных в регионе Северного Кавказа, их распространение и клиническое проявление, определен ущерб, наносимый данной патологией животноводству региона. В результате проведенных исследований впервые определено содержание селена в кормах и крови продуктивных животных в различных зонах Северокавказского региона.

Разработаны новые селенсодержащие препараты - экстраселен, ЮТ, антавин, МПОС, впервые изучены параметры их токсичности и фармакологические свойства: влияние на биохимические и морфологические показатели крови крупного рогатого скота, свиней, норок, кроликов, птиц. На основании полученных данных определены показания к применению и разработаны схемы профилактики и лечения гипоселенозов животных с использованием предложенных лекарственных средств, существенно более эффективные, по сравнению с традиционными селенсодержащими препаратами.

Приоритетность проведенных исследований подтверждена патентами РФ на изобретение № 2370262 от 20.10.2009 г. «Препарат для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных», № 2392944 от 27.06.2010 г. «Препарат для лечения и профилактики обмена селена для сельскохозяйственных животных», № 2258522 от 20 августа 2005 года  «Способ изготовления препарата из отходов пчеловодства для стимуляции организма животных».

Практическая значимость работы. Для широкого применения в животноводстве предложены новые селенсодержащие препараты экстраселен, антавин, ЮТ, МПОС, повышающие эффективность профилактики и лечения заболеваний, связанных с дефицитом селена. Разработана и утверждена соответствующая нормативная документация по их применению. В соответствии с разработанными  инструкциями на препараты определены оптимальные схемы лечения основных гипоселенозов сельскохозяйственных животных региона Северного Кавказа.

Внедрение результатов исследований. Подготовлены и утверждены в установленном порядке Технические условия № 9321-058-002576501-09 и Временная инструкция по применению препарата экстраселен (утверждено управлением Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору по СК 04.02.2009); Технические условия  № 9321-059-002576501-09 и Временная инструкция по применению кормовой добавки ЮТ (утверждено управлением Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору по СК 05.02.2009);  Временное наставление по применению препарата антавин № 13-4-03/0303; Методические рекомендации по использованию препаратов в профилактике и лечении селенодефицитных заболеваний животных и птиц (Утверждены НТС МСХ СК протокол № 15 от 15.12.2006).

Освоено производство опытных партий  препаратов на ФГУП «Ставропольская биофабрика» (г. Ставрополь).

Апробация работы.  Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на региональных, всероссийских и международных научно-практических конференциях в 1997-2009 г. в гг. Ставрополь, Краснодар, Троицк, Воронеж, пос. Персиановском, в том числе, на конференции фармакологов Российской Федерации, посвященной 85-летию Рабиновича М.И. «Фармакологические и экотоксилогические аспекты ветеринарной медицины», Троицк, 2007 г., первом международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства», Санкт-Петербург, 2008 г.

Основные положения, выносимые на защиту.

  • Актуальность проблемы гипоселенозов животных и птиц региона Северного Кавказа и факторов, способствующих их распространению.
  • Результаты разработки и оценки основных токсикологических и фармакологических свойств новых селенсодержащих препаратов (ЮТ, экстраселен, антавин, МПОС).
  • Данные по лечебной и профилактической эффективности препаратов (ЮТ, экстраселен, антавин, МПОС) при основных гипоселенозах животных и птицы и других, связанных с дефицитом селена заболеваниях.
  • Разработка комплексной системы ветеринарных и организационно-хозяйственных мероприятий при гипоселенозах в регионе Северного Кавказа

Публикации результатов исследования. По результатам исследований опубликованы: 42 научные статьи, в том числе 10 в изданиях, входящих  в «Перечень… ВАК РФ», 1 методическое указание, 1 монография, 3 патента РФ на изобретение и  одно положительное решение на изобретение.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 295 страницах стандартного компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Библиографический список включает 297  источников, в том числе, 104 иностранных авторов. Работа иллюстрирована  67  таблицами и 12  рисунками.

2. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в период с 2002 по 2010 годы в ГНУ «Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт РАСХН» и на кафедре терапии и фармакологии ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет».  Диссертационные исследования выполнялись в соответствии с планом НИР  Российской академии сельскохозяйственных наук с шифром  0804, № государственной регистрации 15070.3666026906.06.8. 004.5.

При изучении распространения болезней микроэлементной недостаточности была использована отчетная документация, предоставляемая районными ветеринарными станциями специалистам отдела незаразной патологии ФГУ «Ставропольская краевая станция по борьбе с болезнями животных», а также ежеквартальные и годовые отчеты ФГУ «Ставропольской краевой СББЖ» с 2005 по 2010 гг.

При изучении обеспеченности кормов микроэлементами и содержания их в крови животных в хозяйствах Ипатовского, Кировского, Шпаковского и Предгорного районов Ставропольского края, Белоглинского района Краснодарского края, Прикубанского района республики Карачаево-Черкессия были отобраны средние пробы используемых в зимне-стойловый период кормов. Одновременно в тех же хозяйствах были отобраны пробы крови от лактирующих коров в количестве 10 голов из каждого хозяйства.

При изучении фармако-токсикологических свойств селенсодержащих препаратов были проведены органолептические, токсикологические, гематологические, клинические, биохимические, микробиологические и другие исследования.

В этом разделе экспериментальной части работы  использовали 350 мышей, 280 крыс,  126 кроликов, 375 поросят, 80 телят и 1500 кур.

Испытание на стерильность проводили согласно ГФ XI вып. 2, с. 187-193 методом прямого посева испытуемого препарата на тиогликолевую среду и среду Сабуро.

Химический состав препаратов изучали в лаборатории патологии обмена веществ СНИИЖиК. Аминокислоты определяли на аминокислотном анализаторе ААА–332Т. Содержание гормонов определяли методом иммуноферментного анализа.

Токсикологические исследования проводили согласно методике, изложенной в «Методических указаниях по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных», утвержденных В.Т. Самохиным (1987).

Местнораздражающее действие определяли методом накожных аппликаций и конъюнктивальных проб согласно «Методическим указаниям по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных», утвержденных В.Т. Самохиным (1987).

По классу опасности препараты классифицировали согласно ГОСТ 12.1.007-76. По кумулятивным свойствам препараты классифицировали согласно «Классификации химических веществ по степени кумуляции» (Л.Н. Медведь, 1964).

Влияние на мочевыделительную систему оценивали при использовании общеклинических методов исследования почек и мочевыводящих путей, морфологического и биохимического исследования мочи с помощью тест-полосок для полуколичественного анализа UrineRS A10.

При изучении лечебно-профилактического действия препаратов селена в условиях хозяйств региона Северного Кавказа объектом исследования служили 740  стельных коров, 960 супоросных свиноматок, 770 телят, 1150 поросят, 130 норок.

В опытах по изучению токсикологических и фармакологических свойств препаратов, а также их лечебно-профилактической эффективности при болезнях селеновой недостаточности проводили клиническое обследование животных, морфологический и биохимический анализ крови, определяли активность ферментов антиоксидантной защиты, содержание микроэлементов в кормах, крови и органах животных. Трупы павших  животных подвергали патологоанатомическому вскрытию, определяли массу тела животных.

Клиническое исследование животных проводилось общепринятыми методами. Морфологические показатели крови определяли методиками, представленными И.П. Кондрахиным, Н.В. Куриловой и др. (1985). Содержание гемоглобина определяли с помощью гематинового метода Сали в гемометре ГС-3. Число эритроцитов и лейкоцитов подсчитывали в счетной камере с сеткой Горяева. Лейкоцитарную формулу подсчитывали в мазках периферической крови, окрашенных азур-эозином по Романовскому-Гимзе четырехполосным методом с подсчетом не менее 200 клеток.

Содержание селена в биологических субстратах определяли на атомно-абсорбционном спектрофотометре AAS-1 (У. Славин, 1971).

