WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

 

На правах рукописи

ГРУДИНА Наталья Владимировна

Разработка нового типа кормовых добавок на основе полимеров и их влияние на здоровье и продуктивность жвачных животных,  содержащихся в разных экологических условиях

03.03.01 Физиология

06.02.05 Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Боровск 2010

Диссертационная работа выполнена в лаборатории радиобиологии сельскохозяйственных животных ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной радиологии и агроэкологии»

Научный консультант  – доктор биологических наук, профессор,

  академик РАСХН

  Кальницкий Борис Дмитриевич

 

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Решетов Вадим Борисович

доктор биологических наук,

профессор

Грушкин Александр Георгиевич

доктор биологических наук

Лавина Светлана Алексеевна

Ведущая организация:  ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»

Защита диссертации состоится «______» _________ 2011 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.030.01 при Всероссийском научно-исследовательском институте физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных Россельхозакадемии.

Адрес института: 249013, Калужская область, г. Боровск, пос. Институт, ВНИИФБиП, тел.: (495) 9963415, факс – (48438) 42088.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных.

Автореферат разослан «_____»____________2011 года

Ученый секретарь

диссертационного совета

кандидат биологических наук В.П. Лазаренко

  1. Общая характеристика работы

Актуальность исследований. Интенсификация животноводства в условиях техногенного пресса заставляет ученых искать все новые пути повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных жи-вотных. При этом одной из главных проблем является обеспечение животных протеином. Ежегодно в кормовом балансе животноводства дефицит протеи-на, в среднем, составляет 15-20%, что сдерживает рост продуктивности жи-вотных и обусловливает повышение затрат кормов. При этом проблема осложняется тем, что в процессе пищеварения существенная часть протеинов высокобелковых кормов теряется, превращаясь в сравнительно малоценные для питания животных вещества (аммиак, мочевина и др.). В связи с этим весьма актуальным является поиск путей и средств для максимального использования питательных веществ традиционных кормов с целью повыше-ния конверсии корма, что  позволит более полно обеспечить организм живот-ных заменимыми и незаменимыми аминокислотами и, следовательно, биосинтез белка. Поэтому, повышение обеспеченности организма протеином приводит к активизации обменных процессов (повышению прироста мышеч-ной массы, увеличению надоев), а также укреплению иммунной системы животных, повышению сохранности молодняка, снижению себестоимости продукции.

На обеспеченность организма жвачных животных протеином и аминокислотами большое влияние оказывают сложные и своеобразные микробиологические процессы, происходящие в сложном желудке жвачных. Особую важность эти вопросы приобретают при нормировании кормления высокопродуктивных коров. Если низкопродуктивным животным достаточно того количества белка, который образуется за счет микробного синтеза в рубце и качественный состав протеина корма не играет существенной роли, то потребность высокопродуктивных животных удовлетворяется как за счет микробного белка, так и за счет высококачественных белков корма, избежавших распада в рубце. Синтез микробного белка в рубце у таких животных может обеспечить лишь 40-50% их потребности, а остальное количество протеина должно поступать с кормом. Для уменьшения распада протеина  в преджелудках используются разнообразные методы «защиты» протеина, которые  имеют существенные недостатки, ограничивающие их применение.

Следует отметить, что при ведении скотоводства на экологически неблагополучных территориях (в частности, радиоактивно загрязненных), большое значение имеет не только количество произведенной животным продукции, но и ее качество, в том числе соответствие санитарно-гигиеническим нормативам по содержанию в ней радионуклидов.

В связи со сказанным представляется весьма актуальной и перспективной задачей разработка кормовых добавок нового типа, создавае-мых на основе высокомолекулярных водорастворимых полимеров (ВВП). Благодаря свойствам этих полимеров добавки будут  лишены ряда  недостат-ков  известных способов защиты белка  и смогут  выполнять две функции: эффективно защищать полноценные кормовые белки от распада в предже-лудках жвачных с целью более полноценного снабжения организма амино-кислотами и снижать  поступление радиоактивного цезия в молоко и мясо.

Цель и задачи исследований. Целью исследований было – разработать теоретические основы и создать на основе высокомолекулярных водорастворимых полимеров образец нового типа кормовых добавок для  крупного рогатого скота двойного назначения: для повышения продуктив-ности животных, содержащихся в разных экологических условиях, и  для снижения поступления радиоактивного цезия в продукты животноводства.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

  • изыскать соединения ВВП, которые теоретически, за счет  образования  интерполимерных комплексов, способны повысить продуктивность животных вследствие повышения эффективности использования питательных веществ кормов и снизить поступление радионуклидов в продукты животноводства;
  • исследовать диффузионные и сорбционные  свойства ВВП по отношению к молекулам белка и ионам тяжелых металлов;
  • изучить свойства ВВП  in vitro и  in vivo на оперированных животных с  фистулой  рубца;
  • разработать кормовую добавку нового типа на основе ВВП;
  • оценить на лабораторных животных безвредность полимерной добавки;
  • исследовать влияние полимерной добавки на здоровье, обмен веществ и продуктивность крупного рогатого скота; 
  • в условиях производства провести апробацию влияния разработанной кормовой добавки на продуктивность крупного  рогатого скота в разных экологических  условиях;
  • определить в условиях производства способность новой добавки снижать уровень загрязнения продуктов животноводства (молоко, мясо) 137Cs.

Научная новизна работы. Впервые в мировой практике в качестве кормовой добавки для жвачных животных были использованы ВВП, вводимые в организм в весьма малых количествах. С применением качественных и количественных методов исследования изучены сорбционные и диффузионные свойства ВВП и доказана способность этих полимеров образовывать интерполимерные комплексы с белками и ионами металлов in vitro. Показано, что при использовании ВВП повышается  обеспеченность животных протеином и аминокислотами  за счет улучшения использования белка, содержащегося в самом корме, т.к. сами ВВП не являются питательными веществами. Их применение не привносит в корм дополнительное количество протеина, как это происходит при использова-нии традиционных кормовых добавок (белково-витамино-минеральных добавок, синтетических азотистых веществ  и т.п.). Механизм защиты кормового белка от распада в рубце  жвачных животных при применении полимеров отличается от известных способов защиты: молекулы ВВП образуют комплексы с белками кормов при помощи кулоновских взаимодействий. При этом не изменяются химические свойства белковых молекул, как это происходит, например, при обработке корма формалином или при нагревании до высоких температур и т. п.. В процессе «защиты» кормового белка с применением ВВП не образуется новых химических соединений.

Впервые для снижения поступления 137Cs в продукты животноводства использованы ВВП в качестве растворимого гомогенно распределяющегося сорбента. В этом случае взаимодействие между сорбентом и металлом (в данном случае - 137Cs) происходит не на границе раздела двух  фаз сорбент-металл, как при использовании твердых сорбентов, а на уровне активных ионных групп молекул полимера и ионов металла.

На основе полученных результатов была разработана новая эффективная кормовая добавка на основе ВВП, получившая коммерческое название «Солунат», имеющая двойное назначение: повышать молочную и мясную продуктивность крупного рогатого скота и снижать поступление  137Cs в продукты животноводства. Основное действующее вещество Солуната – натриевая соль сополимера этиленкарбоновой кислоты и ее амида, является высокомолекулярным анионным водорастворимым полиме-ром, который имеет линейную структуру молекулы. Реакционноспособными группами макромолекулы ПЭККА являются амино- и карбоксильные группы, способные к образованию межмолекулярных связей с молекулами белков и ионов металлов и других заряженных ионов.

Научно-практическое значение работы. На базе полученных результатов была разработана эффективная кормовая добавка нового типа, действующим  веществом которой является ВВП, получившая коммерческое название «Солунат». Эта добавка имеет двойное назначение: повышать молочную и мясную продуктивность жвачных животных и снижать поступление  137Cs в продукты животноводства.

Результаты  исследований  защищены:  патентом  на  изобретение  РФ

№ 2173057 Способ протектирования белкового корма для сельскохозяйс-твенных животных и протектор для его осуществления» от 10.09.2001; патентом Евросоюза № ЕР 1 198 993 В1«Verfahren zum Schutz von Eiweissfutter mit polyacrylamid» от 19.10.2001.

На кормовую добавку Солунат получено: Свидетельство о государ-ственной регистрации - учетная серия 21-2-3.5-0529, регистрационный № ПВР – 2-3.5/01549 от 24.04.2006г.; Сертификат соответствия № РОСС RU.ПР15.В13729.

Кормовая добавка Солунат внедрена в технологию кормления крупного рогатого скота: в колхозе им. Фрунзе Белгородской области; в ООО «Маяк» Прионежского района, Карелия;  ООО «Мясо Калмыкии» Целинного района, Калмыкия; ООО «Агросоюз Удмуртии» Завьяловского района, Удмуртия.

Основные положения, выносимые на защиту:

- создано новое направление в животноводстве по использованию высокомолекулярных водорастворимых полимеров в качестве кормовой добавки для крупного рогатого скота;

-  утверждается, что эффективность таких добавок основана на их сорбционных свойствах и способности образовывать интерполимерные комплексы с молекулами белка и ионами  металлов;

- доказано, что высокомолекулярные водорастворимые полимеры с линейной структурой молекул повышают эффективность использования питательных веществ кормов;

- разработана кормовая добавка нового типа, с коммерческим названием Солунат,  имеющая двойное назначение: она способна повышать мясную и молочную продуктивность крупного рогатого скота и снижать концентрацию радиоактивного цезия в  продуктах животноводства.

Апробация работы. Материалы доложены: на региональном конкурсе научных проектов в области естественных наук, Калуга, 2000; Международной научно-практической конференции “Опыт преодоления последствий катастрофы на Чернобыльской атомной станции. Экология, безопасность и устойчивое развитие - XXI век”, г. Новозыбков, Брянская область, 20-21сентября 2002 г; Всероссийской научно-практической конференции «Агроэкологические проблемы сельскохозяйственного производства в условиях техногенного загрязнения агроэкосистем», Казань, 2002 г.;  Всероссийском семинаре «Биотехнология-2003», Пущино, ноябрь, 2003; 2-ой Российской научно-практической конференции «Физико-технические проблемы создания новых технологий в агропромышленном комплексе», Ставрополь, апрель, 2003 г.; 5-ом Международном симпозиуме «Актуальные проблемы дозиметрии», Минск (Республика Беларусь),  20-21 октября 2005 г.; Международной научно–практической конференции, посвященной 50- летию ВНИИВВиМ 13-14 ноября 2008 г. «Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными, экзотическими и малоизучен-ными инфекционными болезнями животных». Покров, 2008; Международной научно-практической конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства и пути их решения» Дубровицы ВИЖ. 21-23 октября 2008г.; Всероссийской научно-практической конференции «Инновационные пути развития животноводства». КЧР, Черкесск, 2009 г.; 6-ой международный радиобиологический съезд, Москва, 25-28 окт. 2010.

Публикации результатов исследований. Основные положения работы опубликованы в 24 научных статьях, тезисах, в том числе в 8 статьях в изданиях, рекомендованных ВАК РФ; на основании полученных результатов защищены: 1 патент РФ и 1 Европатент.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 325 страницах текста компьютерного набора, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, заключения, выводов, предложений производству, приложений. Работа иллюстрирована 90 таблицами, 32 рисунками. Список литературы включает 307 источников, в том числе 105 иностранных.

2. Материал и методы исследований

Экспериментальная работа была выполнена за период 1999-2009 гг на лабораторных животных – белых мышах, белых взрослых крысах, эмбрионах и новорожденных крысятах, а также на коровах и молодняке крупного рогатого скота (КРС) черно–пестрой породы. Всего в работе использовано: около 300 голов коров, 130 бычков в возрасте 6-7 месяцев и 8-9 месяцев; 10 мышей; 56 крыс, 220 эмбрионов крыс, 214 новорожденных крысят.

В качестве высокомолекулярных водорастворимых полимеров были использованы полианионит – ПЭККА, а так же поликатиониты ВПК. Оба полимера не имеют запаха, не горючи, не взрывоопасны.

Полианионит ПЭККА - натриевая соль сополимера этиленкарбоновой кислоты и ее амида, является высокомолекулярным анионным водораство-римым полимером, который имеет линейную структуру молекулы. Реакцион-носпособными группами макромолекулы ПЭККА являются амино- и карбок-сильные группы, способные к образованию межмолекулярных связей с моле-кулами белков и ионов металлов и других заряженных ионов. Молекулярная масса полимера в экспериментах,  в среднем, составляла 106 Да. В экспериментальной работе использовали водные растворы ПЭККА, которые являются бесцветными слабо опалесцирующими жидкостями, с  вязкостью 20 100 мм2/с, pH 5-8, устойчивы при хранении: температура хранения -  от 0 до +25 0С.

Поликатионит ВПК-402 - высокомолекулярный катионный водораст-воримый полимер,  имеющий линейно-циклическую структуру молекулы и химическую формулу – полидиметилдиаллиламмоний хлорид. Активной группой поликатионита ВПК-402 является  четвертичная аммонийная группа. В водном растворе полимерная молекула поликатионита, за счет диссоциации четвертичной аммонийной группы на ионы, приобретает положительный заряд и способность связывать отрицательно заряженные  ионы. В экспериментах использовали три марки водных растворов ВПК, с молекулярной массой  от 3х105 до 106 Да. Внешний вид растворов ВПК–бесцветная до желтого цвета, однородная по консистенции жидкость без посторонних включений, содержит до 10 % хлористого натрия, кинемати-ческая вязкость не менее 2 мм2/с,  рН  от 5 до 8, устойчив к действию температур от - 40 0С до + 60 0С.

Лабораторные исследования проводили на базе ВНИИСХРАЭ. Определяли физико-химические свойства ВВП; гематологические, биохими-ческие, иммунологические показатели крови КРС. Величина рН растворов определялась с помощью иономера И-130, измерение оптической плотности растворов–на фотоколориметре КФК–2 при длине волны–540 нм. Концент-рацию бычьего сывороточного альбумина в водных растворах определяли с использованием биохимической системы FP – 901М (фирма Labsistems, Финляндия). Измерение концентрации  меди, цинка, свинца и кадмия в водных растворах полимерных комплексов, а также содержание микро- и макроэлементов  в молоке и сыворотке крови животных проводилось атомно-абсорбционным методом на спектрометре Varian SpectrAA 250 Plus Report; содержание  137Cs в образцах кормов и молока – на гамма-спектрометре марки «InSpector» модель–1250. Токсические, генотоксические, эмбриоток-сические, туморогенные свойства ВВП определяли на крысах в лаборатории токсикологии ВНИИВСГЭ в соответствии с «Методическими рекоменда-циями по оценке мутагенной активности препаратов, применяемых в живот-новодстве» (1988) и «Методами определения токсичности и опасности химических веществ» (1970), а также использовали методы Сперанского (1965), Шумской, Карамзиной (1966) и др..

Исследования по физиологии пищеварения были выполнены в условиях вивария ГНУ ВНИИФБиП на базе лаборатории пищеварения. Во  всех физиологических экспериментах, в которых изучали влияние Солуната на переваримость основных питательных веществ в преджелудках и кишеч-нике жвачных животных, использовали оперированных коров, которые имели фистулу рубца и 12-перстной кишки (Алиев, 1985).

С целью изучения влияния ВВП и других химических веществ на про-цессы, протекающие в рубце, в опытах на быках была определена распадаемость кормов рациона. Распадаемость сырого протеина концентрированных белковых кормов рациона в рубце определяли методом, изложенным в «Методических рекомендациях» (Боровск, 1987). Для этого  через фистулу в содержимое рубца помещали нейлоновые мешочки с образцами белковых кормов (шрот сои или жмых подсолнечника), обработанные разными химическими веществами: альдегидами (формальдегид, ацетальдегид, глутаральдегид); спиртами (этиловый, изопропиловый, бутиловый, изоамиловый); ВВП (полиизопропиленкар-боновая кислота, натриевая соль сополимера этиленкарбоновой кислоты и ее амида), а также клеящими веществами.

