WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

 

На правах рукописи

ВАСИЛЕНКО  ТАТЬЯНА ФЕДОРОВНА

ЭСТРАЛЬНАЯ ЦИКЛИЧНОСТЬ У ДОМАШНИХ И ДИКИХ ЖВАЧНЫХ ЖИВОТНЫХ В ЛАКТАЦИОННЫЙ ПЕРИОД

03.00.13 физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

МОСКВА  2007

Работа выполнена в ГУ Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук.

Научный консультант:

доктор биологических наук,

академик РАН Рощевский Михаил Павлович 

Официальные оппоненты: 

  доктор биологических наук,

  профессор Максимов Владимир Ильич

 

заслуженный деятель науки РФ,

доктор биологических наук,

профессор  Горшков Григорий Иванович

доктор биологических наук,

профессор  Грушкин  Александр Георгиевич

Ведущая организация:  ГНУ Уральский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук 

Защита состоится  «  »  2008 г.  в ------- часов на заседании диссертационного совета  Д 220 042 04 в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина» по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина».

Автореферат разослан «…..» 2007 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета В.Д. Фомина

1. ОБЩАЯ  ХАРАКТЕРИСТИКА  РАБОТЫ

Актуальность исследования. Основным назначением репродуктивной функции является осуществление способности организма к самовоспроизведению и обеспечению существования вида. Эколого-физиологические особенности функции размножения у диких жвачных животных тесно связаны с сезонной обеспеченностью кормами (Nelson, Demas, 1997; Thiery et al., 2002) и характеризуются сокращенным до одного-двух месяцев лактационным  периодом. Подготовка к гону у этих животных зависит от успешности набора массы тела (Thomas, 1982; Reimers, 1983; Tyler, 1991; Cameron et al., 1993; Cameron, Ver Hoff, 1994; Willard et al., 1999; Rostad, 2000). Длительность фотопериода является сигнальным фактором среды для синхронизации годовых ритмов репродукции и других физиологических функций у диких жвачных животных в условиях Севера. Световые импульсы через вариации в секреции мелатонина шишковидной железой трансформируются в нервные и гормональные изменения, которые определяют  цикличность функции размножения у этих животных (Cardinali, Pvet, 1998; Lincoln, Richardson, 1998; Goldman, 1999; Thiery et al, 2002).

Репродуктивная функция домашних жвачных животных эволюционировала под влиянием созданных человеком стационарных условий кормления и содержания. Эффективность воспроизводства коров зависит от качества кормов и уровня обменных процессов, обусловленных кормлением. Однонаправленная селекция коров по уровню молочной продуктивности оказывает влияние на увеличение длительности периода от родов до возобновления физиологически полноценных эстральных циклов. Процесс формирования циклов в организме самок домашних жвачных животных в послеродовой лактационный период и его зависимость от состояния внутренних сред организма (крови и влагалищной среды) не достаточно исследован и не определены условия восстановления  полноценных циклов.

Важная роль в инициации эстральной цикличности у коров принадлежит стероидным гормонам - прогестерону и эстрогенам (Lammoglia M.A. et al., 1997), предшественником которых является холестерин. Определена видовая специфичность динамики холестерина у самок животных в зависимости от стадии репродуктивного цикла (Fillios et al., 1958; Bosch, Camejo, 1967; Zilversmit et al., 1972; Kessler, Rawlins, 1983; Quig, Zilversmit, 1986; Knopp et al, 1985, 1992; Smith et al., 1998;  Wright-Rodgers et al., 2005). Содержание холестерина в сыворотке крови коров зависит от сроков послеродового периода (Eicher et al., 1999). Не исследована динамика содержания холестерина в крови коров в зависимости от стадии репродуктивного цикла и  после родов в процессе формирования полноценных или неполноценных эстральных циклов.

В ходе репродуктивного цикла у самок животных изменяется содержание клеток разной морфологии во влагалищном эпителии, которые обусловлены влиянием гормональных регуляторов (Арсеньева, 1977; Dore, 1978, 1978 a; Martin, 1980). По качественному и количественному составу клеток покровного эпителия влагалища можно оценивать отдельные стадии эстрального цикла и функциональное состояние яичников у животных. Важным в определении закономерностей возобновления функциональной активности яичников у жвачных животных являются характеристики эстральных циклов на основе динамики различных типов клеток эпителия влагалища.

  Нарушение возобновления эстральной цикличности и удлинение анэстрального периода у коров предполагает широкое использование стимуляторов репродуктивных процессов. Однако их применение должно быть основано на знании механизма формирования эстральной цикличности. Особое значение приобретают исследования воздействия естественных регуляторов эстральной цикличности, содержащих предшественники синтеза эстрогенов, стероидные вещества животных тканей или растений, для обоснования использования этих препаратов в рационе кормления домашних жвачных животных с целью коррекции течения послеродовых репродуктивных процессов.

Диссертационное исследование проведено в соответствии с темой научных исследований, проводимых согласно планам НИР ГУ Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук: “Состояние обмена веществ и репродукции жвачных животных в условиях Севера” (№  ГР  01.87.0001936), “Физиологические и биохимические механизмы проявления половой функции самок жвачных животных в условиях Севера” (№ ГР 01.9.10031624), “Ассимиляция питательных веществ и межуточный метаболизм в эндотрофических цепях у жвачных животных” (№ ГР 01.96. 001832).

Цель работы - сравнительно-физиологическое изучение механизмов формирования эстральных циклов в репродуктивной функции самок диких и домашних жвачных животных в послеродовой лактационный период.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

  1. Определить закономерности возобновления функциональной активности яичников по характеристикам эстральных циклов у коров в послеродовой период на основе исследования биохимического состава крови, содержания различных типов клеток эпителия, выстилающего влагалище, и физико-химических свойств цервико-вагинального секрета.
  2. Выявить информативные тесты формирования физиологически полноценных эстральных циклов, характеризующие условия в организме продуктивных животных. 
  1. Изучить возобновление эстральной цикличности и ее зависимость от овариальной функции у самок диких жвачных животных в послеродовой лактационный период на примере лосих Печоро-Илычского государственного природного заповедника. 
  2. Исследовать влияние препаратов, повышающих содержание стероидных гормонов, и биологически активных веществ из животных тканей и растений на функциональное состояние яичников и прохождение эстральных циклов у коров в послеродовой период.

5. Оценка и разработка научно-обоснованных рекомендаций использования биостимуляторов в составе кормов для коров в послеродовой период и/или в отдельные стадии цикла для ускоренного восстановления полноценной эстральной цикличности и сокращения периода от родов до оплодотворения.

Научная новизна. Установлено, что возобновление эстральных циклов у самок домашних жвачных животных в лактационный период характеризуется существенным увеличением содержания общего холестерина в сыворотке крови коров, отражающего специфику трансформации метаболических потоков в переходный период от  беременности к послеродовому этапу для создания условий в организме животных для восстановления полноценных эстральных циклов и оплодотворения.

Показана динамика содержания клеток поверхностного эпителия из краниального отдела влагалища и физико-химические характеристики цервико-вагинального секрета у коров в зависимости от функционального состояния яичников и полноценности эстральных циклов.

Впервые определено функциональное состояние яичников у лосих в послеродовой  период на основании исследования клеток различной морфологии на мазках, взятых с поверхностного эпителия краниального отдела влагалища, и выявлено, что изменение поведенческой реакции у лосих в эструсе не связано с активацией функционального состояния яичников.

Впервые установлено восстановление полноценных эстральных циклов и уменьшение периода от родов до оплодотворения у коров при использовании препаратов, содержащих предшественники синтеза стероидов (калиевая соль уксусной кислоты), экзогенные эстрогены и прогестерон (плацента) и вещества стероидной природы  (надземные части растений рапонтик - Rhaponticum carthamoides и серпуха - Serratula coronata).

Научно-практическая значимость работы. На основании раскрытия физиологических механизмов регуляции эстральной цикличности установлена  закономерность достоверного повышения содержания общего холестерина в сыворотке крови коров, как условия возобновления функциональной активности яичников и полноценных эстральных циклов в послеродовой период.

Запатентовано два способа определения функционального состояния яичников у коров (Патенты  РФ № 2155016 от 28.08.2000 и № 2211683 от 10.09.2003) на основе результатов исследования биохимического состава крови, содержания различных клеток влагалищного эпителия,  отражающего итоговую реакцию на яичниковые гормоны, и физико-химических характеристик секрета влагалища.

Разработана рецептура и технология получения кормового препарата с использованием измельченных тканей плаценты коров и получен патент на способ его приготовления (Патент РФ № 2065704 от 27.08.1996). Предложены и запатентованы два способа включения препарата из плаценты в корма в отдельные периоды репродуктивного или эстральных циклов у коров с целью стимулирующего воздействия на функциональное состояние яичников, сокращения сроков от родов до возобновления полноценной эстральной цикличности и оплодотворения (Патенты РФ 2026075 от 10.01.1995 и № 2070389 от 20.12. 1996). 

Получены патенты на способы сокращения анэстрального периода и стимуляции становления результативных овуляторных циклов у коров  после родов на основе включения в рацион препаратов, содержащих вещества стероидной природы растений рапонтик сафлоровидный (Rhaponticum carthamoides) и серпуха венценосная (Serratula coronata) (Патенты РФ № 2028806 от 25.02.1995,  № 2099963 от 27.12.1997 и № 2218929 от 20.12.2003).

Получен патент на способ регуляции воспроизводительной  функции коров в послеродовой период, основанный на включении калиевой соли уксусной кислоты в корма с повышенной пропорцией белковых (концентрированных) кормов, что способствует увеличению содержания холестерина в крови коров, прохождению овуляторных циклов и увеличению  вероятности оплодотворения коров (Патент РФ № 2125369 от 27.01.1999).

Получен патент на способ определения функционального состояния яичников у лосих (Патент РФ № 2148388 от 10.05.2000) на основе исследования содержания различных клеток влагалищного эпителия,  отражающего итоговую реакцию на яичниковые гормоны.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Прохождение эстральных циклов у домашних жвачных животных в послеродовой лактационный период контролируется выработкой гормонов при одновременном созревании яйцеклеток в доминантных фолликулах яичников и создании определенных условий в организме и органах репродуктивной системы (крови и влагалищной среде).

2. Достоверное увеличение содержания общего холестерина в сыворотке крови  коров в послеродовой период является критерием успешности трансформации метаболических потоков при смене физиологического состояния беременности на послеродовой период и способствует  восстановлению результативных эстральных циклов.

3. На основании исследования клеток различной морфологии на мазках, взятых с поверхностного эпителия краниального отдела влагалища, проявляющийся у диких жвачных животных в период лактации эструс отражает изменение поведенческой реакции и не связан с активацией функционального состояния  яичников.

