WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

 

  На правах рукописи

ВОЙТЕНКО ЛЮБОВЬ ГЕННАДЬЕВНА

СИСТЕМА  КОМПЛЕКСНОЙ ФАРМАКОТЕРАПИИ ОСТРОГО ПОСЛЕРОДОВОГО  ЭНДОМЕТРИТА У КОРОВ

06.02.06. ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

        06.02.03. - ветеринарная фармакология с токсикологией

        АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

                                                       

        Краснодар 2012

Работа выполнена в

ГНУ «Краснодарский научно-исследовательский институт

РАСХН»

Научные консультанты:

       Заслуженный деятель науки РСФСР,

доктор ветеринарных наук, профессор, академик

Никитин Виктор Яковлевич

Заслуженный деятель науки РФ  доктор ветеринарных наук, профессор член корр. РАСХН 

Антипов Валерий Александрович

Официальные оппоненты:                        доктор ветеринарных наук,  профессор,

                заслуженный ветеринарный врач РФ 

               Назаров Михаил Васильевич

               доктор ветеринарных наук, профессор 

  Мануйлов Игорь Михайлович

                доктор ветеринарных наук,

                Коба Игорь Сергеевич

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Казанская государственная  академия

ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана                

  Защита состоится «  02 » марта 2012 года в  1000  часов на заседании

диссертационного совета Д 220.038.07 при ФГОУ ВПО «Кубанский

      государственный аграрный университет

  (350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке «ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет»

Автореферат разослан  «  »  _______________________ 2011 года

Ученый секретарь диссертационного совета

Доктор ветеринарных наук Родин И.А

  1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Послеродовой эндометрит наблюдается у 22,5 – 38,4 % отелившихся коров, занимая ведущее место в структуре послеродовых осложнений. Заболевают  преимущественно животные с высоким уровнем молочной продуктивности. Мероприятия по лечению и профилактики послеродового эндометрита занимают до 80% рабочего времени ветеринарных врачей ( А.Н. Турченко 2003,  Г.М. Андреев, 2004; В.Я. Никитин 2003; Е. В. Ильинский  2004; А.Г. Нежданов, 2005; И.А. Порфирьев, 2006) 

Проблема устранения эндометрита коров является актуальной. Вследствие этого  разработке методов и средств терапии и профилактики при данной патологии, ученые и ветеринарные практики  уделяют большое внимание, как в нашей стране, так и за рубежом.

Наиболее эффективна при эндометрите комплексная терапия, направленная на подавление микрофлоры, стимуляцию сократительной функции  матки и повышение резистентности организма и регенеративных процессов в эндометрии.  (М.В. Назаров 1996;  В.А. Титова с соавт. 2006;  В.А.  Петров с соавт. 2007).

Цель и задачи исследований

Целью работы являлось совершенствование методов комплексной фармакотерапии  острого послеродового эндометрита у коров.

  Для достижения намеченной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить распространение послеродового эндометрита у коров в хозяйствах Ростовской области.

2. Изучить клинику послеродового эндометрита у высокопродуктивных коров в условиях Ростовской области.

3. Определить роль микробного фактора, моциона, уровня кормления и  резистентности организма  коров, в возникновении послеродового эндометрита у коров.

4. Разработать и изучить комплексный  этиотропный химиотерапевтический  препарат цефаметрин при эндометрите коров.

5. Разработать  новые лечебно- профилактические средства этио-патогенетического действия при послеродовом эндометрите коров

6. Разработать и определить эффективность комплексной фармакотерапии при послеродовом эндометрите коров

Научная новизна исследований состоит  в научно-обоснованной разработке нового подхода к выбору методов и средств фармакотерапии при послеродовом эндометрите путем подавления условно патогенной микрофлоры и повышения естественной резистентности и коррекции симптомов эндометрита у коров.

Определена степень распространения острого послеродового эндометрита, его влияние на послеродовую функцию коров.

Разработан новый комплексный  препарат цефаметрин, предназначенный для внутриматочного применения при послеродовом эндометрите коров, изучены его токсикологические свойства, определено  влияние цефаметрина на естественную резистентность организма коров, морфологические биохимические  показатели крови, микрофлору матки, показатели воспроизводительной функции коров. Дана фармакотоксикологическая и экспериментально-клиническая оценка терапевтической эффективности  цефаметрина.

На основе полученных данных разработана комплексная эффективная  система мероприятий по профилактике и терапии  послеродового эндометрита коров.

На разработанный новый препарат и способ профилактики послеродового эндометрита, получены патенты (№2218155 и № 2203665), утверждена необходимая нормативно-техническая документация (технические условия, инструкция по изготовлению и контролю препарата, наставление по их применению).

Практическая значимость работы.  Проведены научные исследования по изучению распространения послеродового эндометрита у коров.

Разработана комплексная система по профилактике и лечению при послеродовом эндометрите коров.

Предложен новый препарат, который обеспечивает высокую эффективность лечения коров с послеродовым эндометритом, что создает условия для снижения числа дней бесплодия коров, экономического ущерба и повышения рентабельности молочного скотоводства.

На основании выполненных нами исследований и научных наблюдений установлена целесообразность  применения  биологических стимуляторов и лазерного излучения для фармакотерапии при послеродовом эндометрите у коров.

Материалы проведенных исследований были использованы при разработке системы комплексного лечения и фармакопрофилактики послеродового эндометрита. Подготовлены  и утверждены следующие разработки:

  1. Научно-практические рекомендации по диагностике и фармакотерапии  послеродовго эндометрита коров.
  2. Научно-практические рекомендации по применению биогенных стимуляторов для профилактики послеродового эндометрита у коров и повышения естественной резистентности у новорожденных телят.
  3. Временное наставление по применению препарата цефаметрин для лечения и профилактики эндометрита у коров (в порядке широкого производственного опыта) в ростовской области в 2010-2011 гг.

Апробация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы были доложены на международных научно-практических конференциях в Донском, Кубанском, Мичуринском  государственных аграрных университетах, Санкт-Петербургской ветеринарной  и Белгородской сельскохозяйственной академиях.

Публикации: по результатам исследований опубликовано 38 работ, в том числе 16  в центральном издании, рекомендованном  Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и науки Российской Федерации.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Распространение, этиология, клиника послеродового эндометрита у коров в условиях Ростовской области.

  1. Материалы разработки, фармако-токсикологического исследования и экспериментально-клинической оценки  нового препарата цефаметрина для лечения коров при послеродовом эндометрите.
  2. Данные  о  влиянии нового препарата на естественную резистентность  организма коров, морфологические и биохимические показатели крови.
  3. Разработка нового способа  профилактики послеродового эндометрита у коров, применением иммуностимуляторов и веществ, стимулирующих обмен веществ.
  4. Обоснование применения комплексной системы мероприятий по  лечению  и фармакопрофилактике при послеродовом эндометрите коров.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнялась в соответствии с государственной тематикой Российской академии сельскохозяйственных наук с 2001 по 2010 год (включительно) в ГНУ Краснодарском научно-исследовательском институте РАСХН,  на базе 5 животноводческих хозяйств 3 районов Ростовской области. 

  Лабораторные исследования выполнялись в лаборатории кафедры  акушерства и хирургии, клиническая часть работы осуществлена в производственных условиях молочно-товарных ферм. Объектами исследований являлись коровы в последние 2 месяца беременности,  первый - пятый месяц после оте­ла, а также лабораторные животные (белые мыши, белые крысы, кролики).

На основе анализа необходимой зоотехнической и ветеринарной доку­ментации, а также материалов акушерско-гинекологической диспансериза­ции крупного рогатого скота с проведением клинических и соответствую­щих лабораторных исследований определяли степень распространения неспецифических воспалений репродуктивных органов в стадах коров согласно общепринятой методике.

С целью выявления этиологических факторов выясняли обстоятельства возникновения воспалений органов половой системы у коров, при этом анализировали условия кормления, содержания и эксплуатации молочно-продуктивных животных, учитывали физиологическое состоя­ние животных, возраст, уровень продуктивности.

Клинико-гинекологическому исследова­нию по общепринятой методике подвергнуто  4989 отелившихся коров, из них у 314 животных проведены гематологические, биохимические, иммунобиологические исследования. Для микробиологических исследований ис­пользовано 199 проб маточных выделений коров больных острым послеро­довым эндометритом.

Для исследований кровь от коров брали до кормления. При гематоло­гических исследованиях определяли количество эритроцитов и лейкоцитов в камере с сеткой Горяева, выводили лейкоформулу по В.Г. Мухину, содержа­ние гемоглобина (гемоглобинцианидным методом), высчитывали цветовой показатель, СОЭ в аппарате Панченкова, характер лейкограммы (микроско­пией окрашенных по Романовскому-Гимза мазках крови). Биохимические ис­следования состояли из определения в сыворотке крови общего белка (коло­риметрически), белковых фракций (нефелометрически), мочевины (цветной реакцией с диацетилмонооксимом и тиосемикарбазидом), общего кальция (с орто-кризолфталеином), неорганического фосфора (с ванадат-молибдатным реактивом), глюкозы (ферментативно).

Для определения факторов резистентности использо­вали тест бактериального фагоцитоза нейтрофилов с учетом степени его за­вершенности по отношению к бактериям  по И.В. Нестеровой с соавт. (1996). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцим-ную (ЛАСК) - по Д.Г. Дорофейчук, Т-, В-, МК-лимфоциты методом Пирса в модификации Н.Н. Гугушвили с соавт. (2000) с прочным синим и нафтилацетатом.

Для микробиологических исследований маточные истечения получали по методике Н.Н. Михайлова, М.А. Лучко и З.С. Конновой (1967). С целью определения состава микрофлоры матки осуществляли посев полученного материала на МПА, МПБ, кровяной агар, МПА с 1% глюкозы, среды Эндо, Сабуро, кандида агар сусло-агар и др. Идентификацию изолированных мик­роорганизмов проводили с учетом их морфологических, культуральных свойств по общепринятым методикам. Для определения вида бактерий ис­пользовали пластины биохимические дифференцирующие энтеробактерии и стафилококки научно-производственного объединения «Диагностические системы», г. Нижний Новгород, углеводные среды Гиса. Видовую принадлежность бактерии устанавливали, руководствуясь «Определителем бакте­рий» Берги (1980) и рекомендациями Н.Н. Михайлова (1983), В.М. Карташовой с соавт. (1988), а грибов - «Определителем патогенных, токсигенных и вредных для человека грибов» (1979) и также «Атласом грибов патогенных для сельскохозяйственных животных и птиц» (1953). Патогенность микроор­ганизмов изучали путем внутрибрюшного заражения белых мышей одно­миллиардной взвесью смыва суточной агаровой культуры в дозах 0,2-0,5 мл (200-500 млн микробных клеток).