В образцах корма и остатках кормов после инкубации определяли ко-личество сухого вещества (СВ) и  сырого протеина (СП) (Методы исследо-вания питания с.-х. животных, 1998). Растворимость сырого протеина кормов определяли in vitro по методу, описанному Турчинским с соавт.(1987).

Для изучения влияния Солуната на переваримость основных питательных веществ в сложном желудке и кишечнике жвачных животных были проведены 2 эксперимента на трех лактирующих коровах со среднесуточным удоем на период опыта около 20 кг, которые были на третьем месяце лактации. Животные получали рационы, общепринятые по структуре и сбалансированные по основным питательным веществам и энергии согласно действующим нормам кормления  (Нормы и рационы кормления с.х. животных, 1985).

1 эксперимент был проведен методом периодов с использованием схемы латинского квадрата. Основной рацион контрольных животных и опытных, получавших Солунат, был одинаковым. В контрольный период животные получали основной сено-силосно-концентратный рацион, а в опытный период в состав комбикорма для животных  опытной группы был включен Солунат, в дозе 500 мг/(гол*сут). В конце каждого периода, продолжительностью 21 день, проводился суточный опыт по сбору дуоденального химуса, в котором было определено количество поступившего микробного и кормового белка. В этом опыте пользовались индикаторной методикой.  Определено поступление из сложного желудка сухого вещества (СВ), органического вещества (ОВ), микробного и кормового протеина, аммонийного азота, липидов, летучих жирных кислот (ЛЖК), крахмала, фракций клетчатки. Был также проведен балансовый опыт для определения переваримости основных питательных веществ в кишечнике коров на основе анализа химуса и кала.

2 эксперимент был проведен на тех же коровах при тех же условиях содержания и кормления, что и в эксперименте 1, с использованием метода in sacco. При этом была определена распадаемость протеина и фракций клетчатки кормов рациона, а также переваримость этих веществ в кишечнике. Во всех опытах проведен подробный химический анализ кормов рациона. Регистрировался фон рубцовой ферментации путем определения количества бактерий и инфузорий рубца, целлюлозолитической, амилоли-тической активности, концентрации основных конечных метаболитов (ацетат, пропионат, бутират, NH3).

Для оценки влияния Солуната на микробиологические и ферментатив-ные процессы, протекающие в рубце, в динамике, в конце каждого опытного периода (на 21-й день) отбирали пробы рубцового содержимого. Взятие проб проводили в 7.00 (до кормления), 11.00 (через 3 часа после кормления) и 13.00 ч (через 5 часов после кормления). В рубцовой жидкости определяли общую концентрацию ЛЖК методом паровой дистилляции на аппарате Маркгама с последующим определением соотношения кислот на газовом хроматографе (Хром-42); концентрацию аммиака - микродиффузионным методом в чашках Конвея;  рН – на рН-метре; буферную емкость, целлюлозолитическую и амилолитическую активность, количество бактерий и инфузорий - по методам, изложенным в руководствах («Методы исследования пищеварения жвачных», 1987; «Изучение пищеварения у жвачных животных», 1987; «Изучение микрофлоры преджелудков у жвачных», 1977). В конце каждого опытного периода отбирали пробы дуоденального химуса в количестве 200 мл (через каждые 4 ч) для составления среднесуточной пробы. Определение объёма химуса, проходящего через начальную часть двенадцатиперстной кишки, проводили методом инертных индикаторов. В полученных пробах определяли концентрацию хрома на фотоэлектроколориметре согласно общепринятой методике. В средних пробах химуса определяли активность ферментов: трипсина, амилазы («Методы анализа пищеварительных ферментов», 1987; «Методы биохимического анализа», 1998); количество СП - по количеству азота, определяемого по Кьельдалю; аммонийный азот – микродиффузным методом в чашках Конвея; протеин микроорганизмов–по диаминопимелино-вой кислоте (ДАПК) и по пуриновым основаниям (Zinn, 1986). Расчет количества бактериального протеина проводили на основе полученного отношения азота ДАПК к азоту в СВ фракций бактерий, выделенных из рубцового содержимого методом дифференциального центрифугирования. Влияние полимерной добавки на эффективность микробного синтеза (г мик-робного азота/кг переваренного ОВ) и поступление микробного азота в 12-перстную кишку, оценивали по пуриновым основаниям, исходя из предположения, что в общем азоте микробов 15 % N приходится на азот пуриновых оснований (Zinn, 1986). Количество нераспавшегося кормового протеина, поступающего из преджелудков в кишечник, рассчитывали по разнице между количеством общего азота химуса и  азотом микроорганизмов и эндогенных поступлений. 

Научно-производственные опыты были проведены методом групп-аналогов на базе молочно-товарных ферм: АО «Кривское» Калужской области; ЗАО «Кузнецовский комбинат» Московской области; ООО «Хвалово» Ленинградской области;  колхоза им. Фрунзе и «Оскольские просторы» Белгородской области; "Деменки" ГУ «Новозыбковская государственная сельскохозяйственная опытная станция ВНИИА», Новозыбковского района Брянской области; КСУП «Дубовый Лог», Добрушского района Гомельской области. В экспериментах использовали клинически здоровых животных. Животные контрольных и опытных групп содержались в одинаковых зооветеринарных условиях. Кормление осуществлялось по рационам, используемым в данном хозяйстве, которые соответствовали действующим нормам (Калашников и др., 2003) и были одинаковыми для контрольной и опытных групп. Схемы проведения опытов для удобства восприятия описаны в соответствующих разделах перед изложением фактического материала исследований. Влияние полимерной добавки на здоровье  крупного рогатого скота оценивали с применением методов клинического, гематологического и иммунологического исследования, а также биохимического анализа. Клиническое обследование проводили общепринятыми методами. Количество эритроцитов и гемоглобина определяли фотоколориметрическим методом, общее количество лейкоцитов подсчитывали в камере Горяева,  лейкоцитарную формулу определяли  в мазках  крови (окрашенных по Романовскому)  общепринятым методом. Активность ферментов и содержание метаболитов в сыворотке крови, в том числе общего белка, определяли с помощью полуавтоматической биохимической системы FP-901М. Концентрацию витаминов А и Е определяли  общепринятыми методами («Лабораторные методы в ветеринарии: биохимические и микологические», 1991). Для оценки иммунного статуса определяли бактерицидную и -литическую активность крови (Бухарин, 1985; Саруханов, Грудина и др., 2005); содержание гамма-глобулинов и фагоцитарную активность нейтрофилов определяли общепринятыми методами, концентрацию циркулирующих иммунных комплексов – с применением полиэтиленгликоля 6000. Молочную продуктивность коров определяли контрольным измерением утреннего и вечернего удоев (индивидуально каждой коровы). Мясную продуктивность молодняка определяли путем индивидуального взвешивания. Для изучения качества молока определяли: плотность молока–ареометром, жирность–кислотным методом, белок–колориметрическим методом, механическую загрязненность–фильтрованием, бактериальную загрязненность–редуктаз-ной пробой, термоустойчивость–алкогольной пробой, кислотность–титрова-нием. Концентрацию 137cs в мышечной ткани крупного рогатого скота определяли путем прижизненной дозиметрии животных с использованием прибора СРП-68-01 с коллиматором. 

3. Результаты исследований

3.1. Методические подходы по разработке добавок нового типа на основе ВВП

Теоретической основой возможности использования ВВП в качестве активного вещества нового типа кормовых добавок, является свойство этих полимеров образовывать комплексы с молекулами других соединений, имеющих заряд, например, с белками или ионами металлов за счет группировок - «векторов», которыми могут являться амино- , карбоксильные группы и др.. Такие комплексы отличаются высокой массовой долей белковых молекул и, соответственно, незначительной массовой долей полимера. Очевидно, используя свойство полимеров образовывать комплек-сы с белками при определенных условиях, можно связать в рубце часть кормового белка («защитить» его от распадаемости под действием микрофлоры рубца) и увеличить его усвоение организмом жвачных животных в нижележащих отделах желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). За счет этого возможно добиться увеличения продуктивности жвачных животных. В то же время, способность полимеров образовывать комплексы с ионами металлов будет препятствовать всасыванию 137cs в организм и обусловит снижение уровня радиоактивного загрязнения животноводческой продукции.

В настоящее время, по-видимому, единственным нашедшим практи-ческое применение способом, снижающим всасывание 137Cs из ЖКТ, является сорбция радиоцезия специфическими сорбентами на основе ферроцианидов, которые являются нерастворимыми гетерогенными сорбентами, вводимыми в корма сельскохозяйственных животных. Использование гетерогенных сорбентов для сорбции 137Cs в условиях ЖКТ сельскохозяйственных животных осложняется рядом существенных недостатков, присущих гетерогенным  сорбентам, проистекающих из их агрегатного состояния: перенос ионов металлов к поверхности сорбента происходит, главным образом, путем молекулярной диффузии, скорость которой довольно мала. Расстояния, которые необходимо пройти ионам металлов для достижения мест адсорбции, относительно велики и соизмеримы по порядку величины с размерами зерен адсорбента (десятки микрометров). Поэтому значительная доля ионов металлов может успевать всасываться стенками ЖКТ раньше, чем произойдет их сорбция гетеро-генным сорбентом. Кроме того, эффективность процесса сорбции снижается из-за того, что существенная доля реакционно-способных по отношению к сорбируемым ионам центров находится в глубине зерна сорбента. Поэтому доступ к ним еще более затруднен.

В связи с этим ясно, что наиболее эффективными могут стать сорбенты гомогенно (на молекулярном уровне) распределяющиеся в воде и содержимом пищеварительного тракта. Создание таких сорбентов (растворимый сорбент) позволило бы снять диффузионные затруднения в процессе сорбции и тем самым повысить эффективность. Способность ВВП растворяться в воде, а так же  образовывать комплексные соединения с ионами металлов, может быть использована для создания растворимых сорбентов в виде кормовых добавок, сорбирующих радиоактивные изотопы, в том числе радиоактивный цезий. Ввиду того, что крупные молекулы ВВП не способны проникать через клеточные барьеры во внутренние среды организма, комплексы высокомолекулярных полимеров с ионами металлов не будут проникать в кровь, но будут выводиться с экскрементами, таким образом будет снижаться содержание 137Cs как в организме животных, так и в продуктах животноводства – молоке и мясе.

3.1.1. Химические и биологические свойства ВВП

Химические и биологические свойства ВВП определяются их макромолекулярной природой. Главная особенность ВВП состоит в том, что в водных растворах их макромолекулы приобретают множественные электрические заряды, т.е. превращаются в полиионы, которые могут образовывать комплексы с молекулами белка, аминокислот, ионами металлов и другими соединениями, имеющими заряд, за счет солевых связей, возникающих вследствие кулоновского взаимодействия противоположно заряженных групп указанных выше соединений и растворенного в воде полимера. Образование таких комплексов не приводит к денатурации белка, так как между белковыми молекулами и полимером не образуется стойких необратимых химических соединений с разрушением нативной структуры белковых молекул, и комплексы существуют только за счет кулоновских взаимодействий. Очень важно отметить, что в растворе цепочка линейного полиэлектролита, нагруженная белковыми молекулами, не прилипает к ним всеми своими звеньями. В частице комплекса сохраняются достаточно длинные свободные участки линейной цепи в виде петель или свободных концов, которые обеспечивают потенциальную возможность дополнитель-ного многоточечного связывания с другими молекулами белка.

Важными свойствами интерполимерных комплексов являются, способность легко вступать в реакции макромолекулярного замещения в растворе (поиск оптимума), что характерно и для комплексов полиэлектролитов с глобулярными белками. Прямые экспериментальные доказательства существования макромолекулярного обмена в растворах комплексов глобулярных белков с синтетическими полиэлектролитами получены в системе бычий сывороточный альбумин и поли-N-этил-4-винилпиридиний бромида Изумрудовым с коллегами (1985). Другим не менее важным свойством интерполимерных комплексов является их способность к многоточечному кооперативному взаимодействию с другими химически комплементарными макромолекулами с образованиием устойчи-вых интерполимерных комплексов или к многоточечной кооперативной сорбции на химически комплементарных поверхностях. В экспериментах Дикова с соавт. (1979) было установлено, что ВВП могут положительно влиять на активность ферментов. Белковая глобула фермента при связывании с ВВП может приобрести новые свойства, подчас важные с практической стороны. Так, при включении SH-содержащих ферментов в комплексы с ВВП (поликатионами) достигается значительная стабилизация фермен-тативной активности.

3.1.2. Определение сорбционных свойств ВВП in vitro. Для разработки кормовых добавок на основе ВВП с целью применения их в животноводстве в лабораторных условиях были изучены сорбционные свойства ВВП: полианионита – ПЭККА по отношению к положительно заряженным ионам (ионам металлов), и свойства поликатионита - ВПК- 402 по отношению к отрицательно заряженным ионам  Cl и  [SO4 ] 2.

Для изучения сорбционных свойств ПЭККА по отношению к ионам металлов были разработаны качественные и количественные методы. В опытах in vitro с использованием прибора для диализа (горизонтальными ячейками, с размерами пор разделительной мембраны 2,5-4,0 нм) по изучению сорбционных свойств ВВП было определено, что степень сорбции ионов меди, цинка, кадмия и свинца составляла 90 – 98 % при рН  5,0- 7,5. При понижении рН степень сорбции ионов металлов ПЭККА уменьшалась и при рН <3 большая часть комплексов распадалась на ионы. Таким образом, было показано, что процесс образования комплексов с ионами металлов зависит от кислотности среды. Тем же методом диализационного равновесия проводили оценку сорбционных свойств поликатионитов на примере ВПК. Была изучена конкуренция ионов Cl и [SO4]2 за связывание с полимером. Установлено, что при рН растворов = 5,5 ионы хлора практически полностью обмениваются на ионы [SO4]2, равновесие наступает через 6 суток в стационарном режиме, без перемешивания.

Таким образом, экспериментальные данные показали, что катионный полимер ВПК обладает хорошей сорбционной способностью по отношению к отрицательно заряженным ионам, в данном случае ионам [SO4] 2

3.1.3. Исследование in vitro диффузионных свойств ВВП по отношению к мембранам клеток. Были сделаны теоретические расчеты радиуса инерции (RG) макромолекулярного клубка полимера ПЭККА на основании  величины молекулярной массы полимера, которые показали, что RG указанного полимера составил 100 нм, что значительно больше размера канальцев мембран клеток. Если RG существенно превосходит размер каналов клеточных мембран, то макромолекула не сможет преодолеть клеточный барьер. Это было подтверждено в экспериментальных исследованиях по изучению диффузионных свойств ВВП с использованием горизонтальных и вертикальной ячеек, которые показали, что мембраны  с  размерами  пор, соизмеримыми с размерами канальцев клеточных мембран, равные  2,5 – 4,0 нм  (в горизонтальных ячейках прибора для диализа) и 40 – 50 нм (в вертикальной ячейке) не проницаемы для молекул ВВП. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ВВП не смогут преодолеть мембраны клеток эпителия ЖКТ животных.

Результаты проведенных опытов позволяют сделать заключение о том, что исследованный полимер не будет всасываться в кровь и попадать во внутренние органы животных и, следовательно, в продукты животноводства. По-видимому, постепенно продвигаясь по пищеварительному тракту, ВВП не попадая во внутренние среды, могут полностью выводиться из организма животных.

3.1.4. Изучение механизмов взаимодействия ВВП и белков in vitro и в рубце жвачных животных. С целью изучения механизмов взаимодействия белков с ВВП (анионный полимер ПЭККА и катионный ВПК-402) были проведены опыты in vitro по изучению способности полимерных молекул образовывать комплексы с водорастворимым (модельным) белком – бычьим сывороточным альбумином (БСА).

