WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

 

На правах рукописи

ПАПУНИДИ ЭЛЛАДА КОНСТАНТИНОВНА

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ РАЗРАБОТКИ СРЕДСТВ ПРОФИЛАКТИКИ ПРИ СОЧЕТАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ЖИВОТНЫХ ТОКСИЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ, МИКОТОКСИНОВ И ПИРЕТРОИДОВ

16.00.04 – ветеринарная фармакология с токсикологией;

16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Казань – 2008

Работа выполнена в ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» и ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины».

Научные консультанты:                доктор биологических наук, профессор

                                               Иванов Аркадий Васильевич

                                               доктор биологических наук, профессор

                                               Тремасов Михаил Яковлевич

Официальные оппоненты:                доктор биологических наук

                                               Хисматуллина Наиля Анваровна

                                               доктор биологических наук, профессор

                                               Бузлама Виталий Соломонович

                                               доктор ветеринарных наук, профессор

                                               Софронов Владимир Георгиевич

Ведущее учреждение:                        Всероссийский научно-исследовательский

                                               институт ветеринарной санитарии,

                                               гигиены и экологии РАСХН

Защита состоится «___»___________2009 года в 1000 часов на заседании диссертационного совета Д-220.012.01 при ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» (420075, Казань, Научный городок-2).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных».

Автореферат разослан «___»___________2009 года.

Ученый секретарь диссертационного совета,

Кандидат ветеринарных наук,

Ст.научный сотрудник                                                        В.И. Степанов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Обеспечение населения экологически безопасными продуктами животноводства в настоящее время становится актуальной проблемой. Бурное развитие промышленности, интенсификация сельского хозяйства, химизация животноводства с целью ускорения роста и откорма, терапия и профилактика болезней животных приводит к загрязнению окружающей среды. Контаминирующие вещества в различных сочетаниях поступают и накапливаются в продуктах животноводства, что является опасным для человека при их потреблении. Продукты, содержащие большое количество вредных веществ, приводят к возникновению у людей острых и хронических токсикозов, снижают резистентность организма, вызывают аллергические реакции, нарушают обмен веществ (В.И. Фисинин, 2006; А.Л. Иванов, 2006; И.М. Донник, И.А. Шкуратова, 2008).

Особую опасность для человека представляют соли тяжелых металлов, пиретроиды и микотоксины. Индивидуальная токсичность перечисленных веществ изучена и доказана экспериментальным путем, установлены предельно допустимые концентрации в продуктах животноводства, а также разработан и предложен целый ряд средств для их детоксикации при поступлении в организм животных. Сочетанное действие данных токсикантов остается малоизученным и является весьма актуальной проблемой (М.Я. Тремасов, А.В. Иванов, 2005; Р.Г. Ильязов, Ф.Х. Шакиров, Л.П. Зарипова, 2006; А.М. Смирнов, В.И. Дорожкин, Г.А. Таланов, 2007).

Важным направлением совершенствования технологии ветеринарно-профилактических мероприятий является внедрение в производство новых средств и методов профилактики и лечения сочетанных токсикозов животных, в том числе с применением препаратов, обладающих биоактивными свойствами, способными оказывать регулирующее влияние на интенсивность обменных процессов, усиливать функциональную активность органов и систем организма, повышать уровень естественной резистентности животных (К.Х. Папуниди, А.В. Иванов, М.Г. Зухрабов, 2000; С.В. Шабунин и др., 2006; В.А. Антипов, М.П. Семененко, А.С. Фонтенецкий, 2007).

К таким веществам относится большая группа природных алюмосиликатных минералов, обладающих уникальными сорбционными, ионообменными, связующими и другими свойствами. В эту группу входят цеолиты, бентониты, опоки и т.д. В последние годы накоплен большой опыт по применению природных минералов в сельском хозяйстве. Их используют в земледелии, ирригационном строительстве, производстве комбикормов (Ф.Г. Ахметов, А.В. Иванов, М.Я. Тремасов, 2003; И.Н. Миколайчик, 2005;  А.Ф. Яхин, В.С. Зотеев, А.А. Никишов, 2005).

В этой связи изучение сочетанного действия солей тяжелых металлов, пиретроидов и микотоксинов на организм животных, динамики распределения их в органах и тканях, ветеринарно-санитарная оценка мяса и разработка средств профилактики токсикозов является одной из актуальных проблем ветеринарной медицины и животноводства и имеет большое научное, теоретическое и практическое значения.

Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ отдела токсикологии ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» по заданию «Токсикологическая безопасность» (Рег. номер 01200202603) и кафедры ветеринарно-санитарной экспертизы ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины» по теме «Разработка способов повышения продуктивности животных и улучшения качества продуктов животноводства» (№ 8.014).

Цели и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение токсичности сочетанного воздействия Т-2 токсина, солей тяжелых металлов и пиретроидов на животных, влияние их на обменные процессы, продуктивность, качество мяса и других продуктов с разработкой рекомендаций по коррекции нарушений обмена веществ и профилактики токсикозов с использованием природных минералов.

В  задачи исследований входило следующее:

- Провести скрининг и дать оценку энтеросорбентов различной природы;

- Изучить параметры общетоксического действия цеолитов Майнского месторождения Ульяновской области на организм животных;

- Изучить влияние цеолитов на обменные процессы и продуктивность свиней и крупного рогатого скота;

- Изучить влияние сочетанного воздействия тяжелых металлов, пиретроидов и микотоксинов на биохимические, иммунобиологические показатели и продуктивность животных;

- Установить особенности распределения тяжелых металлов, пиретроидов и микотоксинов в органах и тканях организма при сочетанном воздействии их на животных;

- Определить качество мяса у животных при сочетанном воздействии токсинов;

- На основании проведенных экспериментов разработать нормативную документацию по профилактике сочетанных токсикозов животных.

Научная новизна. Впервые на основе комплексных исследований по изучению сочетанного воздействия тяжелых металлов, пиретроидов и микотоксинов на клинические, биохимические, иммунобиологические показатели и продуктивность животных установлено взаимоусиливающее негативное действие токсикантов различных групп, представляющие экологическую и социальную опасность, разработаны средства по снижению их влияния на здоровье животных и безопасность животноводческой продукции.

Показаны особенности накопления и распределения в органах и тканях животных токсинов при сочетанном воздействии.

Установлено, что мясо и продукты убоя, полученные от животных, подвергнутых воздействию токсикантов, характеризуются низким качеством по органолептическим, микробиологическим и физико-химическим показателям, а также пониженной пищевой ценностью и неполноценностью полученной продукции.

Изучены токсикологические свойства цеолитов, установлено их положительное влияние на организм в целом и функции различных органов и систем животных. Экспериментально обоснована эффективность их применения для оптимизации обменных процессов, коррекции микроэлементной недостаточности, повышения уровня неспецифической резистентности организма и профилактики токсикозов животных.

Научная новизна исследований защищена патентом РФ на изобретение № 96105477113(009894) от 10.10.96г.

Практическая ценность работы. В результате исследований решена крупная научная проблема по получению экологически безопасной продукции, имеющая народнохозяйственное значение.

Полученные результаты позволяют по-новому оценить проблему сочетанных и комбинированных воздействий на животных химических и биологических средств и рекомендовать средства для профилактики токсикозов и возможности использования мяса и мясопродуктов.

Материалы диссертационной работы вошли составной частью в следующие нормативные документы:

- Временное наставление по применению минеральной кормовой добавки «Майнит» в животноводстве и птицеводстве, утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ в 1995 г.;

- Рекомендации по борьбе со смешанными микотоксикозами животных в Республике Татарстан, утв. Министерством сельского  хозяйства и продовольствия Республики Татарстан, 2007 г.

На основании собственных исследований, а также обобщения данных литературы, в соавторстве разработаны:

- Санитарно-микологическая оценка кормов и улучшение их качества. М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2006. – 32 с.

- Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике отравлений животных синтетическими пиретроидами. М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2007. - 20 с.

Апробация работы. Результаты экспериментальных исследований, явившиеся основой диссертации, доложены, обсуждены и одобрены: на заседаниях Ученых советов Казанской государственной академии ветеринарной медицины и ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 1997-2008 гг., на Международных и Всероссийских научно-практических симпозиумах и конференциях в гг. Воронеже, Ижевске, Екатеринбурге, Казани, Троицке, Саратове и др. в 1997-2008 годах.

Основные положения, выносимые на защиту:

- разработка средств, обеспечивающих получение экологически чистой и биологически полноценной животноводческой продукции при сочетанном воздействии токсических элементов, пиретроидов и микотоксинов;

- токсикологическая оценка цеолитов Майнского месторождения Ульяновской области РФ;

- биохимические и иммунобиологические показатели крови и продуктивность животных при сочетанном воздействии тяжелых металлов, пиретроидов и микотоксинов;

- особенности накопления и распределения тяжелых металлов, дециса и микотоксинов в органах и тканях при сочетанном воздействии их на животных;

- органолептические, микробиологические и физико-химические показатели мяса при экспериментальном сочетанном токсикозе;

- применение цеолитов для нормализации обмена веществ, детоксикации продуктов животноводства и профилактики токсикозов при сочетанном воздействии тяжелых металлов, пиретроидов и микотоксинов.

Публикация результатов исследования.  По материалам диссертации опубликовано 33 научные работы, в том числе 9 статей, рекомендованных ВАК РФ, изданиях «Ветеринария», «Ветеринарный врач» и «Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины».

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 285 страницах стандартного компьютерного набора и включает общую характеристику работы, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы, практические предложения  и приложения. Библиографический список включает 475 источника, в том числе 135 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 43 таблицами и 49 рисунками.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проведены в отделе токсикологии ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных, на кафедрах фармакологии с токсикологией и ветеринарно-санитарной экспертизы Казанской государственной академии ветеринарной медицины,  в учебно-опытном хозяйстве КГАВМ и в ООО «Агрофирма» «Сарсазы» Чистопольского района Республики Татарстан в 1996-2008 гг.

В опытах использовано 221 белая крыса, 12 морских свинок, 45 кроликов, 72 свиньи, 21 овца и 60 крупного рогатого скота. Кормление животных осуществляли в соответствии с общепринятыми детализированными нормами с учетом технологических особенностей для вида лабораторных и сельскохозяйственных животных.

Условия постановки и схема проведения опытов, количество и вид животных, дозы цеолитов и токсикантов приведены в соответствующих разделах работы.

Общетоксические свойства цеолитов оценивали путем определения острой и хронической токсичности, возможных побочных свойств и отдаленных последствий в соответствии с «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве», утвержденными ГУВ СССР (1985) и «Методическими рекомендациями по токсико-экологической оценке лекарственных средств, применяемых в ветеринарии», одобренных секцией отделения ветеринарной медицины РАСХН (1998). 