4. Дополнительное включение в корма препаратов, содержащих биологически активные вещества, способствует восстановлению полноценных эстральных циклов и оплодотворению коров в ранние сроки лактации. 

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены автором устно и обсуждены на III и IV Международных симпозиумах по лосю (Сыктывкар,1990;  Фэрбенкс, Аляска, 1997); VII, VIII и IX Международных симпозиумах по новым кормовым растениям “Эколого-популяционный анализ кормовых растений естественной флоры, интродукция и использование“ (Сыктывкар, 1990, 1996, 1999); Международной конференции: “Актуальные проблемы биологии в животноводстве“ (Боровск, 2000); Международном совещании по фитоэкдистероидам (Сыктывкар, 1996); XIX и ХХ съездах Физиологического общества им. И.П.Павлова (Екатеринбург, 2004; Москва, 2007);  I Съезде физиологов СНГ (Сочи, Дагомыс, 2005); III Съезде физиологов Урала (Екатеринбург, 2006); 2-й Российской научно-практической конференции: “Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными растительными ресурсами и создания функциональных продуктов» (Москва, 2003); Республиканской научно-практической конференции “Рыночные отношения в агропромышленном комплексе Республики Коми: современное состояние и перспективы” (Сыктывкар, 1998); на семинарах научной школы академика М.П.Рощевского (Сыктывкар, 2005, 2006).
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 67 научных работ. Список основных публикаций содержит 17 статей (в том числе 5 в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ), 10 патентов, 34 -материалы и тезисы докладов,  5 публикаций информационных материалов.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методов и материалов исследования, результатов и их обсуждения, заключения, выводов, списка литературы  и  приложения. Работа изложена на 260 страницах машинописного текста, включая 13 рисунков, 35 таблиц. Библиографический раздел включает 506 источников, в том числе  263  – зарубежных авторов.
2. МАТЕРИАЛЫ  И  МЕТОДЫ  ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в ГУ Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук. Эксперименты проводили на клинически здоровых животных фермы  Выльгордской научно-экспериментальной биологической станции Коми научного центра с декабря по июнь-месяц в течение 1981-1998 гг. Использовали коров холмогорской породы 3-11-летнего возраста с живой массой 500-750 кг со среднегодовой молочной продуктивностью 4000 кг и выше.

Исследования состояния репродуктивной функции и суточной молокопродукции у лосих проводили на лосеферме Печоро-Илычского государственного природного заповедника. В течение четырех лет обследовали семь лосих в предродовый период в мае – начале июня, 17 лактационных периодов у пяти животных в возрасте от трех  до 13 лет и  девять животных – после родов в июне, августе и октябре.

Опытные и контрольные группы формировали животными-аналогами по возрасту,  продуктивности, характеру изменений течения послеродового периода, сроков после родов и т.д. Общее число животных составило 546, из них коров - 525 и лосих - 21. В ходе экспериментальных исследований проводили ежедневные (до трех-пяти раз в сутки) наблюдения индивидуально за каждым животным. Всего проведено 148500 обследований.

Методика исследования воспроизводительной функции коров и лосих заключалась в клиническом обследовании животных в определенные сроки после родов и беременности, биохимическом анализе крови и влагалищного содержимого.

Взятие образцов крови из яремной вены коров и лосих осуществляли через три часа после утреннего кормления в предродовой период, сразу после родов, каждые 15 дней лактационного периода и на первых месяцах беременности. Исследовали пробы крови на содержание общего белка и белковых фракций крови по Лебедеву, Усовичу (1976);  холестерина - методом Илька (Методические указания…, 1973); каротина унифицированным способом; витамина А - по Сурай и др. (1987).

Эксперименты по изучению эстральной цикличности у коров выполняли в течение ряда лет на одних и тех же животных методом периодов при соблюдении времени и последовательности использования различных приемов, предусмотренных постановкой экспериментов.

Функциональное состояние яичников определяли по исследованию зависимым от гормонального фона морфофункциональным изменениям покровного эпителия краниального отдела влагалища самок животных в послеродовом периоде. Метод был  разработан нами для коров и лосих (Василенко, Борисенков, 1987; Василенко, 2000 а, б).

Метод определения функционального состояния яичников у коров включает взятие мазка из верхнебокового свода влагалища на уровне шейки матки путем снятия клеточной массы со стенок пипеткой для искусственного осеменения с обработанным шероховатым концом (5-7 см). Пипетку вводили через вагинальное зеркало с подсветкой под визуальным контролем. Материал, взятый со стенки влагалища, равномерно распределяли по предметному стеклу. Сразу после взятия высушенные мазки фиксировали в 70 спирте в течение 10 минут. Окраску мазков проводили по методу Романовского-Гимза. С помощью клавишного счетчика подсчитывали 200 клеток в разных участках на мазках, используя микроскоп Biolar (увеличение 12х10).

На мазках, взятых у коров, отмечали наличие четырех типов десквамированных клеток: 

1. Клетки собственно поверхностного слоя влагалищного эпителия - самые крупные клетки со слабо ацидофильной или слабо базофильной окраской, иногда вакуолизированные. Ядро большое, круглое или овальное, интенсивно окрашенное.

2. Большие промежуточные клетки влагалищного эпителия, прилегающие к клеткам собственно поверхностного слоя, отличаются от базальных клеток интенсивной ацидофильной окраской цитоплазмы.

3. Малые промежуточные клетки круглой, овальной или треугольной формы с цитоплазмой, чаще окрашенной в слабые базофильные поля.

4.  Единичные клетки  парабазального слоя. Ядро большое, круглое, окружено ободком цитоплазмы.  Клетки по величине не больше лимфоцита.

Определение принадлежности клеток к определенному типу осуществляли с использованием классификации клеток влагалищного эпителия для женщин (Арсеньева, 1977) и собак (Dore, 1978, 1978 а). В группу поверхностных клеток влагалищного эпителия включали также безъядерные или с чуть заметными контурами ядра прозрачные чешуйчатые клетки со слегка базофильной или бесцветной цитоплазмой, так называемые “тени”, по аналогии с “тенями” эритроцитов. Такие клетки часто располагаются отдельно, имеют закрученные края. В эту группу клеток включали дополнительно обособленные ядра и “тени” ядер при цитолизе.

Учитывали следующие характеристики клеточного состава влагалищных мазков у коров в послеродовом периоде: изменения в содержании отдельных типов поверхностных клеток, цитолиз или наличие ядер без цитоплазмы и их "теней" и появление лейкоцитов. Каждый тип клеток представляли в процентах от суммы.  Лейкоциты и другие клетки  крови отмечали отдельно. При обследовании одного животного осуществляли взятие двух-трех мазков.

Для диагностирования яичников у животных определяли процентное содержание собственно поверхностных клеток с четким ядром и ядер без цитоплазмы и их «теней».  При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и ядер без цитоплазмы и их «теней» не более 1,3% диагностировали  предовуляторный  период полового цикла и делали заключение о наличии  благоприятных условий для оплодотворения коров. При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и обособленных  ядер и их «теней» в пределах 3,1 – 8,5% диагностировали  беременность и судили о благоприятных условиях для  развития плода.

Влагалищные мазки были взяты у 143 коров в определенные периоды после родов и у 56 животных – на разных сроках  беременности. Забор мазков осуществляли у семи лосих: в июне-августе у пяти лактирующих лосих и в период гона у двух самок в возрасте 16 месяцев в специально оборудованном станке на лосеферме.

Для характеристики возобновления эстральных циклов у коров определяли  длительность временного промежутка в днях от родов до появления признаков проявления половой охоты – отказ от корма, беспокойство, снижение удоя, изменение двигательной активности и поведенческих реакций у животных (проявление рефлекса вспрыгивания на других животных стада или состояния неподвижности в конце истинной половой охоты).  Исследовали возрастные особенности возобновления эстральных циклов у 45 коров трех-шестилетнего возраста в течение 5 лет. Учитывали периоды выделения цервико-вагинального секрета, осуществляли отбор проб секрета и исследовали  концентрацию водородных ионов (рН), показатель преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете на рефрактометре ИРФ-22. Проводили забор мазков и осуществляли подсчет количества разных типов клеток эпителия, выстилающего краниальный отдел влагалища.

Определяли длительность циклов и половой охоты (эструса) в цикле у 73 животных. Отмечали особенности проявления циклов - овуляторный (нормальный) заканчивается овуляцией и оплодотворением; ановуляторный - без овуляции; ареактивный цикл - без стадии возбуждения; нерегулярный цикл - с изменением длительности и т.д.

Проводили эксперименты по изучению влияния  на функциональное состояние яичников и возобновление эстральных циклов у коров в послеродовой период дополнительного использования в рационе экспериментальных препаратов с включением калиевой соли уксусной кислоты или животных тканей и растений, содержащих биологически активные вещества:

  1. 20%-й водный раствор калиевой соли уксусной кислоты по 200-250 мл на корову в сутки. Водный раствор соли смешивали с любым наполнителем (концентрированные корма, сенная резка, травяная мука и т.д.). Общие затраты уксуснокислого калия составили 600-750 г на животное. Препарат использовали в кормлении коров в течение 15 дней в определенный физиологический период после родов. Проведено три серии опытов, протяженностью от трех до шести месяцев. Обследовано 21 животное.
  2. Смесь свежих или свежезамороженных измельченных тканей плаценты (плацентом с соединительно-тканными оболочками и остатками околоплодных вод) с наполнителем (травяной мукой, сенной резкой и т.д.) в соотношении 1:1. Препарат использовали  в зависимости от физиологического состояния коров в течение 33-44 дней до и после родов. Общие затраты препарата на животное за весь период составляют 16,2-18,6 кг. Чистые затраты плаценты равны  8,1-9,3 кг, что несколько превышает вес плаценты (последа), отделяемого у коров после родов (5,8-7,3 кг). Проведено 4 серии экспериментов. Общее число обследованных коров составило 43 (из них 23 получали обычный рацион  - контроль).
  3. Смесь плаценты с любым наполнителем в соотношении 2,5:1,0. Полученную смесь высушивали при температуре не выше 50 С, измельчали до порошкообразного состояния и фасовали на дозы. Препарат использовали  в качестве добавки к кормам животным в течение первых  20 дней после родов или с первого дня половой охоты (начала истечения цервико-вагинального секрета – течки) не более 5 дней. Общие затраты препарата на животное в течение 5 дней составляют 1,75 кг. Длительность  эксперимента составила 4 года. Общее количество обследованных коров равно 46.
  4. Кормовой препарат из надземных частей растения рапонтик сафлоровидный. Препарат вводили в рацион коров за 4-16 дней до родов, начиная с 0,1 кг в 1 сутки, и постепенно доводили до 1,0 кг в день прохождения родов и последующие 20-30 дней послеродового периода. Общую длительность скармливания препарата установили в 39-41 день. Расход муки из рапонтика на корову за весь период  составил в среднем  34,0 кг. Опыты выполняли в течение двух лет. Количество животных в эксперименте составило 34. Из них 14 коров находились на рационе без добавления стимулятора (контроль).
  5. Препарат на основе использования надземных частей растения серпуха венценосная. Скармливание проводили не более 10 дней животным после родов в зависимости от их физиологического состояния. Затраты препарата за весь период обработки составляли не более 200 г на животное.  Эксперименты проводили в течение трех лет на 15 животных.