Изучение динамики  образования комплексов белка с полимерами ПЭККА и ВПК проводили путем использования метода титрования. Поскольку избыток белка значителен по сравнению с количеством полимера в ЖКТ жвачных животных, использовали  2 % раствор БСА и титровали его  0,1% раствором одного из указанных полимеров. Анализ результатов эксперимента показал, что образование комплексов полимера (ВПК) с БСА происходило в широком интервале избытка белка по отношению к данному  полимеру: от 40 до 8000. По данным эксперимента было рассчитано, что 1 г ВПК способен присоединить 21 г белка БСА. В аналогичных опытах с ПЭККА определено, что белок-полимерные комплексы образуются уже при соотношении белка к ПЭККА 40:1  и при рН  7,3 – 7,4  эти комплексы растворимы.

Взаимодействие ПЭККА с белками в условиях, имитирующих ЖКТ. В связи с тем, что  содержимое разных отделов желудочно-кишечного тракта  имеет различные значения рН, представляло интерес выяснить влияние концентрации водородных ионов на степень связывания белков с полимерными молекулами. Для изучения взаимодействия белков (БСА) с полимерами (на примере ПЭККА) были  проведены эксперименты, в которых  были заданы параметры, близкие к условиям желудочно-кишечного тракта: кислотность и температура среды, соотношение белок-полимер, длительность взаимодействия полимера с белком. Опыты проводились при температуре 38  0С, при рН среды от 5,0 до 6,5 (кислотность среды, близкая к содержимому рубца) и при рН 1,5 (кислая среда сычуга); длительность взаимодействия равнялась 24 часам. С учетом обратимой сорбции полимера на частицах корма, а также высокой вязкости полимера, можно предположить наличие кумуляции ПЭККА, за счет чего присутствующая доза полимера в рубце коров может быть больше, чем ежедневно задаваемая коровам (500 мг) и может составлять не менее 1,0 г. Расчеты показали, что соотношение полимера и сырого протеина в рубце будет составлять, примерно, 0,38•10–3 . В экспериментах показано, что для образования интерполимерных комплексов ПЭККА с БСА оптимальная кислотность среды (рН) – 5,0÷6,5 (в этом же диапазоне находится и рН рубца у КРС), а при рН = 1,5-комплексы не образуются. По данным, полученным в эксперименте, было рассчитано, что при рН 5,0÷6,5 и при указанном выше соотношении белок/полимер, 1 г ПЭККА может присоединить 70 ÷90 г низкомолекулярного белка БСА.

Проведенные эксперименты свидетельствуют о том, что в условиях ЖКТ, где наблюдается избыток белка и недостаток полимера, только часть белка связывается с полимером. Остальной белок будет доступен для функциональной активности рубцовой микрофлоры. Поэтому, вводимые количества полимера не должны нарушать жизнедеятельность микрофлоры.

3.1.4.2. Изучение способности ВВП снижать распадаемость протеинов кормов. В настоящем разделе приводятся результаты собственных исследований влияния  ВВП на степень распадаемости сухого вещества (СВ) и протеинов концентрированных белковых кормов в рубце КРС, а также даны результаты по влиянию ВВП на растворимость протеинов кормов в буферных растворах (in vitro). Эффективность ВВП определялась в сравнении с известными защищающими агентами – альдегидами, спиртами, а так же с клеящими веществами. Распадаемость СВ и протеинов кормов определяли методом инкубации в рубце быков нейлоновых мешочков с испытуемыми образцами концентрированных белковых кормов. Мешочки с образцами опускали через фистулу в нижнюю часть рубца.

В опытах показано, что величины степеней защиты СВ и протеина обработанных кормов, инкубированых в рубце, а также степень защиты (СЗ) протеина кормов в буферных растворах коррелирует между собой. Так, СЗ от распада протеина в рубце и его растворимости в буферных растворах для образцов подсолнечного жмыха, обработанных 1% растворами формальде-гида и глутаральдегида и 0,01 % раствором ПЭККА очень близки между собой (78,2 и 74,4 %;  67,1 и 61,5 %;  50,8 и 54,7 %, соответственно). Это свидетельствует в пользу предположения о том, что микробиальному распаду в рубце в значительной степени подвергаются молекулы протеина, перешедшие в раствор и, следовательно, «защитное» действие добавок связано с уменьшением растворимости протеина. Следует отметить также, что при близких значениях СЗ от распада протеинов в рубце, эффект достигается при использовании ПЭККА в концентрациях 100 раз меньших, чем концентрации альдегидов.

Однако, ввиду высокой токсичности альдегидов, практическое использование их для «защиты» протеинов кормов от разложения в рубце, очевидно, является проблематичным. Более приемлемой представляется защита протеинов в рубце жвачных с использованием ВВП, в частности, испытанного нами в эксперименте полимера ПЭККА. Безвредность для здоровья животных и человека, низкая стоимость, незначительные концентрации полимера, дающие положительный эффект, простота процесса внесения в корм дают основание считать водорастворимые полимеры перспективными для разработки на их основе принципиально новой экологически чистой высоко рентабельной технологии повышения продуктивности сельскохозяйственных животных.

3.1.4.3. Влияние «склеивающих» свойств ВВП на растворимость кормового белка in vitro. Проведенные эксперименты показали, что обработка кормов клеями, приводящая к «простому» склеиванию (агрегации) частичек корма, явно не дает заметного снижения распадаемости протеина в рубце. В патентной литературе в качестве одного из путей «защиты» (снижения перехода белков в раствор и их распада в рубце) описано покрытие частиц белоксодержащего корма пленками (на основе солей жирных кислот, полимеров и др.), нерастворимых в нейтральных и слабощелочных средах (в рубце), но растворимых в кислых средах (в сычуге) (Патент № 4.181.700, 1980; Патент № 2113121А, 1982). Однако, при этом положительный эффект достигается только при использовании пленкообразователя в количествах, соизмеримых или превышающих количество защищаемого корма, что на несколько порядков превосходит количество ПЭККА, необходимое для эффективной защиты белков корма от деградации в рубце (Грудина, 2006). Представляется весьма маловероятной возможность эффективной защиты кормовых белков вследствие образования на поверхности частиц корма пленок ПЭККА при столь малом количестве применяемого полимера.

Очевидно, наиболее вероятным механизмом уменьшения перехода протеинов кормов в раствор и эффективной защиты их от распада под действием микрофлоры рубца является связывание белков полимером с образованием водонерастворимых комплексов. При этом массовая доля белков в таких комплексах должна многократно  превосходить массовую долю полимера (Зайцев и др., 1992; Тенфорд, 1965). Поскольку в ЖКТ всегда присутствует избыточное количество белка по отношению к полимеру, то образуемые интерполимерные комплексы, в частности в рубце, будут нераст-воримы, что не позволит протеинам кормов перейти в раствор и сделает недоступными для усвоения микрофлорой рубца.

3.2. Изучение биологических свойств кормовой добавки «Солунат», разработанной на основе ВВП

Экспериментальные данные, приведенные в главе 3.1, позволили разработать принципиально новую кормовую добавку на основе ВВП (полианионита ПЭККА), получившую коммерческое название – «Солунат». Она имеет двойное назначение: повышать продуктивность животных, а также снижать поступление 137Cs в продукцию животноводства. При разра-ботке кормовой добавки Солунат были соблюдены основные требования, предъявляемые к вновь создаваемым препаратам и кормовым добавкам.

3.2.1. Характеристика Солуната кормовой добавки нового типа. Солунат представляет собой однородную вязкую бесцветную слабо опалесцирующую жидкость, без запаха, со значениями рН, близкими к нейтральным. Массовая доля основного вещества составляет 1,5 – 3,0%. В рецептуру препарата не входят тяжелые металлы, генно-инженерно-модифицированные организмы, гормоны, антибиотики или какие-либо другие биологически активные вещества, способные оказывать негативное действие на здоровье животных. Препарат предназначен для орального применения жвачными животными в смеси с высокобелковым концентрированным кормом. При этом Солунат не служит источником питательных веществ для животных. Он является лишь фактором повышающим эффективность использования кормового протеина,  а также снижающим всасывание 137Cs из ЖКТ, выполняя функцию частичной защиты кормового белка от распада в рубце жвачных; увеличивая контактную поверхность субстрат-фермент; усиливая процессы всасывания конечных продуктов, образующихся в процессе диссимиляции питательных веществ, а также функцию неспецифического сорбента, снижающего поступление радионуклида 137Cs  в продукцию животноводства.

Основное действующее вещество Солуната–полианионит ПЭККА– имеет структурную формулу:

       R– CH2 – CH –        

       |        

А

n,

где:  R – радикал;  А – активная полярная группа:  –COО  или  –NH2

При растворении в воде молекула полимера многократно набухает, значительно увеличивает свой обьем, активные группы оказываются на поверхности и имеют доступ к амино- и карбоксильным группам белков, образуя белок – полимерные комплексы. Важным свойством Солуната является создание им большой контактирующей поверхностной площади (за счет функционирования каждой молекулы полимера) в полости пищеварительного тракта.

3.2.2. Изучение влияния Солуната на организм лабораторных животных. Широкое использование и внедрение в практику вновь созданного препарата или кормовой добавки предполагает отсутствие у них токсичности. Для определения безвредности Солуната были изучены его токсические свойства и отдаленные последствия при длительном применении препарата.

3.2.2.1. Токсикологическая оценка Солуната

3.2.2.1.1. Исследование острой токсичности. Исследование острой токсичности проводили на белых мышах, массой 20-25 г. На основании результатов исследований можно сделать вывод, что максимально-действующая доза полимера, взятого для испытаний находится на уровне, превышающем 5000 мг/кг живой массы. Из этого следует, что Солунат является малотоксичным веществом, и его следует отнести к IV классу опасности по ГОСТ 12.1.0076.

3.2.2.1.2. Изучение показателей субхронической тосичности.

Субхроническую токсичность Солуната изучали на белых крысах, которым задавали Солунат вместе с кормом, после тщательного предварительного перемешивания, в дозе (по действующему веществу) около 10 мг/кг живой массы. Эксперимент продолжался в течение двух недель. С целью выявления признаков субхронической токсичности Солуната у крыс исследовали показатели, характеризующие как общее состояние организма, так и функциональную активность основных систем организма. В течение периода наблюдения (срок эксперимента) общее состояние крыс оставалось ненарушенным. Они адекватно реагировали на внешние раздражители, полностью поедали корм, пили без особой жадности. Динамика живой массы крыс, получавших ежедневно с кормом Солунат свидетельствует о том, что при кормлении крыс в течение двух недель кормами, содержащими Солунат, относительный прирост живой массы крыс в конце опыта составлял в контрольной группе 29,7%, а в опытной – 34,0%.

Действие ВВП, входящего в состав кормовой добавки Солунат, на гемопоэз оценивали путем анализа клеточного состава (количественного) периферической крови животных и уровень гемоглобина. Было показано, что Солунат, в указанных выше дозах (по активному веществу), при введении в корм не оказывал отрицательного влияния на концентрацию гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов.

Изучение влияния Солуната на функциональную активность центральной нервной системы проводили путем определения суммационно-порогового показателя. Величины суммационно-порогового показателя, отражающие состояние нервно-мышечного аппарата, не отличались у животных из обеих групп.

Функциональную активность выделительной системы определяли путем оценки функционального состояния почек. Суточный диурез, удельный вес мочи, содержание белка в моче животных находились в пределах контрольных величин. Это свидетельствует о том, что добавка Солунат не оказывает отрицательного влияния на функциональное состояние почек.

В качестве показателей жизнедеятельности организма животных и наличия отрицательного влияния химических веществ на функции организма является содержание в крови сульфгидрильных групп (SH-групп) и общего белка в периферической крови. SH-группы характеризуют состояние белкового обмена в организме животных. В случае токсического воздействия на организм вредных азотсодержащих веществ, (эндо- или экзогенного происхождения, в том числе, аммиака) сульфгидрильные группы служат антидотами. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии различий в уровне содержания общего белка и SH-групп в сыворотке крови интактных и опытных животных, получавших в течение 2-х недель Солунат, что является одним из доказательств отсутствия в составе Солуната токсических веществ.

Одним из основных факторов, который отражает состояние естест-венной резистентности организма,  можно считать  уровень иммуноглобу-линов в сыворотке крови лабораторных животных. Иммуноглобулины вступают в связь с различными антигенами химической и биологической природы, нейтрализуя их отрицательное действие на организм.

Таблица 1

Влияние Солуната на различные системы организма крыс

Показатель

Контроль

Опыт

Концентрация гемоглобина, г %

12,4 ± 0,11

12,3 ± 0,21

Концентрация лейкоцитов, тыс/мкл

6,32 ± 0,21

6,44 ± 0,16

Концентрация общего белка в сыворотке крови, г %

8,4 ± 1,1

8,7 ± 1,2

Концентрация иммуноглобулинов, мг/мл

36,2 ± 3,6

37,8 ± 4,1

Общее количество SH-групп, мкмоль/л

12,3 ± 0,6

12,7 ± 0,7

Количество межпальцевых сокращений

на электродах

3,8 ± 0,09

4,0 ± 0,05

Диурез, мл

2,4 ± 0,1

2,3 ± 0,2

Белок в моче, мг %

23,8 ± 3,7

19,4 ± 2,4

Полученные данные свидетельствуют об отсутствии иммунного ответа на введение в организм с кормом добавки Солунат и, следовательно, об отсутствии отрицательного воздействия испытуемой добавки на организм крыс.

Отсутствие выраженных изменений каких-либо показателей исследованных в эксперименте и приведенных выше (табл. 1), характери-зующих состояние и функционирование различных систем организма опытных крыс, согласуется с результатами морфологических исследо-ваний. Так, весовые коэффициенты печени, почек, сердца, селезенки не отличались от контрольных величин.

3.2.2.2. Исследование отдаленных последствий Солуната

3.2.2.2.1. Мутагенная активность Солуната. Мутагенную актив-ность Солуната изучали in vitro на индикаторных штаммах сальмонелл (тест Эймса) ТА-1535 и ТА-1538 без метаболической активации, а также методом учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга белых беспородных крыс.

Полученные данные свидетельствуют о том, что в опытах с ВВП уровень мутаций не отличался от числа мутаций, вызванных дистиллированной водой.

Результаты опытов на белых крысах по исследованию цитогенетичес-ких изменений клеток костного мозга показаны в табл. 2.

Таблица 2

Цитогенетический анализ клеток костного мозга белых крыс, которым давали Солунат

Группа живот-ных

Количество живот-ных

Просмот-рено клеток

Количество клеток, %

Митотичес-кий индекс

с истинны-ми аберра-циями

со слипаниями

с

отстава-нием

Опыт

8

2000

3,8 ± 0,5

0,3±0,08

0,02±0,0

2,1±0,1

Конт-роль

8

2000

3,6 ± 0,4

0,2±0,06

0,02±0,0

2,1±0,2

Представленные в табл. 2 данные свидетельствуют о том, что введение в рацион белым крысам Солуната в дозе (по активному веществу) 120 мг/кг корма выход истинных хромосомных аберраций и митотическая активность клеток достоверно не отличались от показателей контрольной группы.

3.2.2.2.2. Изучение эмбриотоксического, гонадотоксического и  тератогенного действия Солуната. Репродуктивная функция организма – одна из наиболее интегральных и достаточно лабильных, отражающих общие процессы, происходящие в организме. Изменение показателей этой функции достаточно убедительно выявляется под действием ряда факторов, в том числе и под действием веществ, поступающих в организм с кормом. Для изучения эмбриотоксического, тератогенного и гонадотоксического действия Солуната было подобрано две группы крыс. Крысам подопытной группы (самцы и самки) за неделю до спаривания начали вводить с кормом Солунат в дозе 120 мг/кг корма. В период всей беременности самки продолжали получать Солунат в той же дозе, что и до спаривания.