Показателями определения острой токсичности служили: внешний вид животных, состояние кожного покрова, поведение (возбуждение или угнетение, подвижность, изменение походки, реакции на внешние раздражения, выделения из глаз, рта, мышечные подергивания, тремор, судороги, параличи, парезы и т.д.). 

Параметры хронической токсичности изучали по общепринятым методикам на белых крысах и поросятах. Цеолиты задавали ежедневно в течение 3-х и 6-ти месяцев по непрерывной схеме из расчета 1-5% к сухому веществу корма. Учитывали клиническое состояние, аппетит, динамику прироста массы тела. 

Выявление кожно-резорбтивного действия изучаемых веществ проводилось по методике И.В. Саноцкого (1970) на белых крысах, местное действие проверяли на кроликах методом накожных аппликаций и конъюнктивальной пробой.

Исследования по изучению эмбриотоксической и тератогенной активности цеолитов были проведены общепринятыми методами на белых крысах с массой тела 180-200 г при ежедневной их даче на протяжении всего срока беременности. Показателями общего постнатального развития служили динамика массы тела крысят, время открытия глаз, появление шерсти, двигательная активность, координация движений и выживаемость.

О токсическом действие препаратов при сочетанном их воздействии судили по клиническим показателям, изменениям в белковом, липидном, углеводном, минеральном обменах, общей неспецифической резистентности организма, интенсивности роста и продуктивности животных.

При гематологических исследованиях определяли количество эритроцитов и лейкоцитов, выводили лейкоформулу, содержание гемоглобина и СОЭ (А.А. Кудрявцев и др., 1969; И.П. Кондрахин, 2004).

Биохимические исследования состояли из определения в сыворотке крови общего белка, белковых фракций (нефелометрически), мочевины, общего кальция, неорганического фосфора, глюкозы, активности трансаминаз, щелочной фосфатазы, мочевую кислоту, билирубина, холестерина, общих липидов, креатинина на анализаторе EXPRESS PLUS. Макро- и микроэлементы в крови, органах и тканях животных определяли атомно-абсорбционным методом, Т-2 токсин и децис хроматографическими методами.

Для определения факторов неспецифической резистентности использовали тест бактериального фагоцитоза нейтрофилов с учетом степени его завершенности по отношению к бактериям Staphylococcus aureus (№ 209Р) по И.В. Нестеровой и др. (1996). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную (ЛАСК) – по Д.Г. Дорофейчук, Т-, В-, ОК-лимфоциты – методом Пирса в модификации Н.Н. Гугушвили с соавт. (2000) с прочным синим и нафтилацетатом.

О качестве мяса животных судили по результатам ветеринарно-санитарной оценки, которая включала в себя органолептическую и дегустационную оценку мяса и жира, биохимические исследования и определение степени бактериальной обсемененности.

Патоморфологические исследования проводили на кафедре патологической анатомии сельскохозяйственных животных КГАВМ под руководством профессора Залялова И.Н.

Кусочки органов для патогистологического исследования фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина. После формалиновой фиксации препараты промывали в проточной воде в течение суток. Проводку и заливку осуществляли общепринятыми методами (Меркулов Г.А., 1969). Уплотнение материала осуществляли путем заливки в парафин. После этого готовили серийные парафиновые срезы толщиной 5-6 мкм при помощи микротома МС-2.

Затравку животных токсикантами проводили совместно со старшим научным сотрудником Егоровым В.И. и аспиранткой Софроновой С.А., за что выражаю им благодарность.

Полученные в опытах данные подвергнуты биометрической обработке с помощью программного обеспечения фирмы Microsoft®, фирмы Carl Zeiss®. Критерии достоверности определяли по таблице Стъюдента.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Изучение in vitro сорбционных свойств препаратов различных групп в отношении тяжелых металлов, микотоксинов и пиретроидов

Сравнительную оценку сорбционных свойств 11 препаратов к свинцу ацетату, кадмию хлориду, Т-2 токсину и дельтаметрину (децису) проводили в кислой и щелочной среде. В опытах использованы следующие препараты:

  1. Цеолит Майнского месторождения Ульяновской области.
  2. Бентонит Биклянского месторождения Республики Татарстан.
  3. Бентонит Тарн-Варского месторождения Республики Татарстан. 
  4. «Зоокарб» - углеродный энтеросорбент, разработанный в научно-техническом учреждении «Конструкторско-технологический институт технического углерода» СО РАН.
  5. Полисорб - высокочистый, высокодисперсный кремнезем.
  6. «Микосорб» - органический сорбент микотоксинов, на основе клеточных стенок дрожжевых клеток, производство компании «Оллтек», Ирландия.
  7. Фитосорбент – растительный сорбент,  разработанный в КГТУ.
  8. «Микофикс Плюс» - сорбент микотоксинов, производство Австрия.
  9. «Микофикс Селект» - сорбент микотоксинов, производство Австрия.
  10. «Молд Карб» - сорбент микотоксинов, производство компании «Кемин», Бельгия.
  11. «Экосил» - энтеросорбент, производство компании «Агромолпрод», Россия.

Результаты опытов по изучению сорбирующих свойств препаратов по отношению к тяжелым металлам представлены на рис. 1 и 2.

Из рис. 1 видно, что максимальные сорбционные свойства при температуре 380С и рН 2 проявили цеолит Майнского месторождения (80,5%), полисорб (60,2%) и бентонит Биклянского месторождения (58,5%). При повышении рН до 7 адсорбционная способность повышалась у цеолита с 80,5 до 91,5%. Наименьшую сорбционную способность к свинцу при рН 2 проявил фитосорбент (9,5%), а при рН 7 она понижалась до 4,5%.

Из рис. 2 следует, что лучше сорбировали кадмий при рН 2 и температуре 380С цеолит Майнского месторождения (60,2%) и бентонит Биклянского месторождения (38,6%).

Данные по изучению адсорбционных свойств энтеросорбентов in vitro в отношении Т-2 токсина представлены на рис. 3 и 4.

Из рис. 3 видно, что максимальные адсорбционные свойства при комнатной температуре и рН 7 сорбенты проявили в следующей последовательности: цеолит (63,4%) бентониты Тарн-Варского и Биклянского месторождений (61,5 и 51,0%), «Молд Карб» (59,6%), «Микосорб» (57,7%), «Микофикс Плюс» (52,5%), «Зоокарб» (42,1%), «Микофикс Селект» (37%). Наименьшую сорбционную способность к Т-2 токсину показал «Экосил» (9,9%). При снижении рН до 2 сорбенты «Микофикс Плюс» и «Микофикс Селект» резко уменьшили адсорбционную способность, у остальных сорбентов существенного снижения или увеличения сорбционной способности не происходило.

Как видно из рис. 4, при увеличении рН до 7,0 цеолит, бентонит, зоокарб и экосил увеличили адсорбцию токсина. У других сорбентов адсорбция токсина изменилась незначительно.

Изучение адсорбционных свойств энтеросорбентов in vitro в отношении дельтаметрина представлено на рис. 5.

Из рис. 5 видно, что все исследуемые сорбенты показали определённую адсорбционную способность к пиретроиду дельтаметрину, различия были незначительны. Максимальные адсорбционные свойства при рН 7 сорбенты проявили в следующей последовательности: цеолит (68,3%) бентонит Биклянского месторождения (64,5), «Зоокарб» (65,8%), полисорб (56,7%). При снижении рН до 2 сорбенты несколько увеличили адсорбционную способность.

Исследования in vitro показали, что из изучаемых сорбентов наибольшей способностью сорбировать тяжелые металлы, Т-2 токсин и децис обладал цеолит Майнского месторождения Ульяновской области. Поэтому дальнейшие исследования при сочетанных воздействиях токсикантов проводились с этим препаратом.

3.2. Токсикологическая оценка цеолитсодержащей породы Майнского месторождения Ульяновской области

Цеолитсодержащая порода Майнского месторождения Ульяновской области представляет собой порошкообразную массу белого цвета, без запаха, в воде нерастворима. В состав породы входят: цеолит – 22%, кальцит – 18%, опалкристобалит – 23%, глинистые минералы (оксиды кремния, алюминия,  кальция, железа и других соединений) – 37%. Количество токсичных элементов (ртуть, свинец, кадмий, мышьяк, фтор) и радионуклидов значительно ниже предельно-допустимых концентраций.

Первая серия опытов по изучению острой токсичности цеолитов проводилась при внутрижелудочным введением их 40 белым крысам в дозах от 2 до 24 г/кг массы тела. Установлено, что ни одна из испытуемых доз не вызывала гибели подопытных животных. При дозах от 2 до 12 г/кг массы тела каких-либо отклонений со стороны поведенческих реакций и общего состояния белых крыс не выявлено. При введении препарата в более высоких дозах, через 25-40 мин опытные животные были угнетены, отказывались от корма, а спустя 7-8 часов указанные признаки проходили и опытные крысы внешне не отличались от интактных.

Вторая серия опытов по изучению острой токсичности цеолитов, проводилась на 12 клинически здоровых поросятах с массой тела от 7,1 до 8,2 кг.  Для этого опытным поросятам  внутрь с помощью зонда вводили однократно цеолиты в дозе 20 г/кг массы тела. Контрольным животным в этих же дозах вводили дистиллированную воду. 

В опытах было установлено, что исследуемая доза цеолитов не вызывает клинических признаков отравления и гибели поросят. 

Исследования по определению кумулятивных свойств цеолитов были проведены на 20 половозрелых белых крысах обоего пола. В течение первых 4 суток животным вводили в желудок водную взвесь цеолитов в дозе 2 г/кг массы тела, затем в каждые последующие 4 дня дозу препарата увеличивали в 1,5 раза и так до конца опыта (24 дня).

Исследованиями установлено, что на 15-й день введения цеолита (суммарная доза 58,25 г/кг) у животных в течение 2-3 часов отмечали угнетение, кратковременный отказ от корма. Начиная с 17 суток и до конца дачи препарата, крысы отказывались от корма, были угнетены, забивались в угол клетки. В таком состоянии, после дачи животным препарата, они находились в течение 4-6 часов. За весь период опыта гибель подопытных крыс не отмечали. Если общую суммарную дозу – 166,3 г/кг разделить на гипотетическую ЛД50 – 20 г/кг, то в соответствии с формулой Кагана и Станкевича коэффициент кумуляции составляет 8,03, что свидетельствует об отсутствии кумулятивного действия у цеолитов.

Эксперименты по определению раздражающего действия цеолитов проводились на 10 кроликах обоего пола (светлой масти) и 10 белых крысах.  Для этого участок кожи 5х5 см за день до опыта тщательно выстригали на спине, слева и справа от позвоночника. 