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам проводили на среде АГВ путем наложения стандартных дисков с антибиотиками. Анти­бактериальные средства лекарственных препаратов изучали луночным мето­дом диффузии в агар (Е.А. Тебякин, С.М. Чайковская, 1959). Оценку чувст­вительности осуществляли по диаметру зоны задержки роста тест-культур.

Учитывая микробную этиологию  после­родового эндометрита, значительного распространения условно патогенной микрофлоры и во избежание образования лекарственноустойчивых штаммов предусматривали ис­пользование для их изготовления доступного сырья, совместимость, синергидность подбираемых компонентов, обеспечивающую расширение спектра и усиление интенсивности антимикробного и противовоспалительного дей­ствия без отрицательного побочного влияния.

Изучение специфической антимикробной активности препарата проводили в опытах in vitro на чистых культурах микроорганизмов, выделенных  из содержимого матки коров при послеродовом эндометрите  методом серийных разведений в жидкой питательной среде и методом диффузии в агар.

Испытания разработанного нами препарата включало его эксперимен­тальную и клиническую оценку. Экспериментальная оценка препарата пре­дусматривала следующие исследования: а) изучение физико-химических свойств; б) определение стабильности и срока годности; в) изучение специ­фического действия; г) определение безвредности.

При изучении физико-химических свойств препарата определяли: цвет, запах, консистенцию (органолептически), плотность или удельную мас­су (ареометром), рН, а также подлинность составных компо­нентов рекомендуемыми химическими методами, предусмотренными техни­ческими условиями. 

Для определения плотности цефаметрина использовали ареометр. Отсчет плотности производили по уровню жидкости сверху вниз.

Для определения рН применяли рН - метр-милливольтметр 150М, с использованием стеклянного комбинированного электрода ЭСКЛ – 08М

Определение стабильности и установление срока годности препаратов проводили по изменению внешнего вида, физико-химических свойств, анти­микробной активности.

Определение срока годности и старение препарата проводили в соответствии с Временной инструкцией по проведению работ с целью определения срока годности лекарственных средств на основе метода ускоренного «старения» при повышенной температуре (№ 42-2-82 Минздрава СССР (1983 г.), а также по показателям качества препаратов по истечении 1, 3, 6 месяцев хранения.

Изучение специфического действия антимикробного препарата вклю­чало: установление антибактериальных свойств методами диффузии в агар с образованием лунок и последовательных серийных разве­дений в МПБ с использованием в качестве тест-микробов, выделенных из матки больных эндометритом коров микробных культур; определение проти­вовоспалительного действия путем накожных аппликаций испытуемых пре­паратов на область экспериментально вызванного термическим и химиче­ским факторами воспаления кожи и подкожной клетчатки у кроликов (по Ж.И. Абрамову, 1954), учитывая при этом степень развития и время исчезновения воспалительной реакции).

Фармакокинетику антимикробного препарата определяли путем выявления оста­точного количества его основных активно действующих веществ в молоке, методом основанном на восстановлении метиленового голубого  в молоке с микроорганизмами вида Streptococcus  thermopiles  с 1по 10 день после внутриматочного введения препарата (Соловьев А.И., Афанасьев А.И., Федоров Н.М, Лысенко С.Н., Поляков Г.Д., 2003).

Безвредность препарата изучали путем установления их «острой» и «хронической» токсичности, раздражающего и аллергогизирующего дейст­вия.

Оценку местного раздражающего действия цефаметрина осуществляли на  кроликах массой 2,2-3,2 кг методом многократных  накожных  аппликаций. Для проведения опыта сформировали 2 группы кроликов. В первой группе кроликов использовали аппликации цефаметрина по 0,1 мл на один и тот же участок кожи размером 4*6 см  ежедневно в течение 4 дней.

  На седьмой день провели капельные пробы: в опытной группе – цефаметрином, в контрольной – лошадиной сывороткой. Учет реакции проводили через 24 часа, на 8, 9, 10 сутки. О раздражающем действии судили по развитию выраженного дерматита в местах капельных проб.

Общее токсическое действие препарата оценивали, определяя острую и хроническую токсичности в соответствии с « Методическими указаниями по определению токсичных свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (1991), утвержденными ГУВ СССР и « Методическими рекомендациями по токсико- экологической оценке лекарственных средств, применяемых в ветеринарии», одобренных секцией отделения ветеринарной медицины РАСХН (1998).

Острую токсичность цефаметрина определяли на белых крысах массой 100-120 г по методу Deichmann, и Le Blanc (И.В. Саноцкий, 1970). Опыт проводили на восьми крысах. Каждую дозу подбирали так, чтобы последующая отличалась от предыдущей в 1,5 раза. Цефаметрин вводили внутрижелудочно через зонд, после чего за животными вели ежедневные наблюдения в течение 10 дней, отмечая время наступления гибели. За LD50 принимали промежуточную дозу препарата между наименьшей летальной и наибольшей переносимой.

Параметры хронической токсичности определяли на белых крысах- самцах массой 140-200 г. разбитых на две группы: опытную и контрольную, подобранных по методу пар-аналогов, используя тест «субхронической токсичности»  R.K. Lim с соавт.  (И.В. Саноцкий, 1970). Пре­парат задавали ежедневно в течение 20 дней, внутрижелудочно в различных дозах  по схеме. В контрольной группе животным вводили стерильный физраствор, в опытной – цефаметрин, установив первоначальную дозу (0,1 от LD50), увеличивая ее через каждые 4 дня в 1,5 раза. Весь опыт разбили на 5 периодов. Для вычисления коэффициента кумуляции использовали расчетную формулу Ю.С. Кагана и В.В. Станкевича (И.В. Саноцкий,1970), учитывая максимально переносимую дозу при однократном введении (острое действие) и многократном - (подострое действие).  За животными велось ежедневное наблюдение, учитывались аппетит и общее состояние. Перед каждым по­вышением дозы препарата, проводились морфологические, а также  биохимические исследования  крови, которые включали: определение мочевины уреазным методом по Conway (1935), общего белка рефрактометрическим методом Рейсса.

Хроническую токсичность препаратов изучали при их длительном применении в лечебных и повышенных дозах лабораторным животным и больным эндометритом коровам. В частности, безвредность проверяли на коровах спустя 6-12 дней после отела больных острым послеродовым эндо­метритом; препарат вводили внутриматочно в лечебной дозе и дозах, превы­шающих последнюю в 3,5 и 10 раз.

В рекогносцировочном опыте на больных острым эндометритом ко­ровах устанавливали оптимальные лечебные дозы разработанного препара­та. Клиническую оценку терапевтической эффективности предложенного препарата в сочетании с другими лечебными приемами осуществляли в сравнительном аспекте в серии научно-хозяйственных опытов с разделением коров по принципу пар-аналогов в опытные и контрольные группы при оди­наковых условиях их кормления, содержания, эксплуатации и осеменения. При этом в контрольных группах в качестве базового лечения использовали традиционные, ранее предложенные лекарственные средства этиотропной, патогенетической и заместительной терапии.

В опытах, в сравнении с общеизвестными антимикробными препарата­ми определяли терапевтическую эффективность  цефаметрина, вводимых внутриматочно на фоне идентичных в опытных и кон­трольных группах коров других лечебных приемов (согласно имеющимся наставлениям), при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометри­те у коров, как наиболее распространенной форме неспецифического воспа­ления эндометрия. В дополнение к этому изучали возможность использова­ния этого препарата после патологических отелов с целью профилактики острого послеродового эндометрита. В связи с тем, что весьма часто острый послеродовый эндометрит раз­вивается у коров после отделения задержавшегося последа или на фоне су­бинволюции половой сферы, или снижения естественной резистентности, а также с учетом осложнения воспаления эндо­метрита дисфункцией (гипофункцией) яичников возникла необходимость в серии специальных научно-производственных опытов определить эффектив­ность препарата цефаметрина в сочетании с  биологическими  стимуляторами и лазерного излучения при указанных патологических процессах  для предупреждения симптоматического бес­плодия у крупного рогатого скота.  Основным критерием оценки профилактической и терапевтической эффективности испы­туемых препаратов явилось восстановление в возможно короткие сроки у  подопытных животных их воспроизводительной способности. При этом принимали во внимание продолжительность курса лечения, сроки исчезновения вы­раженных признаков заболевания или возможного предотвращения их про­явления, сроки возобновления половых циклов и полноценность, оплодотворяемость после первого и последующих осеменений, индекс осеменения, число дней бесплодия.

Цифровой материал подвергали биометрической обработке в соответ­ствии с рекомендациями И.А. Ойвина (1960) и Н.А. Плохинского (1970) с ис­пользованием ЭВМ «Реntium-4».

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Распространение эндометрита  коров 

  В хозяйствах Ростовской области в последние 5 лет уровень бесплодия у коров достигает 30-40%.  По причине бесплодия коров в Ростовской области ежегодно недополучают 50-60 тыс. телят и 70-75 тыс. тонн молока. Бесплодие обусловлено многими причинами, прежде всего акушерскими и гинекологическими болезнями. Возникновение симптоматического бесплодия на 60% и более обусловлено болезнями матки воспалительного характера.

В результате акушерской диспансеризации, прове­денной с 2006 по 2010 год в 5 хозяйствах Ростовской области, было обследовано 4989 отелившихся и в томчисле 2468 больных эндометритом,  коров. С помощью клинико - акушерского  исследования установлено распространение послеро­дового эндометрита у коров.

Послеродовым эн­дометритом в среднем заболевает 49,19 % коров. (табл. 1).  При этом в 2007 году (второй год наблюдения) заболеваемость составила  62,18 %, что на 13 % больше средней величины. Од­нако  заболеваемость коров послеродовыми  эндометритами  неравномерна.