При определении показателей ситемы антиоксиданстной защиты органихма и продуктов свободнорадикального окисления пользовались методиками И.П.Кондрахина, А.В.Архипова и др.(2004).

Определение содержания глюкозы в крови проводили ортотолуидиновым методом Гультмана в модификации Хиваринена-Никкила (О.Д. Кушманова, 1983). Количество общего белка определяли рефрактометрическим методом, на приборе УРЛ-1. Белковые фракции сыворотки крови - турбидиметрическим (нефелометрическим) методом.

Количество общих липидов определяли с сульфофосфованилиновым реактивом (по Целнеру–Киршу в изложении Л.В. Орловой). Содержание общего холестерина сыворотки крови определяли по реакции Любермана–Бурхарда в модификации Илька. Билирубин определяли по методу Ендрассика–Клеггорна–Грофа (И.П. Кондрахин, А.В. Архипов и др., 2004). Активность аминотрансфераз (АсАт, АлАт) определяли с использованием стандартного набора Bio La Test Lahema. Общий кальций определяли комплексонометрическим методом с флуорексоном; неорганический фосфор – по Пулсу в модификации В.Ф. Коромыслова и Л.А. Кудрявцевой с ванадат-молибденовым реактивом; магний – по цветной реакции с титановым желтым (по Кункелю, Пирсону, Швейгерту в модификации И.В. Петрухина). Липопротеиды низкой плотности (ЛПНП) - по Т.Л. Алейниковой и Г.В. Рубцовой (1988).

Определение лизоцимной активности сыворотки крови проводили нефелометрическим методом по В.Г. Дорофейчуку (1968). Об активности лизоцима судили по изменению светопроницаемости опытной микробной взвеси Micrococcus lisodekticus (штамм 19) по сравнению с исходной.

Бактерицидную активность сыворотки крови определяли методом фотонефелометрии, основанном на изменении оптической плотности мясо-пептонного бульона при росте в нем кишечной палочки (Е. сoli, серотип 0-2) с добавлением и без добавления испытуемой сыворотки.

Полученные данные были подвергнуты статистической обработке с помощью программы Microsoft Office Exel-2003 и BioStat 2007 3.8.0.0.

Подробное описание опытных и контрольных групп, а также специфики проводимых исследований в зависимости от целей и задач опыта приведено в соответствующих главах диссертационной работы.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Концентрация селена в растениях региона Северного Кавказа

В кормах всех исследованных районов региона отмечается полимикроэлементная недостаточность. Наиболее благоприятными по содержанию микроэлементов в кормах оказались Белоглинский район Краснодарского края и Прикубанский район республики Карачаево-Черкессия, в которых был выявлен только недостаток селена и кобальта. В худшем положении находился Шпаковский район Ставропольского края, в кормах которого выявлен дефицит практически всех изученных (за исключением железа) микроэлементов.

В дальнейшем были проведены исследования по определению содержания селена в крови и органах животных  указанных районов. Для установления объективной картины микроэлементозов и селенодефицита были исследованы пробы крови лактирующих коров (n=60) из хозяйств, в которых изучали состав кормов.

Установлено, что содержание железа, меди, цинка и селена в целом связано с  содержанием этих микроэлементов в кормах. Концентрация селена в крови животных была ниже нормы во всех районах. Дефицит относительно нормы составлял от 86,2% (Белоглинский район Краснодарского края) до 93,7%  (Прикубанский район республики Карачаево-Черкессия).

Полученные результаты позволили установить, что исследованные районы дефицитны по меди и цинку, а дефицит селена превышал 86,2%.

Дальнейшими исследованиями проведен мониторинг гипоселенозов у животных в регионе Северного Кавказа. В результате анализа ветеринарной отчетности установлено, что на протяжении последних 7 лет в крае сложилась неблагоприятная ситуация по болезням обмена веществ. Качественный анализ кормов, проводимый в периоды диспансеризации, показал, что доля кормов, непригодных к скармливанию, от общего количества исследованных, находится в пределах 5,4% грубых, 12,5% сочных, 1,3% концентрированных. Клиническому проявлению гипоселенозов способствует скармливание недоброкачественных кормов, содержащих прогорклые жиры, гидроперекиси, имеющие высокую кислотность.