Количество выполненных исследований по каждому параметру у  животных является средней величиной из проведенных параллельно двух -  трех исследований данного показателя у одного и того же животного. Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием пакета прикладных программ Statistica for Windows (Basic). Достоверность различий оценивали при уровнях значимости  р от < 0,05 до <0,001.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ  ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Характеристики эстральных циклов у коров и лосих после родов

3.1.1. Закономерности возобновления эстральных циклов у коров в первые месяцы лактационного периода

Изменение естественных ритмов репродуктивной активности у здоровых коров в условиях длительного стойлового содержания на Севере характеризуется удлинением интервала от родов до возобновления эстральной активности, увеличением количества прохождения неполноценных циклов и аритмией эстральной цикличности.

В течение первого месяца после родов возобновление эстральных циклов наблюдали в среднем у 37 % коров трех - шестилетнего возраста (n=45). С увеличением возраста животных и количества родов частота проявления цикла в первые месяцы лактационного периода заметно снижается: у 50% животных в шестилетнем возрасте первый цикл регистрировали свыше двух месяцев после родов.

В первые месяцы лактации регулярные повторения течки и изменения поведенческих реакций через 19-23 дня наблюдали у 25% (19 из 73) коров. У 75% животных (55 из 73) циклы повторялись с разной периодичностью. Их длительность варьирует от 16 до 30 дней. Увеличение протяженности эстральных циклов в основном происходило за счет удлинения периода охоты до 5-8 дней и более. При этом в 14% случаев отмечали циклы в 16-19 дней, в 59% случаев - в 20-23 дня, в 27%  случаев - 24 дня и более.

Таким образом, механизм формирования эстральной цикличности у коров эволюционировал под влиянием созданных человеком условий кормления и содержания. Изменение ритмов репродуктивной активности у домашних жвачных животных в условиях Севера характеризуется удлинением интервалов от родов до возобновления эстральных циклов, их аритмией и увеличением количества неполноценных циклов. Фактически у большинства коров период от родов до восстановления овуляторных циклов и оплодотворения превышает трехмесячный срок и приближен к показателям, которые характеризуют процессы восстановления полноценных циклов и оплодотворения у диких жвачных животных.

3.1.2. Биохимический состав крови в эстральном цикле коров

Процесс возобновления эстральной цикличности у самок домашних жвачных животных зависит от специфики перестройки метаболических потоков в организме при смене состояния беременности на послеродовой период.

Содержание общего белка в сыворотке крови коров было низким на девятом месяце беременности и в первую неделю после родов. К периоду возобновления первых эстральных циклов у самок домашних жвачных животных (35-й  день после родов) и оплодотворению (49-й день и более) его количество достоверно увеличивается  до 78,0 г/л. Альбумино-глобулиновый коэффициент крови у здоровых коров после родов сохраняется на уровне 1,70 (табл. 1.).  Результаты получены на коровах, рацион кормления которых был сбалансирован по основным питательным веществам в зависимости от изменения физиологического состояния и уровня молочной продуктивности (Кочанов, Чувьюрова, 1988).

Таблица 1 - Общий белок и альбумино-глобулиновый коэффициент крови коров  перед родами и в послеродовой период

Период

Общий белок,

г/л

А/Г коэффициент

n

До родов:

8 дней

69,5±1,3

2,03±0,28

10

После родов:

7 дней

69,7±1,5

1,74±0,18

14

35 дней

(возобновление

первых  циклов)

77,6±0,9*

1,63±0,14

31

49 дней и более

(полноценные циклы)

78,8±0,8

1,70±0,10

39

* - р<0,001.

Альбумино-глобулиновый коэффициент крови у продуктивных жвачных животных в предовуляторный период эстрального цикла перед осеменением с последующим оплодотворением, а также в первый и второй месяцы беременности находится на уровне 1,70, оптимальном для данного показателя, при сохранении содержания белка в пределах  75,7-78,8 г/л.

Содержание общего холестерина в сыворотке крови коров в конце беременности составляет около 3,14 – 3,27 ммоль/л и увеличивается почти в два раза в первые месяцы после родов в условиях  возобновления полноценных эстральных циклов (табл. 2). Низкие концентрации холестерина в крови  животных после родов (в пределах 3,87-4,93  ммоль/л) наблюдали при неполноценных циклах (табл. 2).  Коровы с низким уровнем холестерина в крови после родов имели половые охоты с отсутствием отдельных этапов: “тихие” охоты - без проявления возбуждения и/или охоты  без овуляции.  Увеличение содержания холестерина в сыворотке крови самок домашних жвачных животных приводит к возобновлению физиологически полноценных эстральных циклов.

Таблица 2 - Холестерин в сыворотке крови коров в полноценные и неполноценные эстральные циклы

Период обследования

Полноценные циклы

Неполноценные циклы

Холестерин, ммоль/л

n

Холестерин, ммоль/л

n

После родов, мес.:

1-й

5,77 ± 0,18

14

3,87 ± 0,33

6

2-й

6,11 ± 0,21

14

  4,84 ± 0,23*

7

3-й

6.11 ± 0,19

20

4,71 ± 0,25

8

4-й

6.08 ± 0,47

  6

4,93 ± 0,33

4

*- р< 0,05 – статистически значимые изменения показателей по сравнению с результатами для предыдущего периода.

Содержание -каротина в крови животных в наиболее напряженный для витаминного обмена зимне-весенний период превышает допустимый уровень (0,20-0,30 мг в 100 мл) в два - три раза. Исследования содержания -каротина и витамина  А в крови коров после родов в конце пастбищного периода выявили, что при заметном увеличении каротина крови примерно в 1,5 раза, количество витамина А остается на уровне, определяемом у животных в конце стойлового периода. Результаты по уровню  -каротина и витамина А в крови коров после родов и в зависимости от сезона года дают основание полагать, что А-витаминная обеспеченность животных находилась в пределах оптимальных значений и не  являлась фактором, лимитирующим течение послеродовых репродуктивных процессов.

3.1.3. Клеточный состав влагалищного содержимого у коров в эстральном цикле и перед оплодотворением

Необходимые условия в организме коров для возобновления циклов обеспечиваются определенным уровнем гормональных регуляторов, суммарное действие которых отражается в изменении содержания клеток разной морфологии в эпителии, выстилающем влагалище.

У коров в течение первого эстрального цикла степень созревания клеток стенки влагалища (по количеству безъядерных эпителиальных клеток поверхностного слоя)  увеличена до 87%. Содержание собственно поверхностных клеток эпителия с ядром варьирует в пределах от 1,5 до 11%. Количество ядер без цитоплазмы, или степень цитолиза,  достигает  уровня 4,4% (рис 1., первый столбик).

При прохождении неполноценных циклов у коров количество собственно поверхностных эпителиальных  клеток с ядром увеличивается до 24 % на фоне уменьшения безъядерных клеток до 75 %. Содержание ядер без цитоплазмы и их теней составляет  5 % (рис. 1., второй столбик).

В полноценный эстральный цикл перед оплодотворением коров содержание безъядерных клеток эпителия на мазках достигает 92,3%, количество собственно поверхностных клеток эпителия с ядром  изменяется от 0,8 до 7,5%. Число ядер без цитоплазмы и их “ теней” уменьшается в четыре раза и более по сравнению с их содержанием на мазках у коров в первом цикле и составляет около 1% (рис.1., третий столбик).

3.1.4. Величины рН, рефрактометрический показатель цервико-вагинального секрета и клеточный состав влагалищных мазков у коров в предовуляторном периоде эстрального цикла

Исследовали условия во влагалищной среде (клеточный состав влагалищных мазков, рН и рефрактометрический показатель цервико-вагинального секрета) в ходе прохождения предовуляторного периода цикла у коров. Выявлены тесты, которые могут использоваться для диагностирования функционального состояния яичников.

Определение содержания клеток на мазках из краниального  отдела  влагалища  коров в предовуляторный период эстрального цикла перед оплодотворением показало, что количество собственно-поверхностных клеток выстилающего эпителия находилось в пределах 7,5%, а промежуточных клеток  составляло  менее 1,2%.  При этом величины  рН  цервико-вагинального секрета изменялись от 5,0 до 6,8, рефрактометрического показателя -  в более узких границах  (от 1,3342 до 1,3352).

На мазках, взятых у животных в предовуляторный период цикла при неплодотворных осеменениях, отмечено появление лейкоцитов. Однако в большей степени изменения касались величин рН и рефрактометрического показателя. Показатели рН повышались до 9,0,  рефрактометрический  показатель -  до 1,3360 – 1,3451.

3.1.5. Сравнительные исследования биохимического  состава крови у  лосих и коров в отдельные периоды репродуктивного цикла

Исследования метаболического профиля крови у лосих перед родами и в первые 20 дней лактации показали, что содержание общего белка практически не меняется и составляет 67,0 и 64,8±2,5 г/л, соответственно (табл. 3.).  У коров в конце беременности и в первые три недели после родов общий белок в сыворотке крови выше, и составляет соответственно 70,0±4,0 и 76,0±4,0 г/л. Величины альбумино-глобулинового коэффициента крови у лосих в конце беременности снижаются в два раза по сравнению с его уровнем в крови животных в послеродовой период. На девятом месяце беременности у коров показатели А/Г отношения превышают в 3,6 раза величины этого коэффициента у лосих. Альбумино-глобулиновый коэффициент крови у коров на 15-60-е дни после родов в 1,4 раза превышает значение этого показателя у лосих и составляет  в среднем 1,85±0,90.

Таблица 3 - Показатели сыворотки крови лосих в различные периоды репродуктивного цикла

Период обсле-дования

n

Холестерин, ммоль/л

n

Общий белок, г/л

Альбумино-глобулиновое

  отношение

9-й месяц беременности

7

2,01±0,37

2

67

0,56

4-60-й дни послеродового периода

9

1,79±0,36

6

65±5

1,34±0,44

Содержание предшественника  стероидных  гормонов холестерина в сыворотке крови лосих составляет:  перед родами - 2,01±0,37 ммоль/л, до 20-го дня после родов - 1,62±0,09 ммоль/л и к 50-му дню – 2,12±0,21.  