Таблица 1 Распространение  послеродового эндометрита коров

в хозяйствах Ростовской области

Годы

Исследовано коров после отела

Выявлено больных эндометритом

коров

%

2006

1160

520

44,82

2007

1100

684

62,18

2008

992

452

45,56

2009

887

435

49,04

2010

850

377

44,35

Так, с 2006 по 2007 года наблюда­лось повышение заболеваемости. С 2008 года процент заболеваемости коров снизился, к 2009 снова повысился  и к 2010 году он уже снизился и составлял 44,35%.

Нами установлено, что заболевание  коров  послеродовым эндометритом имеет определенный сезонный характер, больше всего  коров заболевает в зимнее-весенний период. Так в I квартале заболело  51,1% от общего количества отелившихся коров в этот пери­од, во втором квартале – 44,2%,  в III – 30,6 и IV квартале  – 43,3%.

При  определении соотношения  форм эндометрита,  выявили, что удельный вес катарального эндометрита составляет 10,9%, катарально-гнойного - 70,0, фибринозного - 12,1%, некротического 7,1%.

Наименьший процент заболеваемости эндометритом отмечен у животных с нормальным течени­ем родов - 11,9%. В группе животных, которым оказывалось родовспоможение, заболеваемость послеродовым эндометритом составила 31%. У коров  с задержанием последа, была более высокая степень заболеваемости до 52%.

3.2. Изучение клинических признаков острого послеродового эндометрита у высокопродуктивных коров

Клинически послеродовой эндометрит проявляется угнетением, повышением температуры тела до 39,7-40,0° С., учаще­нием пульса до 89 уд/мин и  до 30-33 дых/мин,  выделением лохий серого  или грязно-бурого цвета, жидких, неоднородных с обрывками плодных оболочек и карункулов, гиперемией слизистой оболочки влагалища и влагалищной части шейки матки, изменением их цвета до ярко-красного, точечными кро­воизлиями или разлитыми кровоподтеками. Канал шейки матки  открыт на 3-4 см. через него выделяется воспалительный экссудат, серого или красно-коричневого цвета, неоднородный, с примесью слизи и гноя. Шейка матки находилась на переднем крае лонного сращения, 7-8см в диаметре, мягкой эластичной консистенции, безболезненная. Рога матки  увеличены, опуще­ны в брюшную полость, не контурированы, флюктуируют, отечные, не сокращается при массаже, стенки рогов матки дряблые.

В результате проведенных исследований, у сухостойных коров которые после отела заболели гнойно-катаральным эндометритом количество гемоглобина  было на 19,6г/л меньше чем у животных  без патологии. Количество эозинофилов было увеличено на 71,4% . В нейтрофильной части крови у глубокостельных коров, которые заболели эндометритом  отмечалось увеличение  количества молодых форм, в частности палочкоядерных нейтрофилов на 37,5% . У коров после отела  без акушерской патологии количество гемоглобина было на 20,5г/л  выше, чем у больных, число лейкоцитов у больных животных увеличение на 34,6%. Число лимфоцитов ниже на 38,7% по сравнению с коровами без послеродового эндометрита, увеличение количества палочкоядерных  на 41,4%  и на 35,0%  сегментоядерных нейтрофилов. 

3.2. Изучение роли микробного фактора в возникновении послеродового эндометрита у коров и  чувствительности микрофлоры, выделенной из  содержимого шейки матки к антибиотикам

При послеродовом гнойно-катаральном эндометрите в 1 мл маточного содержимого обнаружили 3157 ± 3,67 микроорганизмов, что больше, чем у животных без клинических признаков, в 1,5 раза.

В результате бактериологического исследования выделяли большое количество отличавшихся по морфологическим и культуральным свойствам колоний микроорганизмов, 43 из них были изолированы в чистые культуры и изучены с помощью основных биохимических тестов с целью определения их рода. Микрофлора у больных и здоровых животных почти не отличалась и была представлена родами: Escherichia, Staphilococcus, Streptococcus, Proteus, Enterobacter, Pseudomonas, Bacillus, Candida.

В биоматериалах от всех животных культуры выделяли в ассоциации. Микрофлору в ассоциации с преобладанием Г (-) палочек выделяли чаще при послеродовом эндометрите, чем при нормальном течении послеродового периода. Большинство выделенных культур были непатогенными (37 из 43).

       Полное отсутствие чувствительности установлено к пенициллину и эритромицину у 47,5 % культур, полимиксину и стрептомицину – у 22,5 %, тетрациклину – у 27,5 %, цефатоксиму – у 0,5 %. Низкочувствительными к пенициллину были 30,0 % культур, к полимиксину – 20,0 %, к тетрациклину и эритромицину – 27,5 %, стрептомицину – 22 %,  Среднюю чувствительность к пенициллину проявили 7,5 % испытанных культур, полимиксину – 14,5 %, эритромицину – 5,0 %, стрептомицину – 12,5 %, тетрациклину –  27,5 %,  цефатоксиму – 10,0 %. Высокочувствительными к пенициллину оказались 7,5 % культур, к полимиксину - 9 %,  и эритромицину – 13,5 %, стрептомицину – 12,5 %, тетрациклину – 17,5% и цефатоксиму – 85,5 %.

3.4. Роль резистентности организма  высокопродуктивных коров в этиологии эндометрита

Решающим  фактором,  который способствует усилению патогенных свойств микроорганизмов является снижение естественной резистентности организма коров в послеродовой период. В связи с этим  нами проведено исследование по изучению морфологического и биохимического состава крови высокопродуктивных коров,  не заболевших и больных послеродовым  эндометритом.

Для проведения эксперимента подбирали 20 коров голштинской породы. В первую группу включили 10 коров с нормально протекающим послеродовым периодом (здоровых)  во вторую  10 живот­ных, больных послеродовым эндометритом.

У клинически здоровых коров первой группы уровень гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общий белок, альбуминов, фагоцитарная активность, фагоцитарное число и фагоцитарный индекс лейкоцитов и остальные показатели были близки к физиологической норме. У коров второй группы коров, заболевших послеродовым эндометритом, был повышен уровень лейкоцитов на 3,3х1012 \л, лимфоцитов на 19,7%, понижено количество сегментоядерных нейтрофилов на 13,1%, понижен общий белок на 15,1г\л, понижены фагоцитарная активность на 15,1%, фагоцитарное число на 0,9%,бактерицидная и лизоцимная активность снижены на 1,6 и 2,3%, снижено количество Т и Б лимфоцитов на 9,3 и 7,5%.

У коров наблюдается выраженная нейтрофилия с резким регенеративным сдвигом, характеризую­щаяся появлением в периферической крови юных, увеличением процента палочкоядерных нейтрофилов, с лейкоцитозом, а также лимфоцитопенией, гипоэозинофилией, сопровождающиеся снижением альбуминов,  - глобулинов, увеличением а- и - глобулиновых фракций, что указывает на наличие острого воспалительного процесса в организме живот­ных.

Низкий процент фагоцитарной активности, незавершенность фагоци­тарного акта, снижение уровня лимфоцитов позволяют судить о на­рушении неспецифического звена иммунной системы. Развитию острого послеродового эндометрита способствует ослабление  иммунной системы организма.

3.5. Изучение  влияния кормления на обмен веществ и проявление послеродового эндометрита у высокопродуктивных коров

Животные круглогодично обеспечено  кормами, в основном силосом,  сеном, концентратами. Фермы находится  на силосно-концентратном типе кормления. Рационы в целом сбалансированы по основным питательным веществам и состоит из сена, силоса, комбикорма, жмыха подсолнечного, шрота рапсового, шрота соевого, кукурузы и патоки. В 1кг сена содержалось 4,16 мг каротина, в 1кг силоса – 16,64мг. Коровы получают  ежедневно по 5,6-6,8 кормовых единиц, 590г переваримого протеина, около 192 мг каротина, 76,6 г кальция и 16 г фосфора. В рационе -  70 г переваримого протеина, 12г фосфора, 30 мг каротина и избыток кальция 20г. Потребление сухого вещества на 1-м месяце лактации составило 18-19кг в сутки, на 2-3 месяце лактации – 21-2 кг в сутки. В тоже время доля концентратов по сухому веществу в рационе составляет удоя 30 л – 62,2%, для удоя 35 л – 66%.

В результате проведения ранней клинико акушерской диспансеризации, включающей клинический и биохимический анализ крови коров, мы не выявили закономерных колебаний количества эритроцитов и лейкоцитов в зависимости от сезона года и от уровня кормления коров. Резервная щелочность резко колебалась, причем самый низкий показатель резервной щелочности был, весной в марте, что способствовало развитию ацидоза.  Обнаружена диспротеинемия, повышение содержания альбуминов, глобулинов и снижение глобулинов. У обследованных коров наблюдается гипокаратинемия (30%), гиперфосфоремия (50%), ацидоз (99%). У большинства высокопродуктивных животных наблюдается нарушение минерального и углеводного обмена веществ.

Рацион не обеспечил потребностей организма животных. Очевидно, что повышенное содержание концентратов в рационе приводит к повышению среднего удоя по хозяйству. Отмечается большой недостаток сена, не занимаются производством кормовой свеклы. Качество кормов низкое, особенно сена, сенажа и силоса. Снижение молочной продуктивности коров, заболевание их гинекологическими болезнями вследствие нарушения обмена веществ обусловлено кормлением некачественными кормами и несбалансированностью рационов по питательным веществам и низким в них сахаропротеиновым отношением.

Контроль за полноценности кормления животных является неотъемлемым условием в интенсивной системе ведения животноводства. Несбалансированность рационов, низкий и чрезмерно высокий уровни кормления, низкое качество кормов - основные причины нарушения обмена веществ у животных. 

3.6. Роль моциона в этиологии  послеродового  пе­риода у коров

  При изучении роли  моциона в про­филактике послеродового эндометрита  у высокопродуктивных  коров  выявили, что у 40%  животных опытной группы, содержащихся с активным моционом послеродовой период протекал без осложнений (табл. 2).

Таблица 2 - Влияние моциона на течение послеродового пе­риода  у коров

  Группа

Число

отелив­шихся коров

С нормальным

течением  по­слеродового периода

С патологией по­слеродового

периода

Эндометрит

Субинволюция матки

коров

%

коров

%

коров

%

Контрольная

150

32

21,3

75

50,0

43

28,6

Опытная

140

56

40

54

38,5

28

20,0

        В контрольной группе таких животных было меньше 1,5 раза и составило 21,3%%. Послеродовой эндометрит регистрировали у коров контрольной группы  в 50,0% случаев, а у животных опытной группы, которые выходили на прогулки– 38,5%, при этом в опытной группе заболевших субинволюцией было тоже меньше на 8,6 % по сравнению с группой, где животные не имели выгула в базу.