Вышеуказанные факторы нашли свое отражение в результатах биохимического анализа крови. В большинстве районов регистрируются отклонения от нормы в крови крупного рогатого скота в сторону понижения по каротину - в 48,5% исследуемых проб, резервной щёлочности – 31,9%, кальцию – 30,5%, фосфору – 23,4%, белку – 26,3%, глюкозе – 21,3%, повышенное содержание кетоновых тел отмечено в 16,5%  проб. Полученные данные специалистами ветеринарной службы интерпретируются как характерные признаки кетоза у коров. Однако повышение уровня кетоновых тел в крови, моче и молоке могут быть как следствием нарушения белково-углеводного обменов, так и нарушением работы антиоксидантной системы, связанной с дефицитом природных антиоксидантов, таких как селен, витамины Е, С и др.

В результате анализа проведенных исследований необходимо констатировать, что биогеохимическая провинция Северного Кавказа является проблемным регионом по гипоселенозам. Следует учитывать, что недостаточное освещение гипоселенозов в ветеринарной отчетности связано, в первую очередь, с несовершенством диагностических исследований по данным патологиям у животных и птиц, в частности с отсутствием четкой картины их клинического проявления, трудностей с  определением селена в биологическом материале. Актуальной проблемой является беломышечная болезнь в скотоводстве, а также широко распространенные болезни, связанные, в том числе, с недостатком селена: послеродовые заболевания животных и патологии печени. Учитывая, что практические ветеринарные работники не дифференцируют  данные патологии от клинически сходных заболеваний другой этиологии, то они и не приводятся в официальной ветеринарной отчетности.

Учитывая, что основным средством фармакокоррекции гипоселенозов, несмотря на имеющиеся разработки, остаются препараты, имеющие в качестве действующего селенсодержащего вещества высокотоксичный селенит натрия, были проведены исследования по разработке новых высокоэффективных лечебно-профилактических селенсодержащих препаратов. В результате был разработан ряд оригинальных отечественных препаратов, содержащих селен, как в органической, так и в неорганической форме (антавин, экстраселен, МПОС, ЮТ). В качестве источника органического селена и прототипа  был использован диацетофенонилселенид (ДАФС 25), разработанный Б.И. Древко, Т.Н. Родионовой (1970-2004).

3.2.1. Физико-химическая характеристика новых препаратов селена

На основе селеноорганического соединения диацетофенонилселенид (ДАФС-25) были созданы комплексные препараты МПОС и ЮТ. На основе неорганических соединений селена был разработан пролонгированный препарат антавин. При использовании нанотехнологий разработан препарат экстраселен. На новые препараты получена и утверждена в установленном порядке техническая документация. Основные физико-химические свойства препаратов представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Основные физико-химические свойства препаратов селена

ДАФС-25

Антавин

МПОС

ЮТ

Экстраселен

Органолептические свойства

Сыпучий порошок от белого до светло-желтого цвета со слабым специфическим запахом, нерастворим в воде

Маслянистая суспензия белого цвета, без запаха, расслаиваю-щаяся при длительном хранении

Серый или серо-желтый мелкодисперсный порошок, без запаха

Мелкопористая сухая масса, равномерного серо-желтого цвета, специфического запаха, сладкого вкуса

Однородный сыпучий порошок темно-красного цвета без примесей

Действующее вещество

Диацетофенонилселенид-не менее 93%, (массовая доля селена-25%)

Селенит бария и селенит натрия, массовая доля солей 4,0±0,5 %

Диацетофенонилселенид и алюмосиликаты в соотношении 3:1000

Диацетофенонилселенид и гомогенат трутней преимагинальных фаз

Атомарный селен на полимерной матрице

Стериль-ность

Стерилен

Стерилен

Нестерилен

Стерилен

Стерилен

Основные свойства

Нерастворим в воде, растворим в растительных маслах

Плотность 0,880-0,920 г/см3, седиментационная устойчивость за 24 часа составляет не менее 20%

Негигроскопичен, с водой образует гель

С водой образует мелкодисперсную суспензию, стерилен. Содержит 6,5-7 % растворимого белка, 0,6-0,8 % эфирорастворимой липидной фракции.