Препарат наносили на кожу в виде кашицы на дистиллированной воде из расчета 20 мг/см2 (контроль 0,02 мл дистиллированной воды/см2), при экспозиции 4 часа. Спустя 4 часа остатки препарата удаляли теплой водой с мылом. Реакцию кожи регистрировали через 1 и 18 часов в сравнении с контролем. За период  эксперимента каких-либо функциональных нарушений кожи (эритема, отек, трещины, изъязвления, изменения температуры) не отмечено.

В следующей серии опытов на 5 кроликах изучали влияние цеолитов на слизистую оболочку глаз. В конъюнктивальный мешок левого глаза кроликов вносили цеолиты в нативном виде в количестве 50 мг, а правый глаз служил контролем. Спустя 30-60 мин после нанесения препарата на слизистую глаза отмечали небольшую гиперемию сосудов, которая исчезала через 20-24 часа с момента нанесения. Отека слизистой оболочки глаза не наблюдали, выделений из глаза не было.

Исследования по изучению аллергизирующего действия цеолитов проведены на 12 морских свинках массой 580-700 г, разделенных на две равные группы – опытную и контрольную. Препарат вводили морским свинкам в желудок в виде взвеси в дозе 5 г/кг массы тела, контрольным животным вводили 5 мл дистиллированной воды. Через 3 часа морским свинкам обеих групп инъецировали подкожно гистамин в дозе 6,5 мг/кг массы тела в виде 0,1% водного раствора. 

Время наступления гистаминового шока в контрольной группе равнялось 17,5±0,2 мин, а в опытной - 17,3±0,8 минут. Гибель животных в обеих группах наступала через 51-65 мин, в опытной и контрольной группах пало по 2 животных, оставшиеся в живых, приходили в исходное состояние спустя 3,5-4 часа с момента введения гистамина.

При исследовании  крови установили, что гематологические показатели были в пределах нормы, а иммунологические тесты также не показали наличия признаков сенсибилизации. Время наступления гистаминового шока как в опытной, так и в контрольной группах было практически одинаковым, что говорит об отсутствии аллергизирующего действия целлитов.

Для изучения хронической токсичности цеолитов было взято 40 растущих белых крыс массой 80-90 г в возрасте 55-60 суток, которые были разделены на 4 группы (по 10 крыс в каждой группе).

Суточная доза цеолита для крыс первой группы составляла 200,0; второй – 300,0; третьей – 400,0 мг на кг живой массы. Препарат давали крысам ежедневно перорально с кормом. Контрольным крысятам препарат в рацион не включали.

В конце эксперимента (через 6 мес) живая масса крыс первой и второй групп превосходила контрольный показатель соответственно на 16 и 20%. Прирост живой массы крыс третьей группы по сравнению с контрольными животными был незначителен.

Результаты исследований гематологических показателей крыс представлены в табл. 1.

Таблица 1– Гематологические показатели белых крыс, получавших в течение 6 мес цеолит (n=5)

Показатель

Группа животных

контроль

1

2

3

Через 3 мес

Гемоглобин, г/л

105,8±8,7

114,6±9,7*

116,5±10,2*

114,3±8,9*

Эритроциты,х1012

7,0±0,04

8,20±0,02*

8,18±0,03*

8,10±0,05*

Лейкоциты, х109

12,07±0,68

12,49±0,06

12,21±0,05

12,76±0,04

Через 6 мес

Гемоглобин, г/л

109,8±10,2

120,7±11,2*

121,8±8,8*

118,3±8,9*

Эритроциты, х1012

7,18±0,03*

8,29±0,03*

8,18±0,04*

8,10±0,05*

Лейкоциты, х109

11,05±0,68

12,86±0,17

12,06±0,07

12,50±0,12

*  Р<0,05

Данные таблицы свидетельствуют о том, что содержание эритроцитов и гемоглобина в крови опытных крыс не выходило за пределы физиологической нормы, но превышало контрольные величины на 10-16%. Количество лейкоцитов имело тенденцию к увеличению во всех опытных группах по сравнению с контролем.

Показатели белкового и углеводного обмена не выходили за пределы физиологической нормы и от контрольных величин существенно не отличались. Наблюдалась лишь тенденция увеличения количества гамма-глобулинов в сыворотке и глюкозы в крови опытных крыс, что свидетельствует о повышении неспецифической резистентности организма животных в ответ на введение в рацион цеолитов.

При патологоанатомическом вскрытии спустя 3 и 6 мес с начала экспериментов у всех животных опытных групп отмечена небольшая гиперемия слизистой желудка, тонкий и толстый отделы кишечника не отличались от таковых контрольной группы крыс.

В следующей серии опытов изучена хроническая токсичность цеолитов на поросятах 2-месячного возраста, подобранных по принципу аналогов. При постановке эксперимента было сформировано 4 группы по 5 животных в каждой.

Основной рацион состоял из комбикорма СК-3, СК-4. Поросята второй, третьей и четвертной групп дополнительно к рациону получали цеолиты в количестве 1%, 2% и 4% от массы комбикорма в течение 90 дней.

Результаты исследований не выявили токсического действия цеолитов при их длительном скармливании, напротив, в ходе эксперимента было отмечено их положительное влияние на обменные процессы и продуктивность поросят.

Введение препарата способствовало увеличению массы тела поросят и лучшему их росту. Так, среднесуточный прирост массы тела при даче 1% цеолитов составил 305 г, при 2% - 333 г, при 4% - 315 г, что по сравнению с контролем (290) составило 105,2%, 114,9% и 108,8% соответственно.

Установлено, что гематологические показатели находились в пределах нормы, цеолиты не оказывали токсического воздействия на клеточный состав крови, наоборот, в некоторой степени стимулировали эритропоэз, белковый и углеводный обмены. При применении цеолитов из расчета 2% к массе комбикорма  уровень гемоглобина (Р<0,05) повысился на 13% и 16% по группам относительно исходных  показателей и на 4,7% и 7,0% в сравнении с показателями контроля, количество общего белка к концу эксперимента повысилось в I-ой опытной группе на 8,1%, III-ей – на 5,3% относительно исходных показателей и на 6,3% и 3,0% соответственно, относительно контрольной группы. Концентрация общих липидов к окончанию эксперимента незначительно увеличилась, уровень глюкозы достоверно повысился.

В лейкоцитарной формуле не выявлено отклонений от физиологических значений по уровню нейтрофилов и эозинофилов, что показывакт об отсутствие токсического и аллергизирующего воздействия цеолитов.

Постоянное клиническое наблюдение за поросятами, получавшими цеолиты, показало, что состояние животных было удовлетворительным, аппетит сохранен, подвижность соответствовала физиологическому уровню, характерному для данного возраста.

Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия цеолитов проводилось на 50 самках и 25 самцах белых крыс половозрелого возраста живой массой 180-200 г, которые были сформированы по принципу аналогов и разделены на 2 равнозначные группы по 25 самок, первая служила контролем, а вторая - опытная.

Оплодотворенным самкам зондом вводили взвесь цеолитов из расчета 1 г на 1 кг массы тела. Животным контрольной группы аналогичным образом вводили 1 мл дистиллированной воды. Введение препарата и воды проводили ежедневно с 1 по 19 день беременности.

На 20 день беременности проводили эвтаназию по 13 животных из каждой группы для получения эмбрионального материала.

Цеолиты в дозе 1/24 от максимально вводимой не оказывали существенного влияния на количество желтых тел в яичниках, число желтых тел в яичниках второй и первой группы составляло по 12,4±0,3 и 12,45±0,25 соответственно. Количество мест имплантации в опытной и контрольной группах также было одинаковым. Количество живых плодов в первой и второй группах составляло 10,24±0,15 и 10,25±0,17 соответственно.

Предимплантационная гибель плодов в группе, получавшей препарат, была меньше на 0,1%, чем в контрольной. В то время как постимплантационная гибель плодов в опытной группе по сравнению с контролем увеличилась  - на 1,1%.

Краниокаудальный размер плодов у белых крыс в обоих группах был одинаковым и составил 3,16±0,07 и 3,14±0,05 см соответственно.

Выживаемость плодов у опытной группы животных была выше на 0,2%, чем в группе биологического контроля. Масса плодов между второй и первой группой не имела значительных отклонений и была равна 3,30±0,08 и 3,31±0,09 г соответственно.

При внешнем осмотре извлеченных из матки плодов обоих групп животных морфологических изменений не выявили.

Продолжительность беременности крыс во второй и первой группе практически  была одинаковой и составила 23,0±0,2 и 22,8±0,2 дней соответственно, что аналогично контрольной группе.

Количество мертворожденных крыс не отличалось между группами подопытных животных, и составляло для обеих групп по 2,6.

Из приведенных данных следует, что продолжительность беременности, количество родившихся крысят, количество мертворожденных, сроки отлипания ушей, опушения, прозрения и прорезывания резцов опытной группы животных не отличается от таковых биологического контроля. Не наблюдаются различия и в постнатальной смертности.

Таким образом, из результатов токсикологических исследований следует, что цеолитсодержащая порода Майнского месторождения Ульяновской области в соответствии с классификацией химических соединений по ГОСТу 12.1.007.76 относится к 4 классу. Препарат не обладает кумулятивным, аллергизирующим, эмбриотоксическим, тератогенным действием, не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистые оболочки. Биологическая проба, проведенная на белых крысах и поросятах показала, что скармливание животным в течение 6 и 3 мес кормов, содержащих цеолиты, не только не оказывает побочного действия на организм животных, но и способствует увеличению массы тела крыс. Учитывая большой набор макро- и микроэлементов, а также высокие сорбционные свойства цеолитов сочли необходимым проведение научно-производственных опытов с использованием их в качестве кормовых добавок на сельскохозяйственных животных,  оценки их влияния на обмен веществ и продуктивность животных и качество продуктов животноводства.

3.3. Изучение влияния цеолитов на обменные процессы и продуктивность крупного рогатого скота

По принципу аналогов были подобраны 2 группы бычков 6 мес возраста по 15 в каждой. Первая группа служила контролем, вторая опытная группа получала с кормом цеолиты из расчета 2% к сухому веществу корма. Продолжительность опыта составила 3 месяца. Результаты биохимических исследований крови у бычков  представлены в табл. 2.