Морфологические, биохимические и иммунологические исследования крови показали, что  в контрольной группе коров (без моциона)  наблюдается нейтрофилия с увеличением сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов на 15,1 и 4,1% и лимфоцитопения на 18,4%, снижение альбуминов на 6,5% и уве­личение гамма глобулинов на 7,1% относительно первой группы коров (с моционом). Также у животных контрольной группы отмечался низкий процент фагоцитарной активности, наблюдалась незавершенность фагоцитарного процесса и снижение уровня Т и В лимфо­цитов. Все это свидетельствует о нарушении целостности неспецифического звена иммунной системы.

3.7. Разработка комплексного этиотропного химиотерапевтического препарата  цефаметрина для фармакотерапии  эндометрита коров

3.7.1.  Технология получения цефаметрина

               Разработка и приготовление новых эффективных препаратов, обладающих сильным противомикробным и противовоспалительным  действием весьма актуальна. На кафедре акушерства и хирургии разработан новый комплексный этиотропный химиотерапевтический  препарат цефаметрин.

Полученный препарат - цефаметрин представляет собой раствор зеленого цвета, со специфическим приятным запахом алоэ, непрозрачный, полужидкой консистенции. Стойкий при хранении в обычных условиях в защищенном от света месте. Не горюч, не пожароопасен. Плотность препарата составляет 1,23 г/мл,  рН – 7,9 – 8,1. Активнодействующим компонентом является цефотаксим – антибиотик цефалоспоринового ряда 3 поколения.

Соотношение активных компонентов в новом препарате – цефаметрине определяли с учетом наставления для их применения в трех составах.

Состав 1. Этакридина лактат – 0,6 г, сок алоэ – 50,4г , цефотаксим – 2,0г , мочевина – 15,0 г, формалин нейтральный – 10,0 г, вода дистиллированная – 5,0г , глицерин – 17,0г .Состав 2. Этакридина лактат – 1,0г , сок алоэ – 51г , цефотаксим  – 1,0г , мочевина – 15,0г, формалин нейтральный – 10,0г , вода дистиллированная – 5,0 г, глицерин – 17,0г .Состав 3. этакридина лактат – 1,0г , сок алоэ – 51,5г , цефотаксим  – 0,5г , мочевина – 15,0г , формалин нейтральный – 10,0г , вода дистиллированная – 5,0г, глицерин – 17,0г.

Для определения оптимального соотношения компонентов в новом препарате подбирали коров в возрасте 4 – 7 лет черно-пестрой породы, с признаками послеродового гнойно-катарального эндометрита. Из них сформировали 3 группы,  в каждой, по принципу пар аналогов. В первой группе коровам вводили новый препарат цефаметрин внутриматочно в составе 1, во второй – в составе 2, в третьей в составе 3, в дозе 50-80 мл (в зависимости от объема матки), через 48 часов до выздоровления. В результате улучшение состояния отмечалось у животных первой и второй группы на третьи сутки, у коров третьей группы улучшение наступало на 4-5 сутки. У опытных животных наблюдалось уменьшение воспалительного отека, количества катарально-гнойного экссудата, объёма матки, флюктуации. Выздоровление наступало у коров 1 группы в среднем на 8,2 сутки после начала лечения. У коров 2 группы на 9,1 сутки, в третьей на 12,4 сутки. Интервал от отела до первого осеменения был короче в первой группе,  чем во второй в 1,11 раз, и  в 1,25 -  чем в третьей. Период времени от отела до плодотворного осеменения (сервис-период), в первой группе был в пределах нормы и составил в среднем 57 суток, когда как во второй и третьей группе был несколько длиннее, в 1,07  и 1,17 раз соответственно. Дни бесплодия наблюдали во второй  и третьей группе. Индекс осеменения в первой группе составил 1,4, а во второй и третьей группе этот показатель был больше в 1,14 и 1,5 соответственно. Таким образом, применение цефаметрина в составе 1 для лечения коров с послеродовым эндометритом способствовало их быстрому выздоровлению и оказывало положительное влияние на воспроизводительные показатели.

Изучение  физико-химических свойств проводили в соответствие с СТО 26582716 – 0001 – 05 в течение 6 мес.

При определении дозы и безвредности выявили, что  оптимальной разовой дозой цефаметрина для внутриматочного введения коровам с послеродовым эндометритом является доза – 80 мл. При введении цефаметрина в дозах  50,  80,  100 мл наступает выздоровление животных, не отмечается отклонений в изменении температуры  тела за пределы нормы и частоты пульса и дыхания. Цефаметрин не обладает вредным действием при внутриматочном введении.

При изучении стабильности препарата флаконы с цефаметрином выдерживали 41 сутки в холодильном шкафу при температуре +5 +10 градусов С. Затем подвергали «ускоренному старению» 15 суток в термостате при температуре 38 градусов С. Срок годности вычисляли по формуле: С = К * Сэ  + Со, где С – срок годности препарата в сутках; К – коэффициент зависимости от температуры хранения; Сэ – предельный срок экспериментального хранения препарата сохранившего свои качества, в сутках; Со – время от изготовления испытуемого средства до начала опыта в сутках.  С = 10 * 15 + 41 = 191 или 6,4 месяца

Изучение стабильности в процессе хранения – при комнатной температуре, в защищенном от света месте проводили в течение 6 месяцев. Определение параметров цефаметрина: внешнего вида, запаха, консистенции, концентрации водородных ионов и безвредность  проводили  каждый месяц срока хранения препарата. Цефаметрин на протяжении всего периода исследований сохранял исходный цвет и внешний вид – зеленый раствор, со специфическим приятным запахом алоэ, рН цефаметрина  в пределах 7,9 – 8,1.

3.7.2. Определение токсичности препарата цефаметрин

Препарат в дозах 2100, 3200, 4700 мг/кг вызывает у крыс непродолжительное сильное беспокойство, переходящее затем в угнетение и диарею, возникающую через три часа после введения препарата. Вышеуказанные дозы вызвали  гибель животных.

        Исходя из факта гибели подопытного животного, не перенесшего дозу 2100 мг/кг живой массы, и оставшегося в живых животного перенесшего дозу 1400 мг/кг  живой массы, по условию методики была выбрана промежуточная доза между наименьшей летальной и наибольшей переносимой для получения более точного результата. С этой целью, доза 1750 мг/кг живой массы была введена крысам с соблюдением всех условий опыта по предварительному нахождению средней смертельной дозы. По результатам опыта ни одно животное не погибло. Доза 2100 мг/ кг живой массы была принята за среднюю смертельную дозу при однократном введении (LD50). Доза 4700 мг/кг массы тела принята абсолют­но смертельной LD(100). Следовательно, препарат цефаметрин  по классификации химических ве­ществ, при однократном оральном пути введения относится к III классу ток­сичности - умеренно токсические вещества.

Хроническая токсичность препарата определялась нахождением его способности к кумуляции, проводились морфологические и биохимические исследования крови перед каждым по­вышением дозы препарата. Гибель животных регистрировали на 15, 18,, 20 сутки от начала опыта. В IV период погибло 3 животных ( 10%)  на 15-е сутки. В V период погибло 5 животных, что составило 16,6% от общего числа  крыс,  включенных в опыт: две крысы погибли на 18-е сутки, три крысы на 20-е сутки.

LD50 при многократном скармливании препарата составила за I - V периоды опыта - 11072 мг/кг массы тела животного (840+1260+1888+2832+4252).

Коэффициент кумуляции (Кк) при многократном применении препара­та цефаметрин рассчитали по формуле Ю.С. Кагана и В.В. Станкевича (1964):

Кк = LD50  хроническая/ LD50  острая , Кк= 11072 : 2100 = 5,27.

Коэффициент кумуляции равный 5,27  позволяет отнести препарат к четвертой группе - слабо выраженная степень кумуляции [по Л. И. Медведю, 1964].

Изменения в лейкоцитарной формуле  указывают на происходя­щие перемены в организме животных опытных групп. Количество лимфоци­тов возрастало с увеличением суммарной дозы препарата с 63,6 до 76,7 %. .На фоне лимфоцитоза происходило снижение количества сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов и моноцитов. Токсические изменения показателей крови крыс у опытных групп, начинались на 13-15 сутки от начала опыта при суммарных дозах препарата 2800-4300 мг/кг массы тела животных. Содержание мочевины в крови крыс, получавших цефаметрин стало выше на 20% относительно контроля к 14 дню опыта, что указывает на возрастание функциональной нагрузки на почки.

При оценке  раздражающего действия цефаметрина методом многократных накожных аппликаций на кожу кроликов,  видимых реакций кожи, не наблюдали.

3.7.3. Фармакологические свойства цефаметрина

Изучение фармакологического действия цефаметрина включало определение антимикробных свойств методом серийных разбавлений в жидкой питательной среде и методом диффузии в агар. Цефаметрин показал выраженное бактерицидное и бактериостатическое действием по отношению ко всем испытуемым  культурам микроорганизмов.

В разведении 1:32 по отношению к культуре Str.epidermis и  E. Coli, в разведении 1:16 по отношению к культуре St. Aureus и Pr. vulgaris. Все  испытанные  культуры микроорганизмов проявили к цефаметрину  достаточную (з.з.р. 20,6 –24,5 мм) чувствительность.

Сроки выделения цефаметрина с  молоком у опытных коров, контролировали по определению остаточных количеств ингибирующих веществ, методом основанном на восстановлении метиленового голубого  в молоке с микроорганизмами вида Streptococcus  thermopiles  с 1по 3 день после внутриматочного введения препарата. Во всех пробах обнаруживали  обесцвечивание метиленового голубого, что свидетельствовало  об отсутствии антибиотика в молоке.