Таблица 3

Эмбриотоксическое и гонадотоксическое действие Солуната в пренатальный период

Группа животных

Количество оплодотво-ренных крыс

Количество крыс, убитых на 21 день беременности

Количест-во береме-нных крыс

Количество  эмбрионов

Количество  погибших эмбрионов

Масса эмбрионов г

Длина туловища, см

Опыт

10

10

112

0

6,3±0,1

6,5±0,1

Контроль

10

10

108

0

6,2±0,2

6,3±0,3

Данные, приведенные в табл. 3 показывают, что не было отмечено существенных различий в количестве эмбрионов, полученных от опытных и контрольных крыс на 21 день беременности, в пренатальный период. Не было также в той или другой группе погибших эмбрионов. При патологоанатомическом обследовании эмбрионов не установлено каких-либо морфологических изменений. Средняя масса эмбрионов и длина туловища в опытной и контрольной группах были аналогичны.

В табл. 4 приведены данные эмбриотоксического и гонадотоксичес-кого действия Солуната, которые были определены в постнатальный период.

Таблица 4

Эмбриотоксическое и гонадотоксическое действие Солуната в постнатальный период

Группа животных

Количество оплодотворен-ных крыс

Родивших крыс

Количество беременных крыс

Количество крысят

Количество  погибших крысят

Масса крысят при  рождении, г

Опыт

10

10

110

0

7,2±0,5

Контроль

10

10

104

0

7,0±0,4

Как видно из таблицы, не было выявлено  различий между группами в количестве родившихся крысят и их живой массе. В обеих группах не было мертворожденных крысят. При осмотре эмбрионов и новорожденных крысят не было выявлено аномалий в развитии конечностей, туловища, черепа, глаз, а так же внутренних органов.

На основании выполненных исследований можно сделать заключение, что  Солунат,  в  дозах  (по действующему веществу)  120 мг/кг корма,  т.е. 10 мг/кг живой массы) не оказывает мутагенного, эмбриотоксического, гонадотоксического и тератогенного действия на лабораторных животных.

3.2.3. Исследование влияния Солуната на показатели здоровья и обмен веществ у крупного рогатого скота. В данной главе приведены данные, показывающие влияние Солуната на организм КРС с применением клинических, биохимических, гематологических и иммунологических методов исследования. В экспериментах использовали коров черно-пестрой породы в возрасте 4-5 лет. Были составлены две группы коров–аналогов, находящихся в стадии раздоя. Животные из группы 2 не получали Солунат, а животным группы 1 ежедневно однократно давали Солунат в дозе по активному веществу – 500 мг/(голову*сутки), т.е. 1 мг/кг живой массы в смеси с 2 кг комбикорма. Клиническое обследование и гематологические тесты (срок наблюдения 2,5 месяца) не выявили отклонений у животных, получавших Солунат, относительно контроля. Для оценки влияния Солуната на биохимический статус крупного рогатого скота (срок наблюдения - 35 дней дачи Солуната), в плазме крови определяли активность ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ), а также концентрацию общего белка, альбуминов, глобулинов, мочевины, глюкозы, холестерина, фосфора, кальция, витаминов А и Е. Полученные данные сведены в табл. 5. Анализ полученных данных (табл. 5) показал, что применение Солуната способствовало повышению концентрации общего белка с 72,1±4,3 (г/л) до 80,8±1,95 (г/л), в то время как в контроле этот показатель практически не изменился. Это свидетельствует о более полноценном снабжении организма белком при использовании Солуната. Содержание альбуминов в крови животных различались незначительно по группам, однако следует отметить тенденцию к повышению их количества в крови животных группы 1 (получавших Солунат) по сравнению с контролем. Это свидетельствует о лучшей конверсии корма, а также о хорошей функциональной активности печени в группе опытных коров, так как альбумины, практически на 100%, синтезируются только гепатоцитами. Содержание кетоновых тел в крови коров опытной группы составляло 2,6 мг %, что не выходит за пределы физиологической нормы (1,0 – 6,0 мг %). Это свидетельствует о том, что добавка Солунат не оказывает негативного действия на функциональную (детоксикационную) активность печени. Концентрация мочевины в крови у коров обеих групп находилась в пределах физиологической нормы. В то же время в крови опытных животных по сравнению с контролем было более низкое содержание мочевины, что может быть связано со снижением распадаемости протеинов кормов при использовании Солуната.

Таблица 5 

Биохимические показатели крови коров

Показатели

Группа 1

(рацион с Солунатом)

n = 5

Группа 2

(рацион без Солуната)

  n = 5

17.03.08.

22.04.08.

17.03.08.

22.04.08.

Общий белок,

г/л

78,6 ± 1,3

81,9 ± 1,9

78,1 ± 4,9

78,9 ± 4,4

Альбумины,

г/л

30,2 ± 1,2

34,4 ± 1,8

29,8 ± 1,8

30,1 ± 1,1

Глобулины,

г/л

48,4±2,5

47,5±1,6

48,3±3,1

48,8±2,8

Белковый индекс

0,62±0,01

0,72±0,01

0,61±0,01

0,62±0,02

               Мочевина,

ммоль/л

4,51±0,1

3,95±0,2

4,42±0,1

4,45±0,1

АЛТ,

Ед/л

24,9±1,2

25,4±2,3

25,2±3,1

30,14±2,2

АСТ,

Ед/л

66,2±5,5

67,0±4,7

71,8±5,8

72,3±5,1

Холестерин,

ммоль/л

3,25±0,03

3,04±0,02

3,38±0,02

4,6±0,04

Глюкоза

ммоль/л

1,96 ± 0,32

2,14 ± 0,34

2,20 ± 0,16

1,74 ± 0,24

Кальций,

мг %

9,51±0,6

9,60±0,5

9,75±0,6

9,71±0,1

Фосфор,

мг %

6,0±0,30

6,10±0,15

5,85±0,21

5,80±0,40

Витамин А, мкг %

47±4,1

45,0±3,1

46,8±4,6

43,0±2,2

Витамин Е, мкг %

0,95±0,01

0,81±0,02

0,98±0,028

0,79±0,038

Изучение активности ферментов переаминирования (АСТ и АЛТ) показало, что в обеих группах этот показатель был в пределах физиологической нормы, однако, у контрольных коров он был близок к верхнему пределу нормы и был выше, чем у опытных коров, что указывает на большую стабильность клеток печени у коров, получавших Солунат, т.к. АЛТ – фермент, содержащийся в клетках печени (гепатоцитах), а АСТ – в клетках сердца, при их повреждении ферменты выходят в сыворотку крови. Таким образом, Солунат не только не повреждает клеток печени и миокарда, но и, возможно, способствует стабилизации клеточных мембран.

Уровень глюкозы в крови коров группы 1 несколько повысился, в то время как в группе 2 – понизился, что свидетельствует о более высоком энергетическом обеспечении организма животных, получавших Солунат. Более низкое содержание холестерина в крови (табл. 5) опытных коров, по сравнению с контролем, свидетельствует о том, что добавка Солунат не оказывает негативного действия на функциональную (детоксикационную) активность печени и подтверждает факт лучшей обеспеченности опытных коров глюкозой, по сравнению с контрольными животными, т.к. при  недостатке глюкозы, особенно в 1 фазе лактации, организм стремится компенсировать энергетический дефицит путем мобилизации собственных жиров и  окисления аминокислот, в результате чего происходит повышение концентрации холестерина в крови и образование кетоновых тел, что приводит к перерождению печени, снижению продуктивности коров, бесплодию и рождению молодняка с низкой жизнеспособностью. Определение концентрации макро- и микроэлементов в сыворотке крови свидетельствуют о том, что Солунат, не только не снижает содержание элементов в сыворотке крови, но даже несколько увеличивает концентрацию их в сыворотке.

3.2.3.4. Влияние Солуната на иммунный статус (состояние защитных сил) организма. Изучение влияния длительного применения добавки Солунат на основные показатели клеточного и гуморального звена иммунитета крупного рогатого скота проводилось в весеннее-летний сезон года (с марта по июнь), в период сезонного ослабления иммунитета у животных. Иммунологические тесты включали: определение общего числа лейкоцитов и лимфоцитов, показатели фагоцитоза по результатам опсоно-фагоцитарной реакции (ОФР), значения бактерицидной активности сыворотки крови (БАК), количество общего белка, гамма-глобулинов, концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). В качестве тест-объекта при постановк ОФР - были использованы убитые бактерии стафилококка.

Подсчет общего количества лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови показал отсутствие негативного влияния Солуната на росток белой крови. Результаты подсчета лейкоцитов и лимфоцитов приведены в разделе 3.2.3.2. диссертации, в которой показано, что общее количество лейкоцитов за период эксперимента (с марта по июнь) было в пределах физиологической нормы и составляло в опыте и контроле 6,5 – 6,9 тыс/мм3 и 6,3–7,1 тыс/мм3, соответственно. Количество лимфоцитов в опыте составляло 56,3–64,6 %; а в контроле равнялось 57,4–69,8%.

Анализ результатов ОФР показал, что, количество фагоцитирующих нейтрофилов (ФЧ) в цельной крови контрольных животных было выше на начало опыта и составляло 87,8 % по сравнению с опытной группой (80,2 %). Через 1 месяц от начала дачи Солуната фагоцитарное число (ФЧ) в контрольной группе снизилось до 77,8 %, а в опытной ФЧ – повысилось до 85,8 %. Спустя 2,5 месяца – ФЧ в опытной и контрольной группах стало равно 80,4 % и 78,4 %, соответственно. Учет проводился через 30 минут от начала реакции. Таким образом, снижение  активности фагоцитов наблюда-лось у контрольных животных – в апреле (раньше, чем у опытных), а у опытных – в июне. Очевидно, применение полимерной кормовой добавки Солунат не только не оказало негативного влияния на иммунный статус крупного рогатого скота, но и способствовало поддержанию иммунитета на более высоком уровне, чем у контрольных животных.

В качестве контролируемых параметров гуморального иммунитета были выбраны БАК сыворотки крови, количество глобулинов, общего белка и ЦИК. Концентрация общего белка и глобулинов в сыворотке крови не выходила за пределы физиологической нормы. В то же время следует отметить тенденцию к тому, что применение Солуната способствовало повышению концентрации общего белка с с 78,6 ± 1,3 (г/л) до 81,9 ± 1,95 (г/л), в то время как в контроле этот показатель, практически, не изменился (табл. 5).

Таблица 6

Динамика бактерицидной активности (%) сыворотки крови коров

Контроль

Опыт

20.03.2008

(начало опыта)

22.04.08

04.06.08

20.03.08

(начало опыта)

22.04.08

04.06.08

84,5±1,1

80,9±1,1

78,8±3,2

84,18±1,3

81,45±1,9

82,8±1,1

  Изучение динамики БАК активности крови (табл.6), а также образова-ния ЦИК, показало, что добавление в корм Солуната не оказало отрицатель-ного влияния на процесс образования иммунных комплексов, т.к. количество их было не велико и практически не отличалось по группам. БАК крови  коров из опытной группы в течение эксперимента  была всегда выше, чем у контрольных животных.

Анализ полученных данных показал отсутствие токсических свойств у кормовой добавки Солунат. В результате проведенных исследований у животных опытной и контрольной групп значительных различий в изучаемых показателях не отмечено. Кроме того, выявлено некоторое положительное влияние Солуната на иммунологические показатели. Например, в апреле (период сезонно низкой резистентности организма) у животных, получавших Солунат, была несколько выше концентрация общего белка в сыворотке крови, ФЧ и относительная поглотительная способность нейтрофилов по сравнению с контролем.

Таким образом, изучение влияния Солуната в дозе 1 мг/кг живой массы на клинические, гематологические биохимические показатели, а так же на иммунный статус крупного рогатого скота, показало что Солунат не оказывает какого – либо негативного воздействия на организм жвачных животных. Использованная в экспериментах доза Солуната (по основному действующему веществу) – 1 мг/кг живой массы была в 10 раз меньше той дозы, которая задавалась лабораторным животным (крысам) при исследовании субхронической токсичности Солуната (раздел 3.2.2.1.2. диссертации), следовательно, дозы 15 мг/кг живой массы КРС, по-видимому, будут безвредны для животных.

3.2.3.5. Влияние Солуната на развитие плода и отелы коров. С целью определения влияния кормовой добавки Солунат было проведено наблюдение за отелами и новорожденными телятами, родившимися от 10 коров, которым в течение 2-х месяцев сухостойного периода скармливали Солунат в дозе 500 мг по активному веществу. Следует отметить, что роды у коров опытной группы проходили нормально, без осложнений, в  то время как коровы из контрольной группы (10 голов) имели осложнения, чаще всего у них с трудом отходил послед: у 6 коров из 10. Новорожденные телята от коров из обеих групп были хорошо развиты, имели правильное сложение, каких – либо уродств или функциональных нарушений у телят не наблюдали.

3.2.4. Исследование влияния Солуната на процессы пищеварения в желудочно-кишечном тракте жвачных животных. Во время проведения экспериментов основной рацион, который получали коровы, состоял из силоса козлятника восточного (30 кг), сена разнотравного (5 кг), патоки кормовой (1,5 кг) и комбикорма (8 кг). Комбикорм для коров состоял из пшеницы, ячменя, кукурузы, пшеничных отрубей, подсолнечного шрота, минеральных добавок. В табл. 7 показано фактическое содержание в рационе сухого вещества, обменной энергии, органического вещества, сырого протеина, БЭВ, сырой клетчатки, сырого жира, сырой золы.

Таблица 7 

Состав рациона коров (по фактической поедаемости)

Показатели

Опыт

Контроль

Сухое вещество, кг

19,6±0,3

20,1 ± 0,2

Обменная энергия, МДж

180,5±25

185,5±34

Органическое вещество, кг

17,9 ± 0,3

18,7 ± 2,1

Сырой протеин, г

2614 ± 66

2647 ± 48,8

БЭВ, г

10752 ± 230

11357 ± 232

Сырая клетчатка, г

4254 ± 166

4416 ± 128

Сырой жир, г

319 ± 17

326 ± 21

Сырая зола, г

1683 ± 31

1380 ± 31,7

3.2.4.1.Влияние Солуната на процессы пищеварения в рубце КРС.

С целью изучения процессов пищеварения в рубце жвачных животных под влиянием Солуната, было проведено определение уровней образования аммиака и ЛЖК, которые служат показателями интенсивности фермен-тативных процессов в рубце. В экспериментах выявлено, что введение в рацион коров кормовой добавки Солунат сначала незначительно ускоряло процесс образования аммиака и ЛЖК, а затем - снижало. Таким образом, можно предполагать наличие эффекта частичной защиты белка в рубце. Кроме того, следует отметить выраженную тенденцию (р< 0,2) к увеличению значений рН рубцовой жидкости опытных (6,19) животных, по сравнению с контрольными (5,9), особенно в период самой интенсивной ферментации (1-3 часа после кормления). Спад у животных опытной группы активности ферментации  после ее пика через час от начала кормления к третьему часу, судя по снижению уровня аммиака и общего количества ЛЖК в содержимом рубца и постоянно несколько более высокому рH, позволяют предположить действие тормозящего фактора. Можно полагать, что это эффект от полимерной добавки Солунат.

Изучение микробиологических процессов в рубце коров показало некоторое снижение амилолитической активности, а также увеличение количества бактерий и инфузорий в рубце животных опытной группы по сравнению с контролем (табл. 8) По данным, представленным в табл. 7, видно, что в опытной группе количество бактерий и инфузорий несколько выше, чем в контроле. Изучение эффективности микробного синтеза в рубце коров показало, что Солунат снижает на 10% эффективность микробного синтеза при одновременном снижении распадаемости СП грубых кормов рациона на 8,5%.

Таблица 8

Среднесуточные показатели микробиологических процессов в рубце коров контрольной и опытной групп

Группа

Число

бактерий,

млрд/мл

Число

инфузорий,

тыс/мл

Амилолитическая  активность,

Е/мл

Целлюлозолитическая активность, %

Контроль

8,1 ± 0,16

141,6 ± 26,3

41,6 ± 1,45

15,6 ± 0,26

Опыт

8,5 ± 0,16

178,0 ± 21,2

36,8 ± 2,48

14,9 ± 1,1

Исследование распадаемости и переваримости СВ и СП комбикормов в рубце при использовании Солуната, выявило, что в опыте по сравнению с контролем распадаемость СП снижалась на 8,2%. 

