WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


На правах рукописи

ФОМИНА ОЛЬГА АЛЕКСАНДРОВНА

ВЕТЕРИНАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ КОМПЛЕКСНЫХ ИММУНОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ РЕАЛИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА СВИНЕЙ

06.02.05 – ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Чебоксары - 2012

Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» Научный руководитель – доктор ветеринарных наук, профессор Петрянкин Федор Петрович

Официальные оппоненты: Григорьева Тамара Егоровна – доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедрой незаразных болезней ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» Кузнецова Елена Леонидовна – кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры зоогигиены ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана» Ведущая организация – ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А. Столыпина»

Защита состоится 17 декабря 2012 г. в 1500 часов на заседании диссертационного совета Д 220.070.02 при ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 428003, г. Чебоксары, ул.

К.Маркса, д. 29, ауд. 222.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия».

Автореферат разослан « » ноября 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор Семенов В.Г.

1

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Проблема восстановления иммунологических нарушений с использованием иммунокорригирующих препаратов в настоящее время является актуальной, поскольку большинство хронических, соматических, инфекционных болезней у животных сопровождаются вторичной иммунологической недостаточностью. Стратегия развития ветеринарии в настоящее время привела к пониманию того, что почти любая патология является причиной или следствием иммунологических нарушений, которые способствуют хронизации основного заболевания. Хронические воздействия неблагоприятных факторов ведут к ослаблению неспецифической резистентности и иммунологической реактивности свиней. Это приводит к тому, что не всегда создается достаточно высокий иммунный фон, возможно снижение напряженности иммунитета и, как следствие, возрастает опасность возникновения инфекционных заболеваний. Это обстоятельство требует применения иммунокорригирующих средств, без которых быстрое и полное излечение пациента представляется затруднительным (Ф.П. Петрянкин, 1998; Г.К. Волков, 2003; А.Г. Шахов, 2003;

Н.К. Кириллов и соавт., 2006).

Особенно чувствителен организм к воздействиям неблагоприятных экологических влияний в первый и последние месяцы внутриутробного развития, и первые три месяца новорожденности. Физиологический статус материнского организма отражается на внутриутробном и постнатальном развитии плода и новорожденного. В результате воздействия неблагоприятных условий чаще всего рождается молодняк со слабыми защитными свойствами, у него развивается иммунодефицитное состояние, он более предрасположен к различным заболеваниям, плохо развивается и растет. При выращивании молодняка в условиях интенсивных технологий с нарушением условий содержания и кормления отягощается проявление иммунодефицита (С.С. Абрамов и соавт., 1990).

Всякое заболевание инфекционной или незаразной этиологии сопровождается иммунодефицитным состоянием. Применение иммуностимуляторов позволяет профилактировать заболеваемость новорожденных, стимулировать рост, развитие и продуктивность животных, усилить напряженность иммунитета при вакцинации и повысить эффективность терапии. Механизм действия неспецифических иммунокорректоров существенно шире, чем принято считать, они повышают эффективность традиционной профилактики и терапии многих болезней (В.М. Земсков, 1997). Комбинированное назначение лекарственных веществ предполагает не только сохранение в сложном лекарстве их фармакологических свойств, но и определенное усиление их действия. Создавая или разрабатывая прописи лекарственных средств, необходимо стремиться создать такое лекарство, которое было бы разумно не только по подбору лекарственных веществ, но и по совместимости в лекарственной форме, а также обладал фармакологическим эффектом, что проявляется синергизмом и антагонизмом лекарственных веществ.

Исходя из вышеизложенного необходимость получения и изучения механизмов действий комплексных иммунотропных препаратов широким спектром антибактериального действия и внедрение их в производственную практику является актуальным.

Цель и задачи исследований. Целью исследований является обоснование применения новых комплексных иммунотерапевтических препаратов на основе полисахаридов микробных клеток и антибактериальных препаратов для реализации биологического потенциала свиней.

Для выполнения вышеуказанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить биологические свойства новых комплексных иммунотерапевтических препаратов и определить оптимальную терапевтическую дозу применения препаратов.

2. Определить влияния препаратов на биологический комплекс «матьплод-новорожденный».

3. Установить профилактическую и терапевтическую эффективность применения новых комплексных препаратов при болезнях животных.

4. Изучить напряженность иммунитета при вакцинации животных против классической чумы свиней и сальмонеллеза на фоне применения иммунотерапевтических препаратов.