  Для определения фармальдегида в молоке  в пробирку наливали 2 мл смеси серной и азотной кислот: (серная кислота , плотностью 1,82г/мл 100 мл + 1 капля концентрированной азотной, плотностью 1,3 г/мл) и осторожно наслаивали 5 мл молока (Булдакова М.А.,2004). На границе жидкостей  во всех пробах образовывалось желтое кольцо, что говорило об отсутствие формальдегида в молоке, при наличии  формальдегида образовывалось бы фиолетовое кольцо

      Определение наличия соматических клеток в молоке определяли  косвенным методом с применением препарата «Мастоприм», ГОСТ 23453-90, с использованием препарата «Мастоприм», в результате смешивания которого с молоком  меняется его консистенция. Во всех пробах образовывался слабый сгусток, который слегка тянулся за палочкой в виде нити, что говорило о низком содержании  соматических  клеток в 1мл (до 500тыс).

При определении терапевтической эффективности нового препарата цефаметрина по сравнению с метрикуром и внутриматочными палочками с фуразолидоном на желатиновой основе, выявили, что все этиотропные препараты,  использованные для лечения коров, больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом были эффективными. Однако в первой группе (n-18), где применяли цефаметрин выздоровело 94% коров, во второй (n-18) - 88 (метрикур) и третьей (n-18) - 72% (фуразолидоновые палочки) коров. В первой и второй  группах был самый короткий терапевтический курс. Он был в среднем короче по сравнению с третьей группой на 5,2 суток (Р < 0,001).Лучшие показатели воспроизводительной функции получены также в первой опытной группе. Так осеменений приходящихся на одну стельность в первой группе потребовалось в 1,05 и  1,23 раза меньше, чем во второй и  третьей группах соответственно. Число дней бесплодия в первой группе было достоверно меньше, чем во второй и  третьей группе.

Число  эритроцитов после лечения повысилось в первой, второй и третьей группах в 1,09, 1,08, 1,03 раз  соответственно, количество лейкоцитов после лечения – уменьшилось, в том числе: палочкоядерных на 4,2 %,  сегментоядерных на 8,1 %, снизилось количество лимфоцитов на 9,1 %. Юные  - обнаруживали в крови больных животных до лечения в количестве 0,1 – 0,4%, а после лечения в крови коров их не было. Количество базофилов, эозинофилов, и моноцитов было в пределах физиологической нормы до лечения и не изменилось после него. Число лимфоцитов в крови коров до лечения находилось на высоком уровне, но не превышало физиологической нормы. После курса терапии содержание лимфоцитов в крови подопытных животных было несколько ниже, чем до лечения такая динамика характерна для фазы выздоровления.

Уровень белка у коров всех групп до лечения был почти одинаковым и находился на нижнем уровне. После лечения этот показатель увеличился в первой группе на 4,13 %, во второй на 0,52, в третьей на 1,59%. Уровень кальция в сыворотке крови коров всех трех групп был в пределах 10,5 – 10,7%. После лечения этот показатель у коров первой группы увеличился на 4,13%, у коров второй и третьей групп отмечалось снижения кальция в сыворотке крови на 1,3% и на 2,4% соответственно. Уровень неорганического фосфора – после лечения  увеличился в среднем на 3,73% у животных всех трех групп. Содержание альфа-глобулинов в сыворотке крови коров после лечения цефаметрином увеличилось на 17,4% в сравнении с уровнем -глобулинов до начало опытов, что характеризует мобилизацию иммунной системы к и благоприятный исход течения болезни. При этом - глобулиновая фракция у коров этой группы была почти на одном уровне до после лечения, что свидетельствует об отсутствие патологии в области почек. До начала опыта  разница в уровне глобулинов  в сыворотке коров первой группы в сравнении с данными этой же группы после лечения составила 16,4%.

  Изучение сравнительной терапевтической эффективности цефаметрина и рихометрина, проведенное  в опытах на базе двух хозяйств показало, что оба препарата при лечении коров, больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом были эффективны. Однако в опытных группах (цефаметрин) выздоровели 95-100% коров, а  контрольной группе процент выздоровления животных был несколько ниже -  80 – 85%. В опытных группах терапевтический курс,  был в среднем короче по сравнению с контрольными группами  на 2 – 4.8 суток. Динамика патологического процесса в группах также отличалась. В опытных группах первые признаки улучшения наступили на 3 – 4 сутки лечения, а в контрольной  несколько позднее – на 4 - 6 сутки.  Все животные, включённые в опытные группы, были результативно осеменены, индекс осеменения  составил в среднем 1,85. В контрольных группах индекс осеменения  был в среднем 2,2. Период от отёла до плодотворного осеменения был также различным в опытных и контрольных группах. У коров опытной группы меньше по сравнению с контролем на 7,5 суток.

3.7.4. Профилактическое действие цефаметрина при послеродовом эндометрите коров

Для изучения профилактического действия цефаметрина сформировали пять групп (n- 26), состоящих из  коров-аналогов в первый день после отёла.  Животным четырех опытных групп  для профилактики послеродового эндометрита  в первый день после отёла вводили внутриматочно готовые лекарственные препараты: в первой опытной группе - метромакс по 2 палочки, коровам  второй опытной группы  -  2 таблетки гинобиотика, животным третьей опытной группы  - эмульсию йодвисмутсульфамида в дозе 100 мл, коровам четвёртой опытной группы – цефаметрин в дозе 80 мл. За коровами пятой группы вели наблюдения без применения препаратов.  В результате эксперимента в четвертой опытной группе коровы  эндометритом не заболели. Несколько худшие результаты получены при применении метромакса, гинобиотика  и эмульсии йодвисмутсульфамида при которых заболеваемость послеродовым эндометритом была ниже, чем в контрольной группе. Продолжительность периода от отёла до плодотворного осеменения у коров опытных групп была примерно одинаковой и в 1,4 – 1,5 раза короче по сравнению с контролем. Наименьшее число осеменений на одну стельность потребовалось в группе коров, которым применили метод комплексной профилактики послеродового эндометрита (1,3). Этот показатель был ниже по сравнению с контролем в 1,9 раза, со второй опытной группой – в 1,4, третьей и пятой – в 1,2 раза.

3.8. Разработка иммуностимулирующих средств для фармакопрофилактики послеродового  эндометрита коров

Мы разработали способы профилактики послеродового эндометрита у коров применением иммуностимуляторов и веществ стимулирующих обмен веществ.

В структуре родеста содержится группа SO2 Cl  в открытой или блокированной Na-форме.  Родест рекомендуются как активнодействующее вещество, которое при парентеральном введении существенно повышает резистентность и имуннореактивность животных и человека. Родест в определенных дозах вызывает направленный иммунный ответ. Максимальная реакция на введение родеста установлена авторами на 20 сутки, по их сведениям уровень плато максимум сохраняется до 35-40 суток. Для удобства применения родест предлагают использовать в виде масляной суспензии на растворе тривита. Тривит используется как стерильная масляная среда, обеспечивающая пролонгированное действие родеста. Для приготовления одной дозы родеста 15-30млг растворяли в 5 мл масляного раствора тривита. Приготовленную суспензию родеста инъецировали внутримышечно в область средней трети шеи глубокостельным коровам за 14-16 дней до отела, предварительно подготовив место инъекции по общепринятым правилам асептики.

Выбор времени инъекции определили по резкому снижению резистентности и реактивности организма коров в последние две недели и 1-3 недели после отела, а родест как раз вызывает максимальную реакцию на 20 сутки,  сохраняя  уровень плато максимум  до 35-40 суток. Для выбора и обоснования дозы родеста подбирали 30 стельных коров за 14-16 дней до отела. Из них сформировали 3 группы по принципу пар аналогов (n -10 ).  Животным первой группы инъецировали родест в дозе 15-20 млг расворенного в 5 мл тривита, во второй группе  - 25-30 млг, в третьей 35-40млг. У всех коров, включенных в опыт брали пробы крови на первые и 15 сутки после отела для иммунологического исследования.

Профилактическая  эффективность родеста составляет 60-90%. Лучший эффект получен при введении родеста в дозе 25-30 млг, при максимальном повышении бактерицидной  (БАКС) и лизоцимной (ЛАСК) активности сыворотки крови, к 15 дню исследования. Небольшие дозы 15-20 мг лишь незначительно повысили БАСК и ЛАСК, а введение родеста в дозе 35-40 мг вызвало угнетение этих показателей.

В следующем эксперименте, для проведения сравнительных испытаний подобрали 30 стельных коров, за 14-16 дней до отела. Из них сформировали 3 группы по принципу пар аналогов (n -10 ): две опытные и одну контрольную. Животным 1-ой опытной группы инъецировали родест в дозе 25-30 млг, растворив его в 5 мл тривита, однократно внутримышечно. Животным 2-ой опытной группы вводили  5 мл тривита, однократно внутримышечно. В третьей группе (контрольной) препаратов не вводили. Применение родеста в дозе 25-30 мг, растворенного в 5 мл масляного раствора тривита, позволяет профилактировать послеродовой эндометрит в 90% случаев. При заболеваемости в контрольной группе 40%, а во второй опытной – 20%. Этот способ даёт возможность существенно снизить заболеваемость коров послеродовым эндометритом, что обеспечит повышение и улучшение показателей воспроизводства стада крупного рогатого скота.

В дальнейшей работе, для профилактики послеродового эндометрита,  испытали гамавит. Гамавит содержит комплекс биологически активных веществ, благодаря  которым оптимизирует обменные процессы в организме (в частности белковый, витаминный и минеральный). . Он содержит в качестве действующих веществ: нуклинат натрия – 0,002%, кислотный гидролизат плаценты денатурированной эмульгированной (ПДЭ) – 0,08% и среду 199 (сбалансированный раствор солей, аминокислот и витаминов) 10% и воду для инъекций до 100%.

Гамавит инъецировали коровам опытной группы (n -15 )  внутримышечно в первый и пятый день  после отела, в дозе 0,1мл на 10кг живой массы. В контрольной группе(n -15 ) профилактику послеродового эндометрита не проводили.

В результате у коров опытной группы послеродовой период протекал без осложнений, в контрольной группе 6 коров (40,0 %) заболело послеродовым гнойно-катаральным эндометритом.       Показатель БАСК у коров контрольной группы средний на десятый день после отёла несколько снизился по сравнению с первым днём, а у коров опытной группы заметно повысился и был достоверно выше (р < 0,01) по сравнению с контролем.  Показатель ЛАСК у контрольных коров на десятый день после отёла повысился по сравнению с первым днём в 1,3 раза, но был достоверно ниже по сравнению с таковым у коров опытной группы (р <  0,01). Относительное количество лимфоцитов, фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов, фагоцитарный индекс у коров контрольной группы в первый и десятый дни после отёла были примерно на одном уровне. У коров опытной группы они возросли на десятый день по сравнению с первым соответственно в 1,14; 1,22 и 1,21 раза и были достоверно выше по сравнению с контрольной группой. Фагоцитарное число у контрольных животных на десятый день после отёла выросло по сравнению с первым днём в 1,14, но было достоверно ниже по сравнению с таковым у опытных животных.