3.2.4.2. Изучение переваримости питательных веществ корма в тонком отделе кишечника. Изучение процессов переваривания питатель-ных веществ корма в тонком отделе кишечника проводили, используя данные, полученные в балансовом опыте на основе анализа химуса и кала.

При добавлении Солуната к комбикормам наблюдалось повышение показателей переваримости для всех питательных веществ в тонком отделе кишечника коров. Особенно повышалась переваримость СП – на  9,7 % по сравнению с контролем (табл. 9). Повышение переваримости в кишечнике, очевидно, обусловлено активацией трипсина и амилазы химуса полимерной добавкой. Переваримость СП могла увеличиться и за счет изменения соотношения микробного и кормового протеина, поступающего из желудка.

Полученные экспериментальные данные дают определенные основания в пользу представления о том, что воздействие полимерной добавки Солунат на процессы пищеварения у жвачных животных может сопровождаться оптимизацией среды обитания бактериальной флоры рубца и защитой кормового белка от распада в рубце.

Выявленное в экспериментах повышение переваримости сырого протеина в тонком отделе кишечника, вероятно, связано с активацией пищеварительных ферментов, иммобилизованных на мембранах эпителиаль-ных клеток тонкого отдела кишечника. Кроме того, переваримость питательных веществ корма в ЖКТ связана так же с активностью растворенных ферментов пищеварительных соков.

Таблица 9.

Переваривание питательных веществ в кишечнике коров

Показатели

Контроль

Опыт

Переварено, г

Переваримость,%

Переварено, г

Переваримость,%

Сухое вещество

4287 ± 281

36,0 ± 1,3

4928 ± 421

39,4 ± 2,1

Органическое вещество

2746 ± 174

29,2 ± 1,2

3224 ± 421

32,6 ± 3,4

Сырой протеин

1809 ± 92

62,8 ± 0,61

2130 ± 59,7

68,9 ± 1,1

БЭВ

561 ± 18,3

17,9 ± 2,82

679 ± 37,7

24,9 ± 0,77

Сырой жир

375 ± 61,5

74,4 ± 4,1

414,9 ± 48,2

76,7 ± 1,1

Сырая зола

1540 ± 124

61,6 ± 1,3

1703 ± 172

64,2 ± 4,6

Важным фактором обеспечения оптимальных условий среды для действия ферментов пищеварительных соков является создание большой поверхностной площади контакта фермента с субстратом, что, очевидно, может обеспечить использование ВВП, молекулы которого растворимы в воде и сохраняют свою активность в качестве сорбента как с наружной поверхности глобулярной молекулы полимера, так и с внутренней, при этом активность ферментов не изменяется. Кроме того, как было отмечено выше, белковая молекула фермента, в интерполимерном комплексе может приобретать новые свойства, например, может стабилизироваться ее ферментативная активность. Таким образом, основываясь на представленных выше  данных, можно предположить, что повышение обеспеченности животных протеином при использовании ВВП осуществляется по двум механизмам посредством  образования белок-полимерных комплексов: путем защиты белка от распада в рубце и путем повышения переваримости в тонком отделе кишечника за счет активизации ферментов в тонком кишечнике.

3.2.5. Механизм влияния ВВП, вводимого с кормом в организм животного, на продуктивность крупного рогатого скота

3.2.5.1. Механизм поведения ВВП в желудочно-кишечном тракте жвачных животных. В организм животных ВВП (в составе Солуната) попадает с частичками концентрированных кормов, которые предварительно подвергают обработке Солунатом. Для обработки кормов 0,1% водный раствор Солуната вносится в корм, при тщательном перемешивании. При этом молекулы полимера обволакивают частички раздробленного зерна концкормов и за счет вязкости удерживаются на них. Поступая в организм с обработанным концентрированным кормом, ВВП способны удерживаться на частицах корма, вероятно более суток, постепенно переходя в водную фракцию рубцового содержимого, образуя при этом в рубце комплексные соединения с растворенными белками. Этому способствует кислотность среды рубца, т.к. комплексные соединения ВВП достаточно устойчивы в нейтральной или слабо кислой среде при значениях рН выше 5,0.

Данные, полученные in vivo показали, что защита протеинов концентрированных кормов в рубце, составляла 8,2%. Степень «защиты» белка основного рациона (сена и силоса) от распада в рубце составляла 4,8 %. О существовании эффекта «защиты» белка от распада свидетельствует факт несколько пониженного, по сравнению с контролем, процесса образования аммиака и ЛЖК в рубце в период наиболее активной ферментации (через 3 часа после приема пищи). Что же касается рубцовой микрофлоры то очевидно, полимер не только не оказывает отрицательного влияния на ее жизнедеятельность, но и, видимо, оптимизирует среду ее обитания, т.к. количество как бактерий, так и инфузорий рубца было больше у животных, получавших с кормом ВВП, очевидно за счет нормализации рН в рубце. Оптимизация среды обитания для микрофлоры является важным моментом, т.к. важнейший источник белкового питания для организма жвачных – это бактериальный белок.

Далее белок-полимерный комплекс по ЖКТ поступает из преджелуд-ков в сычуг, где под влиянием высокой кислотности среды комплекс распадается. Защищенный кормовой белок высвобождается и гидролизуется в кислой среде протеолитическими ферментами до полипептидов, которые поступают затем в верхний отдел тонкого кишечника, где окончательно перевариваются до аминокислот и усваиваются организмом. В 12-перстной кишке и тонком отделе кишечника химус имеет среду, близкую к нейтральной или выше. Кислотность этой среды благоприятна для образования интерполимерных комплексов, поэтому здесь, очевидно, снова могут образовываться комплексы ВВП с полипептидами, белками и аминокислотами, которые могут находиться как в содержимом тонкого отдела кишечника, так и прикрепляться к белково-липидной цитоплазматической мембране слизистой оболочки кишечника, в структуру которой входят выступающие структурные белковые молекулы.  В то же время, ВВП могут взаимодействовать не только со структурными белками мембран, но и с ферментами, иммобилизованными на поверхности цитоплазматических мембран. При этом ВВП, вероятно, облегчают процесс всасывания конечных продуктов, т.к. молекулы аминокислот, прикрепив-шись к полимерной молекуле, способны довольно быстро перемещаться вдоль клеточной мембраны эпителиальных клеток кишечника за счет реакции межмолекулярного замещения.

Очевидно, усиливается всасывание в эпителиальные клетки ЖКТ и ионов некоторых металлов, например кальция или калия. Увеличение проницаемости для ионов  может быть связано с какими-либо структурными изменениями мембраны (например, падение мембранного потенциала). В то же время образование внутриклеточных градиентов концентрации катионов, в частности кальция, может служить пусковым механизмом регуляции метаболических систем клетки (в частности, активизация мембранных ферментов АТФ-аз).

В толстый отдел кишечника полимеры поступают в неизменном виде, поскольку в эпителиальных клетках кишечника нет ферментов для расщепления ВВП. Завершающим этапом нахождения полимера в ЖКТ является его полное выведение из организма с экскрементами, поскольку ВВП не могут преодолеть мембраны клеток желудочно-кишечного тракта. Об этом свидетельствуют литературные данные и результаты собственных исследований, доказывающие неспособность молекул полимера проходить через фильтры, с размерами пор, равными диаметру канальцев мембран клеток млекопитающих, и на порядок выше.

Следствием всего выше сказанного должен активизироваться обмен веществ и повыситься продуктивности животных.

3.2.5.2. Теоретические расчеты, обосновывающие возможность повышения продуктивности скота с применением полимерных соединений

Для проведения теоретических расчетов по прогнозу повышения продуктивности с применением полимерных соединений (на примере  образования молока) была проанализирована доступная литература по белковому составу растительных кормов зерновых.

В зерне злаковых растений и жмыхах, из которых готовятся концентрированные и высокобелковые корма (комбикорма, зерносмеси, шроты, жмыхи и пр.), используемые в рационах жвачных животных, содержится несколько разновидностей простых белков - протеинов, которые классифицируют на: альбумины, глобулины, глютелины, проламины. Глютенин пшеницы, содержание которого в зерне достаточно высокое, является достаточно гетерогенным и имеет широкий спектр молекулярной массы – от 100000 Да до нескольких миллионов Да. Шрот сои и жмых подсолнечника содержат наиболее высокое количество белка. Соевый белок являясь легкоусвояемым, высокоценным, достаточно сбалансированным по аминокислотному составу, в своем составе имеет преимущественно глобулины (60-90%) с молекулярной массой - 100000 до 380000 Да. Можно предположить, что реально в рубце у жвачных присутствующая (равновесная) доза полимера может быть равна 1,0 г, т.к. ввиду своей высокой вязкости ВВП должны медленно выводиться из организма.

Теоретические расчеты показали, что 1 г полимера с молекулярной массы = 1х106 Да может удержать от 150 г белка (с молекулярной массой = 3х105 Да) до 429 г растительного белка (с молекулярной массой, равной 1,5х106  Да), в зависимости от молекулярной массы белковых молекул разных кормов и некоторых других условий. Если считать, что равновесная концентрация полимера, имеющего молекулярную массу =1х106  Да и более (например, ПЭККА), в рубце коровы, равна 1,0 г, то этого будет достаточно для обеспечения образования молока коровой в количестве более 1 литра.

3.2.6. Изучение влияния Солуната на продуктивность крупного рогатого скота

3.2.6.1. Влияние Солуната на мясную продуктивность молодняка крупного рогатого скота. Изучение влияния Солуната на мясную продук-тивность проводили на бычках черно-пестрой породы. В каждой серии экспериментов формировались две-три группы животных (по 15 голов в каждой) по принципу парных аналогов. Содержание бычков было стойловое привязное. Кормление животных проводилось из индивидуальных кормушек по принятой в хозяйстве технологии, с использованием рационов, составленных по действующим нормам. Рационы контрольной и опытной групп различались лишь тем, что в рацион животных опытной группы включали кормовую добавку Солунат, который давали ежедневно животным в смеси с комбикормом 1 раз в сутки, во время утреннего кормления. Влияние кормовой добавки Солунат на мясную продуктивность бычков оценивали путем индивидуального взвешивания бычков утром (в одно и то же время), до кормления, индивидуально каждое животное, два дня подряд.

Изучение влияния  Солуната на привесы у бычков 56-ти месячного возраста. Для проведения эксперимента были сформированы 3 группы животных: одна контрольная и две опытных. В экспериментах было показано, что применение Солуната в дозах 250 мг/(гол*сут) (1-я опытная группа) и 500 мг/(гол*сут) (2-я опытная группа), способствовало увеличению живой массы бычков черно-пестрой породы по сравнению с контролем. Исходная живая масса бычков в контроле составляла 118 ± 5 кг/(гол*сут), в 1-ой опытной группе–115±7 кг/(гол*сут), в 2-ой опытной группе–116±4 кг/(гол*сут).

За 62 дня выращивания живая масса животных 1-ой и 2-й опытных групп увеличилась на 47,5 кг и 45,1 кг, соответственно. В то время как в контроле увеличение живой массы за тот же период составило 32 кг. Более высоким был этот показатель у животных, получавших с кормом Солунат, в количестве 250 мг /(гол*сут) по активному веществу (опытная группа 1). У этих же бычков была выше и интенсивность роста. Так, увеличение среднесуточного привеса у этих животных за 62 дня опыта составило 766±15 г/(гол*сут), а в контроле – 516±13г /(гол*сут), т.е. привес живой массы у бычков опытной группы 1 (по сравнению с контрольными) был на 250 г/(гол*сут) выше. Бычки второй опытной группы, получавшие Солунат в дозе 500 мг /(гол*сут), дали привесы живой массы 727±10 г/(гол*сут), что на 211 г/(гол*сут) больше по сравнению с контролем.

Влияние добавки Солунат на привесы бычков 8ми  месячного возраста.

Для проведения эксперимента было сформировано две группы животных: контрольная и опытная. Влияние кормовой добавки Солунат, в дозе 500 мг/(гол*сут), оценивали путем индивидуального взвешивания бычков в начале опыта (постановочная живая масса), и далее – трижды, каждые 25 дней (I, II и III периоды). Эксперимент продолжался в течение 75 дней. Исходная живая масса бычков, в среднем, составляла в контрольной группе – 208,8±5 кг, в опытной – 208,5±6 Увеличение живой массы бычков в опытной группе за первые 25 суток эксперимента (I период) составило, в среднем, 20,0±1,6 кг/гол, а в контрольной - 17,6± 0,8  кг/гол, т.е. на 2,4 кг в опыте больше, чем в контроле. За II и III периоды выращивания бычков увеличение живой массы в опытной группе было 25±1,3 кг/гол и 29,3±1,6 кг/гол, а в контрольной–20,5±1,5 кг/гол и 23,7±0,9 кг/гол, соответственно. Следователь-но, за II период было получено дополнительной живой массы в опытной группе на 4,5 кг, а за III период – на 5,6 кг больше, чем в контроле. За весь период эксперимента (75 суток) увеличение живой массы бычков в опытной группе составило, в среднем 74,3±4 кг/гол, а в контрольной – 61,8±4,5 кг, т.е. в опыте было на 12,5 кг больше, чем в контроле. Интенсивность роста бычков опытной группы была существенно выше, чем контрольной. Так, абсолютная дополнительная ежесуточная прибавка массы тела бычков в расчете на одну голову, в среднем, по опытной группе составила за первые 25 суток (1 период) – 799± 34,2 г/гол, за II  и  III периоды – 999±22 г и 1172± 31г/гол, в то время как в контрольной – 704±35 г/гол, 820±25 г/гол и 950±28 г/гол, соответственно. За весь период эксперимента (75 суток) абсолютный среднесуточный прирост живой массы в опытной группе составил 990±20,8 г/гол, что на 166 г выше, чем в контроле (824±25 г/гол).

Относительная скорость роста бычков за весь период эксперимента составила: в опытной группе 35,6 %, а в контрольной – 29,6 %, т. е. в опытной группе была выше, чем в контроле, на 6,0 %.

3.2.6.2. Эффективность Солуната по повышению молочной продуктивности крупного рогатого скота. Эксперименты проводились на  коровах в стадии глубокой стельности (9-й месяц беременности), а также на лактирующих коровах на разных стадиях лактации, с использованием молочной и мясо-молочной пород скота. При проведении опытов формировали контрольную и опытную группы из животных по принципу парных аналогов. Опытная группа получала те же корма и в тех количествах, что и контрольная, отличие было в том, что в комбикорм для коров опытной группы добавляли Солунат из расчета 500 мг/(голову*сут.). Молочную продуктивность коров определяли контрольными дойками, путем измерения  утреннего и вечернего удоев молока индивидуально от каждой коровы, через определенные интервалы времени.

3.2.6.2.1. Влияние кормовой добавки Солунат на удои коров

3.2.6.2.1.1. Влияние Солуната на удои коров, которые получали Солунат до отела (в стадии глубокой стельности). В стадии глубокой стельности происходит интенсивный рост плода, формируются его ткани и органы, что требует значительного расхода органических и минеральных веществ. В то же время питательные вещества необходимы и для поддержания жизни животного. При этом следует учитывать, что несмотря на относительно высокие потребности коровы в питательных веществах, особенно в протеине, в этот период, вследствие беременности коровы, сильно уменьшен размере рубца, а значит уменьшается количество корма, который может потребить корова и, следовательно, снижено потребление необходимых питательных веществ, в которых нуждается животное. Кроме того, во время сухостойного периода организм коровы должен накопить достаточное количество питательных веществ, потому что после отела корова должна выработать большое количество молока, на синтез которого не хватает энергии питательных веществ рациона. В связи с этим в начале лактации у коров, особенно высокопродуктивных, часто наблюдается значительный дефицит энергии, для покрытия которого организм интенсивно использует запасы питательных веществ, отложенных в теле в течение сухостойного периода. Особенно в этот период организм животных нуждается в белке.