В  крови коров непосредственно перед родами уровень холестерина равен 3,14± 0,17 ммоль/л или в 1,6 раза выше, чем содержание  холестерина в сыворотке крови лосих в этот период.  Особенностью динамики общего холестерина крови у коров в зависимости от их физиологического состояния является заметное увеличение его содержания к моменту проявления первых эстральных циклов. 

3.1.6. Содержание эпителиальных клеток на влагалищных мазках  у лосих в послеродовой период

Исследования содержания клеток разной морфологии на мазках у лосих показали, что максимальное количество легко отторгаемых поверхностных клеток влагалищного эпителия - до 98-100% на 200 обсчитанных клеток отмечали на мазках у лосих на 51-й и 58-й день послеродового периода (рис. 2.).  Ближе к гону - на 99-й день после родов - содержание поверхностных клеток уменьшается до 90% и одновременно увеличивается количество промежуточных клеток в среднем до 10%.

Мы провели наблюдения за тремя лактирующими лосихами, находящимися в стадии возбуждения с заметным снижением суточного удоя на 51-й, 58-й и 99-й день после родов. У двух лосих отмечали выделение небольших количеств цервико-вагинального секрета (на 51-й и 58-й день).

На мазках у животных, проявляющих признаки так называемого “поведенческого” эструса, определили, что содержание собственно поверхностных эпителиальных клеток с четким ядром и ядер без цитоплазмы  и их “теней” близко к аналогичным значениям у лосих в ранний послеродовой  период на 7-й  и  17-й дни.

Из этого следует, что мы наблюдали феномен неполноценной  половой охоты, не связанной с соответствующей перестройкой в репродуктивных органах самок (влагалище), что и подтверждается недостаточной зрелостью поверхностных клеток эпителия со стенки краниального отдела влагалища и преждевременным отторжением собственно поверхностных оформленных клеток с ядром. Содержание собственно поверхностных оформленных клеток с ядром от общего количества клеток составило 13,7 - 22,5% , количество ядер без цитоплазмы  24-58,8%, в то время как у коров в период явной половой охоты перед оплодотворением эти индексы равнялись  0,8-7,5% и 0,5-1,3%.

Цитолиз (появление обособленных ядер и их "теней") на мазках у лосих наблюдали в течение всего послеродового периода: от 35-49% на 7-й и 17-й дни до 42,1-58,8% на 51-й и 58-й дни.  Содержание ядер и их "теней" на мазках у животных ближе  к  гону (99 дней после родов) уменьшается примерно в 1,5-2,5 раза и достигает 24%, эти величины приближаются к 2,4-6,3% - к концу гона. Количество ядер без цитоплазмы и их "теней" на мазках у коров в первую половую охоту (27-64 дней после родов) изменяется от 0,3 до 9,8% и от 0,5 до 1,3% - перед оплодотворением (49-67 дней послеродового периода).

3.2. Регуляция прохождения эстральных циклов у коров на основе использования биологически активных веществ кормовых препаратов

3.2.1. Восстановление полноценных эстральных циклов у коров после включения  калиевой соли уксусной кислоты в корма

Повышение пропорции белковых (концентрированных) кормов в рационе домашних жвачных животных в период лактации уменьшает поступление калия с кормами, снижает рН рубцовой жидкости и изменяет синтез органических кислот, уменьшая продукцию уксусной кислоты и увеличивая – пропионовой и масляной. Поскольку уксусная кислота является предшественником синтеза холестерина, изменение ее содержания в организме жвачных животных может оказывать влияние на уровень холестерина в крови. Использование в течение 15 дней в качестве добавки к белковым кормам по 200 мл 20% водного раствора калиевой соли уксусной кислоты для коров с низким уровнем холестерина на 60-90-е дни после родов достоверно увеличивало содержание холестерина в крови (рис. 3.). После включения уксуснокислого калия в корма полноценные половые охоты наблюдали у всех животных. Четыре коровы были оплодотворены в течение 42 дней после начала применения добавки и одна – через 90 дней.

3.2.2. Возобновление и прохождение эстральных циклов у коров в послеродовой период после использования в кормлении препарата плаценты. Изменение длительности циклов 

В эксперименте по включению  препарата плаценты в рацион коров в течение 38 дней до и после родов было установлено, что в зимний период интервал от родов до возобновления первого эстрального цикла у коров группы А на обычном рационе пролонгируется от  26 до 132 дней. У коров группы Б после использования 18,6 кг препарата плаценты в течение 38 дней до родов и в послеродовой период этот интервал составил в среднем 32,8 дня (табл. 4). Уровень оплодотворения коров групп А и Б соответственно достигает 34 и 80%. Животные группы Б были оплодотворены к 150-му дню после родов (100%) в то время, как у животных группы А этот показатель составил всего 68%.

Таблица 4 - Показатели репродукции коров на обычном рационе (группа А) и после использования препарата плаценты (группа Б)

Группа

n

Период

использования

препарата

Затраты препарата на корову, кг

Период от родов до первого эструса, дней

Показатель оплодотворения, %

до 80-го дня

до 150-го дня

А

6

-

-

26,4 ± 4,4 (3*)

52,0 – 132,0 (3*)

34

68

Б

5

38

18,6

32,8 ± 5,8

80

100

А

4

-

-

30,0 ± 7,0

25

25

Б

4

23

11,5

25,0 ± 2,0

50

100

* - количество животных

Во втором эксперименте в условиях уменьшения затрат препарата плаценты на животное до 11,5 кг в течение 23 дней проявление первого эструса наблюдали к 25-му дню после родов у коров группы Б. У коров группы А на обычном рационе этот период был удлинен до 30 дней (табл. 4). Показатель оплодотворения животных до 80-го дня составил 25% по группе А и 50% - по группе Б. К пяти месяцам после родов уровень оплодотворения у коров в опыте является оптимальным – 100%, в контроле сохранился на уровне 25% (табл. 4).

Включение препарата плаценты в корма животным с 16-18 дня эстрального цикла за три-пять дней до овуляции на 25-49-й дни после родов стимулирует прохождение овуляторных циклов с оптимальным показателем оплодотворения, равным 100%. После использования препарата плаценты в течение пяти дней в ходе циклов на 55-80-й дни после родов оплодотворилось 67% животных. В условиях использования препарата плаценты в конце циклов, имеющих место на 120-144 дни после родов оплодотворилось 60% животных в то время, как уровень оплодотворения животных на обычном рационе в этот период составил всего 40%.

Анализ сравнения показателей оплодотворения коров после включения препарата из плаценты в корма животным в период от родов до 100 дней с  величинами оплодотворения коров трех-шестилетнего возраста в контроле выявил, что использование добавки увеличивает оплодотворяемость животных до 76% против 37% у коров, содержащихся на обычном рационе.

В период 101-200 дней после родов уровень оплодотворения  животных после использования добавки в ходе прохождения половых охот составил 69% против 32% у коров на рационе без добавки. Увеличение показателя оплодотворения животных до 83 % отмечали после использования препарата из плаценты в кормлении коров в период 201-475 дней после родов.

Продолжительность эстрального цикла у коров в среднем составляет 20-23 дня. Результаты проведенных исследований показали, что обычно в условиях стойлового содержания в 59% случаев  длительность цикла равна 20-23 дням, в 27% - 24 дня и более и в 14% - 16-19 дней. После применения препарата из плаценты у коров в 58% случаев наблюдали циклы  в  20-23 дня, по 21% случаев - 24-30 дней и 16-19 дней.

3.2.3. Влияние применения кормовых препаратов из растений рапонтик сафлоровидный и серпуха венценосная на функциональное состояние яичников и течение эстральных циклов у коров 

Уменьшение уровня стероидных гормонов в крови  коров  после родов может быть одной из причин нарушения возобновления эстральных циклов (Савченко,1975; Савченко, Степанов, 1981; Нежданов, Соловьев, 1988 и др.). Применение в кормлении животных растительного сырья с высоким содержанием веществ стероидной природы оказывает влияние на проявление функциональной активности яичников и прохождение эстральных циклов.

Экспериментальные кормовые добавки с включением определенных количеств муки из надземной части растений  рапонтик или серпуха в смеси с наполнителем использовали в кормлении коров в течение одной-двух недель до родов и/или в отдельные интервалы послеродового периода.  Затраты расхода муки из серпухи на животное рассчитывали с учетом содержания в ней  20 – гидроксиэкдизона.

Включение в рацион до 34 кг муки из рапонтика на одну корову в течение 40 дней до и после родов благоприятно сказалось на возобновлении циклической активности яичников: первую половую охоту  у  животных  3-9-летнего возраста отмечали к  40-му дню послеродового периода  (табл. 5.).

После использования экспериментального препарата длительность интервала от родов до проявления нормальной функциональной активности яичников и овуляции с последующим оплодотворением коров составила в среднем  90 дней. Одна корова осталась неоплодотворенной. У животных в контроле протяженность этого интервала заметно варьировала:  74±7 дней (n=5), 128±8 дней (n=3) и 210 дней (n=1) и  две коровы не оплодотворились (табл. 5).

Таблица 5 - Длительность периода от родов до первой охоты и оплодотворения  у коров  после применения препарата из надземной части рапонтика сафлоровидного

Группа

Обследовано

коров

Длительность

использования

препарата,

дней

Длительность периода от родов

Всего

Из них  с тремя отелами более

до первой половой охоты

до половой охоты с последующим оплодотворением


Опытная

9

6

40

42±3 (n=8)

82 (n=1)

69±2 (n=5)

112±4 (n=3)


Контрольная

11

8

-

36±4 (n=10)

132 (n=1)

74±7 (n=5)

128±8 (n=3)

210 (n=1)


Примечание: в скобках – количество животных.

Показатель оплодотворения коров на рационе с включением препарата в течение первых двух месяцев после родов находился на уровне 55%,  что на 28%  выше, чем у коров на обычном рационе.  К 120-му дню после родов этот показатель достигает  90%  против 55% у жи­вотных, не получавших  добавку (табл. 5). 

Использование  муки  из  рапонтика  в кормлении  коров  в  течение 40  дней  до  и  после родов оказывает влияние на возобновление  нормальной  функциональной  активности  яичников: прохождение  половых  охот  со  всеми  характерными  признаками  отмечали  к концу  первого – началу  второго  месяца лактации.  Количество  животных опытной группы,  имеющих нормальные половые охоты с овуляцией и последующим оплодотворением в течение первых трех месяцев после родов, в среднем на  30%  превышает число коров на обычном рационе. 