Для изучения профилактической эффективности  дюфалайта – используемого в ветеринарии для профилактики и лечения гиповитаминозов, нарушении белкового обмена, повышения резистентности организма, препарат вводили путем внутримышечных инъекций  за 30 дней до отела. В 1мл дюфалайта содержится: витамины - витамин В1  -  0,10мг, витамин В2  -  0,04мг, витамин В6  -  0,10 мг, витамин В12 -  0,05 мг, никотиномид  -  1,50 мг, d-пантенол  -  0,05 мг; аминокислоты и питательные вещества, декстроза  -  45,56мг, L-Аргинин -  0,025мг, L – Цистеин -  0,01мг. глутамат натрия  -  0,04мг, L –Гистидн -  0,01мг. L – Изолейцин  -  0,01мг, L – Лейцин  -  0,04мг, L – Лизин - 0,03 мг, L -  Метионин – 0,01 мг, Д L Фенилаланил – 0,03мг, L – Треонин -  0,02мг, Д L – Триптофан  - 0,01 мг, Д L – Валин -  0,05 мг,; электролит:  кальция хлорид - 0,23 мг, магния сульфат -  0,29мг, калия хлорид  - 0,20мг; вспомогательные вещества: метил-парабен -  1,80мг, пропил парабел  -  0,20мг, фенол -  0,10 мг, ЭДТА - 0,15мг, ацетат натрия - 2,50мг, лимонная кислота (как регулятор рН), вода для инъекций до 1,0мл.

В контрольной группе профилактику послеродового эндометрита не проводили. В результате эксперимента в опытной группе (n-17) острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом заболели (11,8 %).  В контроле (n -20 ), заболело 40,0 % и было больше по сравнению с опытной в 3,4 раза. У всех коров  клиничский воспалительный процесс в матке протекал аналогично. У коров, получавших дюфалайт, период от отёла до плодотворного осеменения составил в среднем 45,6 ± 1,2 дня с колебаниями от 40 до 62 дней. У коров контрольной группы этот период был 95 ± 3,4 дня с колебаниями от 48 до 125 дней, оказавшись таким образом длиннее в 2,1 раза . Индекс осеменения в опытной группе был в 1,4 раза меньше по сравнению с контрольной

  В результате следующего эксперимента по изучению эффективности  гамавита, родеста и дюфалайта с  профилактической целью при послеродовом эндометрите, в сравнительном аспекте, в период стельности,  во второй группе (n -10 ) (гамавит) эндометритом коровы не заболели, в  третьей группе (n -10 ) (дюфалайт) заболело две коровы (20%) в первой (родест)  –  одна корова (10%), а в контрольной (n -10 ) (без применения средств профилактики)  - четыре  (40%).

В контрольной группе БАСК на 14 день после отёла снизился по сравнению с первым днём, а у коров опытных  - повысился и был выше (р < 0,01) по сравнению с контролем.  Показатель ЛАСК у контрольных коров повысился по сравнению с первым днём, и был ниже по сравнению с  опытной группой (р <  0,01).  Фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов, фагоцитарный индекс у коров опытных групп возросли на 14 день по сравнению с первым были достоверно выше по сравнению с контролем. Фагоцитарное число у контрольных животных было достоверно ниже по сравнению с таковым у опытных животных.

3.9. Разработка  способа фармакопрофилактики послеродового 

эндометрита коров применением утеротонических средств

        Важным условием быстрого своевременного возвращение матки после родов в исходное до беременности состояние является восстановление её тонуса. Изучение фармакопрофилактического действия средств  повышающих тонус матки при послеродовом эндометрите коров  провели на 38 коровах  после  отела, которых разбили на 2 группы, опытную и контрольную (n – 17). В опытной группе профилактику послеродового эндометрита проводили путем однократной внутримышечной инъекции  утеротона через 6 часов после отела. В контрольной группе профилактику послеродового эндометрита не проводили. В результате в опытной группе острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом заболела одна корова (5,5 %).  В контроле заболело  коров в 9 раз больше.  Заболевшим острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом коровам контрольной группы потребовалось по 4  введения цефаметрина на седьмой, девятый, десятый, одиннадцатый  дни послеродового периода, после чего наступило выздоровление.  У коров опытной группы, период от отёла до плодотворного осеменения составил в среднем 51,6 ± 0,2 дня с при 100,0 % - ной оплодотворяемости. У коров контрольной группы этот период был 105,3 ± 3,4 дня, оказавшись таким образом длиннее в 2,1 раза при 94,0 % - ной оплодотворяемости. Две коровы контроле не имевшие клинических признаков эндометрита, не оплодотворились в течение  120 дней. Индекс осеменения в опытной группе был в 1,4 раза меньше по сравнению с контрольной.

Миотропным действием обладает лазерное излучение при местном воздействии. Благодаря  миотоническому действию, лазерное излучение стимулирует сократительную деятельность матки . В следующем эксперименте коровам опытной группы (n – 23) применяли лазер «Зорька» трансректально в 5 режиме на 1, 2, и 3 дни после отела. Лазерное облучение осуществляли с помощью лазерного терапевтического комплекса  (ЛТК) «Зорька». В результате в опытной группе острым эндометритом коровы  не заболели. Послеродовой период у них протекал без осложнений, лохиальный период закончился на 12-13 сутки. В контрольной группе заболело 8 коров, что составило 34,0%.

       

3.12. Экспериментальное обоснование и клиническая оценка эффективности комплексного лечения и профилактики при послеродовом эндометрите коров

Для изучения эффективности комплексного лечения коров при послеродовом эндометрите, с применением  биогенных стимуляторов, этиотропных, симптоматических, патогенетических препаратов организовали серию опытов в хозяйствах Ростовской области.  Для очередного эксперимента коров подбирали на пятый – седьмой дни после отёла с признаками эндометрита. Их разбили их на 3 группы (n-12). В контрольной группе  животным водили цефаметрин внутриматочно в дозе 100 мл через 48 часов до выздоровления,  окситоцин  в дозе 50 ЕД внутримышечно и проводили новокаиновую блокаду по Фатееву в 1, 2 и 5 дни лечения. В первой  группе  лечение животных  дополняли инъекцией гамавита в дозе 0,1 мл на 10 кг массы животного внутримышечно в первые пять дней подряд, во второй группе введением дюфалайта  в дозе 10мл внутримышечно однократно в первый день лечения. В результате комплексного лечения выздоровели все коровы. Терапевтический курс составил в 1-й опытной группе в 6,0 , во 2-й  был на 1,5 дня,  а в 3-й - на 3,3 дня длиннее,. Число дней бесплодия во второй опытной и контрольной было больше чем в первой опытной на 6 и 29 соответственно. Индекс осеменения в первой группе колебался в пределах 1,4, а во второй опытной и контрольной был выше на 0,2 и 1,2 соответственно. В результате гематологического исследования выявили, что до начала лечения во всех трех группах отмечалось снижение количества эритроцитов и гемоглобина в среднем до 5,31012/л и 94г/л соответственно. Количество лейкоцитов  во всех группах было увеличено и в среднем составило 13,6109/л. На 10 сутки после выздоровления отмечалось увеличение количества гемоглобина в первой опытной группе до 114,2г/л, что на 11,5 и на 14,8г/л (Р>0,99) чем во второй опытной и контрольной группах соответственно. При изучении лейкограммы, установлено, что количество лейкоцитов  нейтрофильной группы в опытных и контрольной группах уменьшилось, лимфоцитов увеличилось. 

  Концентрация общего белка в сыворотке крови у коров больных гнойно-катаральным эндометритом до проведенного лечения во всех исследуемых группах в среднем составила 72,8 г/л. После проведенного лечения  концентрация общего белка в сыворотке крови имела тенденцию к увеличению в опытных группах по сравнению с контрольной  на 11,7 и на 11,2 г/л  соответственно. Концентрация альбуминов,  альфа- и бета- глобулинов после проведенного лечения  увеличилась незначительно и на протяжении всего эксперимента была в пределах первоначальных показателей. Однако выявлены изменения содержания гамма-глобулиновой фракции у коров в 1-й и 2-й опытных групп при использовании в схемах лечения биологически активных веществ гамавита и дюфалайта. Концентрация гамма-глобулинов после проведенного лечения  по сравнению с коровами контрольной группы до лечения в 1-й и 2-й опытных группах увеличилась на 7,5 и 6,8г/л соответственно. Существенные изменения отмечены при определении гуморальных факторов естественной защиты организма у коров после проведенного лечения: так бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови  в 1-й и во 2-й опытных группах по сравнению с контрольной увеличилась на 7,0 % и 6,9 %  и на 4,7 %  и 5,6%  соответственно. У коров всех групп  заболевших гнойно-катаральным эндометритом фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов, фагоцитарный индекс до лечения были примерно на одном уровне. После проведенного лечения у коров 1-й и 2-й опытных групп фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов увеличилась на 11,6 (Р>0,99)  и 9,5 % (Р>0,95) по сравнению  с показателями контрольной группы до лечения. Этот показатель у коров контрольной группы после лечения также  увеличился на 1,2%.

Производственные опыты по испытанию комплексного лечения в хозяйствах Ростовской области в отношении острого послеродового эндометрита у коров подтвердили его высокую эффективность.

4. Схема комплекса мероприятий по предупреждению и терапии острого послеродового эндометрита у коров

         Анализируя и обобщая результаты исследования причин послеродового эндометрита у коров, результатов клинической оценки разработанного комплексного химиотерапевтического препарата, профилактических средств и комплексных схем лечения, считаем возможным предложить, наряду с общепринятыми ветеринарными, зооинженерными и общехозяйственными мероприятиями следующие методы профилактики и терапии послеродового эндометрита в стадах молочного и мясомолочного скота.