Применение Солуната на мясо-молочной породе скота. В эксперимент были отобраны коровы айширской породы в стадии глубокой стельности (7,5-8,0 месяцев). Эксперимент  был проведен на базе МТФ ООО «Хвалово» Ленинградской области, в пастбищный сезон года. Опыт  был начат с 1 июля и длился до конца сентября - всего 9 декад. Были сформорованы 2 группы из коров-аналогов, находящихся в стадии глубокой стельности, по 10 голов в каждой, в возрасте 4-5 лет, с продуктивностью по предыдущей лактации в опытной группе – 3780±770 кг и в контрольной – 3770±970 кг. Рацион животных состоял из 35 кг зеленой массы и 2 кг комбикорма марки К-60 (для пастбищного периода). Коровы опытной группы получали кормовую добавку Солунат в течение 30-45 дней до отела и далее – 60 дней после отела. Контрольные дойки проводили ежедекадно.

Полученные данные свидетельствуют о том, что в течение опыта, длившегося в общей сложности 90 дней, среднесуточные удои  были всегда выше в опытной группе и плавно нарастали в течение 60 дней лактации.  Следует обратить внимание на тот факт, что положительный эффект от применения кормовой добавки Солунат был замечен во время первой контрольной дойки, т.к. коровы, которым начали давать Солунат в период глубокой стельности, уже в первую декаду лактации дали на 2,7 л молока больше, чем  контрольные. Особенно большие различия по надоям между группами были получены в 5-ую и 6-ую декады лактации. За весь период эксперимента среднесуточный удой на 1 голову в опытной группе, получавшей Солунат, составил 14,1±1,2 л; в контрольной – 12,2±1,5 л, т. е. коровы опытной группы дали на 1,9 л/(гол.*сут.) молока больше, чем контрольные.

Применение Солуната на молочной породе скота. В опыт были отобраны коровы черно-пестрой породы скота в стадии глубокой стельности (8 месяцев). Эксперимент был проведен на базе МТФ АО «Кривское» Калужской области, с января по июнь. Весь период эксперимента составил 130 дней. Были составлены 2 группы из коров-аналогов, по 5 голов в каждой, в возрасте 4-5 лет, с молочной продуктивностью по предыдущей лактации в опытной группе – 3551±230 кг и в контрольной – 3428±239 кг.

Эксперимент показал, что за 100 дней лактации контрольные коровы раздоились с 17,4±2,7 л/(гол*сут) до 20,8±2,9л /(гол*сут), а опытные  – с 17,8±1,3 л/(гол*сут) до 26,5±0,8 л/(гол*сут). За весь период эксперимента средний ежесуточный  удой контрольных коров составил 20,3±1,4 л, а опытных – 22,1±1,3 л, следовательно, Солунат способствовал получению дополнительного молока в количестве 1,8 л/(гол*сут). Валовый надой молока у коров, получавших Солунат был всегда выше, чем у контрольных и за 100 дней лактации от 5 коров в контрольной группе составил 10135 л, а в опытной – 11050 л, что на 915 л  больше, чем в контроле. Следует отметить, что объем молозива, который был измерен в первые сутки после отела, у опытных коров был существенно выше и составлял 68 л от 5 опытных коров и  48 л – от 5 голов контрольных.

3.2.6.2.1.2. Влияние Солуната на молочную продуктивность коров, получавших  Солунат  в  фазе раздоя и в средней фазе лактации

Применение Солуната в рационе низкопродуктивных коров, находящихся в стадии раздоя. Эксперимент был проведен в Брянской области  Красногорском районе, на базе МТФ СПК «Дубенецкий». Коровы черно-пестрой породы, в возрасте 4-5 лет, второй месяц лактации. Содержание коров стойловое привязное. Животных кормили согласно принятым нормам, из индивидуальных кормушек. Солунат давали животным в течение 75 дней,  смешивая с 1 кг зерносмеси. Контрольные дойки проводили через каждые 15 дней.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что применение Солуната способствовало более значительному увеличению удоев у опытных коров по сравнению с контрольными. В конце опыта, на 75-ый день, молочная продуктивность коров опытной группы увеличилась, в среднем, с 7,6±0,2 л/(гол*сут) до 10,8±0,3 л/(гол*сут), т.е.–на 3,2л/ (гол*сут), в то время, как в контрольной с 7,6±0,1 л/(гол*сут) – до 9,6±0,3 л/(гол*сут), т.е. – в среднем, на 2,0 л /(гол*сут). Таким образом, применение кормовой добавки Солунат в рационе низкопродуктивных коров в первой фазе лактации способствовало получению дополнительного молока на 1,2 л/(гол*сут).

Применение Солуната в рационе низкопродуктивных коров, находящихся в средней стадии лактации. Научно-хозяйственный эксперимент был проведен на базе Бирючанской молочно-товарной фермы ОАО «Оскольские просторы», Белгородской области. Были сформированы 2 группы коров-аналогов, по 7 голов в каждой, в возрасте 4 лет. Коровы получали кормовую добавку Солунат в течение 30 дней. Дачу Солуната начали в феврале, через 3 месяца после отела (90 дней лактации). Контрольные дойки были проведены в начале и конце эксперимента.

Анализ полученных данных показал, что контрольные коровы в течение четвертого месяца лактации не увеличили молочную продуктивность: в начале эксперимента она была равна 13,0±0,4 л, через месяц - 13,0 ± 0,3 л. При этом жирность молока, концентрация белка в нем и плотность молока, практически, не изменились. Лактирующие коровы, в концкорма  которых вводили Солунат, увеличили удои молока в физическом объеме с 14,4±1,2 л/(гол*сут)  до на 16,6 ±0,9 л/(гол*сут), т. е. на 2,2 л, при этом повысилась (относительно исходного) плотность молока на 1,6 А; процент содержания жира – на 0,15±0,01; белка – на 0,2±0,02. 

Применение Солуната в рационе высокопродуктивных коров

В условиях животноводческих хозяйств Северного и Южного Федеральных округов России, расположенных на территории Ленинградской и Белгородской областей, были проведены эксперименты по изучению влияния Солуната на процессы образования молока у высокопродуктивных коров в первой и средней фазах лактации. Кроме того, в экспериментах изучалось влияние пивной дробины, введенной в рацион, на эффективность кормовой добавки Солунат по повышению молочной продуктивности коров, т.к. пивная дробина широко используется в кормлении дойного стада в животноводческих хозяйствах Ленинградской области и некоторых других областях РФ.

Применение Солуната в рационе высокопродуктивных коров на раздое

Скармливание Солуната коровам со среднесуточным удоем молока 24,0 л. Эксперимент продолжительностью 30 дней был проведен в летний сезон года, в условиях молочно-товарной фермы Белгородской области, на  коровах черно-пестрой породы, которые выпасались на пастбище и поедали зеленую траву (вволю) и комбикорм К-60 в количестве 6 кг на 1 голову в сутки: из них Солунатом обрабатывали 2 кг комбикорма. В сформированных двух группах-аналогах по 10 голов в каждой коровы находились на 25-30-ом  дне лактации. Эксперимент показал, что применение Солуната повысило среднесуточные удои коров с 24,3 ±1,5 л/(гол*сут) до 26,9 ±1,4 л/(гол*сут), т.е. – на 2,4 л/(гол*сут), а валовый надой от 10 коров, в среднем, за 30 дней дачи Солуната увеличился на 630 л.

Скармливание добавки Солунат  коровам со среднесуточным удоем молока  от  24,0 л  до  47,0 л.

1 серия экспериментов. Белгородская область.

Эксперимент был проведен в стойловый период, продолжительностью 16 дней в условиях молочно-товарной фермы колхоза им. Фрунзе, Белгородской области (южный регион). Коровы были черно-пестрой породы (бессоновский тип). Содержание коров стойловое привязное. Дачу Солуната начали первого марта и продолжали в течение 16 дней, один раз в день во время обеденного кормления, в смеси с 2 кг комбикорма (в остальные 10 кг комбикорма Солунат не вносили). Рацион коров содержал: сенаж – 10 кг; силос – 15 кг; сено (многолетние травы) – 3 кг; комбикорм – 12 кг; жом – 5 кг; патока – 1,4 кг. Комбикорм был приготовлен на комбикормовом заводе хозяйства. Имел следующий состав: пшеница – 7 %;  ячмень – 5,2 %; кукуруза – 37,7 %; горох – 20 %; шрот подсолнечника 25 %; монокальций фосфат – 2,0 %;  поваренная соль 2,0 %; премикс – 2 %. В опытной группе дополнительный удой молока по сравнению с контролем составил 0,5 л, т.к. в контрольной группе прибавка молока составила 3,0 л, а в опытной – 3,5 л. Приведенные данные получены от коров с лактацией на начало опыта от 24,0 до 31,0 л. Анализ полученных результатов позволяет заключить, что в начале периода раздоя  (17-26 дней после отела) при использованном рационе опытные коровы раздаивались в течение 16 дней (период опыта) несколько быстрее, чем опытные.

2 серия экспериментов. Ленинградская область.

Научно-исследовательская работа была выполнена на базе молочно-товарной фермы «Сосновая горка», Выборгского района. В эксперимент были взяты голштинизированные черно-пестрые коровы в возрасте 4-5 лет.  В корм коров, кроме основного рациона, была введена пивная дробина, в количестве 25-30 кг/(гол.*сут.). При исходном среднесуточном удое коров 25,2 л/гол.- в контроле и 29,2 л/гол. – в опыте, в первой фазе лактации, дача Солуната на 35-50-й день лактации позволила за 12 дней увеличить средний суточный удой  на 3,2 л/гол., в то время, как в контроле – прибавка молока, в среднем, составила 0,5 л/гол. Таким образом, применение кормовой добавки Солунат способствовало увеличению среднесуточных удоев молока на 2,7 л/гол. по сравнению с контролем. Удои от коров, находящихся на 60 -70-м дне лактации, которым давали Солунат, увеличились, в среднем, на 2,6 л /(гол.*сут.) молока, в то время как в контрольной группе – снизились на 0,6 л за тот же срок.

Применение Солуната в рационе высокопродуктивных коров, находящихся в средней фазе лактации. Полученные в эксперименте сравнитель-ные данные по удоям коров, получавших Солунат и контрольных, свиде-тельствуют о том, что в конце первой фазы лактации (раздой) – после 100 дней и в течение 40 дней средней фазы лактации у контрольных коров происходит снижение удоев, в среднем, на 0,8 л. В то же время у опытных животных, получавших тот же рацион, что и контрольные, не только не происходит уменьшение удоев молока, но наоборот – у коров повышаются удои, в среднем, на 0,85 л/(гол*сут.).

Таким образом, данные, полученные в натурных условиях хозяйств, по изучению влияния кормовой добавки Солунат на образование молока, свидетельствуют о том, что коровы, получавшие с концентрированными кормами Солунат, имели более высокие удои, чем контрольные животные. Коровы, получавшие Солунат в стадии глубокой стельности, сразу после отела вырабатывали больше молозива и удои молока у них нарастали более быстро, чем у контрольных коров. Коровы, которых не кормили Солунатом в стадии сухостоя, но начали получать Солунат в разные сроки после отела, также прибавляли удои, причем начинали это делать через 10 – 12 дней от начала дачи Солуната. Поскольку контрольные и опытные коровы содержались в одинаковых условиях и получали одинаковый по составу и количеству рацион, то повышение молочной продуктивности опытных коров можно объяснить только введением в их рацион добавки Солунат.  Полученные результаты  служат косвенным подтверждением положитель-ного влияния Солуната (описано в разделе 3.2.4.) на пищеварительные процессы жвачных животных.

3.2.5.2.2. Влияние Солуната на показатели качества молока. Применение Солуната способствовало повышению (относительно исходного) плотности молока на 1,6 А; процента содержания жира – на 0,15 и белка – на 0,2. Исследование минерального состава молока показало, что содержание некоторых микро- и макроэлементов в молоке животных опытной группы повысилось: калия – на 14%, натрия – на 13,6%, цинка – на 18%, кальция и магния–на 4,0% и 5,0%, соответственно. Концентрация других определяемых элементов, практически, не изменилась.

3.2.6. Изучение эффективности кормовой добавки Солунат на радиоактивно загрязненных территориях

Продукция животноводства (молоко, мясо) является одним из основных источников формирования доз внутреннего облучения населения на радиоактивно загрязненных территориях, что определяет первоочередность и важность решения проблемы обеспечения ее радиационной безопасности. До настоящего времени основные работы были направлены на поиск сорбентов – препаратов, препятствующих поступлению радионуклидов в организм животных, но не увеличивающих их продуктивность. В настоящее время в качестве специфических сорбентов, используются препараты, изготавливаемые на основе ферроцианидов. Однако, обладая достаточно высокой эффективностью, они имеют недостатки, в том числе отсутствие способности у ферроцианидов  повышать  продуктивность животных. В то же время при ведении скотоводства на радиоактивно загрязненной территории большое значение имеет экономическая эффективность проводимых специальных мероприятий  для получения экологически чистой продукции. Одним из способов решения проблемы в этом случае может являться применение добавок в корм, способствующих снижению накопления радионуклидов в организме животных и одновременно увеличивающих их продуктивность. Следует отметить, что литературные источники, практически, не освещают данное направление.

3.2.6.1. Предпосылки использования ПЭККА, основного действую-щего вещества Солуната, в качестве растворимого сорбента 137Cs. Применяемые в настоящее время нерастворимые гетерогенные сорбенты для сорбции и выведения из организма 137Cs имеют ряд недостатков. Одним из них является достаточно низкая дисперсность частиц твердого сорбента. Растворимый же сорбент на основе ВВП, в частности полимер ПЭККА,  имеет очень высокую степень дисперсности, равную диаметру молекуляр-ного клубка порядка 100 нм.  Поэтому растворимый сорбент нового типа на основе ВВП теоретически должен быть активен в количествах значительно меньших, чем известные ныне твердые нерастворимые (гетерогенные) сорбенты. В то же время макромолекулы ПЭККА, имеющие диаметр 100 нм не смогут преодолеть клеточные барьеры ЖКТ и попасть во внутренние среды организма и, следовательно, – в продукты животноводства.

Теоретической основой возможности использования ВВП в качестве активного вещества нового типа растворимого сорбента для удержания ионов 137Cs, является свойство ПЭККА  образовывать комплексы не только с белками, но и с ионами металлов.

В экспериментах in vitro, было показано, что полимер ПЭККА в нейтральной (или слегка кислой) среде, способен за счет достаточно прочных связей, образовывать комплексы с ионами металлов, в том числе с ионами Pb+2, близкого по размеру атома к радиоактивному изотопу 137Cs+2. Как показано в экспериментах, даже под давлением эти комплексы не распадаются в течение 3-х суток (срок наблюдения), при этом степень удержания  полимером ионов свинца в вертикальной ячейке достаточно высока и составляла  93,35 – 95,6 %.  Способность ВВП образовывать комплексные соединения с ионами металлов была использована для создания растворимого гомогенно распределяющегося сорбента, образующего нераст-воримые комплексы с радиоактивным изотопом  137Cs+2.

Поскольку ПЭККА, входящий в состав Солуната в качестве основного действующего вещества, показал себя как хороший сорбент ионов металлов и белка  in vitro, а так же показал высокую эффективность в научно-производственных экспериментах in vivo, по увеличению продуктивности скота, то были проведены исследования в  условиях животноводческих хозяйств по изучению эффективности кормовой добавки Солунат в плане снижения концентрации радионуклидов в продукции животноводства, и одновременно способствующего увеличению продуктивности животных.