Наночастицы размером 50 нм, стабилизированные полиэлектролитом,  с водой образует мелкодисперсную суспензию

Препарата МПОС создан на основе алюмосиликатов, добываемых в Тарасовском месторождении Ростовской области и селеноорганического соединения ДАФС-25, таким образом, в составе МПОС содержится 65,5% SiO2; 13,74% Al2O3; 3,05% CaO; 1,94% MgO; 6,01% Fe2O3; 1,72% Na2O и K2O, 0,6% SO2, Se - 200 мкг/кг.

Химический состав препарата ЮТ включает заменимые и незаменимые аминокислоты, в частности на 100 г продукта: аспарагиновая кислота 18,42±0,89 г, треонин 10,83±0,6 г, серин 7,17±0,09 г, глутаминовая кислота 24,02±0,34 г, глицин 6,77±0,09 г, аланин 7,6±0,04 г, тирозин 2,65±0,01 г, гистидин 4,17±0,01 г, аргинин 26,98±0,97 г, микроэлементы, в частности селен 10,0±0,07 мкг, магний 87,0±0,65 мг, железо 5,0±0,04 мг, гормоны: тестостерон 2,5±0,01 нмоль, прогестерон 1,3±0,02 нмоль, эстрадиол 2,05±0,07 нмоль, кортизол 3,4±0,02 нмоль.

3.2.2. Токсикологические свойства новых препаратов селена

Препарат антавин за счет малой растворимости и, как следствие, медленной резорбции из места введения при инъекции мышам в максимально допустимом объеме не привел к развитию картины острой интоксикации. В дозе более 75 мг/кг на 3 день отмечено угнетение, снижение активности и отказ от корма на срок до 40 часов.

При определении параметров острой токсичности препаратов МПОС и ЮТ ввиду низкой токсичности основных формообразующих субстратов (трутневый гомогенат и бентонит) и невозможности введения их в организм животных в количествах, обеспечивающих поступления токсических доз диацетофенонилселенида, препараты были отнесены к нетоксичным соединениям. При поступлении их в организм мышей в максимально возможных для однократного введения дозах признаков токсического действия выявлено не было.

За счет использования в качестве действующего вещества атомарного селена препарат экстраселен имеет низкую острую токсичность и может быть отнесен согласно классификации ГОСТ 12.1.007-76 ко 3 классу опасности. Параметры острой токсичности представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Острая токсичность препарата экстраселен (мг/кг)

Вид животных

Параметры токсичности

SLD50

МПД

LD16

LD50

LD84

LD100

Белые мыши

9,4

25,38

32,9

44,18

56,4

±0,29

При изучении хронической токсичности препарата антавин установлено, что при введении его крысам и поросятам в дозе до 3 мг/кг в течение трех месяцев динамика клинических и биохимических  показателей крови соответствовала возрастной норме. Концентрация гемоглобина животных опытной группы была выше на 9%, количество лейкоцитов на 14%. Концентрация мочевины у поросят контрольной группы на 30 день опыта увеличилась на 16,8%, по отношению к фоновым значениям, в опытной группе на протяжении всего периода исследований достоверных колебаний ее концентрации зарегистрировано не было. Содержание холестерина в крови поросят опытной группы сохранялось на одном уровне, у поросят контрольной группы данный показатель увеличился на 21,2%. Препарат антавин согласно ГОСТ 12.1.007-76 был отнесен к 3-му классу опасности и классифицирован как вещество умеренно опасное.