  1. Правильная организация моциона коров в период сухостоя, в первый и последующие месяцы после отела, использование летних лагерей.
  2. Полноценное сбалансированное кормление по питательным веществам: белкам, жирам, углеводам, витаминам, макро-микроэлементам.
  3. Проведение искусственного осеменения коров  после завершения периода инволюции половой системы и телок, достигших физиологической зрелости с соблюдением ветеринарно-санитарных правил.
  4. Круглогодовое, рациональное использование родильных отделений на фермах крупного рогатого скота, обустроенных и разделенных на секции: дородовую, родовую и послеродовую. Осуществление мероприятий по профилактике послеродового эндометрита с использованием разработанных нами средств:  иммуностимуляторов: родеста, гамавита; веществ, повышающих уровень обмена веществ -  дюфалайта, миотропных – утеротона, лазерного излучения
  5. Регулярное проведение ранней клинико-акушерской диспансеризации с целью выявления и своевременного, комплексного  лечения коров при послеродовом эндометрите с использованием  препарата цефаметрина.
  6. Создание,  максимально приближенных к привычным,  условий кормления и содержания импортного скота с целью адаптации к условиям Северного Кавказа (Ростовской области).

5.  Выводы

       1 В хозяйствах Ростовской области, послеродовой эндометрит имеет широкое распространение, он регистрируется в среднем у  49,9% от числа отелившихся коров и протекает по типу гнойно-катарального воспаления у 70 % коров, катарального  у 10,9 %,  некротического у  7,1 %, фибринозного  у 12 % коров.

         2. Острый послеродовой эн­дометрит имеет определенный сезонный характер. Наибольшее количество коров, до 57 %,  в  хозяйствах заболевает в зимне-весенний период и значительно меньше, до  44 %, в летнее-осенний период. Частота проявления послеродового эндометрита зависит от течения родов, наименьший процент заболеваемости эндометритом наблюдается у коров с нормальным течени­ем родов -11,9%, при родовспоможении заболеваемость послеродовым эндометритом  выше и составляет 31,2%, наиболее высокая степень заболеваемости эндометритом до 52%,  у коров с задержанием последа.

         3. Основным этиологическим фактором острого послеродового эндометрита у коров является развитие в матке условно-патогенной микрофлоры. В 1 мл маточного содержимого коров, больных послеродовым эндометритом общее число микроорганизмов превышает таковые у животных без выраженных клинических признаков в 1,5 раза. Видовой состав микрофлоры представлен штаммами родов Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Enterobacter, Bacillus, Pseudomonas, из них высокочувствительными к пенициллину было 7,5 % культур, к полимиксину - 9%,  эритромицину – 13,5 %, стрептомицину – 12,5 %, тетрациклину – 17,5%, цефатоксиму – 85,5 %.

4. Основным способствующим фактом возникновения эндометрита у коров является снижение резистентности организма после родов, которое характеризуется увеличением уровня лейкоцитов на 3,3х1012 \л, лимфоцитов на 19,7%, понижением количества сегментоядерных нейтрофилов на 13,1%, понижением общего белка на 15,1г\л, фагоцитарной активности на 15,1%, фагоцитарного числа на 0,9%, бактерицидной и лизоцимной активности на 1,6 и 2,3%, снижением количества Т и Б лимфоцитов на 9,3 и 7,5%.

5.Несбалансированность рационов, низкий и чрезмерно высокий уровни кормления, низкое качество кормов являются  основными причинами нарушения обмена веществ  у высокопродуктивных коров, и ведет к нарушению функциональной деятельности органов репродуктивной системы. Создание животным на молочных комплексах и фермах промышленно­го типа условий содержания требует  систематического активного моциона  после отела, который позволяет на 21,5%  сократить заболеваемость коров эндометритом  и на 8,6% - субинволюцией матки, способствует повышению естественной резистентности организма животных при одних и тех же условиях кормления и доения. У коров, не имевших постоянного моциона наблюдается нейтрофилия с увеличением сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов на 15,1 и 4,1% и лимфоцитопения на 18,4%, причем наблюдается снижение альбуминов на 6,5% и уве­личение гамма глобулинов на 7,1% относительно коров, пользующихся моционом, низкий процент фагоцитарной активности, незавершенность фагоцитарного процесса и снижение уровня Т и В лимфо­цитов.

  6. Клинические признаки послеродового катарального эндометрита: частичное разжижение лохий и  приобретение ними сероватого цвета обнаруживаются на 5-6 сутки после отела. На 7-8 день  наблюдается выделение большого количества лохий, жидких и неоднородных серого цвета со слизистыми прожилками, с переходом в катарально-гнойную или гнойно-катаральную форму воспаления, из матки выделятся лохии,  красноватые со слизью, с хлопьями или прожилками гноя, слизистая оболочка отечная, ярко-красного цвета,  с полосчатыми или точечными кровоизлия­ниями. На нижней стенке влагалища слизисто-гнойный экссудат, чаще в виде белых рыхлых пленок. Шейка матки увеличена до 6-8 см в диаметре, отеч­ная, гиперемированая, из канала шейки матки  вытекал экссудат, матка увеличена, опущена в брюшную полость, стенка матки дряблая, отечная, тестоватая, матка не отвечает сокращением на массаж. При некротическом  - выделение серого или бурого экссудата из матки с ихорозным запахом и примесью хлопьев или крошек некротизированных тканей. Слизистая оболочка влагалища сухая, с красными полосами, шейка матки увеличена, с кровоподтеками, матка увеличена, болезненна, находится в брюшной полости, ее стенки уплотнены или тестоваты. На массаж матка не реагирует. При фибринозном эндометрите наблюдали слизисто-гнойные обильные истечения из матки серо-желтого или желто-бурого цвета с хлопьями и крупинками фибрина, атонию и увеличение матки, утол­щение ее стенок, часто болезненность. Температура тела превышает верх­нюю границу нормы на 1-2°С, пульса учащен на 15-20 уд/мин., увеличено количество дыхательных движений на 5-10. На нижней части поверхности слизистой оболочки влагалища отмечали наличие белых рыхлых пленок.

7. Цефаметрин представляет собой раствор  со специфическим приятным запахом алоэ, непрозрачный, полужидкой консистенции, с Рн в пределах 7,9 – 8,1, удельным весом 1,23, не вызывает раздражающего и вредного  действия на организм животных, обладает выраженным бактерицидным и бактериостатическим действием по отношению к микроорганизмам. Период хранения цефаметрина 6 месяцев. Характеризуется комплексным лечебным действием, При внутриматочном введении цефаметрина для лечения коров с послеродовым гнойно-катаральным  эндометритом, в дозе 80 мл с интервалом 48 часов способствует их быстрому выздоровлению в течение 8,2±0,4 суток и оказывает положительное влияние на их воспроизводительные показатели. Он отнесен к малотоксичным препаратам, 3 класса токсичности, его активнодействующие компоненты после введения в молоке не обнаруживаются.

       8.  Применение профилактических средств и комплексных схем лечения при послеродовом эндометрите с применением этиотропных, миотропных и общестимулирующих средств позволило предупредить заболеваемость коров  эндометритом, получить терапевтический эффект до 96%, уменьшить число дней бесплодия, увеличить процент оплодотворяемости, повысить сохранность и жизнеспособность  телят.

9. Проведение ветеринарных профилактических и лечебных мероприятий при послеродовом эндометрите экономически выгодно. Применение нового препарата  цефаметрина с лечебной целью в условиях широкой производственной апробации получено 18,05 руб. прибыли на один рубль затраченных средств, использование  комплексной терапии с применением этиотропных, миотропных, патогенетических и общестимулирующих средств  позволило поучить  на один рубль затрат 21,02 рублей экономического эффекта. Проведение профилактики при послеродовом эндометрите показало экономический эффект, который составил 75782,4 руб., или на 1 рубль затрат 16,84 руб.

6. Практические предложения

  1. Для лечения коров при послеродовом эндометрите и повышения резистентности их организма рекомендуем внутриматочное введение цефаметрина в дозе  80 мл с интервалом 48 часов до выздоровления.
  2. С лечебной целью при остром послеродовом эндометрите у коров рекомендуем комплексное лечение:

по схеме 1:  цефаметрин в дозе  80 мл внутриматочно с интервалом 48 часов  до выздоровления и лазер «Зорька» трансректально в пятом режиме утром и вечером до выздоровления;

по схеме 2:  дюфалайт в дозе,  окситоцин в дозе 50 ЕД,  цефаметрин в дозе  80 мл внутриматочно с интервалом 48 часов до выздоровления, блокада по Фатееву в 1, 3, 5 дни лечения.

  1. С профилактической целью при остром послеродовом эндометрите рекомендуем  применение биологических стимуляторов:  родест в дозе 30 млг растворенного в 5мл тривита или гамавит в дозе 10мл  или дюфалайт в дозе 10 мл стельным коровам за 30 дней до отела или споробактерин в суточной дозе 200 млрд. микробных клеток с концентрированным кормом с первого по десятый день после отела.
  2. Для предупреждения послеродового эндометрита, наряду с общеизвестными организационными и ветеринарно-зооинженерными мероприятиями,  максимальное внимание уделять  организации моциона коров в период сухостоя, в первый и последующие месяцы после отела, полноценного сбалансированного кормления по питательным веществам: белкам, жирам, углеводам, витаминам, макро-микроэлементам, проведения искусственного осеменения коров  после завершения периода инволюции половой системы и телок, достигших физиологической зрелости с соблюдением ветеринарно-санитарных правил,  рационального использования родильных отделений на фермах крупного рогатого скота, обустроенных и разделенных на секции: дородовую, родовую и послеродовую, регулярному проведению ранней клинико-акушерской диспансеризации с целью выявления и своевременного, комплексного  лечения коров при послеродовом эндометрите с использованием разработанного нами и других лечебных препаратов, средств физиотерапии.
  3. Научные выводы и практические предложения, вытекающие из материалов диссертационной работы использовать в учебном процессе по курсам ветеринарного акушерства, гинекологии и биотехники размножения и фармакологии.

  Список  опубликованных работ по теме диссертации 

1.  Войтенко Л.Г.  Новый препарат для лечения животных при послеродовом эндометрите / Л.Г. Войтенко,  Е.И. Нижельская, Т.Н. Щебетовская // Серия ветеринарные науки. Труды Куб ГАУ, №1, (ч.1.) 2009, С. 267-269.