Включение препарата из растения рапонтик в рацион осуществляли коровам, у которых в течение 6-10 месяцев после родов не наблюдали проявление функциональной активности в яичниках, необходимой для восстановления полноценных циклов.  Животные нередко имели осложнения  или  заболевания  в органах репродуктивной системы в ходе родов и послеродового периода. После начала использования препарата у 50%  коров на рационе с добавкой на 12-17-ый дни отмечали прояв­ление  явных половых охот с заметно  выраженной стадией возбуждения и выделением цервико-вагинального секрета. У  остальных  животных этой группы признаки полноценной эстральной активности проявлялись через две недели после окончания скармливания препарата.

Перспективным продуцентом экдистероидов является серпуха венценосная. Содержание основного носителя биологической активности в экс­трактивных веществах  из этого растения - 20-гидроксиэкдизона - на 1-2 порядка выше,  чем содержание данного вещества в сырье  из  рапонтика.  Препарат из серпухи использовали  в кормлении коров 4-7-летнего возраста,  имеющих или осложнения в родах,  или ареактивные - без стадии возбуждения, так называемые "тихие" половые охоты. Кормовой препарат включали животным с 34-го дня послеродового периода.  Средний расход  муки  из серпухи  на  одну корову составил всего 100 г. Уровень оплодотворения животных опытной группы в течение первых трех месяцев после родов  равен  67%, а у коров на обычном рационе был уменьшен в два раза  и составил  33%.

Препарат из серпухи кратковременно использовали в кормлении животных 2-5-летнего возраста, также имеющих половые охоты без стадии возбуждения на третьем-пятом месяце  после  родов. Общий расход препарата на корову увеличили в два раза. Его применение оказало благоприятное влияние на воспроизводительную функцию животных: показатель прохождения нормальных половых охот с последующей  овуляцией и оплодотворением  коров в течение двух месяцев по завершению скармливания добавки составил  67%.

Степень стимулирующего воздействия препаратов из рапонтика или  серпухи на функциональное состояние яичников у коров изменялась в зависимости от сроков включения препарата и используемых доз. Выявлена прямая взаимосвязь по­ложительного результата действия опытных препаратов на функциональное состояние яичников у коров со свойствами и качеством используемой травяной муки из апроби­руемых растений,  а также от содержания экдистероидов.

Препарат из серпухи  с  содержанием  20-гидроксиэкдизона  0,8  вес.% применяли в качестве добавки к кормам в первый-второй месяцы после родов животным 3-7 -лет­него возраста, имеющим осложнения в родах  и  послеродовой период.  Рас­ход  препарата составил  25-50 г на корову за весь период  эксперимента. После его использования  у всех животных  отмечали нормализацию функции яичников. К концу эксперимента  коровы  оплодотворились,  при  этом  период от родов до оплодотворения составил 60 дней.

Полученные результаты подтверждают целесообразность использования разработанных экспериментальных препаратов из рапонтика и серпухи в кормлении коров с целью активации функционального состояния яичников и формирования полноценной эстральной цикличности в ранние сроки послеродового периода.

ОБСУЖДЕНИЕ  РЕЗУЛЬТАТОВ

Наблюдаемое нами в стационарных условиях кормления и содержания изменение сроков возобновления эстральной цикличности и периодичности прохождения циклов у преобладающего количества коров в период лактации свидетельствует о проявлении ранних скрытых нарушений в формировании циклов.

Возобновление эстральной цикличности у самок домашних жвачных животных в  послеродовой период контролируется содержанием гормональных регуляторов в крови при одновременном созревании яйцеклеток в доминантных фолликулах и зависит от состояния организма (состава крови и влагалищной среды).

Установлено, что при прохождении послеродового периода у коров без видимых осложнений репродуктивной функции содержание сывороточного холестерина достигает максимальных значений перед оплодотворением и сохраняется на высоком уровне в течение первых месяцев беременности. У животных, содержание холестерина в сыворотке крови которых в первые месяцы лактации сохраняется на уровне дородового или раннего послеродового периода, увеличивается длительность интервала от родов до возобновления эстральных циклов и изменяется характер формирования циклов. Отмечается отсутствие отдельных этапов в циклах: «тихие» охоты – без стадии возбуждения или ановуляторные циклы – без овуляции. В ходе неполноценных эстральных циклов длительность половой охоты увеличивается с двух-трех дней до 5-10 дней. Достоверно низкие концентрации холестерина в крови были обнаружены у 25-30% животных с задержкой возобновления регулярных эстральных циклов к концу первого месяца после родов. К 120-му дню лактационного периода количество животных, имеющих низкие уровни сывороточного холестерина и изменение эстральной цикличности, достигало 65%.

Таким образом, низкий уровень холестерина в крови самок домашних жвачных животных в первые месяцы лактации уменьшает вероятность восстановления  эстральных циклов, необходимых для оплодотворения.

Исследование условий прохождения циклов у коров в лактационный период позволило установить взаимосвязь между формированием физиологически полноценных циклов и состоянием внутренней среды организма (крови, влагалищной среды) и найти подходы к раскрытию механизма, обеспечивающего восстановление  результативных циклов.

Необходимые условия для возобновления циклов в организме самок животных  создаются определенным гормональным фоном. Имеются данные о том, что итоговую реакцию поверхностного эпителия влагалища на совокупность гормональных воздействий показывает клеточный состав эпителия, выстилающий поверхность влагалища (Арсеньева, 1977). В ходе эстрального цикла и беременности у самок млекопитающих отмечены морфологические изменения клеток поверхностного эпителия влагалища, отражающие пролиферативные, секреторные и деструктивные процессы в органе (Арсеньева, 1977; Dore, 1978, 1978а; Martin, 1980). По количеству клеток разной морфологии можно определять отдельные стадии эстрального цикла у животных.

Результаты, полученные нами, свидетельствуют, что у коров в период эструса количество собственно поверхностных оформленных клеток с ядром на мазках составляет 0,8-7,5% от общего числа клеток, содержание  ядер без цитоплазмы – 0,5-1,3%. Во время беременности количество собственно поверхностных клеток на влагалищных мазках у животных не превышает 7,5%, а ядер клеток без цитоплазмы увеличивается в шесть раз и более.

Точность определения функционального состояния яичников у коров повышается, если отбирать животных, проявляющих четкий рефлекс неподвижности в предовуляторный период эстрального цикла и имеющих  оптимальные  для оплодотворения величины содержания  общего холестерина  крови (на уровне 5,2 – 7,5  ммоль/л) и альбумино-глобулинового коэффициента (1,0-2,2). При этом функционально активному доминантному фолликулу со зрелой яйцеклеткой в яичниках коров (в период, оптимальный для проведения осеменения) соответствуют величины  рН  ЦВС от  5,0 до 6,8 и рефрактометрического показателя ЦВС, равные 1,3342-1,3352,  и показатели содержания собственно-поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках  до 7,5%.

По имеющимся данным у лосих первые три месяца послеродового периода характеризуются отсутствием половых циклов (Кнорре, 1959; Кожухов, 1973; Shwartz and Hundermark, 1993). Наблюдаемые нами и другими исследователями (Кожухов, 1989)  элементы поведения, свойственные самкам диких жвачных животных в период половой охоты, и выделение влагалищного секрета у отдельных лосих  на 51-й –58-й дни после родов не связаны с активацией функционального  состояния яичников.

Особенностью клеточного состава влагалищных мазков у лосих до 58-го дня послеродового периода является увеличение содержания ядер без цитоплазмы и их “теней”, в 35-58 раз превышающие эти показатели у коров перед овуляцией и оплодотворением. В предовуляторный период эстрального цикла в условиях проявления максимального эстрогенного эффекта у самок животных других видов, например, крыс или собак, со стенок влагалища отторгается большое количество ороговевших клеток эпителия (Киршенблат, 1969; Dore, 1978, 1978a). Выявленный нами у лосих так называемый “цитологический” тип влагалищных мазков с обрывками цитоплазмы и отдельно лежащими ядрами без цитоплазмы,  был ранее обнаружен у коров, имеющих низкий уровень эстрогенов в крови (Кошовий, 1987). Можно предположить, что в первые месяцы после родов у лосих отмечается существенное уменьшение содержания  эстрогенов, которое связано с торможением роста фолликулов в яичнике. Сниженный базальный уровень эстрогенов в крови у лосих на 51-й, 58-й и 99-й дни послеродового периода, по-видимому, обусловливает появление на мазках преждевременно отторгнутых незрелых поверхностных оформленных клеток эпителия с четким ядром и большого количества ядер без цитоплазмы и их “теней”.

Увеличение содержания ядер без цитоплазмы на влагалищных мазках у самок лосей в послеродовой период может быть связано с сохранением функциональной активности в желтом теле прошедшей беременности. Поскольку лосихи – животные с сезонным размножением, то желтое тело беременности может оставаться активным в течение первых месяцев после родов. Однако полученные нами результаты, согласно которым  содержание  прогестерона в крови составляет около 1,0 нг/л, могут свидетельствовать о том, что желтое тело яичников у самок лосей в этот период является неактивным. Аналогичное содержание прогестерона в крови у самок овцебыка было определено во время пика проявления эстральной активности (Rowell, Flood, 1988).

Таким образом, у лосих первые три месяца после родов характеризуются возобновлением “поведенческих” эстральных циклов. Результаты проведенных исследований подтвердили, что появляющиеся в этот период в состоянии лосих признаки половой активности - возбуждение, выделение цервико-вагинального секрета, снижение суточной молокопродукции, не сопровождаются определенными изменениями в количестве различных типов клеток покровного эпителия на мазках из влагалища (Василенко и др., 2000; 2002; Vasilenko, 1999; Vasilenko et al., 2001). Отторгаемые с влагалищной стенки клетки отражают суммарный эффект гормональных воздействий в организме самки. Поскольку картина клеточного содержимого на мазках из влагалища лосих не изменяется в первые месяцы после родов, это может свидетельствовать о наличии функционального покоя в яичниках и задержке роста фолликулов и, следовательно, сохранении без изменений гормонального фона. Появление “поведенческого эструса” у лосих  отражается на лактационной функции и фактически способствует заметному снижению суточных удоев с 30-го дня послеродового периода и прекращению лактации после 60-го дня.

Отдельную проблему, возникающую при анализе условий прохождения репродуктивных процессов у самок диких жвачных животных, представляет исследование метаболического профиля крови. Полученные нами данные свидетельствуют о сохранении содержания  общего белка и холестерина в крови у лосих до и после родов на постоянном уровне. Величины содержания сывороточного холестерина у самок лосей были в 1,6 раза ниже в сравнении с его количеством в крови коров в предродовой и послеродовой периоды (Василенко и др., 2000; Vasilenko,  1999).