Таблица 2 - Результаты биохимического исследования крови бычков, получавших в течение  3 мес цеолит (n=6)

Показатель

Контрольная

Опытная

исходные

(M±m)

через

90 дней

(M±m)

исходные

(M±m)

через

90 дней

(M±m)

Глюкоза, ммоль/л

2,59±0,08

2,75±0,09

2,56±0,08

2,94±0,10*

Резерв, щелоч. об.%СО2

44,62±2,74

43,13±3,32

42,43±6,79

46,60±3,75

Общий белок, г/л

77,50±7,10

78,43±4,31

76,35±5,60

79,65±7,02

Альбумины, %

32,92±5,34

25,23±3,64

28,55±7,02

36,46±5,04*

α-глобулины, %

5,65±0,14

7,22±2,65

7,45±1,15

9,04±0,98

β-глобулины, %

15,25±2,34

17,18±3,08

13,95±1,17

12,22±2,15*

γ-глобулины, %

36,18±6,85

40,37±6,64

50,05±8,67

42,28±9,72

Мочевина, ммоль/л

3,27±0,82

4,10±0,24

3,00±0,36

4,21±0,35

Холестерин, ммоль/л

4,69±0,32

5,93±0,48

5,11±0,38

4,38±0,42*

Кальций, ммоль/л

2,50±0,16

2,73±0,19

2,56±0,09

2,83±0,21

Фосфор, ммоль/л

2,01±0,21

2,20±0,22

2,06±0,19

2,28±0,24

Железо, мкмоль/л

18,92±5,48

22,10±1,14

19,68±3,64

29,33±3,43*

Каротин, мкмоль/л

2,66±0,95

4,75±1,01

2,43±0,88

6,64±0,36*

*  Р<0,05

Введение в рацион цеолитов способствовало повышению уровня глюкозы на 14,8%, а резервная щелочность повысилась на 10-12%, что указывало на активизацию углеводного обмена. Уровень холестерина в крови контрольных бычков возрос за период опыта на 26,4%, в то время как у опытных животных произошло достоверное снижение этого показателя на 16,6%. Существенных различий в содержании общего белка не отмечено. Однако у опытных животных произошло достоверное повышение уровня альбуминов. В контрольной группе в ходе опыта повысилось содержание β-глобулинов, что может отмечаться при токсических гепатозах. В опытной группе достоверных различий по содержанию β-глобулинов не выявлено.

При гистологическом исследовании у контрольных животных были выражены явления зернистой дистрофии во всех органах, в сердечной мышце - слабая исчерченность, в печени отмечается пролиферативная реакция, в печеночных клетках - зернистая дистрофия, в почках выявлена картина зернистой дистрофии в эпителии извитых канальцев, в клубочках - застойная гиперемия.

Через 3 мес после скармливания цеолитов в сердечной мышце хорошо видна поперечная исчерченность, мышечные волокна равномерно и ярко окрашены, липофусцин отсутствует, в печени увеличивается количество клеток с крупными ядрами, что свидетельствует о выраженной регенерации, клетки содержат больше гликогена, отсутствуют застойные явления в капиллярной сети, в почках сохраняются явления зернистой дистрофии, но появляются участки регенерирующей ткани.

Для токсикологического анализа ежемесячно проводили контрольный убой 1 бычка из каждой группы. Исследовали содержание свинца, кадмия  в мышечной, костной ткани и паренхиматозных органах. В конце эксперимента проводили ветеринарно-санитарную экспертизу мяса подопытных животных. 

Анализ показал, что у контрольных животных происходило активное накопление в мышцах и печени свинца и кадмия. В течение пастбищного периода уровень свинца в мышечной ткани возрос на 43,5%, в печени – на 40,8, в почках – на 10,9, в костях – на 7,3%. Содержание кадмия в мышцах увеличилось на 21,4%, в печени – на 94,7, в почках – на 17%. В ходе опыта было установлено, что при скармливании цеолитов уже через 30 дней содержание свинца в мышцах по сравнению с контрольными животными снижается на 18,2%, через 60 – в 2 раза, через 90 – в 6 раз. Содержание свинца в печени у животных опытной группы за 90 дней снизилось относительно контроля в 3,2, в костях – в 1,9 раза. В почках, напротив, уровень свинца возрос на 8,4%, что может быть связано с его усиленным выведением. Аналогичная картина характерна и для кадмия. Особенно возрастает содержание кадмия в почках. По сравнению с исходными данными содержание данного элемента при скармливании цеолитов уменьшается более чем в два раза (рис.6,7).

Рис. 6 - Содержание свинца (мг/кг) в печени бычков контрольной

и опытной групп

Рис. 7 - Содержание кадмия (мг/кг) в почках бычков контрольной

и опытной групп

Результаты ветеринарно-санитарной экспертизы показали, что мясо животных, получавших с основным рационом цеолиты, по органолептическим, физико-химическим и бактериологическим показателям соответствует требованиям ГОСТов для свежего, доброкачественного мяса (табл. 3).

Таблица 3 – Биохимические показатели мяса подопытных бычков, получавших в течение 3 мес цеолит

Показатель

Опытная группа

Контрольная группа

Реакция на пероксидазу

положительная

положительная

Аминоаммиачный азот (ААА)

1,21 г

1,23 г

Продукты первичного распада белков (реакция с медным купоросом)

отрицательная

отрицательная

Количество летучих жирных кислот (ЛЖК)

4,05

4,09

рН мясной вытяжки

5,81

5,85

Исследованиями установлено, что применение цеолитов способствовало повышению прироста живой массы бычков. Если у контрольных животных прирост массы за 90 дней составил 62 кг, то у опытных - 73,7 кг, что на 13,5% больше.

Для изучения влияния цеолитов на репродуктивную функцию и состояние новорожденных телят были подобраны две группы коров - аналогов по 15 голов в каждой. Коровам опытной группы на протяжении всего сухостойного периода дополнительно к рациону давали цеолиты из расчета 2% к сухому веществу корма. В ходе опыта учитывали результаты биохимических показателей крови  и показатели воспроизводства.

Биохимический анализ крови показал, что при скармливании цеолитов отмечается тенденция к повышению уровня глюкозы, резервной щелочности, снижению содержания холестерина и мочевины, что может быть рассмотрено как нормализация обменных процессов.

Введение цеолита в рацион сухостойных коров способствовало нормализации функциональной системы мать-плод, что обеспечило физиологическое течение родов, сокращению сервис-периода и рождению более жизнеспособного молодняка.

Одним из приоритетных направлений интенсификации животноводства является поиск эффективных способов повышения продуктивности животных и улучшения качества продуктов животноводства. С этой целью была проведена ветеринарно-санитарная экспертиза молока от опытных животных после применения цеолитов в течение первого лактирующего месяца.

Для оценки влияния цеолитов на продуктивность и  качество молока, три раза в месяц проводили контрольную дойку, в пробах молока определяли содержание жира, белка, лактозы, измеряли кислотность и плотность. Молоко исследовали по санитарно-гигиеническим показателям.

Через 1 мес после скармливания препарата у опытных животных повысился удой на 6,6% по сравнению с контрольными. Одновременно отмечали улучшение химического состава молока: повысилось содержание жира соответственно в опытной группе на 8,57% (р<0,10), белка – на 0,9% (p<0,10), лактозы – на 0,86 (p<0,10). В контрольной группе содержание жира не изменилось (3,6%), белка и лактозы - снизилось (табл.4)

Спустя месяц после окончания опыта такая тенденция сохранялась. К этому моменту уровни жира, белка и лактозы в опытной группе возрастали соответственно на 14% (p<0,001); 1,78% (p<0,10) и 1,5% (p<0,10) от первоначальных значений.

В контрольной группе значения вышеперечисленных показателей выглядели следующим образом: содержание жира увеличилось на 2,77 (p<0,02), белка – на 1,2% (p<0,10), а уровень лактозы снизился на 1,29% (p<0,10).

Физико-химические показатели молока подопытных коров (плотность, кислотность) не подвергались значительным изменениям. Более того, скармливание препарата не оказало отрицательного влияния на санитарно-гигиенические показатели (механическая загрязненность и бактериальная обсемененность).

Таблица 4 – Результаты исследований молока коров, получавших цеолиты

Показатель

Срок исследования, сут

Группа животных

опытная

контрольная

Жирность, %

Исход.

3,5±0,1

3,6±0,01

30

3,8±0,3

3,6±0,1

Белок, %

Исход.

3,30±0,04

3,35±0,07

30

3,33±0,03

3,30±0,01

Лактоза, %

Исход.

4,62±0,03

4,65±0,05

30

4,66±0,04

4,63±0,06

Кислотность, 0Т

Исход.

17,3±0,3

17,7±0,3

30

17,3±0,2

17,0±0,5

Плотность, кг/м3

Исход.

1028±0,2

1029±0,4

30

1030±0,3

1029±0,2

Таким образом, введение в рацион животных в течение 60 дней цеолитов Майнского месторождения из расчета 2% к сухому веществу корма уменьшает ксенобиотическую нагрузку и ведет к нормализации обменных процессов и повышению продуктивности животных.

3.4. Изучение влияния цеолитов на обменные процессы и продуктивность поросят

Для решения данной задачи в учебно-опытном хозяйстве КГАВМ было подобрано по принципу аналогов две группы поросят крупной белой породы, 1,5 месячного возраста, по 20 голов в каждой. Животное первой группы служили контролем и получали стандартный рацион, вторая группа (опытная) получала корм, содержащий 2% цеолита Майнского месторождения Ульяновской области относительно сухого вещества корма.

В течение всего периода наблюдений за поросятами не было установлено отклонений в их клиническом статусе. У поросят опытных групп был лучше выражен аппетит и поедаемость корма. В контрольной группе пал один поросенок, в опытной группе падежа не отмечалось.

При анализе прироста живой массы  выявлено, что поросята опытной группы отличались относительно высокой энергией роста по отношению к контрольным  животным. Наибольшая интенсивность роста отмечалась на 30-е сутки после применения цеолитов, живая масса контрольной группы животных уступала аналогичным значениям опытной группы на 12,6%.

На 60-е сутки среднесуточный прирост живой массы у животных опытной группы был на 11,5 % больше, чем в контроле, на 90-е сутки живая масса животных опытной группы превзошла значения контрольной на 9,2%.

Изучение гематологических показателей подопытных животных позволило установить, что у поросят, которым давали цеолиты на протяжении всего периода исследований среднее содержание эритроцитов и уровень гемоглобина, постепенно увеличиваясь с возрастом, находилось в пределах физиологической нормы.

Количество эритроцитов продолжало повышаться на протяжении всего эксперимента и к 90 суткам в опытной группе поросят было выше данных контроля на 4,5%. На 90-е сутки эксперимента уровень гемоглобина в опытной группе увеличился и составил 118,0, в контрольной группе – 109,0 г/л, разница с контролем была достоверной.

При анализе биохимических показателей, характеризующих белковый обмен, установлено, что наибольшее содержание общего белка и альбумина было у животных опытной группы на всех сроках исследования. На 30-е сутки содержание общего белка в опытной группе превысило показатели контроля на 13,7 %, на 60-е сутки эксперимента концентрация общего белка в сыворотке крови превышала показатели контроля на 20,5%, альбумина - на 18,9%.

Во все периоды исследования отмечается недостоверное увеличение содержания мочевины в крови опытных поросят по сравнению с контролем. В опытной группе на 30-е сутки мочевины содержалось 9,96 к 9,0 в контроле, на 60-е – 5,66 к 5,28, на 90-е – 8,0 к 7,0 ммоль/л соответственно в контроле.