3.2.6.3. Эффективность применения кормовой добавки Солунат в рационе дойного стада, содержащегося на радиоактивно загрязненной территории. Испытания Солуната на радиоактивно загрязненной территории (плотность загрязнения почв 137Cs  от 15 до 40 Ки/км2 ) были проведены в Брянской области,  Новозыбковском районе, на базе молочно-товарной фермы «Деменки» ГУ «Новозыбковская государственная сельскохозяйствен-ная опытная станция ВНИИА» (Россия), а так же на базе хозяйства КСУП  «Дубовый Лог», Гомельская область,  Добрушский район ( Беларусь).

3.2.6.3.1. Научно производственные эксперименты на базе фермы «Деменки», Брянская область. Для определения эффективности Солуната по снижению концентрации 137Cs в молоке в хозяйстве Брянской области были проведены 2 серии производственных испытаний на дойных коровах, черно-пестрой породы, в стадии раздоя.

1 серия экспериментов.

Содержание коров стойловое, привязное, кормление из индивидуальных кормушек. Уровень загрязнения молока 137Cs на начало эксперимента составлял 120 Бк/кг. Анализ данных спектрометрии образцов молока показал, что при концентрации 137Cs в кормах, равной 10-12 кБк/сут, добавление Солуната в дозе по активному веществу = 0,5 г/(гол*сут), снижало концентрацию 137Cs в молоке на 24, 16 и 13 % по сравнению с контролем. Скармливание кормов, содержащих более низкие концентрации 137Cs - 2-3 кБк/сут, снижало концентрацию радиоцезия в молоке коров опытной группы на 14-20 %, относительно контроля. За весь период опыта ( 2 мес.) применение Солуната при кормлении коров, снижало концентрации 137Cs в молоке, в среднем, на 17 %.

2 серия экспериментов.

Содержание коров пастбищное, кормление концентрированными кормами с добавлением Солуната проводилось из индивидуальных кормушек, во время обеденной дойки. До начала эксперимента концентрация 137Cs в молоке составляла, в среднем, 275±95 Бк/кг. Солунат давали животным в смеси с концентрированными кормами в дозе 1,0 г действующего вещества на 1 голову в сутки. Первые 4 суток эксперимента зеленые корма, которые поедали коровы, содержали 137Cs 1464±190,6 Бк/кг; в следующие 4 суток –  концентрация 137Cs в кормах стала ниже и стала равна 652,2 ±108,6 Бк/кг; в последующие 7 суток  она составила  475±98,2 Бк/кг. Эксперимент показал (рис. 1), что через 4 суток от начала применения Солуната началось снижение концентрации 137Cs  в молоке коров относительно контроля до 98,6% (-1,4 %), через следующие 4 суток – до 89,9% (-10,1%), а еще через 7 суток – до 78,3% (-21,7%). В контрольной группе в те же сроки отбора спектрометрические измерения образцов молока показали не снижение, а повышение концентраций 137Cs в молоке контрольных коров до 137,9 % (+37,9%); 117,9 % (+17,9) и 102,7 % (+2,7%), соответственно.

Рисунок 1- Динамика относительного содержания 137Cs в молоке коров.

3.2.6.3.2. Производственные эксперименты на базе хозяйства КСУП «Дубовый Лог», Гомельская область. На молочно-товарной ферме КСУП «Дубовый Лог» были проведены испытания эффективности кормовой добавки Солунат в натурных условиях по снижению поступления 137Cs в молоко коров в сравнении со специфическим сорбентом  радиоактивного цезия – ферроцианидом. Изучалось влияние Солуната при скармливании его с подсолнечным шротом и комбикормом на молочную продуктивность и уровни загрязнения 137Cs молока коров. Были сформированы 3 группы стельных коров черно-пестрой породы второго и третьего года лактации на 9-ом месяце стельности по 10 голов в каждой.

1 серия экспериментов. Изучение влияния кормовой добавки Солунат на поступление 137Cs в молоко коров проводили в течение 40 дней. Содержание 137Cs в суточном рационе в течение первых 20 суток опыта было в пределах 15 – 25 кБк,  далее- 8-10 кБк. Были сформированы 3 группы животных, по 10 голов в каждой: одна группа была контрольная, не получавшая Солунат, две – опытных. 1 опытная группа получала концкорма с добавлением 3 г /(гол*сут) ферроцианида  Vossen Blau; 2 опытная группа – Солунат в дозе 0,5 г /(гол.*сут.) Как показали эксперименты (табл. 10), применение Солуната (с 20 по 40 сутки) способствовало снижению содержания 137Cs в молоке коров с 255±10 до 103±11 Бк/кг. В группе коров, получавших ферроцианид, за тот же промежуток времени содержание 137Cs в молоке коров снижалось с 182±16 до 81±6 Бк/кг; в  контроле – с 302±9  до 111±8 Бк/кг. Необходимо отметить, что при увеличении содержания 137Cs в кормах коров (с 0 до 20 суток), больше всего 137Cs  содержалось в молоке контрольных коров и составляло 302±12 Бк/кг. Ниже концентрация 137Cs была в молоке коров, получавших Солунат и была равна 255±12 Бк/кг; самое низкое количество 137Cs было в молоке коров, которым давали ферроцианид – 182±16 Бк/кг.

Таблица 10

Динамика содержания 137Cs в молоке коров, Бк/кг

Срок эксперимента, дни

Среднее содержание по группе

Контрольная

ферроцианид

Солунат

0 (исх.)

36±4

26±4

26±4

20

302±12

182±16

255±10

30

115±11

78±11

101±11

40

111±8

81±6

103±11

2 серия экспериментов.

В следующей серии экспериментов, продолжавшейся 8 суток, были испытаны две дозы Солуната (по активному веществу, в сравнении с ферроцианидом, при скармливали кормов (сенажа), с суммарной актив-ностью суточного рациона по 137Cs  от 14,1 до 24,4 кБк/сутки. По принципу парных аналогов были сформированы контрольная и три опытные группы коров по 4 головы в каждой. Животные всех групп получали по 0,5 кг комбикорма. В комбикорм 1-ой опытной группы  вводили с ферроцианид в дозе  3,0  г/(гол*сут),  2-ой опытной группы – Солунат  в дозе 0,5 г /(гол*сут),

3-ей опытной группы Солунат – в дозе  1,0 г /(гол*сут). Контрольная группа получала комбикорм без указанных добавок.

За период эксперимента в контроле концентрация 137Cs в молоке, в среднем, составила 300±12 Бк/кг, в 1-ой опытной группе – 139±9 Бк/кг, во  2-ой опытной группе – 250±8 Бк/кг, в 3-ей опытной группе –220±6 Бк/кг. Таким образом, применение ферроцианида с комбикормом снизило поступление 137Cs в молоко на 54%, Солуната – на 17% (доза Солуната – 0,5 г/(гол*сут) и на 27 % (при дозе Солуната – 1,0 г/(гол*сут) по сравнению с контролем.

Влияние Солуната на молочную продуктивность коров. В связи с тем, что кормовая добавка Солунат разрабатывалась как добавка двойного назначения, то одновременно с измерением  радиоактивности молока, проводился учет молочной продуктивности коров. Данные, полученные в ходе эксперимента, свидетельствуют о том, что за период опыта (10 декад) среднесуточный удой от одной лактирующей коровы  в опытной группе, получавшей Солунат, составил – 12,8±1,5 л; в контрольной – 11,3±2,3 л. При применении ферроцианида среднесуточные удои коров, достоверно, не отличались от контрольной группы. В опытах было показано, что применение Солуната на радиоактивно загрязненной территории при традиционных условиях содержания и кормления животных, способствовало повышению удоев в физическом объеме, а также увеличивало продукцию коровой молочного жира и белка.

3.2.6.4 Применение Солуната в кормлении молодняка крупного рогатого скота, выращиваемого на радиоактивно загрязненной территории

3.2.6.4.1 Брянская область, МТФ  «Деменки».

Влияние Солуната на динамику накопления 137Cs в мышечной ткани молодняка КРС. Производственные испытания по влиянию Солуната на снижение перехода 137Cs в мышечную ткань молодняка  крупного рогатого скота проводили на бычках в течение 60 дней, в стойловый период, с февраля по апрель. Для опыта было отобрано 30 голов, в возрасте 8-9 месяцев. Были сформированы 3 группы бычков по 10 голов в каждой. Одна группа была контрольной и две опытных: опытная группа 1 получала Солунат (по активному веществу) в дозе 0,5 г /(гол*сут), опытная группа 2 получала Солунат в дозе 1,0 г /(гол*сут).  Всем животным скармливали одинаковый по питательности и составу рацион, согласно принятым нормам. Во время проведения опыта в рацион бычков, в качестве радиоактивной компоненты, было включено сено в количестве 2,0 – 2,5 кг/(гол*сут), которое в первые 20 суток эксперимента имело концентрацию 137Cs, равную  1200 – 1550 Бк/кг, далее и до конца опыта 2962 – 5410 Бк/кг. В эксперименте было выявлено (табл. 10), что доза Солуната 0,5 г/(гол*сут) предотвращала поступление  радионуклида в мышечную ткань бычков на 8 % по сравнению с контролем, а доза 1,0 г/(гол*сут) – на  38% (табл. 11).

Таблица 11 

Концентрация 137Cs в мышечной ткани бычков, Бк/кг

Группа бычков

Суточная доза Солуната, г/гол

Исходная концент-рация 137Cs

Концентра-ция  137Cs

на 30 день

Концентра-ция  137Cs

на 60 день

Снижение кон-центрации 137Cs относительно контроля, %

Контроль

0

205,0±19

270,7±23

511,2±11

0

Опытная 1

0,5

225,0±21

267,2±12

508,6±18

8,0

Опытная 2

1,0

230,5±18

247,0±19

420,8±24

38,0

Следовательно, наиболее эффективной суточной дозой Солуната по снижению уровней накопления  137Cs в мышечной ткани бычков является 1,0 г/(гол*сут).

3.2.6.4.2. Гомельская область, КСУП «Дубовый Лог». Научно-производственный эксперимент в условиях хозяйства КСУП «Дубовый Лог» был посвящен изучению влияния кормовой добавки Солунат на динамику накопления 137Cs в мышцах и приросту живой массы молодняка КРС (бычки). Целью эксперимента было выяснить возможно ли, используя ничтожно малое количество полимера (0,5 и 1,0 г/гол*сут), одновременно снижать поступление 137Cs в организм животного и повышать мясную продуктивность молодняка крупного рогатого скота. В хозяйстве были сформированы по принципу парных аналогов три группы (одна контрольная и две опытных) бычков черно-пестрой породы, в количестве 15 голов, по пять голов в каждой группе, в возрасте 7 месяцев, с живой массой  167-175 кг.  На протяжении эксперимента рацион подопытных животных всех трех групп состоял из силоса кукурузного–22 кг, сена злакового–2,5 кг, зернофу-ража овес+ячмень+рожь)–2кг, белково-витамино-минеральной добавки–0,5 кг. Первая опытная группа, кроме основного рациона, вместе с зернофура-жом получала Солунат из расчета (по активному веществу): 0,5 г/(на гол*сут); вторая опытная группа – 1,0 г/(на гол*сут). Контрольная группа получала тот же рацион, но в зернофураж Солунат не вводили. Эксперимент длился около трех месяцев.

Влияние Солуната на динамику накопления 137Cs в мышечной ткани молодняка КРС. В качестве радиоактивного компонента корма бычки получали разнотравное луговое сено со средней активностью по 137Cs , равной 52,1 кБк/кг – в первые  30 дней по 200 г, а затем 20 дней – по 400 г на голову в сутки. На 51-е сутки эксперимента высокоактивное сено было изъято из рациона. На первом этапе эксперимента (сено луговое 0,2 кг), равновесие в организме между поступлением радионуклида и его выведением наступило между 12-15 –м  днем опыта. На втором этапе, когда в рационе количество сена было увеличено до 0,4 кг аналогичная картина наблюдалась так же между 12-15-ми  сутками. Эксперимент показал (табл. 12), что к 24-м суткам концентрация в мышечной ткани контрольных бычков составляла 348±31 Бк/кг, в 1-ой опытной группе - 358±19 Бк/кг, а во 2-ой опытной группе - 369±23 Бк/кг. После отмены затравки, через 57 суток от начала опыта  (срок наблюдения)  активность мышечной ткани бычков возвратилась к первоначальным исходным значениям и оставалась таковой до 90 дней опыта (срок наблюдения).

Таблица 12

Концентрация 137Cs в организме бычков

Группа

Содержание 137Cs,  Бк/кг

24 день

33-50 дни

57-90 дни

Контрольная

348±31

482±13

254±8

Опытная 1

358±19

427±12

190±5

Опытная 2

369±23

436±17

169±7

Таким образом, изучение уровня накопления и выведения 137Cs из организма животных показало, что на 57 сутки опыта содержание его в мышечной ткани бычков первой опытной группы на 25%, а второй опытной - на 35% было ниже, относительно контроля.

Влияние  кормовой добавки Солунат при выращивании молодняка КРС. Одновременно с изучением способности кормовой добавки Солунат снижать уровни радиоактивных элементов в организме скота (137Cs), в том же опыте, что описан выше исследовалось влияние Солуната на приросты живой массы молодняка КРС. Взвешивание животных проводили ежемесячно. За весь период эксперимента (90 дней) контроль, в среднем, прибавил 51,6 кг и живая масса бычков, в среднем, стала равна 224±4 кг/гол., в то время как  бычки 1-ой опытной группы  прибавили – 67 кг/гол.  и  2-ой опытной группы – 64 кг/гол. При этом живая масса бычков 1-ой опытной группы стала равна 240,0±3,2 кг/гол; 2-ой опытной группы – 236±3,8 кг/гол. Среднесуточный привес живой массы за 90 дней эксперимента составил: в контрольной группе–573 г/(гол*сут); в 1-ой опытной группе–746 г/(гол*сут); в 2-ой опытной группе–710 г/(гол*сут). Следовательно, увеличение привесов живой массы животных по сравнению с контролем составило, в среднем, 173 г/(гол*сут) в 1-ой опытной группе и 137 г/(гол*сут). 

Таким образом, в проведенных длительных экспериментах было показано, что длительное применение кормовой добавки Солунат, при использовании ничтожно малого количества полимера (0,5 и 1,0 г/гол*сут), обеспечивает одновременно снижение поступления 137Cs в организм животного и повышение мясной продуктивности КРС.

Выводы

1. В экспериментах in vitro показано, что исследованные полимеры  ВПК и ПЭККА с молекулярной массой 106 Да и размером молекулярного клубка 100нм образуют интерполимерные комплексы с модельным белком – бычьим сывороточным альбумином. Образование комплексов происходило в широком интервале избытка белка от 1 до 2000 по отношению к полимеру. Расчеты показали, что 1 г полимера ВПК при рН 7,26 - 6,74  может удержать, 21-25 г бычьего сывороточного альбумина, имеющего молекулярную массу 105 Да, а 1 г полимера ПЭККА  (при рН 6,0-6,5) – 86 91 г. Поскольку бычий сывороточный альбумин является низкомолекулярным белком сыворотки крови животных, то были проведены теоретические расчеты по количеству удержания полимером ПЭККА молекул растительных белков, которые имеют значительно более высокую молекулярную массу, чем бычий альбумин. Расчеты показали, что 1 г ПЭККА, с молекулярной массой 106 Да,  может удержать в комплексе от 150 до 400 г растительного белка в зависимости от вида белка и его молекулярной массы.

2. В исследованиях in vitro было установлено, что высокомолекулярные водорастворимые полимеры, так же как некоторые химические вещества (альдегиды, спирты), хорошо «защищают»  протеин концентрированных кормов. Степень защиты в буферных растворах от растворимости протеина подсолнечного жмыха, обработанного 1% растворами формальдегида и глутаральдегида, а также 0,01% раствором ПЭККА, составляла 78,2; 67,1%; 50,8%, соответственно. При исследовании инкубированных в рубце таких же  образцов подсолнечного жмыха, обработанных альдегидами: 1% растворами формальдегида и глутаральдегида, а так же 0,01% раствором ПЭККА степень защиты  составляет 74,4%; 61,5%; 54,7%, соответственно. Следует отметить, что при сопоставимом эффекте количество ПЭККА было в 100 раз меньше, чем альдегидов.