Представленные в настоящей работе результаты по разной динамике  холестерина крови у коров и лосих в первые месяцы после родов подтверждают специфичность (разную направленность) обменных процессов у самок домашних и диких жвачных животных. Трансформация обменных процессов у коров в послеродовой период тесно взаимосвязана с интенсификацией процесса молокообразования. Для получения высоких надоев от домашних жвачных животных обмен веществ должен заметно повышаться в первые 10-20 дней послеродового периода и сохраняться в этих пределах в течение первых двух-трех месяцев интенсивной лактации. Для лосих повышение упитанности (нагула) и интенсификация обменных процессов к концу летнего периода является одним из необходимых условий  подготовки организма животных к периоду половой активности (гона).

В последнее время появилось много новых сведений, касающихся расшифровки механизмов регуляции возобновления эстральной цикличности у самок диких и домашних жвачных животных (Bearden et al., 2004; Webb et al., 2004). В процессе одомашнивания у самок домашних жвачных животных по сравнению с дикими животными изменился механизм инициации эстральных циклов. Имеются множественные доказательства в пользу активного участия гормона клеток жировых депо организма лептина в механизме возобновления эстральных циклов у коров (Chilliard et al., 2001; Ingvartsen and Boisclair, 2001; Garcia et al., 2002; Delavaud et al., 2002; Sillence, 2004; Chelikani et al., 2004; Liefers et al., 2005; Kulcsar et al., 2005; Zieba et al., 2005). На странице 27 представлена схема регуляции возобновления эстральной цикличности у домашних и диких жвачных животных, подтвержденная  результатами, полученными в наших экспериментах и данными других исследователей.

В основе регуляции естественной эстральной цикличности лежит стимулирующее действие эстрогенов на циклическое выделение гонадотропных гормонов гипофиза.  Удлинение анэстрального периода и задержку возобновления эстральных циклов у самок домашних жвачных животных в послеродовой период часто объясняют падением  базального уровня стероидов в организме (Савченко, 1975; Савченко, Степанов, 1981; Van Eerdenburg et al., 2000; Rensis, Scaramuzzi, 2003). 

Уменьшение содержания эстрогенов в крови коров после родов может быть обусловлено их существенными потерями в процессе родов. Ему также способствует снижение уровней синтетических процессов с возрастом, нарушение функций соответственных  органов (печени, коркового слоя надпочечников, яичников и т.д.), недостаточное количество имеющихся для синтеза стероидных гормонов предшественников (ацетата, холестерина и др.) и уменьшение поступления с кормами веществ стероидной природы (фитоэстрогенов, фитоэкдистероидов). Изменения  содержания жира в кормах и или его интенсивное использование организмом коров в период лактации также оказывают влияние на уровень циркулирующих гормонов в крови (Mystkowski, Schwartz, 2000). Снижению уровня эстрогенов в крови коров способствует уменьшение их синтеза в яичниках при стрессе (Rensis, Scaramuzzi, 2003).

Подтверждением наличия высокой чувствительности коров к эстрогенам могут свидетельствовать обнаруженные нами особенности типов десквамированных клеток

поверхностного эпителия влагалища и, в частности, увеличение отторжения недостаточно зрелых собственно поверхностных клеток с четким ядром на мазках непосредственно перед овуляцией (Василенко, 2000). В то время как у самок млекопитающих (мыши, собака, человек) перед овуляцией при повышенном содержании эстрогенов отторгаются в основном ороговевшие (дегенеративные) клетки поверхностного эпителия с пикнотическим ядром (Техвер, 1968; Киршенблат, 1969; Арсеньева, 1977; Резников, 1982; Dore, 1978, 1978a).

Для воздействия на функциональное состояние яичников и стимуляции  полноценных эстральных циклов у коров после родов нами был разработан кормовой препарат, содержащий измельченную плаценту здоровых животных в смеси с наполнителем (травяная мука, концентрированные корма и др.) (Василенко, Рубцова, 1996). Известно, что плацента и околоплодные воды коров содержит эстрогены и в меньшем количестве прогестерон (Нежданов, 1990;  Bianchini et al, 1977; Mostl et al., 1987; Gross, Williams, 1988).

Применение в кормлении коров 11,8-18,6 кг препарата плаценты на животное за период в 20-35 дней до и после родов оказывало положительное действие на их воспроизводительную способность: в условиях длительного стойлового содержания у коров второго-восьмого отелов восстановление полноценных эстральных циклов отмечали

в конце первого - начале второго месяца после родов. Уровень оплодотворения животных до 80-го дня после родов в эксперименте в зависимости от года исследования изменялся в пределах 50-80% и на 25-46% превышал величины оплодотворения коров в контрольной группе. Длительность интервала между родами у коров опытных групп составила 11,5 – 14,0 месяцев, что соответствует нормативам средней продолжительности данного периода у самок домашних жвачных животных при высоком уровне воспроизводства в стаде (Василенко и др., 1995). 

В проведенных нами экспериментах впервые выявлено, что использование в рационе коров препаратов с высоким содержанием экдистероидов (20-гидроксиэкдизона) оказывает позитивное влияние на функциональную активность яичников и возобновление полноценных эстральных циклов.

Было установлено, что включение препарата из  рапонтика  в корма коров в течение 40  дней  до  и  после  родов оказывает положительное воздействие на восстановление полноценных эстральных циклов. В условиях длительного стойлового содержания  (девять месяцев и более)  у  животных опытных  групп  прохождение  половых  охот  со  всеми  характерными признаками отмечали к концу первого – началу второго месяца послеродового периода.  Количество  животных опытной группы,  имеющих нормальные половые охоты с овуляцией и последующим оплодотворением  в течение первых трех месяцев после родов, в среднем  на  30%  превышает  их количество  в  контрольной группе животных, которая находилась на обычном рационе (Василенко и др., 1995).

Снижение функциональной активности яичников и удлинение периода от родов до восстановления физиологически полноценных эстральных циклов в условиях оптимального обеспечения  организма коров питательными веществами в основном связаны с замедленным темпом роста фолликулов в яичнике и дефицитом гормональных регуляторов. Эти явления могут устраняться при дополнительном включении в рацион для животных  препаратов из надземной части растения серпуха венценосная.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Физиологические особенности репродуктивной функции у диких жвачных животных эволюционно формировались в соответствии с условиями среды обитания. Одомашнивание и селекция базируются на совершенствовании полезных для человека характеристик продуктивности животных. Репродуктивная активность домашних животных была одной из характеристик, являющейся объектом селекции, искусственного прямого или побочного регулирования человеком. Такая регуляция обусловила существенное изменение репродукции коров в сравнении с дикими животными. В значительной степени природные механизмы воспроизводства коров были расстроены, а становление новых устойчивых способов размножения в рамках сельскохозяйственного производства не завершилось, поскольку главным объектом селекции коров были и остаются молочная и мясная продуктивность. Поэтому существует потребность в активных научных исследованиях физиологии размножения коров и создание, разработка естественных средств, направленных на обеспечение стабильного, прогнозируемого и регулируемого их воспроизводства. У диких жвачных животных (лосей) при попытках их одомашнивания обнаруживается невозможность изменения жестко регламентированной сезонности эволюционно сформировавшихся репродуктивных циклов, их временной и качественной характеристик.

Широкое использование стимуляторов функции размножения продуктивных животных  должно быть основано на знании физиолого-биохимических механизмов эстральной цикличности. Селекция коров по уровню молочной продуктивности нередко увеличивает продолжительность анэстрального периода и приводит к нарушению процесса возобновления эстральной активности в первые месяцы лактации. Прохождение  эстральных циклов у самок животных контролируется выработкой гормональных регуляторов при одновременном росте фолликулов в яичнике и зависит от условий, создающихся в крови и влагалищной среде. Установлено, что повышение уровня общего холестерина в крови коров в лактационный период способствует проявлению эстральных циклов. Включение в рацион коров в послеродовой период разработанных и запатентованных естественных биостимуляторов восстанавливает физиологически полноценные эстральные циклы.

ВЫВОДЫ

  1. Репродуктивная деятельность полового аппарата у домашних и диких жвачных животных в послеродовой лактационный период проявляется через прохождение  эстральных циклов. Выявлено, что в первые месяцы после родов в стационарных условиях кормления и содержания регулярные эстральные циклы восстанавливаются всего у 25% животных. Изменение метаболического и гормонального фона у большинства здоровых коров на пике лактации в условиях длительного стойлового содержания на Севере отражается в проявлении нерегулярных циклов (с вариациями длительности от 18 до 30 дней) и ареактивных половых охот (без стадии возбуждения).

2. Восстановлению результативных эстральных циклов способствует существенное  увеличение содержания общего холестерина в сыворотке крови коров в послеродовой период по сравнению с дородовым и ранним послеродовым периодом. Заметное повышение уровня холестерина является критерием изменения направленности  метаболических потоков при смене физиологического состояния беременности на послеродовой период.  Установлено, что у коров в предродовый период определяется невысокий уровень холестерина в пределах 3,14 – 3,27 ммоль/л и увеличение его уровня в крови животных почти в два раза определяет восстановление полноценных эстральных циклов после родов. Содержание холестерина сохраняется в этих пределах  (6,42 – 5,42 ммоль/л) в первые месяцы беременности.

3.  Условия  влагалищной среды перед оплодотворением в предовуляторный период эстрального цикла у домашних жвачных животных характеризуют количество собственно поверхностных оформленных клеток с ядром в покровном эпителии краниального отдела влагалища коров на уровне 0,8-7,5% от общего числа эпителиальных клеток, ядер без цитоплазмы - в пределах 0,5-1,3%,  промежуточных клеток - менее 1,2%, величины  рН  цервико-вагинального секрета – в пределах 5,0-6,8 и рефрактометрического показателя - 1,3342-1,3352. Эти показатели являются диагностическими тестами активации функционального состояния яичников у коров в предовуляторный период цикла.

4. Установлено, что увеличение содержания  незрелых клеток поверхностного эпителия и ядер без цитоплазмы, и их “теней” в покровном эпителии краниального отдела влагалища лосих в первые месяцы послеродового лактационного периода соответственно до 13,7-22,5% и 24,0-58,8% от общего числа эпителиальных клеток определяет снижение функциональной активности яичников, аналогичного изменениям у коров в период беременности.

5. Наблюдаемое уменьшение молочной продуктивности на 1,1 – 6,4 л у самок диких жвачных животных в ходе неполноценных циклов на 50-60-й день послеродового периода по сравнению с продуктивностью на пике лактации свидетельствует о завершении лактации и подготовке организма лосих к размножению.

7. Применение биостимуляторов на основе исследования состава крови и влагалищной среды обеспечивает коррекцию эстральной цикличности у  коров. Показано, что включение водного раствора калиевой соли уксусной кислоты (20% раствора) в рацион с увеличением пропорции белковых (концентрированных) кормов для коров с низким уровнем холестерина на 60-90-е дни после родов увеличивает содержание холестерина в крови и способствует восстановлению полноценных эстральных циклов.