На 90-е сутки содержание общего билирубина у опытной группы поросят уменьшилось до 1,8 мкмоль/л.

На всех сроках исследования в опытной группе отмечалось достоверное снижение содержания креатинина в сыворотке крови поросят. Так, на 60-е сутки разница с контролем в опытной группе составила 25%.

Анализ ферментов переаминирования в сыворотке крови поросят выявил снижение активности индикаторных ферментов AСT и AЛT во всех периодах  эксперимента. Снижение активности AСT в опытной группе на 30-е сутки составило 10,5 %, на 60-е- 26,3 %, на 90-е – 11,4% по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует о благоприятном действии цеолитов на функциональную деятельность печени.

На фоне применения цеолитов наблюдается некоторое снижение активности ферментов гаммаглутамилтрансферазы, амилазы и креатинфосфокиназы в обеих группах. 

Отмечалось увеличение относительного числа Т- и В-лимфоцитов во все периоды исследования. На 60-е сутки эксперимента содержание Т-лимфоцитов у поросят опытной группы превышало контроль на 3,2%, В-лимофцитов составил 19,25 против 16,33 в контроле.

Активность лизоцима у животных, получавших цеолиты, увеличилась на 30-е, 60-е и 90-е сутки на 11,8, 12,7 и 14,9% соответственно по отношению к контролю.

Фагоцитарная активность нейтрофилов крови поросят повышалась на 30-е сутки после применения цеолитов на 11% по отношению к контрольной группе. На 60-е и 90-е сутки у опытных поросят этот показатель был незначительно выше данных контроля.

На второй и третий сроки исследования фагоцитарное число, индекс и емкость в опытной группе значительно превышали данные контрольной группы. Это связано с увеличением поглотительной способности нейтрофилов у опытных животных на фоне применения цеолитов.

При проведении ветеринарно-санитарной экспертизы мяса опытных поросят было установлено, что по  органолептическим, микробиологическим и физико-химическим показателям его можно расценивать как доброкачественное.

С целью оценки влияния цеолитосодержащей кормовой добавки на развитие тканей откармливаемых поросят были выполнены морфологические исследования с использованием гистологических, гистохимических и морфометрических методов.

Применение минеральной кормовой добавки способствовало активации процессов хондро- и остеогенеза, стимулировало фибриллогенез и синтез компонентов аморфного вещества соединительной и эпителиальной ткани. 

Применение цеолитосодержащей кормовой добавки способствовало активному росту и формированию хрящевой и костной тканей, стимулировало выработку фибриллярных белков и гликозаминогликанов и отложение гидроксиапатита.

У опытных поросят, получавших кормовую добавку, отмечено формирование более развитой сети остеоидных балок, ориентированных преимущественно вдоль оси  исследованной кости.

В структуре печени подопытных свиней отмечали хорошо выраженную дольчатую  балочную  структуру органа. Большинство гепатоцитов имели крупные ядра и интенсивную окраску цитоплазмы, в которой выделяли значительные депозиты гликогена.

У контрольных поросят печень характеризовалась большим разбросом величин объемов ядер гепатоцитов, присутствием большого количества светлых клеток, имеющих пониженный уровень содержания гликогена и мелкие очаги пролиферации макрофагов.

Следовательно, применение цеолитов способствует увеличению средних размеров ядер гепатоцитов, стимулирует биосинтетические процессы в этих клетках и оказывает положительное влияние на формирование полноценной структуры гистогематических барьеров в организме.

Таким образом, применение животным цеолитов Майнского месторождения Ульяновской области в дозе 2% от сухого вещества рациона оказывает положительное влияние на обменные процессы, энергию роста и сохранность свиней. Указанное благоприятное влияние объясняется высокими сорбирующими свойствами цеолитов, способствующими обезвреживанию в желудочно-кишечном тракте токсинов, нормализации обменных процессов и улучшению пищеварения. В результате повышается сопротивляемость организма к различным заболеваниям, сохранность и продуктивность животных. 

3.5. Изучение сочетанного действия кадмия и свинца на животных  и на фоне применения цеолитов

По принципу аналогов для опыта были сформированы 3 группы кроликов по 10 голов в каждой, с учетом возраста, живой массы и физиологического состояния. Ежедневно в течение 30 суток животным скармливали:

1 группе – корм, контаминированный кадмия хлоридом (1,5 мг /кг) и свинца ацетатом (25 мг/кг); 2 группе – одновременно с теми же ксенобиотиками давали цеолиты (200 мг/ кг); 3 группе – давали стандартный рацион, и она служила контролем.

Кролики, получавшие за время опыта контаминированные тяжелыми металлами корма, имели взъерошенный, тускловатый шерстный покров, ослабленную реакцию на внешние раздражители, расстройство координации движения. У животных, получавших с кормом помимо токсикантов сорбенты, не наблюдалось проявления внешних признаков интоксикации и по внешнему виду они не отличались от контрольных.

У животных, получавших кадмий и свинец, отмечалось  снижение количества сульфгидрильных групп на 48 %, а при  применении цеолита в лечебных целях содержание сульфгидридных групп не менялось.

На 30-й день затравки содержание общего белка в крови затравленных животных снизилось на 19%, а глобулинов - на 25%. Также отмечалось снижение кальция на 28 %, неорганического фосфора - на 16%, а в группе кроликов, получавшей сорбенты, произошло увеличение данных показателей - на 11% и 25% соответственно.

Данную картину вероятнее всего можно объяснить богатым минеральным составом цеолитов, а также их высокой сорбирующей способностью. 

Об изменении показателей естественной резистенции кроликов, получавших в течение 30-и дней тяжелые металлы, можно судить исходя из данных, приведенных в табл. 5.

Таблица 5 - Показатели естественной резистенции кроликов при сочетанном воздействии свинца и кадмия и применении сорбента

Показатель

Фон

Затравка

кадмий + свинец

кадмий + свинец

и лечение цеолитом

10

20

30

10

20

30

1

2

3

4

5

6

7

8

Лейкоциты,

109/л

8,7±

0,61

11,7±*

0,54

13,9±*

0,89

5,9±

0,44

7,9±

0,43

9,2±

0,71

7,9±

0,48

1

2

3

4

5

6

7

8

Фагоцитарная активность, %

57,5±

2,28

46,0±

3,43

39,9±*

3,15

38,0±*

2,57

49,1±

3,10

51,8±

3,79

59,8±

3,39

Фагоцитарный индекс

3,3±

0,18

2,7±*

0,14

2,8±*

0,13

2,5±*

0,11

3,0±

0,15

2,8±

0,15

2,7±

0,12

Фагоцитарное число

1,9±

0,12

1,2±*

0,05

1,2±*

0,07

0,88±*

0,03

1,6±

0, 08

1,5±

0,03

1,8±

0,11

Фагоцитарная емкость

15,9±

0,59

13,4±

0,59

15,8±

0,89

5,6±

0,09

11,4±

0,80

12,8±

0,95

13,3±

0,15

Активность  лизоцима

37,0±

2,30

34,4±

2,09

31,7±

2,21

23,3±

1,08

36,1±

1,35

42,2±

2,09

38,4±

2,15

*  Р<0,05

На 20-й день затравки количество лейкоцитов в группе кроликов, получавших тяжелые металлы, превышало в 1,5 раза их содержание в группе животных, получавших в лечебных целях цеолиты. Фагоцитарная активность у кроликов, получавших токсиканты, по сравнению с животными, которым задавали цеолиты, снизилась в 1,2 раза.

На 20-й день затравки наибольшая концентрация свинца отмечалась в почках - 4,12, в сердце - 2,53, костной ткани - 1,46, печени - 1,32 мг/кг; кадмия в  почках- 1,61, в костях- 0,61, в сердце - 0,21, печени - 0,18 мг/кг. На 30-й день затравки произошло повышение перечисленных показателей: свинца в почках до 5,37 мг/кг, в сердце - 4,41 мг/кг, костях - 2,36 мг/кг, печени - 1,98 мг/кг; кадмия в почках - 2,09 мг/кг, в костях - 0,75 мг/кг, сердце - 0,30 мг/кг, печени - 0,29 мг/кг.

У группы кроликов, получавших токсиканты на фоне цеолита, на 30-й день затравки содержание свинца в почках, сердце, костях, печени было ниже в 5,42; 15,2; 2,0 и 2,8 раза, чем у животных, получавших тяжелые металлы. Содержание кадмия у тех же животных  в почках, костях, сердце и печени было ниже, чем у кроликов, получавших только токсиканты в 3,1; 5,3; 10,0 и 1,8 раз соответственно.

Мясо подопытных кроликов, получавших с кормом кадмий и свинец, имело некоторые отклонения по физико-химическим показателям: при постановке реакции на фермент пероксидазу окраска появляется с большим опозданием, что говорит о ее низкой активности; коэффициент кислотности – окисляемости составил на 10-й день 0,3, это на 0,1 ниже нормы, что свидетельствует о наличие в мясе первичных продуктов распада органических веществ; при формольной реакции вытяжка приобретает желеобразную консистенцию, что также свидетельствует о том же, рН мяса составил 6,5, это может говорить о низкой активности мышечных ферментов, и о том, что не произошло резкого сдвига в кислую сторону.

Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса, затравленных кроликов и убитых на 20-й, 30-й день затравки, показала выраженную тенденцию к ухудшению как органолептических, так и физико-химических показателей, что объясняется более длительным поступлением токсикантов в организм животных.

Мясо кроликов, получавших помимо токсикантов сорбенты, по органолептическим и физико-химическим показателям не отличалось от мяса контрольной группы.

Следовательно, мясо кроликов, получавших сочетано свинец и кадмий на фоне цеолитов, имеет органолептические и физико-химические показатели, соответствующие стандартам, предусмотренным для мяса здоровых животных. Улучшение показателей мяса кроликов, получавших цеолиты, произошло за счет предотвращения нарушения обмена веществ, снижения накопления тяжелых металлов в органах и тканях животных, повышения резистентности организма. Цеолиты имеют богатый минеральный состав, а также обладают высокой сорбирующей способностью, являясь ионообменниками, они поглощают токсины из крови, компенсируя их микроэлементами.

Следующая серия опытов проведена на 9 овцах массой 32-36 кг, разделенные по принципу аналогов на 3 группы. Ежедневно в течение 30 дней первой группе скармливали корм, контаминированный кадмием хлоридом (1,5 мг/кг) и свинцом ацетатом (25 мг/кг), второй группе овец одновременно с токсикантами давали цеолит (300 мг/кг), третья группа служила контролем и получала стандартный рацион + цеолит  (300 мг/кг).