Изучение хронической токсичности МПОС проводили на  белых крысах и поросятах. Изучение динамики гематологических показателей крыс на фоне применения МПОС показало, что длительное применение премикса в дозах 1, 2, 3% к корму не приводит к развитию изменений в составе крови, характерных для токсического действия.

При анализе биохимических показателей установлено, что уровень мочевины в крови животных, получавших 2% МПОС, к концу опыта понизился на 13, 5% по отношению к фоновым значениям, в группе поросят, получавших 3 % МПОС  повысился на 19,3%. Концентрация глюкозы в конце опыта в группе поросят, получавших 2 и 3% МПОС, была выше, чем в контрольной группе на 15,5% и 13% соответственно.

Патологоанатомическая картина животных, убитых по завершении эксперимента, соответствовала клинически здоровым животным. Согласно ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» препарат МПОС относится к 4-му классу опасности.

Изучение параметров хронической токсичности препарата ЮТ показало, что на фоне длительного его применения в дозах до 4 мл/кг, превышающих терапевтическую в 2 раза, регистрируется умеренное снижение массы и линейных размеров селезенки и печени,  среднесуточных привесов и уменьшение физической выносливости при экстремальной физической нагрузке. Препарат согласно ГОСТ 12.1.007-76 был отнесен к 4-му классу опасности.

У препарата экстраселен в опытах на крысах был установлен коэффициент кумуляции по формуле Кэкстраселен = LD50х / LD50а= 136,18 / 35,9 = 3,79. Согласно полученным результатам и классификации по Л.Н. Медведю (1964) по степени кумуляции препарат экстраселен можно отнести к 3 группе: вещества, обладающие умеренной кумуляцией.

3.2.3. Фармакологическое действие  препаратов селена

Изучение фармакодинамики препарата антавин проводили на поросятах-отъемышах на базе СПК «Дружба» Апанасенковского района Ставропольского края. Сформировали три группы поросят крупной белой породы двухмесячного возраста (n=15). Поросятам первой группы подкожно вводили антавин однократно в дозе 0,03 мл/кг массы тела, второй группы - 0,05 мл/кг, третья служила контролем  (животным вводили 0,05 мл/кг стерильного вазелинового масла).

На момент завершения опыта масса поросят второй и третьей группы была на 9,9% и на 6,8% соответственно выше, чем в контрольной.

На 30 день опыта разница в количестве эритроцитов между поросятами опытной группы (антавин в дозе 0,03 мл/кг) и поросятами контрольной группы составила 18,2%. Концентрация гемоглобина коррелировала с количеством эритроцитов и на 15 день была максимальна в группе животных, получивших антавин в дозе 0,03 мл/кг.

В начале опыта у поросят наблюдался лейкоцитоз, умеренная эозионофилия (6,4±1,2%), базофилия (1,3±0,3%). На 15-й день после введения препарата антавин в опытных группах количество лейкоцитов достоверно снизилось до нормы, нормализовалась лейкоформула.

Анализируя биохимические показатели крови поросят до введения препарата антавин было зарегистрировано, что концентрация альбуминов, ?- и ?-глобулинов находились на нижних границах нормы. На фоне применения препарата антавин уже на 15-й день опыта было отмечено увеличение доли  вышеуказанных фракций, что косвенно свидетельствует о нормализации белоксинтезирующей функции печени, оптимизации содержания транспортных белков и  фракции иммуноглобулинов. При этом концентрация общего белка в опытных группах достигла средних нормальных значений для данного вида животных. На 30-й день от начала эксперимента вышеуказанная динамика сохранилась. Соотношение белков фракций ?-, ?-, ?-глобулинов и альбуминов достигло оптимальных значений.

При применении препарата антавин в дозе 0,03 мл/кг концентрация витамина А в крови составила 0,56±0,07 мкмоль/л, что на 34,6% выше фоновых значений и на 19,2% выше, чем в контроле. В группе поросят, получавших антавин в дозе 0,05 мл/кг концентрация витамина А увеличилась на 40,8% по отношению к фоновым значениям и на 32,5% относительно  контроля.