  1. Эффективность воспроизводства домашних жвачных животных повышается через ускорение восстановления полноценных эстральных циклов и сокращение периода от родов до оплодотворения при использовании в рационе разработанных и запатентованных естественных биостимуляторов (предшественников синтеза стероидов, экзогенных эстрогенов и прогестерона или веществ стероидной природы).

Практические предложения

  1. Предложены нормативные клинико-физиологические тесты для определения функциональной активности яичников коров на основе изучения показателей обмена веществ, клеточного состава покровного эпителия краниального отдела влагалища, физико-химических свойств цервико-вагинального секрета.
  2. Для оценки восстановления полноценных эстральных циклов у лактирующих коров  рекомендуется использовать содержание общего холестерина в сыворотке крови.

3.  При снижении уровня холестерина у коров после родов в профилактических целях рекомендуется включать в качестве добавки к белковым кормам водный раствор калиевой соли уксусной кислоты (Патент РФ № 2125369 от 27.01.1999).

4.  Для ускорения восстановления полноценных эстральных циклов у коров после родов  рекомендуется использовать в составе кормов естественные биостимуляторы из животных тканей и растений (Патенты РФ 2026075 от 10.01.1995, № 2070389 от 20.12. 1996, № 2028806 от 25.02.1995,  № 2099963 от 27.12.1997 и № 2218929 от 20.12.2003).

5. Результаты исследований апробированы на коровах племенных животноводческих хозяйств Республики Коми и используются на ферме Выльгордской научно-экспериментальной станции Коми научного центра Уральского отделения Российской Академии наук.

Список опубликованных работ по теме диссертации

Книги

1. Василенко Т.Ф. Эстральный цикл коровы / Кочанов Н.Е., Василенко Т.Ф., Борисенков М.Ф. - Сыктывкар, 1994. - 60 с.

Статьи в журналах и сборниках научных трудов

2. Василенко Т.Ф. Содержание холестерина в крови холмогорских коров / Т.Ф. Василенко // Усвоение питательных веществ у жвачных животных: Труды Коми филиала АН СССР. - Сыктывкар, 1987. - №85. - С. 92-97.

3. Василенко Т.Ф. Изменение клеточного состава влагалища коров в течение полового цикла / Т.Ф. Василенко, М.Ф. Борисенков // Усвоение питательных веществ у жвачных животных: Труды  Коми  филиала  АН  СССР. - Сыктывкар, 1987.- № 85. - С. 92-97.

4. Василенко Т.Ф. Содержание каротина и витамина А в крови коров / Т.Ф. Василенко, И.И. Полетаева // Обмен веществ жвачных животных: Труды Коми научного центра УрО АН СССР. – Сыктывкар, 1989. – № 105. - С.73 –78.

5.  Василенко Т.Ф. Воспроизводительная способность коров при скармливании добавок с включением нетрадиционных источников сырья животного происхождения: / Т.Ф. Василенко, Л.Ю. Рубцова // Физиология пищеварения и репродукции жвачных животных: Труды Коми научного центра УрО РАН. – Сыктывкар, 1994. – № 137. - С 57-62.

6. Vasilenko T.F. Pre- and postpartum blood values and postpartum cell content of vaginal smears of female moose and dairy cows / T.F.Vasilenko // Alces, 1999. Vol. 35. P. 135-141.

*7. Василенко Т.Ф. Содержание общего белка, холестерина,  прогестерона в крови и клеточный состав влагалищных мазков у лосих и коров в пред- и послеродовой периоды / Т.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова, М.Ф. Борисенков // Зоологический  журнал. – 2000. – Т. 79, № 8. – С. 1000-1004.

8. Василенко Т.Ф. Использование растений – продуцентов экдистероидов для регуляции функционального состояния яичников у коров в послеродовой период / Т.Ф.Василенко // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты: Сб. трудов Рос. Академии естеств. наук. – М., 2001. –Вып. № 5. – С. 135-141.

9. Василенко Т.Ф. Взаимосвязь функционального состояния печени и воспроизводительной функции коров в условиях длительного стойлового содержания / Т.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова, Н.П. Монгалев // Актуальные проблемы биологии в животноводстве: Сб. науч. статей по материалам III-й Международ. конф. – Боровск, 2001. – С. 189-195.

10.  Vasilenko T.F. Peculiarities of daily milk productivity of Pechora taiga domesticated cow moose and their interconnection with reproductive function / T.F.Vasilenko, I.N.Sivoxa, M.V.Kozhykhov , P.R. Lemons  // Alces. – 2001. – Vol. 37, № 1. – P. 123 – 128.

*11. Василенко Т.Ф. Динамика лактации одомашненных лосих и ее взаимосвязь с эстральной цикличностью в послеродовой период / Т.Ф. Василенко, И.Н. Сивоха, М.В. Кожухов // Зоологический журнал. – 2002. – Т. 81, № 10. – С. 1278 – 1281.

12.  Василенко Т.Ф. Применение кормового препарата с включением плаценты от здоровых коров для регуляции репродукции самок крупного рогатого скота / Т.Ф. Василенко, Л.Ю. Рубцова // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты: Сб. трудов  Рос. Акад. естеств. наук. – М., 2004. –Вып. № 11, Ч. 2. – С. 80-87.

13. Vasilenko T.F. Resumption of ovary activity and normal estrous cycles in postpartum cows after the application of placenta containing additives in the diet / T.F.Vasilenko // Integrrative Zool. – 2006. - № 2. – P. 69 –71.

14. Василенко Т.Ф. Проблемы воспроизводства животных на Севере: физиологический аспект / Т.Ф. Василенко // Состояние и перспективы развития научного обеспечения сельскохозяйственного производства на Севере. – Сыктывкар, 2007. – С. 116 – 124.

*15. Василенко Т.Ф. Влияние двигательной активности разной интенсивности на состав крови и дыхательную функцию у домашних жвачных животных в течение первого месяца жизни / Т.Ф. Василенко, С.А. Мартынов, Н.П. Монгалев, Н.И. Чувьюрова, Л.Ю. Рубцова // Российский  физиологический журнал им. И.М.Сеченова, 2007. – Т. 93, №9. – С. 1062-1070.

16. Василенко Т.Ф. Перспективы эффективного повышения воспроизводства продуктивных животных / Т.Ф. Василенко // Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования, образование: Сб. трудов 4-й Междунар. научно-практ. конф. «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности», 2-5 октября 2007 г., Санкт-Петербург, Россия. – Санкт-Петербург: изд-во политехнического  ун-та, 2007. – Т. 2. – С. 253-254.

  *17 Василенко Т.Ф.  Закономерности возобновления и метаболического обеспечения эстральных циклов у домашних жвачных животных / Т.Ф. Василенко // Успехи физиологических наук. – 2008. – Т.39, №1. - С. 77 – 90.

  *18 Василенко Т.Ф. Роль общего холестерина в восстановлении эстральных циклов у животных / Т.Ф. Василенко,  М.П. Рощевский // Доклады Академии наук. – 2008. – Т. 418, № 4.

Патенты

19. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф.Василенко, Н.Е.Кочанов, А.А.Патрушев // Патент №2026075, Россия, №5048253/15, Заяв. 16.06.92; Опубл. 10.01.95. Бюл №1.

20. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф.Василенко, Н.Е.Кочанов, А.А.Патрушев // Патент №2028806, Россия, №5049683/15, Заяв. 26.06.92; Опубл. 25.02.95. Бюл №5.

21. Василенко Т.Ф. Способ приготовления кормовой добавки / Т.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова // Патент №2065704, Россия, №940007871/15, Заяв. 05.03.94; Опубл. 27.08.96. Бюл № 24.

22. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова //  Патент №2070389, Россия, №94036307/15, Заяв. 28.09.94; Опубл. 20.12.96. Бюл №35.

23. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова, В.П. Мишуров // Патент №2099963, Россия, №95118792 /13, Заяв. 31.10.95; Опубл. 27.12.97. Бюл №36.

24. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова, Н.П. Монгалев // Патент №2125369, Россия, №97119332/13, Заяв. 24.11.97; Опубл. 27.01.99. Бюл  №3.

25. Василенко Т.Ф. Способ диагностики функционального состояния яичников у лосих / Т.Ф.Василенко // Патент №2148388, Россия, № 99113105/13, Заяв. 18.06.99; Опубл. 10.05.2000. Бюл №13.

26. Василенко Т.Ф. Способ диагностики функционального состояния яичников у животных с удлиненным влагалищем / Т.Ф.Василенко // Патент №2155016, Россия, № 99111378/13, Заяв. 27.05.99; Опубл. 27.08.2000. Бюл №24.

27. Василенко Т.Ф. Способ определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных / Т.Ф. Василенко // Патент №2211683, Россия, № 2002101322/13, Заяв. 09.01.2002; Опубл. 10.09.2003. Бюл №25.

28. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф. Василенко, В.В. Пунегов, Л.Ю. Рубцова // Патент №2218929, Россия, №2002117841/13, Заяв. 02.07.2002; Опубл. 20.12.2003. Бюл № 35.

Тезисы и материалы конференций и симпозиумов

29. Василенко Т.Ф. Изменение клеточного состава влагалища в течение эстрального цикла коров / Т.Ф.Василенко // VI Всес. конф. по экологической физиологии: Тез. докл.  – Сыктывкар, 1982. – С. 170.

30. Василенко Т.Ф. Изменение клеточного состава влагалища в период половой охотыТ.Ф.Василенко, Н.Е.Кочанов // Проблемы диагностики, терапии, профилактики незаразных болезней с.-х. животных в промышленном животноводстве: Тез. докл. – Воронеж, 1986. – Ч. II. – С. 10.

31. Василенко Т.Ф. Содержание каротина в крови коров в зависимости от физиологического состояния / Т.Ф.Василенко, Э.Е.Люляева // Научные основы витаминного питания с.-х.  животных: Тез. докл. – Рига, 1987. – С. 59.

32. Василенко Т.Ф. Исследование репродукции одомашненных лосематок / Т.Ф.Василенко // 3-й Междунар. симпозиум по лосю: Тез. докл. – Сыктывкар, 1990. – С. 133.

33. Vasilenko T.F.  Investigation of Domesticated Moose Reproduction / T.F.Vasilenko // Abstracts of Papers and Posters, Third International Moose Symposium August 27-September 5, 1990. – Syktyvkar, USSR, 1990. – P. 155.

34. Василенко Т.Ф. Выявление оптимального времени осеменения коров / T.Ф. Василенко // Физиология продуктивных животных – решению Продовольственной  программы СССР: Матер. Всесоюзн. конф. (Тарту, 13-15 сент. 1989). – Таллин, 1990. – Ч.2. – С. 108-109.