При биохимическом исследовании крови были выявлены  следующие изменения: у животных, получавших свинец и кадмий, содержание общего белка в сыворотке крови  на 30-й день затравки снижалось на 13%, альбуминов - на 28,2%, -глобулинов - на 31,2%, что может говорить о нарушение белковообразовательной и адсорбционной функции печени. У овец, получавших помимо токсикантов цеолиты, содержание альбуминов к 30 дню затравки снизилось на 14,7%, -глобулинов - на 13,5% относительно контроля.

У овец, получавших свинец и кадмий, на 10-й, 20-й и 30-й день затравки, наблюдалось снижение содержания неорганического фосфора на 13-14,5, кальция - на 10,8-20%. У овец, получавших помимо токсикантов цеолиты, снижение содержания неорганического фосфора было менее значительным (6-8,1%), а количество общего кальция увеличилось на 6,2-15,8%.

В группе овец, сочетано получавших свинец и кадмий, на 20-й день исследований было отмечено повышение активности АЛТ и АСТ на 8,3 и 42,2% соответственно. У овец, получавших токсиканты и цеолиты, активности АЛТ и АСТ оставались близкими к фоновым показателям.

На 20-й день у затравленных тяжелыми металлами овец отмечали повышение активности ферментов лактатдегидрогеназы и щелочной фосфатазы на 28,7 и 72,5% относительно контроля. 

Произошло ухудшение выделительной способности почек, что привело к увеличению креатина в сыворотке крови на 30,8%, мочевины - на 68,4% и амилазы - на 136%.

У животных, получавших на фоне затравки цеолиты, наблюдалась нормализация активности лактатдегидрогеназы и щелочной фосфатазы, снижение содержания креатинина, мочевины и амилазы в сыворотке.

У овец, получавших тяжелые металлы, уже на 10-й день затравки отмечается их накопление в крови. На 10-й день затравки содержание свинца  увеличилось в 8,5 раза, кадмия в 25,5 раза по сравнению с фоновыми показателями. На 20-й и 30-й день затравки наблюдалось постепенное снижение уровня металлов, что можно объяснить их распределением и локализацией во внутренних органах и тканях.

В группе овец, получавших токсиканты на фоне применения цеолита, на протяжении всего периода опыта содержание тяжелых металлов в крови существенно не отличалось от фоновых показателей.

Из данных, представленных в табл. 6 видно, что наибольшая концентрация свинца отмечалась в костях - 2,32; печени - 1,82; почках - 1,29 мг/кг; кадмия - в почках - 0,90; мышечной ткани - 0,72 и костях – 0,57 мг/кг.

У животных, получавших токсиканты на фоне применения цеолита, содержание свинца в почках было в пять раз меньше. В мышцах, печени и костной ткани было ниже в 3,4; 2,2 и 1,5 раза соответственно, чем в контрольной группе. Содержание кадмия у тех же животных в мышцах было ниже, чем в контроле в 18,0 раз, а в костной ткани, сердце и почках в 6,3; 5,3 и 3,0 раза соответственно.

Таблица 6 - Содержание кадмия и свинца (мг/кг) в органах и тканях овец, получавших сочетано тяжелые металлы при применении цеолита

Орган, ткань

Группа животных, получавших

кадмий+свинец

кадмий+свинец+цеолит

Свинец

Печень

1,82±0,11

0,80±0,07

Почки

1,29±0,06

0,26±0,01

Легкие

0,23±0,04

0,22±0,01

Сердце

0,54±0,01

0,47±0,02

Мышцы

0,27±0,01

0,08±0,02

Кости

2,32±0,22

1,57±0,01

Кадмий

Печень

0,29±0,05

0,15±0,04

Почки

0,90±0,03

0,30±0,01

Легкие

0,03±0,01

0,03±0,01

Сердце

0,26±0,01

0,05±0,01

Мышцы

0,72±0,02

0,04±0,01

Кости

0,57±0,03

0,09±0,01

При ветеринарно-санитарной экспертизе мяса опытных овец  на 10-й, 20-й и 30-й день затравки было установлено, что мясо от опытных животных имеет интенсивно красный цвет, удовлетворительную степень обескровливания, местами отмечаются кровоизлияния, поверхность разреза липкая, влажная.  Мясо животных, получавших сочетано токсиканты и цеолиты, имеет показатели близкие к контролю – степень обескровливания хорошая, поверхность разреза слегка влажная, не оставляет следа на бумаге, цвет розово-красный, запах характерный специфический, консистенция упругая (ямка от надавливания быстро выравнивается). Бульон при пробе варки из мяса опытных животных не соответствует нормам, а при применении цеолита соответствует доброкачественному мясу.

При исследовании мяса на 20-й и 30-й день убоя отмечается ухудшение органолептических показателей, а у группы животных, получавших цеолиты, остается в норме.

Физико-химические показатели мяса подопытных овец, получавших с кормом кадмий и свинец, имеют некоторые отклонения от нормы, предусмотренной для здоровых животных: при реакции на фермент пероксидазу окраска появляется с большим опозданием, что говорит о ее низкой активности; коэффициент кислотности – окисляемости составляет на 10-й день затравки 0,3, а на 20-й и 30-й день - 0,2, что говорит о незначительной титруемой кислотности, накоплении банальной микрофлоры и наличие первичных продуктов распада органических веществ; рН на 10-й день затравки составил 6,6, а на 30-й день достиг 7,2. При постановке формольной реакции вытяжка приобретала желеобразную консистенцию, что также свидетельствует о наличии первичных продуктов распада.

Физико-химические показатели мяса животных, получавших токсиканты и цеолиты, так же как и в контроле соответствовали нормам, предусмотренным стандартом: рН составил 5,8-6,0. При реакции на пероксидазу появляется сине-зеленое окрашивание, переходящее в бурое; при формольной реакции фильтрат остается прозрачным.

При микроскопическом исследовании мазков отпечатков, окрашенных по грамму, в мясе овец, получавших свинец и кадмий, обнаружено до 10-15 микроорганизмов, а в контроле и группе овец, получавших цеолиты, отдельные кокки и палочки.

Таким образом, ежедневное  сочетанное поступление кадмия хлорида и свинца ацетата с кормом в течение 30 дней в организм овец сопровождается увеличением содержания тяжелых металлов в органах и тканях, наибольшая локализация отмечена в почках, печени и костях.

3.6. Изучение сочетанного действия кадмия, дециса и Т-2 токсина на овец и на фоне применения цеолитов 

Исследования проводились на 12 овцах породы «Прекос», массой 28-30 кг, разделенных на три группы. Первая группа получала кадмия хлорид, Т-2 токсин и децис; вторая - соль кадмия, децис и Т-2 токсин и цеолит (300 мг/кг); третья группа служила контролем и получала стандартный рацион.

Клинические признаки отравления проявлялись у овец, получавших сочетано соль кадмия, Т-2 токсин и децис, прослеживалось угнетенное состояние, взъерошенность шёрстного покрова, снижение аппетита, к 20 сут  была отмечена диарея, тремор отдельных мыщц конечностей, некрозы и эрозия кожи губ и слизистых оболочек ротовой полости. У овец, получавших токсиканты на фоне применения цеолита, клиническая картина интоксикации не проявлялась, состояние животных было удовлетворительным.

Содержание общего белка в крови подопытных овец, получавших сочетано токсиканты, в течение всего эксперимента постоянно уменьшалось,  значительное его снижение было отмечено к концу эксперимента - на 17,6% относительно контроля. В группе овец, получавшей токсиканты на фоне цеолита, снижение общего белка не прослеживалось.

В группе овец, получавших кадмий, Т-2 токсин и децис, содержание -глобулинов на 10-й день затравки повысилось на 41,8%; 20-й – 75 %; 30-й – 98%. 

На 30-й день затравки у овец, получавших сочетано токсиканты, произошло понижение альбуминов на 35,6%; -глобулинов – на 33% , содержание - глобулинов повысилось на 22 %. В группе овец, получавших цеолиты, все фракции белка оставались на уровне контроля.

Под воздействием кадмия, Т-2 токсина и дециса на уровне ПДК общее содержание кальция в крови на 10-ые сутки снижалось  на 22,7%; 20-ые – 36,8 % и 30-ые – 38,1% соответственно.  У животных, получавших цеолит, этот показатель находился в пределах контрольных величин. Содержание неорганического фосфора в крови всех подопытных овец в течение всего эксперимента  статистически достоверно не отличалось от исходных показателей. 

Исследования активности ферментов  показали, то что в группе овец, получавших сочетано токсиканты, происходило увеличение щелочной фосфатазы, к 10-м суткам ее уровень повысился на 46,1%; к 20-м суткам -  на 68,5% и на 30-ые - на 94,4%. Активность данного фермента у овец, получавших цеолиты, находилась на уровне контроля. 

Содержание амилазы у овец, затравленных сочетано токсикантами, незначительно возросло на 10 и 20-е сутки, но к 30-м суткам снизилось на 26,1% относительно исходных данных, а  в группе животных, получавших цеолиты, существенных отличий во все сроки эксперимента не наблюдалось.

Активность АСТ в  группе овец, получавшей сочетано кадмий, Т-2 токсин и децис, повышалась на 10-е сутки на 30 %; на 20-е - на 53,2%; на 30-е - на 67,4%. Активность АЛТ у овец, получавших сочетано токсиканты, к 30-му дню эксперимента повысилась на 14,2%, и разница в данном показателе между группой овец, получавших цеолит, и контроля составила всего 0,9%.

Содержание азота мочевины  у овец, получавших токсиканты сочетано, на 10-е сутки повысилось на 61,8%; 20-е - на 73,6%, к концу эксперимента на 85,5 % по сравнению с исходными показателями.

При определении остаточного количества токсикантов в крови овец, получавших кадмий, Т-2 токсин и децис  отмечалось, что на 10-й день затравки  содержание кадмия увеличилось в 25,2 раза, на 20-й и 30-й день затравки наблюдалось постепенное снижение уровня металла, что можно объяснить его перераспределением и локализацией во внутренних органах и тканях.

В группе овец, получавших токсиканты на фоне применения цеолита на протяжении всех дней затравки, содержание кадмия в крови существенно не отличалось от исходных показателей.

В группе овец, получавших Т-2 токсин сочетано с децисом и кадмием, микотоксин был обнаружен в следовых количествах.

Концентрация дециса в органах и тканях была выше при его совместном поступлении с Т-2  токсином и кадмия хлоридом. Наибольшее количество дециса обнаружено в почках: при совместном поступлении с Т-2 токсином – 4,0 мкг/кг. Концентрация дециса в других органах была значительно ниже: в печени – 0,37, в селезёнке – 0,2, в лёгких – 0,155 мкг/кг . Незначительное следы дециса были обнаружены в сердце и мышцах.

Результатам исследования по определению остаточных количеств дециса и Т-2токсина в органах и тканях овец, получавших препараты в течение 30 дней, представлены в табл. 7.