5. Провести ветеринарно-санитарную оценку свинины на фоне применения новых комплексных препаратов.

Научная новизна. Впервые изучены биологические свойства новых комплексных иммунотерапевтических препаратов ПС-3, ПС-4 на основе полисахаридов микробных клеток с добавлением антибиотиков широкого спектра действия, повышающих факторы неспецифической резистентности и иммуногенез организма. Определены оптимальные терапевтические дозы применения. Использование их усиливает защитный, репродуктивный и продуктивный потенциал животных, профилактическую и терапевтическую эффективность, повышает напряженность иммунитета при вакцинации. Получены патенты на способы получения комплексных иммунотропных препаратов. Новизна полученных данных подтверждена приоритетом заявки на изобретение № 2011125254/15 от 17.06.2011 г.

Практическая значимость. Изучены и предложены практическому животноводству и ветеринарной медицине новые комплексные иммунотерапевтические препараты ПС-3 и ПС-4, обладающие высокими лечебнопрофилактическими действиями при различных заболеваниях и иммунодефицитных состояниях организма животных.

Предложенные препараты способствуют повышению неспецифической резистентности материнского организма, улучшению внутриутробного развития и получению здорового приплода, снижению заболеваемости новорожденных. В результате повышается выход молодняка на 100 маток, снижается заболеваемость маточного поголовья и повышается их продуктивность. Препараты являются высокоэффективными профилактическими и лечебными средствами при болезнях различной этиологии, особенно у молодняка, в результате которого снижается заболеваемость молодняка и повышается сохранность их в ранний постнатальный период онтогенеза. Они способствуют улучшению иммунологической реактивности организма и повышению напряженности специфического иммунитета против инфекционных болезней, что значительно снижает заболеваемость животных от инфекционных болезней.

Реализация результатов исследований. Данные, полученные при выполнении диссертационной работы, внедрены в ОАО «Рассвет» Ибресинского района Чувашской Республики. Материалы, представленные в диссертационной работе, используются в учебном процессе ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия».

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на VI всероссийской науч.-практ. конференции молодых ученых, аспирантов и студентов, посвященной 90-летию создания Чувашской Республики (Чебоксары, 2010); VI всероссийском конкурсе по ПФО на лучшую научную работу среди молодых ученых, аспирантов и студентов II этапа (Казань, 2010); VII всероссийской науч.-практ. конференции молодых ученых, аспирантов и студентов, посвященной 80-летию ЧГСХА (Чебоксары, 2011); VII всероссийском конкурсе по ПФО на лучшую научную работу среди молодых ученых, аспирантов и студентов II этапа (Казань, 2011); VII всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди молодых ученых, аспирантов и студентов III этапа (Ставрополь, 2011); III съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов России «Актуальные проблемы ветеринарной фармакологии, токсикологии и фармации» (СПб, 2011); IV республиканском конкурсе инновационных проектов «Участник молодежного научно-инновационного конкурса» У.М.Н.И.К. в рамках Открытой научной конференции молодежи и студентов «Молодая инновационная Чувашия: творчество и активность» (Чебоксары, 2011, 2012); на III всероссийском конкурсе УМНИК на СТАРТ по направлению Н.5.7. Агробиотехнология (Рязань, 2012);

на расширенном заседании кафедры инфекционных и инвазионных болезней ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» (Чебоксары, 2012).

Основные положения, выносимые на защиту:

- доклиническое исследование новых комплексных иммунотерапевтических препаратов;

- влияние препаратов на биологический комплекс «мать-плодновородженный»;

- профилактическая и терапевтическая эффективности исследуемых препаратов при болезнях животных;

- особенности формирование иммунитета при вакцинации свиней против классической чумы свиней и сальмонеллеза на фоне применения иммунотерапевтических препаратов;

-ветеринарно-санитарная оценка свинины после применения комплексных препаратов.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ в материалах международной и всероссийских конференций и в научных трудах ФГБОУ ВПО ЧГСХА, в том числе 3 работы в трудах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 154 страницах компьютерного исполнения, содержит 30 таблиц и 5 рисунков.