2. Войтенко Л.Г. Влияние биологических стимуляторов на показатели естественной резистентности организма коров и частоту заболеваний их послеродовым эндометритом / Л.Г. Войтенко,  Е. С. Полозюк // Серия ветеринарные науки. Труды Куб ГАУ, №1, (ч.2.) 2009, С. 149-151

3. Войтенко Л.Г. Совершенствование терапии при послеродовом эндометрите коров / Ж. Ветеринарный врач, 2010, №4, С. 43-46.

4. Войтенко Л.Г. Влияние микробного фактора на возникновение послеродового эндометрита у коров / Л.Г. Войтенко,  Е. И. Нижельская, И.П. Хабузов // Серия ветеринарные науки. Труды Куб ГАУ, №, (ч..) 2010, С. 126-130.

5. Войтенко Л.Г.  Эффективность цефаметрина при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите коров / Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин, Е.И. Нижельская // Ж. Ветеринария, 2011, №3, С. 38-40

6. Войтенко Л.Г  Сравнительная терапевтическая эффективность цефаметрина,  метрикура и фуразолидоновых палочек при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите коров / Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин // Ж. Ветеринарный врач, №1,  2011. С. 20-22.

7. Войтенко Л.Г. Влияние некоторых показателей крови на возникновение послеродового эндометрита коров / Л.Г. Войтенко,  // ж. Вестник Мичуринского ГАУ, 2011. С.  13-16 

8.Войтенко Л.Г  Клинические и лабораторные испытания нового внутриматочного препарата цефаметрина  / Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин // Ж. Вестник Мичуринского ГАУ, 2011. С.  26-28

9. Войтенко Л.Г Эффективность применения комплексных схем лечения при послеродовом эндометрите коров  / Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин, Е.С. Полозюк // Ж. Зоотехния, 2011, №5, С.21-22.

10. Войтенко Л.Г Эффективность комплексного лечения коров при послеродовом эндометрите с применением лазерного излучения и цефаметрина / Л.Г. Войтенко // Ж. Ветеринарная патология, 2011, №  , С.21-22.

11. Войтенко Л.Г. Средство для лечения животных при послеродовом эндометрите / Л.Г. Войтенко, Б.П. Гриценко, Е.И. Нижельская, О.М. Карноухова, Н.В. Степаненко, Е.Б. Вербина // Патент на изобретение № 2203665, г. Москва, 2009.

12. Войтенко Л.Г. Способ профилактики послеродового эндометрита коров / Л.Г. Войтенко, Б.П. Гриценко, О.Н. Полозюк // Патент на изобретение №№ 2218155, г. Москва, 2004.

13. Войтенко Л.Г. Производственная апробация комплексных схем лечения с использованием биогенных стимуляторов при послеродовом эндометрите коров / Л.Г. Войтенко // Ж. Ветеринария Кубани, 2011, №  С. 19-20

14. Войтенко Л.Г. Биогенные стимуляторы в лечении эндометрита /Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин, Е.С. Полозюк // Ж. Животноводство России, 2011, №  С.41

15.Войтенко Л.Г. Профилактика послеродового эндометрита у коров применением ежедневного моциона  / Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин // ж. Вестник Мичуринского ГАУ, 2011, № , С.  14-17

16. Войтенко Л.Г  Лечение коров с применением биогенных стимуляторов  / Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин // Ж. Вестник Мичуринского ГАУ, 2011. С.  19-22

17.  Войтенко Л.Г Влияние биологических стимуляторов на эффективность комплексного лечения при послеродовом эндометрите коров  / Л.Г. Войтенко, В.Я. Никитин, Е.С. Полозюк // Труды Куб ГАУ, №, (ч..) 2011, С.

18. Войтенко Л.Г. Лазеротерапия при послеродовом эндометрите коров/ Л.Г. Войтенко Н.Л. Хижнякова, А.А. Болдарев// Инновационный путь развития АПК-магистральное направление научных исследований для сельского хозяйства. Материалы международной научно-практической конференции.  Пос. Персиановский, 2007. С. 37-39.

18. Войтенко Л.Г. Влияние лазеротерапии на гематологические показатели организма  коров при послеродовом эндометрите/ Л.Г. Войтенко, Е.И. Нижельская// Инновационный путь развития АПК - магистральное направление научных исследований для сельского хозяйства. Материалы международной научно-практической конференции.  Пос. Персиановский, 2007. С. 39-40.

19. Войтенко Л.Г. Влияние лазеротерапии на биохимические показатели сыворотки крови  коров при послеродовом эндометрите/ Л.Г. Войтенко, Е.Б. Вербина// Инновационный путь развития АПК - магистральное направление научных исследований для сельского хозяйства. Материалы международной научно-практической конференции.  Пос. Персиановский, 2007. С. 40-42.

20.  Войтенко Л.Г Сравнительная оценка различных методов терапии коров при послеродовом эндометрите с использованием лазера зорька /Л.Г. Войтенко Е.И.,  Нижельская, Н.В. Степаненко//Через инновации в науке и образовании к экономическому росту АПК.  Труды Дон ГАУ пос. Персиановский, 2008. С. 70-73

21. Войтенко Л.Г. Влияние комплексной терапии на гематологические показатели коров при послеродовом эндометрите/Л.Г. Войтенко Е.И. Нижельская, А.С. Пасичниченко, О.Н Тимченко/  Через инновации в науке и образовании к экономическому росту АПК.  Труды Дон ГАУ пос. Персиановский, 2008. С. 73-76

22. Войтенко Л.Г. Применение ЛТК «Зорька» при послеродовом эндометрите у коров//Л.Г. Войтенко Е.И. Нижельская, Ю.С. Войтенко/Пути научного обеспеспечения национального проекта по животноводству.  Материалы научно-практической дистанционной конференции. Труды Дон ГАУ пос. Персиановский, 2008. С. 73-76

23. Войтенко Л.Г. Изучение влияния лазеротерапии на биохимические процессы организма коров при послеродовом эндометрите/Л.Г. Войтенко, Е.И. Нижельская, Е.В. Воронянская// Развитие инновационного потенциала агропромышленного производства, науки и аграрного образования.  Материалы международной научно-практической конференции.  Пос. Персиановский, 2009. С. 75-77.

24. Войтенко Л.Г. Профилактика послеродового эндометрита применением лазерного излучения/ Л.Г. Войтенко, Е.И. Нижельская// Труды Дон ГАУ пос. Персиановский, 2009. С. 75-77.

25. Войтенко Л.Г. Новый препарат для лечения животных при послеродовом эндометрите/ Л.Г. Войтенко, О.М. Карноухова, Н.В. Степаненко// Инновационные подходы в решении проблем экологии сельскохозяйственного производства. Материалы научно-практической конференции. Том 1. Пос. Персиановский, 2009. С. 233-235.

26. Войтенко Л.Г. Комплексный метод лечения коров при послеродовом эндометрите/ Л.Г. Войтенко, Е.С. Полозюк, А.А. Пасечниченко//Инновационные подходы в решении проблем экологии сельскохозяйственного производства. Материалы научно-практической конференции. Том 1. Пос. Персиановский, 2009. С. 235-237.

27.Войтенко Л.Г. Влияние лазеротерапии на биохимические по крови коров при послеродовом эндометрите/ Л.Г. Войтенко, Е.И. Нижельская// Интеграция науки, образования и бизнеса для обеспечения продовольственной безопасности Российской Федерации. Материалы научно-практической конференции, п. Персиановский 2010, С. – 213-215.

28. Войтенко Л.Г. Комплексное лечение коров при послеродовом эндометрите с использованием «Витафона». / Л.Г. Войтенко, В.В. Николаев// Интеграция науки, образования и бизнеса для обеспечения продовольственной безопасности Российской Федерации. Материалы научно-практической конференции, п. Персиановский 2010, С. – 215-218.

29. Войтенко Л.Г. Профилактика послеродового эндометрита коров/ Л.Г. Войтенко, Е.С. Полозюк// Интеграция науки, образования и бизнеса для обеспечения продовольственной безопасности Российской Федерации. Материалы научно-практической конференции, п. Персиановский 2010, С. – 220-222.

30. Войтенко Л.Г. Роль микробного фактора в возникновении послеродового эндометрита у коров/Л.Г. Войтенко, И.П., Хабузов, Е.И. Нижельская// Бюллетень научных работ ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»  Белгород,  2010, №21.- С. 87-89

31. Войтенко Л.Г. Этиотропная терапия при послеродовом эндометрите коров/ Л.Г. Войтенко, Е.И. Нижельская// Бюллетень научных работ ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»  Белгород 2010, №21.- С. 76-77.

32. Войтенко Л.Г.Апробация комплексного метода лечении при послеродовом эндометрите

коров/ Л.Г. Войтенко)) Сб. научных трудов Дон ГАУ, п. Персиановский 2011 С 35-38

33. Войтенко Л.Г. Терапевтическая и экономическая эффективность  применения биологических стимуляторов в сочетании с этиотропными патогенетическими и миотропными средствами при послеродовом эндометрите / Л.Г. Войтенко, Е.И. Нижельская// Сб. научных трудов Дон ГАУ, п. Персиановский 2011,с. 33-35

34. Войтенко Л.Г. Биопрфилактика послеродового эндометрита у коров/ Л.Г. Войтенко, О.Н. Полозюк // Новые профилактические средства для животноводства и ветеринарии. В сборнике научных трудов г. Краснодар, 2001, - С. 32-34.

35. Войтенко Л.Г. Биологический метод в лечении и профилактике при послеродовом эндометрите у коров/ Л.Г. Войтенко// Материалы международной научно-практической  конференции. В сборнике научных трудов Дон ГАУ, пос. Персиановский, 2002, - С. 250-251.

36. Войтенко Л.Г. Применение биогенных стимуляторов для профилактики послеродового эндометрита у коров и повышения резистентности у новорожденных телят/ Л.Г. Войтенко, Е.С. Полозюк// Научно-практические рекомендации. Пос. Персиановский, 2011, - с. 29.

37. Войтенко Л.Г. Лечение коров при послеродовом эндометрите/Л.Г. Войтенко Е.И. Нижельская//Научный вестник Дон ГАУ, пос. Персиановский, 2011, С. 41-45.

38. Войтенко Л.Г Диагностике и фармакотерапии  послеродовго эндометрита коров/ Л.Г. Войтенко, М.Н. Обухов, Е.И. Нижельская// Научно-практические рекомендации. Пос. Персиановский, 2011, - с. 21




© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.