Таблица 7 – Содержание токсикантов в органах и тканях овец, мкг/кг

Орган, ткань

Группа животных, получавших

кадмий +Т-2 токсин +децис

кадмий+Т-2 токсин+децис+цеолит

Т-2 токсин

Печень

1,82±0,11

0,91±0,14

Почки

3,9±0,06

1,97±0,07

Легкие

1,55±0,04

0,86±0,11

Селезенка

0,3±0,22

0,2±0,15

Децис

Печень

0,37±0,03

0,14±0,04

Почки

4,01±0,05

1,3±0,01

Легкие

1,153±0,01

0,2±0,01

Сердце

следы

-

Мышцы

следы

-

Кости

-

-

Селезенка

0,2±0,01

-

Исследования по определению остаточных количеств кадмия в органах и тканях овец показали, что  наибольшая его концентрация отмечалась в  почках-0,93; костях- 0,58; печени- 0,30 и мышечной ткани - 0,71 мг/кг массы тела.

У животных, получавших токсиканты при применении цеолита, содержание кадмия в мышцах и почках было ниже, чем в контроле в 18,0 и 30,0 раз, а в костной ткани и сердце - в 6,3 и 4,3 раза соответственно. 

При сочетанном воздействии токсикантов и применении цеолитов отмечалась удовлетворительная степень обескровливания мяса, однако данный показатель ухудшался в зависимости от сроков затравки.

Степень обескровливания мяса овец, получавших цеолиты, и контрольной группы хорошая, консистенция упругая, цвет малиновый, запах естественный.

Бульон из мяса животных, получавших токсиканты, был мутный, с хлопьями на всех сроках затравки с тенденцией к ухудшению. Бульон из мяса овец, служивших контролем и группы, получавшей цеолиты, прозрачный, с незначительными хлопьями, ароматный.

Физико-химические показатели мяса опытных овец, получавших с кормом сочетано токсиканты, имеют отклонения от нормы, причем прослеживалась тенденция их ухудшения в зависимости от сроков затравки. При постановке реакции на фермент пероксидазу окраска появляется с опозданием, что говорит о низкой активности фермента, коэффициент кислотности-окисляемости на 10-й день затравки 0,24, на 20-й – 0,2 и 30-й день 0,17, что свидетельствует о незначительной титруемой кислотности, накоплении банальной микрофлоры и наличие первичных продуктов распада органических веществ; показатель рН на 10-й день затравки составил 6, на 20-й – 7,0 на 30-й день – 7,2.

При постановке формольной реакции вытяжка из мяса овец, получавших токсиканты сочетано, приобретала желеобразную консистенцию, что свидетельствует о наличие в бульоне первичных продуктов распада веществ.

Физико-химические показатели мяса животных контрольной группы и группы овец, получавшей токсиканты при применении цеолита, соответствовали нормам, предусмотренным стандартом.

Микроскопическими исследованиями установлено, что в мясе овец, получавших сочетано токсиканты, обнаружено более 15 микроорганизмов, а в контроле и группе овец, получавших помимо токсикантов цеолиты, единичные кокки и палочки.

Таким образом, можно сделать заключение, что ежедневное сочетанное поступление кадмия хлорида, Т-2 токсина и дециса с кормом в течение 30 дней в организм овец сопровождается увеличением содержания тяжелых металлов в органах и тканях, наибольшая локализация которых отмечена в почках, печени и костях. При введении в рацион затравленных животных цеолитов происходит снижение в органах содержания кадмия, дециса и Т-2 токсина.

Мясо животных, получавших сочетано кадмий, Т-2 токсин и децис при применении цеолита, имеет органолептические и физико-химические показатели, соответствующие ГОСТам, предусмотренным для мяса здоровых животных.

ВЫВОДЫ

  1. Впервые на лабораторных и сельскохозяйственных животных установлено усиление токсического действия сочетанного воздействия тяжелых металлов, микотоксинов и перитроидов при совместном поступлении в организм, сопровождающееся более выраженными изменениями биохимических и иммунобиологических показателей крови, органов и тканей, чем при раздельном их поступлении. Обоснована разработка и применение профилактических средств, позволяющих обеспечить получение биологически полноценной, экологически безопасной животноводческой продукции.
  2. В результате скрининга средств для профилактики токсикозов животных, вызванных сочетанным поступлением кадмия, свинца, Т-2 токсина и дециса отобран цеолит Майнского месторождения Ульяновской области, который является малотоксичным для лабораторных (белые крысы) и сельскохозяйственных (свиньи) животных. Средне-смертельная доза цеолита из за низкой токсичности для животных не установлена, что по ГОСТу 12.1.007-76 «Вредные вещества» позволяет отнести его к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества).

Препарат не оказывает раздражающего и аллергизирующего действия на кожу и слизистые оболочки, не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием.

  1. Применение цеолитов белым крысам (6 мес) и свиньям (3 мес) из расчета 1,2 и 4% к сухому веществу корма не оказывает отрицательного влияния на общее состояние и показатели клинического статуса животных.

Скармливание цеолитов крупному рогатому скоту и свиньям из расчета 2% к комбикорму в течение 3 мес сопровождается значительным влиянием на морфологические и биохимические показатели крови, увеличивая при этом количество эритроцитов и гемоглобина на 4,5% и 18,0% соответственно. Они способствуют оптимизации белкового (за счет повышения уровня общего белка на 13,7% и нормализации его фракционного состава), углеводного (концентрация глюкозы повышается на 14,8%), минерального (повышение общего кальция, железа), липидного (уровень холестерина уменьшается на 16,6%) и ферментного (уменьшается содержание билирубина, активность креатиназы, АЛТ, АСТ и повышается активность лаклатдегидрогеназы) обменов, оказывает положительное влияние на энергию роста и продуктивность животных. Прирост массы тела повышается в среднем на 9 - 11%.

  1. Цеолиты положительно действуют на показатели неспецифической резистентности животных, проявляющееся увеличением фагоцитарной активности нейтрофилов на 9-11%, фагоцитарного числа - на 52%, фагоцитарного индекса - на 50,5%, фагоцитарной емкости - на 42%, количества Т и В лимфоцитов - на 7,2 и 12,5% соответственно.
  2. Мясо животных, получавших в течение 3 мес цеолиты из расчета 2% к комбикорму, по органолептическим, физико-химическим, бактериологическим показателям и биологической полноценности соответствует требованиям ГОСТов для доброкачественного мяса.

Физико-химические (плотность, кислотность и бактериальная обсемененность) показатели молока опытных коров соответствовали ГОСТу для доброкачественного продукта.

  1. Введение в рацион животных цеолитов способствует активации процессов остеогенеза, стимулирует синтез аморфного вещества соединительной и эпителиальной ткани, оказывает благоприятное воздействие на процессы метаболизма и полноценное развитие паренхиматозных элементов печени животных.
  2. Сочетанное пероральное поступление свинца (25 мг/кг) и кадмия (1,5 мг/кг) в организм животных в течение 30 суток вызывает потенцирование (усиление) токсического действия, характеризующееся более выраженными изменениями биохимических и иммунобиологических показателей крови, чем при раздельном воздействие токсикантов, и сопровождается снижением общего белка (17-20%), альбуминов (50-52%), неорганического фосфора и общего кальция (15-30%), фагоцитарной, лизоцимной и бактерицидной активности (40-60%), количества Т- и В-лимфоцитов на 23-30% и повышением активности ферментов АЛТ, АСТ, амилазы, креатинкиназы на 50-100%.
  3. Совместное поступление животным хлорида кадмия, Т-2-токсина и дециса в дозах 1/10 от ЛД50 характеризуется выраженными изменениями клинических (диарея, тремор, некрозы и эрозии слизистых ротовой полости) и биохимических (содержание общего белка в сыворотке крови снижается на 17,6%, альбуминов, и глобулинов – на 22-35%, общего кальция – на 38%, активность ферментов щелочной фосфатазы, аспаратаминотрансферазы, аламинаминотрансферазы, а также содержание азота мочевины и -глобулинов повышается на 94,4, 67,4, 14,2, 85,5 и 55,5% соответственно) показателей.

Введение в рацион животных цеолита из расчета 2% от сухого вещества корма оказывает положительное влияние на клиническое состояние и нормализует биохимические показатели.

  1. При сочетанном пероральном поступлении овцам кадмия хлорида и ацетата свинца, а также кадмия хлорида, Т-2 токсина и дециса наибольшее накопление токсикантов выявляется в почках, костях, печени и мышечной ткани. Введение в состав рациона цеолита из расчета 2% к сухому веществу корма способствует снижению содержания тяжелых металлов в 3-28 раз, Т-2 токсина – в 1,5-2 и дециса - в 2,5-3 раза (в зависимости от токсина и органа).
  2. Мясо животных, получавших в течение 30 дней сочетанно кадмия хлорид, Т-2 токсин и децис, по органолептическим (степень обескровливания плохая, цвет малиново–красный, бульон мутный, с обильной пеной и хлопьями), физико-химическим (в реакции на фермент перексидазу окраска не появляется, коэффициент кислотности – окисляемости составил 0,17, свидетельствующий о наличии первичных продуктов распада органических веществ, показатель рН – 7,2, при формольной реакции вытяжка из мяса приобретала желеобразную консистенцию) и бактериоскопическим показателям (более 15 микроорганизмов) имело отклонения и не соответствовало ГОСТам для доброкачественного продукта.

Мясо животных, получавших сочетанно хлорид кадмия, Т-2 токсин и децис на фоне применения с кормом цеолитов, по органолептическим, биохимическим и бактериоскопическим показателям, соответствовало стандартам, предусмотренным для мяса здоровых животных.

  1. При сочетанном воздействии на животных кадмия хлорида, Т-2 токсина и дециса в течение 30 дней изменения гистоструктуры органов были более выражены и характеризовались внутри- и внеклеточными отеками в головном мозге, сердце, печени и нарушением проницаемости сосудов с перивоскулярными кровоизлияниями в печени, почках, легких и красной пульпы селезенки.

Раздельное воздействие токсинов на организм животных не вызывает перечисленных отклонений и не приводит к развитию пролиферативных изменений.

При профилактике отравлений животных цеолитом изменения в органах и тканях животных имеют меньшую степень выраженности или отсутствуют.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании экспериментальных данных разработаны дозы и схемы применения цеолитов для нормализации обменных процессов, повышения продуктивности и профилактики сочетанных отравлений животных тяжелыми металлами, микотоксинами и пиретроидами.