3. Механизм защиты кормового белка от распада в рубце жвачных животных с применением высокомолекулярных полимеров отличается от известных способов защиты: молекулы полимеров образуют комплексы с протеинами концентрированных кормов при помощи кулоновских взаимодействий, при этом не изменяют химических свойств белковых молекул как это происходит, например при обработке корма формалином или при нагревании до высоких температур.

4. Установлено, что полимер ПЭККА, обладает хорошо выраженными сорбционными свойствами по отношению к ионам металлов. В опытах in vitro было показано, что степень сорбции молекулами ПЭККА ионов металлов: Cu+2, Zn+2, Cd+2, Pb+2 составляла 90-98%.

5. В опытах с ПЭККА было установлено, что интерполимерные комплексы с белком и ионами металлов образуются при рН среды 5,0 7,5.  В кислой среде при рН  1,5  комплексы не существуют.

6. На основании лабораторных исследований свойств высокомолеку-лярных водорастворимых полимеров, была разработана кормовая добавка нового типа для крупного рогатого скота, получившая коммерческое название «Солунат», двойного назначения: повышающая продуктивность животных и снижающая поступление радиоактивного цезия в продукцию животноводства. Основное действующее вещество Солуната – натриевая соль сополимера этиленкарбоновой кислоты и ее амида (ПЭККА). ПЭККА вносится в организм крупного рогатого скота с концентрированным кормом в ничтожно малых количествах, из расчета 500 мг или 1000 мг на 1 животное, с живой массой 500 кг.

7. При использовании Солуната обеспечение жвачных животных аминокислотами происходит не за счет питательных компонент добавки, как это происходит при применении традиционных кормовых добавок, а за счет лучшего усвоения белка, содержащегося в основном  корме.

8. Добавление Солуната в концентрированные корма приводило к снижению распадаемости сырого протеина в рубце коров на 8,2 в абс. %, что подтверждает существование эффекта «защиты» и объясняется тем, что активные центры полимерных молекул могут связываться с активными центрами части белковых молекул корма, что делает их недоступными для протеолитических бактерий рубцовой микрофлоры. При применении Солуната отмечена тенденция повышения рН содержимого рубца (рН=5,9  в контроле, против рН=6,1 в опыте).

9. При использовании Солуната несколько понижается амилолитическая активность рубцового содержимого, что позволяет увеличить поступление крахмала в кишечник, где он переварится без ферментативных потерь.

10. Введение Солуната в рацион  коров увеличивает переваримость питательных веществ в кишечнике. Особенно повышалась переваримость сырого протеина – на 9,7 % относительно контроля. По-видимому, это связано с увеличением поверхности контакта ферментов с субстратом, посредством образования белок - полимерных комплексов. Это, очевидно, способствует повышению эффективности полостного и пристеночного пищеварения в тонком отделе кишечника.

11. Изучение показателей субхронической токсичности полимерной добавки Солунат показало отсутствие выраженных изменений каких-либо показателей, характеризующих состояние и функционирование различных систем организма крыс: кроветворную, центральную нервную систему, выделительную, иммунную и др. В экспериментах установлено, что Солунат  в дозах10мг/кг живой массы не оказывает мутагенного, эмбриотокси-ческого, гонадотоксического и тератогенного действия на организм лабораторных животных.

12. Анализ экспериментальных данных показал отсутствие токсичес-ких свойств кормовой добавки Солунат. У подопытных животных установлен высокий уровень естественной резистентности и иммунного статуса, о чем свидетельствует соответствие нормативным значениям показателей лейкоформулы, а так же характеристик функциональной активности нейтрофилов крови, бактерицидной активности сыворотки крови, концентрации общего белка, его фракций. Выявлено некоторое положительное влияние Солуната на иммунологические показатели: в период сезонно низкой резистентности у животных, получавших Солунат, была несколько выше концентрация общего белка в сыворотке крови, ФЧ и относительная поглотительная способность нейтрофилов по сравнению с контролем.

13. В серии производственных опытов в условиях хозяйств Белгородской, Ленинградской, Московской, Калужской, Брянской, Гомельской и др. областей показано положительное влияние Солуната на повышение молочной и мясной продуктивности крупного рогатого скота. При одинаковом основном рационе животных применение Солуната обеспечивало увеличение привесов молодняка крупного рогатого скота на 137173 г/(гол.*сут.) и удоев – 1,52,5 л/(гол.*сут.).

14. Впервые для снижения поступления 137Cs в продукты животно-водства предлагается использовать высокомолекулярные водорастворимые полимеры (ПЭККА), с молекулярной массой 106 Да, в виде растворимого гомогенно распределяющегося сорбента. В этом случае эффективная доза Солуната составляет 1,0 г/(гол.*сутки) и взаимодействие между сорбентом и металлом (в данном случае, с 137Cs) происходит не на границе раздела двух твердых поверхностей сорбент-металл, а на уровне активных ионных групп, расположенных на поверхности молекул полимера и ионов металла.

15. В исследованиях, проведенных в условиях хозяйств, располо-женных на радиоактивно загрязненных территориях, применение Солуната в эффективной дозе (1,0 г/(гол.*сутки) показало снижение содержания 137Cs в мышечной ткани бычков на 35– 38 % относительно контроля. Использование Солуната в рационе дойных коров в эффективной дозе снижало (относительно контроля), в среднем, поступление 137Cs в молоко на  30%; что было на 24% меньше, чем применение ферроцианидов (специфического сор-бента 137Cs в дозе 3 г/(гол.*сутки)–на 54%). При этом молочная продуктив-ность повышалась, в среднем на 1,5 л/(гол.*сут.), а мясная–на 173 г/(гол.*сут.).

Предложения производству

  1. Рекомендовать скотоводческим хозяйствам, находящимся как в  условно «чистых» регионах, так и на радиоактивно загрязненных  (137Cs) территориях, использовать кормовую добавку Солунат в рационе крупного рогатого скота.
  2. С целью повышения молочной продуктивности скота предлагается использовать Солунат в смеси с концентрированным белковым кормом в дозе 500 мг/(гол.*сут.) (по активному веществу) как на территориях загрязненных 137Cs, так и на территориях, не подверженных загрязнению радионуклидами. Для получения максимального эффекта рекомендуется начинать дачу Солуната стельным сухостойным коровам за месяц до отела и продолжать в течение всей лактации.
  3. Для повышения мясной продуктивности молодняка крупного рогатого скота производству предлагается вводить в концентрированные белковые корма Солунат в дозе по активному веществу – 250 мг/(гол.*сут.) телятам с живой массой менее 200 кг и 500 мг/(гол.*сут.) телятам с живой массой более  200 кг.
  4. Для снижения уровней накопления 137Cs в молоке коров наиболее эффективной дозой (по активному веществу) является 1,0 г/(гол.*сут.). При уровнях «загрязнения» молока  137Cs с невысоким превышением санитарно-гигиенических нормативов, целесообразно использовать Солунат в дозах 0,5 г/(гол.*сут.). При содержании 137Cs в молоке коров выше 150 Бк/кг, рекомендуемая суточная доза Солуната – 1,0 г/голову.
  5. Для снижения концентрации 137Cs в мышечной ткани молодняка крупного рогатого скота  наиболее эффективной дозой Солуната (по активному веществу) является – 0,5 г/(гол.*сут.) телятам с живой массой менее 200 кг  и  1,0 г/(гол.*сут.) телятам с живой массой более  200 кг.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

Публикации в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК:

  1. Грудина Н.В. Повышение эффективности высококонцентрирован-ных белковых кормов путем применения защищающих агентов/ В.И. Луховицкий, Р.М. Алексахин, Н.С. Грудин, Б.Д. Кальницкий, А.М. Соловьев //Доклады РАСХН.- 2005.-№2.- С.33-35.
  2. Грудина Н.В. Механизм «защитного» действия высокомолекуляр-ных водорастворимых полимеров на распадаемость протеина кормов в рубце жвачных животных/ В.И. Луховицкий, Р.М. Алексахин, Н.С. Грудин, Б.Д. Кальницкий, А.М. Соловьев //Доклады РАСХН.- 2006.-№1.- С.34-36.
  3. Грудина Н.В. Роль техногенного загрязнения радионуклидами и тяжелыми металлами в скотоводстве/Н.Н. Исамов, В.С. Анисимов, Е.Х. Ткачук // Вестник РАСХН.- 2003.- №1.- С. 20-21.
  4. Грудина Н.В. Метод определения бета-литической активности крови крупного рогатого скота/ В.Я. Саруханов, Н.Н. Исамов, П.Г. Царин //Сельскохозяйственная биология.- № 2005.- № 6.- С. 115-117.
  5. Грудина Н.В., Солунат – это ежесуточная прибавка молока/ В.И. Луховицкий, Б.Д. Кальницкий //Животноводство России.- 2008.- №5.- С. 54 – 55.
  6. Грудина Н.В. Влияние полимерной добавки Солунат на пищеварение жвачных животных/Н.В. Грудина//Проблемы биологии продуктивных животных.- 2009.- №2.- С. 106-110.
  7. Грудина Н.В. Использование препарата Солунат, созданного на основе полимеров, при выращивании бычков / Н.В. Грудина //Доклады РАСХН.- 2009.- №6.- С.39- 40.
  8. Grudina N.V. Use of trePolymer-Based Drag Solunat in Raising Calves. (Применение полимерной добавки Солунат при выращивании телят)/ N.V. Grudina // «Russian Agricultural Sciences.- 2009.- Vol. 35, №6.- Р. 404 -406.
  9. Грудина Н.В. Сорбционные и диффузионные свойства высокомоле-кулярных водорастворимых полимеров, используемых в качестве основы новых кормовых добавок/ В.В. Быданова, Н.С. Грудин //Проблемы биологии продуктивных животных.-2011.-№1.-С. 101-106.
  10. Грудина Н.В. Влияние полимерной кормовой добавки на показатели здоровья крупного рогатого скота/ Н.В. Грудина// Проблемы биологии продуктивных животных.-2011.- №1.- С. 107-111.

Патенты:

  1. Грудина Н.В. Способ протектирования белкового корма для сельскохозяйственных животных и протектор для его  осуществления /В.И. Луховицкий, И.В. Добров, А.М. Соловьев, В.Н. Федичкин, В.Р. Дуфлот, Р.М. Алексахин, Б.Д. Кальницкий, В.В. Дубовик //Заявка № 2000126336, Патент РФ № № 2173057, 2001.
  2. Grudina N.W. Verfahren zum Schutz von Eiweissfutter mit polyacrylamid /W Luchowizkij, I. Dobrow, A.Solowjow, , W. Feditschkin, W Duflot, R. Alexachin, B. Kalnizkiy, W. Dubowik //Патент Европейского Союза № 1 198 993 В1, 2001.

В сборниках научных трудов институтов и материалах конференций:

  1. Грудина Н.В. Оценка защитных свойств сорбентов и ингибиторов при получении экологически чистой продукции животноводства/ А.В. Васильев, А.Н. Ратников, Е.Г. Краснова, Н.Н. Исамов// Регионал. конкурс научных проектов в области естественных наук: сб. трудов конкурса (Калуга, 2000 г).- (Калуга, 2000). -Вып.1.- С. 213-221.
  2. Грудина Н.В. Сравнительная оценка реакции периферической гемодинамики на внешнее гамма-облучение у овец и лошадей/ В.А. Козлов, Н.Н. Исамов // 1У съезд по радиационным исследованиям: тезисы докл. на междун.съезде (Москва, ноябрь 2001 г.).- Москва, 2001.-Т.2.- С.649-650.
  3. Грудина Н.В. Оценка состояния здоровья животных, содержащихся на территориях, загрязняемых тяжелыми металлами/ Л.А. Бастракова, В.Н. Исакова, В.Я. Саруханов, В.А. Козлов, И.В. Жуков //Агроэкологические проблемы сельскохозяйственного производст-ва в условиях техногенного загрязнения агроэкосистем: сборник докладов Всерос. научно-практ. конф. (Казань, 2002 г).- Часть II. – Казань, 2002.- С. 248-250.
  4. Грудина Н.В. Использование кормовой добавки Солунат для снижения концентрации 137Cs в молоке лактирующих коров в хозяйстве Брянской области/ В.И. Луховицкий, А.М. Соловьев, Н.С. Грудин//Опыт преодоления последствий катастрофы на Чернобыльской атомной станции. Экология, безопасность и устойчивое развитие - XXI век: тезисы докл. на междун. научно-практ. конф. (Новозыбков, 20-21 сентября 2002 г.).- Брянск, 2002.- С. 127-131.
  5. Грудина Н.В. Биолого-экологические эффекты у животных при загрязнении пастбищ радионуклидами и тяжелыми металлами/ Н.Н. Исамов, В.С. Анисимов, Е.Х. Ткачук// Опыт преодоления последствий катастрофы на Чернобыльской атомной станции. Экология, безопасность и устойчивое развитие - XXI век: тезисы докл. на междун. научно-практ. конф. (Новозыбков, 20-21 сентября 2002 г.).- Брянск, 2002.- С.122-125.
  6. Грудина Н.В., Рациональное использование протеина при кормлении скота/ Н.С. Грудин, В.И. Луховицкий, А.М. Соловьев// Физико-технические проблемы создания новых технологий в агро-промышленном комплексе: тезисы докл. 2-ой Российс. научно-практ. конф. (Ставрополь, апрель, 2003 г.).- Ставрополь, 2003.- Т.1.- С.173-175.
  7. Грудина Н.В. Кормовая добавка Солунат - высокоэффективное средство повышения продуктивности сельскохозяйственных животных/ Р.М. Алексахин, Н.С. Грудин, Б.Д. Кальницкий, В.И. Луховицкий, А.М. Соловьев, В.Н. Федичкин // Био-технология-2003: тезисы докл. конф. (Пущино, ноябрь 2003 г.).- Пущино, 2003.- С. 71.
  8. Грудина Н.В. Применение полимерной кормовой добавки Солунат на радиоактивно загрязненной территории /В.И. Луховицкий, Н.С. Грудин, П.Н. Цыгвинцев, А.А. Царенок, А.Ф. Гвоздик, Н.В. Телицына //Актуальные проблемы дозиметрии: тезисы докл. 5-го междун. симпозиума (Республика Беларусь, Минск, 20-21 окт. 2005 г). - Минск, 2005.- С.69-71.
  9. Грудина Н.В., Препарат нового поколения Солунат для повышения молочной продуктивности коров. /В.И. Луховицкий, Н.С. Грудин, В.В. Быданова, Л.А. Бастракова// Молочное и мясное скотоводство: состояние и перспективы развития в Южном Федеральном Округе: сб. науч. труд. всерос. научно-практ. конф. (Черкесск, 2007 г.).- Черкесск, 2007.- С.168-171.
  10. Грудина Н.В. Новое поколение кормовых добавок для сельскохозяйственных животных на основе высокомолекулярных водорастворимых полимеров /В.И. Луховицкий, Н.С. Грудин, В.В. Быданова, В.М. Артюх // Проблемы увеличения производства продуктов животноводства: сб. трудов ВИЖа (Дубровицы-ВИЖ, 21-23 окт. 2008 г.).- Дубровицы, 2008.- С. 258-260.
  11. Грудина Н.В. Рациональное использование протеина для крупного рогатого скота/Н.В. Грудина// Комбикорма.- 2008.- №3.- С. 73 – 75.
  12. Грудина Н.В. Классификация защитных мероприятий и технологий по снижению перехода радионуклидов и тяжелых металлов в сельскохозяйственную продукцию. В кн.: «Технологические приемы, обеспечивающие повышение устойчивости агроценозов, восстановление нарушенных земель, оптимизацию ведения земледелия и получение соответствующей нормативам сельскохозяйственной продукции» под ред. проф. Санжаровой Н.И. Обнинск. - 2010.- С. 29-36.



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.