Работа включает следующие разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, предложения производству, список литературы, включающего 197 источников, в том числе зарубежных - 33, приложения.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Научно-исследовательскую работу выполняли в течение 2009 – 2012 гг. в лабораториях био- и нанотехнологий и кафедры инфекционных и инвазионных болезней ФГБОУ ВПО ЧГСХА, ОАО «Рассвет» Ибресинского района ЧР и БУ ЧР «Чувашская республиканская ветеринарная лаборатория» государственной ветеринарной службы Чувашской Республики в соответствии с государственным планом научных исследований (номер госрегистрации 01.200.201725) и тематическим планом НИОКР ФГБОУ ВПО ЧГСХА.

Объектами исследований при проведении доклинических исследований были лабораторные животные (белые мыши и крысы), клинических – супоросные и подсосные свиноматки, а также поросята-сосуны, полученные от них, свиньи разных возрастных групп. Все животные, подобранные для опыта, являлись аналогами. Содержали животных согласно технологическим процессам, принятым в хозяйствах. Рационы были сбалансированы по основным питательным веществам согласно нормам кормления.

Доклинические исследования новых комплексных иммунотерапевтических препаратов проводили путем изучения физической и химической несовместимостей лекарственных средств, определения острой и хронической токсичности, кумулятивных и превентивных свойств препаратов.

Для определения острой, хронической токсичности и кумулятивных свойств препаратов ПС-3, ПС-4 были использованы белые мыши в возрасте 22,5 месяцев живой массой 18-22 г и белые крысы, массой 105-155 г в возрасте 2,5-3 месяца. В предварительных опытах были определены максимальная летальная доза препаратов (ЛД100) и максимально переносимая доза (ЛД0), а в последующем – ЛД50. Изучение хронической токсичности и кумулятивных свойств проводили путем введения нарастающих доз 0,1 части ЛД50. Определение превентивных свойств препаратов проводили путем одновременного введения 1 млрд. (по стандарту мутности) суспензию патогенного штамма S.enteritidis и исследуемых препаратов. В качестве контроля изучали действие составляющих комплексный препарат лекарственные средства (ПС-2, экстенциллин, цефтриаксон). За подопытными животными проводили систематический клинический осмотр в течение 10 суток.

Оптимальную терапевтическую дозу препаратов определяли на 4 группах поросят по 10 голов в каждой в возрасте 25-30 суток. Первой опытной группе поросят вводили препарат в дозе 0,05 мл/кг живой массы; второй опытной – 0,мл/кг; третьей опытной – 0,15 мл/кг живой массы; четвертая группа поросят была контрольной, которым препарат не применяли.

Научно-хозяйственный опыт по изучению влияния иммунотерапевтических препаратов ПС-3, ПС-4 на физиологический статус и биологический комплекс «мать-плод-новорожденный» проведен на супоросных свиноматках и поросятах, полученных от них. Животных подбирали по принципу пар-аналогов с учетом физиологического состояния, возраста, живой массы по 10 животных в каждой группе. Свиноматкам за 50-45 и 20-15 суток до опороса внутримышечно вводили иммунопрепараты: 1-й опытной – ПС-2, 2-й опытной – ПС-3 и 3-й опытной – ПС-4 в дозах 5,0 мл на 1 животное. Свиноматкам четвертой группы препараты не использовали. Изучение влияния препаратов на заболеваемость и физиологическое состояние поросят проводили на поросятах, полученных от вышеуказанных свиноматок. Поросятам опытных групп в возрасте 23 и 7-8 суток были внутримышечно введены комплексные препараты: 1-й опытной – ПС-2, 2-й опытной – ПС-3 и 3-й опытной – ПС-4. Поросятам контрольной группы эти препараты не применяли. Проводили систематический клинический осмотр животных и взятие крови для лабораторных исследований в 14- и 28-суточном возрасте.

Для изучения профилактической и терапевтической эффективностей новых комплексных препаратов было подобрано 4 группы по 20 поросят по принципу групп-аналогов в возрасте 20 суток. Первой опытной группе инъецировали препарат ПС-2, второй группе ПС-3, третьей группе ПС-4 в дозе 1 мл на животное. Четвертая (контрольная) группа содержалась без применения препаратов. Проводили систематический клинический осмотр животных и взятие крови для лабораторных исследований в 30- и 60-суточном возрастах.