В следующей серии опытов изучали воздействие препарата антавин на организм телят. Опыт проводили на базе СПК колхоза-племзавода КПЗ «Казьминский» Кочубеевского района Ставропольского края. По принципу аналогов были отобраны телята в возрасте 18-20 дней, которых разделили на две группы (n=10). Животным опытной группы однократно подкожно в дозе 0,05 мл/кг живой массы вводили антавин, телятам контрольной группы аналогично вводили стерильное вазелиновое масло.

По результатам оценки  массы тела телят обеих групп установлено, что среднесуточный прирост животных опытной группы составил 576,2±69,3 г, что на 12% выше, чем в контроле. Разница массы телят на момент завершения опыта составила, в среднем, 2,66 кг.

На протяжении всего периода наблюдений количество эритроцитов достоверно превышало аналогичный показатель контрольной группы на 16,8-18,8%. Количество лейкоцитов в крови телят опытной группы на 10-й день после введения антавина было на 18,7% выше, чем в контрольной группе, на 30 сутки опыта разница составила 19,9%. На 28 сутки жизни телят (10 дней после введения антавина) наблюдали физиологическую эозинопению. Количество эозинофилов в крови животных контрольной группы составляло 1,3±0,2%, в крови животных опытной группы 2,1±0,7%. В возрасте 38 дней (20 сутки после введения антавина) содержание эозинофилов в крови телят опытной группы соответствовало видовой норме.

К 48 суткам жизни количество палочкоядерных нейтрофилов в крови телят опытной группы составило 5,2±0,99%, в крови телят контрольной группы - 6,1±0,88%. Количество сегментоядерных нейтрофилов - 34,3±1,2% и 31,4±1,6% соответственно. Динамика содержания лимфоцитов была обратно пропорциональна динамике содержания нейтрофилов.

При анализе биохимических показателей установлено, что концентрация общего белка достоверно не изменялась. При этом в крови телят опытной группы к 30 дню после введения препарата антавин концентрация белков фракции ?-глобулинов увеличилась на 26,1% по сравнению с 28 днем жизни, превысив данные контрольной группы на 3,42%.

Содержание неорганического фосфора в крови телят опытной группы достоверно не изменялось, находясь в пределах 1,42±0,32 - 1,46±0,23 ммоль/л. В крови телят контрольной группы данный показатель был выше по отношению к опыту. На 10 день после введения антавина разница составила 12,4%, на 20 день – 16,7%, на 30 день – 26,8%. Содержание кальция в сыворотке крови к 20 дню опыта достигло 2,36±0,13 ммоль/л, на 30 день увеличилась до 2,48±0,24 ммоль/л. У телят контрольной группы содержание кальция изменялось недостоверно. Кальций-фосфорное соотношение у телят опытной группы на 10 день опыта составляло 2:1, на 20 день – 2,1:1, на 30 день – 2,2:1. У животных опытной группы на 10 день – 2,26:1, на 20 день – 2,25:1, на 30 день – 2,05:1.

Динамика содержания витамина А в крови телят контрольной и опытной групп была аналогична динамике содержания кальция и фосфора. На 10 день после введения антавина в крови телят опытной группы содержание витамина А составило 1,26±0,07 мкмоль/л, что на 27,4% выше, чем в контрольной группе. Содержание витамина в крови телят контрольной группы в течение всего периода наблюдения достоверно не менялось. На 30 день после введения антавина разница между опытной и контрольной группами составила 41,6%.

Оценивая активность аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы, было отмечено, что данные показатели у телят опытной и контрольной групп находились в пределах  нормы. Однако коэффициент де Ритиса у телят контрольной группы на 20 и 30 дни опыта составлял 0,64 и 0,6, что говорит о возможных субклинических нарушения функциональной активности печени и ее дегенеративных изменениях. У телят опытной группы коэффициент де Ритиса оставался в пределах 0,8-0,9, что является нормой.

  СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА  
Страницы: | 1 | 2 | 3 |
 





© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.