Результаты исследований нашли отражение в следующих нормативных документах и методических рекомендациях:

  1. Временное наставление по применению минеральной кормовой добавки «Майнит» в животноводстве и птицеводстве. Утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода Российской Федерации (2005).
  2. Рекомендации по борьбе со смешанными микотоксикозами животных в Республике Татарстан (2007).
  3. Методические рекомендации «Санитарно-микологическая оценка кормов и улучшение их качества». М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2006.
  4. Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике отравлений животных синтетическими пиретроидами. М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2007.
  5. Основные положения диссертационной работы используются при чтении лекций и проведения лабораторно-практических занятий со слушателями курсов по повышению квалификации ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» и студентами Казанской государственной академии ветеринарной медицины, Чувашской и Ульяновской сельскохозяйственных академий.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Папуниди, Э.К. Изучение токсикологического действия цеолитосодержащих пород / Э.К.Папуниди // Матер. Всероссийской научно-производ. конф.-  Казань.- 1994. - С. 115-118.

2. Папуниди, Э.К. Временное наставление по применению минеральной кормовой добавки «Майнит» в животноводстве и птицеводстве (наставление) / К.Х.Пупуниди, А.В.Иванов, М.Г.Зухрабов, Е.В.Лесин, Г.З.Идрисов, И.Н.Залялов, В.В.Лесин, Э.К.Папуниди// Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода Российской Федерации 9 августа 1995 г. – 3 с.

3. Папуниди, Э.К. Токсикологическая оценка цеолитосодержащей породы / Э.К.Папуниди, М.Г.Зухрабов, В.Г.Софронов, Е.В.Лесин // Матер. научно–производственной конф. по проблемам ветеринарии  и  животноводства. - Казань. - 1995. - С. 131-134.

4. Папуниди, Э.К. Природные цеолиты и полисоли в профилактике нарушений обмена веществ у свиней /Э.К.Папуниди, М.Г.Зухрабов // Труды первого съезда ветеринарных врачей Республики Татарстан. - Казань.-1996. -С. 275-277.

5. Папуниди, Э.К. Использование  цеолитов для  профилактики острых расстройств пищеварения у телят /Э.К.Папуниди, А.В.Иванов, М.И.Шагеев// Матер. республиканской научно–практической конф. по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. - Казань. - 1996. - С. 152-155.

6. Папуниди, Э.К. Средство для  нормализации обменных процессов в организме животных / Э.К.Папуниди, К.Х.Папуниди, Е.В.Лесин, Г.З.Идрисов, М.Г.Зухрабов, В.В.Лесин, Е.Н.Белясников, А.П.Какурников// Патент РФ № 96105477113(009894) от 10.10.96. - 1с.

7. Папуниди, Э.К. Влияние цеолитов на биохимические показатели крови и продуктивность свиней /М.Г.Зухрабов, А.В.Иванов, Э.К.Папуниди// Межвузовский сборник научных трудов. Диагностика, профилактика и терапия незаразных болезней животных. - Казань. - 1996. - С. 123-126.

8. Папуниди, Э.К. Влияние цеолитов на обмен веществ у свиней /Э.К.Папуниди, М.Г.Зухрабов, К.Х.Папуниди, Г.З.Идрисов, А.В.Иванов, И.Н.Залялов// Ветеринария. - М., 1997. - №2. - С. 55-58.

9. Папуниди, Э.К. Стимуляция роста скелетной ткани у свиней минеральной  кормовой добавкой «Майнит» /Э.К.Папуниди, И.Н.Залялов, М.Г.Зухрабов// Матер. республиканской научно–производ. конф.  по  актуальным  проблемам  ветеринарии и животноводства. - Казань. - 1997. – С. 162-165.

10. Папуниди, Э.К. Содержание минеральных веществ при применении «Майнита» /Э.К.Папуниди, Р.С.Чахмахчев// Матер. науч. конф. «Актуальные проблемы животноводства и ветеринарии». - Казань. - 1999. - С.

11. Папуниди, Э.К. Влияние сукцината железа на санитарно–гигиенические и биологические показатели мяса свиней /Э.К.Папуниди, А.С.Гасанов// Ученые записки КГАВМ им. Н.Э.Баумана.- Том . 177.- Казань. - 2004. - С. 23-31.

12. Папуниди, Э.К. Санитарно–микологическая оценка кормов и улучшение их качества /Э.К.Папуниди, А.В.Иванов, М.Я.Тремассов, К.Х.Папуниди// Изд-во «Росинформагротех». - М., - 2006. – 30 с.

13. Папуниди, Э.К. Остаточное количество дециса в органах и тканях овец /Г.Г.Галяутдинова, М.Я.Тремассов, М.Е.Шангараева, С.Л.Мохтарова, А.В.Софронов, Э.К.Папуниди// Матер. междунар. конф. «Токсикозы животных и актуальные проблемы болезней молодняка». - Казань. - 2006.- С. 61-63.

14. Папуниди, Э.К. Гематологические и биохимические показатели овец при сочетанном воздействии децисом и Т–2 токсином /В.И.Егоров, Г.Г.Галяутдинова, Э.К.Папуниди// Матер. Междунар. конф. «Токсикозы животных и актуальные проблемы болезней молодняка». - Казань. - 2006.- С. 84-86.

15. Папуниди, Э.К. Влияние бентонитов на обменные процессы и продуктивность свиней /К.Х.Папуниди, О.А.Грачева, Д.М.Мухутдинова, Э.К.Папуниди// Матер. Международного симпозиума «Агроэкологическая безопасность в условиях техногенеза».- II часть.-  Казань. - 2006. - С. 285-289.

16. Папуниди, Э.К. Ветеринарно–санитарная оценка продуктов животноводства при сочетанном воздействии пиретроидов и микотоксина /Г.Г.Галяутдинова, В.И.Егоров, Н.Г.Шангараев, Э.К.Папуниди, М.Я.Тремасов// Ветеринарный врач.- №1.-Казань. - 2007. - С. 9-11.

17. Папуниди, Э.К. Рекомендации по борьбе со смешанными микотоксикозами животных в Республике Татарстан /М.Я.Тремасов, Ф.Г.Ахметов, Э.К. Папуниди// Мин. сельского хозяйства. - Казань.-2007.- 20с.

18. Папуниди, Э.К. Испытание антидота при отравлении овец децисом /Г.Г.Галяутдинова, М.Я.Тремасов, В.И.Егоров, А.В.Иванов, Э.К.Папуниди// Материалы первого съезда ветеринарных фармакологов России.- Воронеж.-2007. - С. 192-195.

19. Папуниди, Э.К. Влияние бентонитов на обменные процессы и продуктивность свиней /К.Х.Папуниди, А.В.Иванов, Э.К.Папуниди// Матер. первого съезда ветеринарных фармакологов России. - Воронеж. - 2007. - С. 490-495.

20. Папуниди, Э.К. Токсикокенетика дециса в организме овец при многократном пероральном применении /Г.Г.Галяутдинова, В.И.Егоров, Н.Г.Шангараев, М.Я.Тремасов, А.В.Иванов, Э.К.Папуниди//. Матер. научно–практ. конф. фармакологов Российской Федерации «Фармакологические аспекты ветеринарной медицины». - Троицк .- 2007 .- С. 320-322.

21. Папуниди, Э.К. Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике отравлений животных синтетическими пиретроидами /А.В.Иванов, Г.Г.Галяутдинова, Э.К.Папуниди, М.Я.Тремасов, К.Х.Папуниди// Изд-во «Росинформагротех». - М., 2007. - 20 с.

22. Папуниди, Э.К. Сочетанное действие физических и химических факторов на клинические и биохимические показатели животных /А.В.Иванов, М.Я.Тремасов, Э.К.Папуниди, Ф.Г.Ахметов, Э.И.Семенов// Ветеринарный врач. - №4. - Казань. - 2007 .- С. 4-6.

23. Папуниди, Э.К. Контроль над качеством и безопасностью генетически модифицированных продуктов, ввозимых из-за рубежа /Э.К.Папуниди, А.К.Чулков, М.Я.Тремасов// Ветеринарный врач. - Спецвыпуск. - Казань. - 2007. - С. 63–66.

24. Папуниди, Э.К. Влияние цеолита на обмен веществ и молочную продуктивность коров /Э.К.Папуниди// Матер. междунар. конф. «Актуальные проблемы здоровья скота, ввозимого в Россию в рамках нацпроекта «Развитие агропромышленного комплекса». Казань. - 2008 .- С. 194–196.

25. Папуниди, Э.К. Ветеринарно-санитарная оценка продуктов животноводства при сочетанном воздействии пиретроида и микотоксина /Г.Г.Галяутдинов, В.И.Егоров, Э.К.Папуниди, А.В.Иванов// Современная микология в России. - Том 1.- Матер. II съезда микологов России. - М., - 2008.- С. 248.

26. Папуниди, Э.К. Применение цеолитов для коррекции нарушения обмена веществ и содержания тяжелых металлов в организме животных /Э.К.Папуниди// Ветеринарный врач. - № 1. - Казань.- 2008. – С. 13-16.

27. Папуниди, Э.К. Ветеринарно-санитарная оценка мяса при воздействии дециса /Г.Г.Галяутдинов, В.И.Егоров, Н.Г.Шангараев, Э.К.Папуниди, М.Я.Тремасов, А.В.Иванов// Ветеринария. - №3. - М., - 2008. - С. 55-57.

28. Папуниди, Э.К. Влияние цеолитов на биохимические  показатели и содержание тяжелых металлов в органах овец при сочетанном воздействие тяжелых металлов в органах овец при сочетанном воздействии на них свинца и кадмия /С.А.Софронова, Э.К. Папуниди, Н.М.Ахмерова, В.А.Конюхова// Ветеринарный врач. - №2.-  Казань. - 2008. - С.4-7.

29. Папуниди, Э.К.  Ветеринарно-санитарная оценка мяса кроликов при воздействии тяжелых металлов и применении цеолитов /Э.К.Папуниди// Ученые записки. - Казань. -- 2008.- С. 355-357.

30. Папуниди, Э.К. Ветеринарно-санитарная оценка мяса при воздействии тяжелых металлов и применении цеолитов /Э.К.Папуниди// Матер. научно-практ. конф. «Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики инфекционных болезней животных и птиц».- Екатеринбург. - 2008. - С. 387-389.

31. Папуниди, Э.К. Потенциальные антидоты пиретроидных пестицидов /А.В.Иванов, Г.Г.Галяутдинова, В.И.Егоров, Э.К.Папуниди// Матер. междунар. научно-практ. конф, посвящ. 50-летию ВНИИВВиМ  «Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными, экзотическими и малоизученными болезнями животных». - 13-14  ноября 2008 года. - Покров. - 2008. - С. 20-23.

32. Папуниди, Э.К. Ветеринарно-санитарная оценка мяса животных при сочетанной интоксикации тяжелыми металлами и применения цеолитов / Э.К.Папуниди// Ветеринарный врач.- №3.- Казань. -2008. –С. 8-9.

33. Папуниди, Э.К. Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса овец, получавших сочетанно соли кадмия, децис и Т-2 токсин /Э.К.Папуниди// Ветеринарный врач. - №6.- Казань.- 2008.  – С. 10-11.




© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.