35. Василенко Т.Ф. Показатели воспроизводительной функции коров при использовании рапонтика сафлоровидного / T.Ф.Василенко, Н.Г.Игутов // Эколого-популяционный анализ кормовых растений естественной флоры, интродукция и использование: Тез. докл. VII  Всес. симп. по новым кормовым растениям. – Сыктывкар, 1990. – С. 35-36.

36. Василенко Т.Ф. Использование рапонтика сафлоровидного для повышения воспроизводительной способности коров / Т.Ф. Василенко, Н.Е.Кочанов // VIII  Всерос. симп. по новым кормовым растениям: Тез. докл. – Сыктывкар, 1993. – С. 33-34.

37. Василенко Т.Ф. Изменение прохождения эстральных циклов у коров при скармливании рапонтика сафлоровидного / T.Ф.Василенко, Н.П.Монгалев // VIII  Всерос. симп. по новым кормовым растениям: Тез. докл. – Сыктывкар, 1993. – С. 34-35.

38. Василенко Т.Ф. Современные направления повышения оплодотворяемости коров в северном регионе / T.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова // Город в Заполярье и окружающая среда: Тез. докл. Междунар. конф. (11-16 сент. 1994 г., Воркута). – Сыктывкар, 1994. – С.14.

39. Vasilenko T.F.L. Ju. Modern Approaches to Fertility Enhancement of Cows in the Northern Region / T.F.Vasilenko , L. Ju. Rubtsova //  Город в Заполярье и окружающая среда: Тез. докл. Междунар. конф. (11-16 сент. 1994 г., Воркута). – Сыктывкар, 1994. - Р. 87.

40. Василенко Т.Ф. Опыт использования кормовой добавки из естественных источников сырья животного происхождения для улучшения оплодотворяющей способности коров / T.Ф.Василенко // Актуальные вопросы ветеринарии: Тез. докл. Международ.  конф. – Барнаул, 1995. – С. 188.

41. Василенко Т.Ф. Стимуляция воспроизводительной способности коров при использовании кормовой добавки из естественных источников сырья животного происхождения / T.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова // Актуальные вопросы ветеринарии: Тез. докл. Междунар. конф. – Барнаул, 1995. – С. 189.

42. Василенко Т.Ф. Использование естественных кормовых добавок для активации воспроизводительной способности крупного рогатого скота в условиях Севера / T.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова // Экологические аспекты устойчивого развития регионов: Тез. докл. Междунар. конф. – Новгород, 1995. – Ч. 2. – С. 71-72.

43. Vasilenko T.F. The Application of Natural Food Additives for the Stimulations of Cattle Reproduction in the North / T.F.Vasilenko , L. Ju. Rubtsova // Экологические аспекты устойчивого развития регионов: Тез. докл. Междунар. конф. – Новгород, 1995. – Ч. 2. – P. 87.

44. Василенко Т.Ф. Использование кормовых добавок из растений семейства  Asteraceae для стимуляции репродукции коров на Севере / T.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова // Междунар. совещание  по фитоэкдистероидам (Сыктывкар, Россия, 2-6 сент. 1996 г.): Тез. докл. – Сыктывкар, 1996. – С. 136 -137.

  45. Vasilenko T.F. The Application of Additives from Asteraseae Plants for the Stimulation of Cow Reproduction in the North / T.F.Vasilenko , L. Ju. Rubtsova // Междунар. совещание по фитоэкдистероидам (Сыктывкар, Россия, 2-6 сент. 1996 г.): Тез. докл. – Сыктывкар, 1996. P. 134-135.

  46. Vasilenko T.F.  Comparative study of moose and cow female in postpartal period / T.F.Vasilenko // Prog& Abstr. 4th International Moose Symposium, 33rd North American Moose Conference, 17-23 May, 1997. – AK, Fairbanks, 1997. – P. 72.

  47. Василенко Т.Ф. Современные методы повышения воспроизводительной способности коров / T.Ф.Василенко //  Рыночные отношения в агропромышленном комплексе Республики Коми: современное состояние и перспективы – Матер. республ. научно-практ. конф. – Сыктывкар, 1998. – С. 118 –119.

48. Василенко Т.Ф. Использование премиксов с включением муки из рапонтика сафлоровидного или серпухи венценосной для стимуляции воспроизводительной способности коров в условиях длительного стойлового содержания / T.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова //  Рыночные отношения в агропромышленном комплексе Республики Коми: современное состояние и перспективы – Матер. республ. научно-практ. конф. – Сыктывкар, 1998. – С. 133 –134.

  49. Василенко Т.Ф. Изменение клеточного состава влагалищных мазков в течение первой половой охоты и перед оплодотворением у коров / T.Ф.Василенко // XVII  съезд физиол. общества им. И.П.Павлова: Тез. докл. – Ростов-на-Дону, 1998. – С. 487.

50. Василенко Т.Ф. Активация способности организма коров к оплодотворению при  использовании муки из Rhaponticum carthamoides или Serratula coronata в зимнем рационе / T.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова // Адаптация организма к природным и экосоциальным условиям: Тез. докл. Междунар. конф. – Магадан: СВНЦ ДВО РАН, 1998. – С. 15-16.

51. Vasilenko T.F. The Stimulation of Cow Fertility by the Application of  Rhaponticum carthamoides or Serratula coronata Hay Meal in Winter Period / T.F.Vasilenko , L. Ju. Rubtsova // Адаптация организма к природным и экосоциальным условиям: Тез. докл. Междунар. конф. – Магадан: СВНЦ ДВО РАН, 1998. - Р. 173-174.

52. Василенко Т.Ф. Использование муки из Serratula coronata для стимуляции воспроизводительной способности коров / T.Ф.Василенко, Л.Ю.Рубцова, В.П. Мишуров, В.В. Пунегов // Эколого-популяционный анализ кормовых растений естественной флоры, интродукция и использование: Тез. докл. IX Всес. симп. по новым кормовым растениям. – Сыктывкар, 1999. – С. 33-34.

53. Василенко Т.Ф. Особенности возобновления биоритма эстральной цикличности у коров на Севере / Т.Ф.Василенко // Первая Междунар. конф. “Хроноструктура и хроноэкология репродуктивной функции” и IX Междунар. конф. “ Эколого-физиологические проблемы адаптации”- Матер. докл. – М.: Изд-во РУДН, 2000. – С. 48-49.

54. Василенко Т.Ф., Функциональная активность печени и ее взаимосвязь с воспроизводительной функцией коров в условиях длительного стойлового содержания / Т.Ф. Василенко, Л.Ю.Рубцова, Н.П. Монгалев // Актуальные проблемы биологии в животноводстве (Третья Междунар. конф. 6-8 сент. 2000 г., Россия, Боровск): Тез. докл. – Боровск: ВНИИФБ и П с.-х. жив-ных., 2000 – С. 272-274.

55. Василенко Т.Ф. Применение добавок из надземной части растений рапонтик сафлоровидный и серпуха венценосная для активации функционального состояния яичников у коров / Т.Ф. Василенко // Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными растительными ресурсами и создание функциональных продуктов: Матер. I-й  Рос. научно-практ. конф. – М., 2001. – С. 62-65. 

56. Василенко Т.Ф. Регуляция становления эстральной цикличности у самок продуктивных животных посредством использования кормовых препаратов / Т.Ф. Василенко // Российский  физиологический журнал им. И.М.Сеченова, 2004. – Т. 90, №8. – Ч. 2. - С. 468-469.

57.  Vasilenko T.F. Alteration of estrus manifestation in postpartum cows by the application of food additives from cows placenta tissue / T.F.Vasilenko // Proc. XIX  Int. Congr. Zool. – Bejing: Inst. Zool., Chines Acad.Sci. – 2004. – P. 522 –525.

  58. Василенко Т.Ф. Физиологические и биохимические механизмы становления эстральных циклов у самок продуктивных животных в условиях Европейского Севера / Т.Ф. Василенко // Материалы научной сессии Рос. Акад. Естествознания (30-31 марта 2004 г., г. Киров). – Киров, 2004. – С. 171-172.

59.  Василенко Т.Ф. Изменения содержания сывороточного холестерина, связанные с эстральной цикличностью коров / Т.Ф. Василенко // Физиология и здоровье человека: научн. труды I Съезда физиологов СНГ (19 – 23 сентября 2005 г., Сочи, Дагомыс). – М.: Медицина – Здоровье, 2005. – Т.1. – С. 195.

60. Василенко Т.Ф. Физиология  эстральной активности у самок домашних жвачных животных / Т.Ф. Василенко, М.П. Рощевский // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2006. - № 3-2 (15). – С. 81.

61. Василенко  Т.Ф. Физиология репродуктивной функции у самок диких и домашних жвачных животных / Т.Ф. Василенко, Н.А. Чермных, М.П. Рощевский // ХХ Съезд Физиологического общества имени И.П.Павлова: Тезисы докладов. – М.: Издательский дом «Русский врач». - 2007. – С. 22.

  62. Василенко  Т.Ф.  Регуляция возобновления овуляторных циклов у животных / Т.Ф. Василенко // Механизмы функционирования висцеральных систем: Тез. докл. V Всероссийской конф. с международным участием, посвященной 100-летию со дня рождения В.Н.Черниговского. - Санкт-Петербург, 2007. – С. 62.

Информационные материалы

  63. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф. Василенко // Информационный  листок  № 27-96. – Сыктывкар: Коми ЦНТИ. – 1996. – 3 с.

64. Василенко  Т.Ф. Способ приготовления кормовой добавки для регуляции воспроизводительной способности коров / Т.Ф. Василенко, Л.Ю.Рубцова // Информационный листок № 28-96.- Сыктывкар: Коми ЦНТИ. – 1996. – 2 с.

65. Василенко Т.Ф. Способ повышения оплодотворения коров при искусственном осеменении / Т.Ф. Василенко // Информационный  листок  № 29-96. – Сыктывкар: Коми ЦНТИ. – 1996. – 4 с.

66.  Василенко  Т.Ф. Способ определения функционального состояния яичников у коров  / Т.Ф. Василенко // Инновационный потенциал Республики Коми. Сыктывкар: Коми респуб. типография.- 2007. - С. 17.

67. Василенко Т.Ф. Способ регуляции воспроизводительной функции коров / Т.Ф. Василенко, Л.Ю. Рубцова, В.В. Пунегов  // Инновационный потенциал Республики Коми. Сыктывкар: Коми респуб. типография.- 2007. - С. 16-17.

* - публикации в ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях согласно перечню ВАК России.

 

  * *

*

Автор выражает глубокую благодарность научному консультанту академику М.П.Рощевскому за ценные советы и консультации и коллегам за всестороннюю поддержку и  активное участие в проведении экспериментальных исследований и обсуждении работы.






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.