Для изучения влияния иммунотерапевтических препаратов на формирование иммунитета по принципу групп-аналогов были сформированы 3 группы поросят в возрасте 40-45 суток по 10 голов в каждой. Поросят вакцинировали вирусвакциной ЛК-ВНИИВВиМ против классической чумы свиней, согласно наставлению по применению. Одновременно поросятам первой группы вводили иммунопрепарат ПС-3 в дозе 0,1 мл на кг массы, второй группе – препарат ПС-4, в указанной же дозе. Поросята третьей группы были контрольными, им не применяли препараты. При этом изучили напряженность иммунитета против классической чумы свиней путем определения титра антител в РНГА.

Для выявления эффективности вакцинации поросят против сальмонеллеза с одновременным использованием иммуностимуляторов сформированы 3 группы поросят в возрасте 20 суток. Поросят вакцинировали против сальмонеллеза и одновременно первой группе поросят инъецировали иммуностимулятор ПС-в дозе 0,1 мл на кг массы, второй – ПС-4 в указанной дозе. Третья группа поросят была контрольной, их вакцинировали без применения препаратов. Проводили исследование сыворотки крови для определения динамики накопления сальмонеллезных антител в РА.

Характеристика использованных иммунотерапевтических препаратов. В экспериментальных опытах использовали иммуностимулятор ПС-2 и комплексные иммунотерапевтические препараты ПС-3, ПС-4.

Иммуностимулятор ПС-2 представляет собой гелеобразную агаровую суспензию очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток с добавлением производного бензимидазола (2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо(2, 1, -)-тиазола гидрохлорид). Получен патент №2332214, зарегистрированный в государственном реестре изобретений РФ 27.08 2008 г.

Комплексный иммунотерапевтический препарат ПС-3 представляет собой гелеобразную агаровую суспензию очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток с добавлением производного бензимидазола и антибиотика экстенциллина. Фармакологическое действие препарата ПС-3 связано с иммуномодулирующим и антибактериальным эффектами. Получен патент на способ получения препарата № 2396080, зарегистрированный в Госреестре изобретений РФ 10.08.2010 г.

Комплексный иммунотерапевтический препарат ПС-4 состоит из агаровой суспензии очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток с добавлением производного бензимидазола и антибиотика цефтриаксона. Фармакологическое действие препарата ПС-4 связано с иммуномодулирующим и выраженным антибактериальным действиями, а также противовоспалительным эффектом. Получен патент на способ получения препарата № 2404770, зарегистрированный в Госреестре изобретений РФ 27.11.2010 г.

Научные исследования проводили с применением следующих методов:

гематологические – определение количества эритроцитов и лейкоцитов, тромбоцитов, Т- и В-лимфоцитов, концентрации гемоглобина проводили на автоматическом ветеринарном гематологическом анализаторе РСЕ 90 Vet, выведение лейкограммы путем подсчета лейкоцитов разных видов в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза, с вычислением процентного содержания;

биохимические – исследование уровней общего белка в сыворотке крови рефрактометром ИРФ-454Б214, белковых фракций – турбидиметрическим методом (С.А. Карпюк,1962).

иммунологические – определение лизоцимной активности (ЛА) сыворотки крови (В.Г. Дорофейчук, 1968) с использованием суточной агаровой культуры Micrococcus lysodecticus (штамм МЛ-43-29-1), фагоцитарной активности (ФА) лейкоцитов с расчетом фагоцитарного индекса (ФИ) с использованием культур Staphylococcus aureus (Ю.Н. Одинцов, 1970), бактерицидной активности (БА) сыворотки крови с использованием культуры E. сoli (О.В. Смирнова, Т.А. Кузьмина, 1966); определение в сыворотке крови специфических антител против классической чумы свиней в РНГА; изучение специфических сальмонеллезных антител проводили в РА на сальмонеллезный антиген;

- зоотехнических: определение живой массы поросят по данным взвешиваний; определение молочности свиноматок (по массе гнезда при достижении поросят 21 суточного возраста); сохранность поросят до отъема по данным ветеринарной отчетности;

- ветеринарно-санитарных: ветеринарно-санитарную экспертизу мяса проводили в соответствии с ГОСТ 7269-79 и ГОСТ 23392-78.

Цифровой материал экспериментальных данных обработан методом вариационной статистики с использованием программного комплекса Microsoft Exel 2007, достоверность различий сравниваемых показателей оценивали по порогам вероятности (Р>0,05; P>0,01; P>0,001) с использованием ПК.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1 Биологические свойства новых комплексных иммунотерапевтических препаратов Разработку новых комплексных иммунотерапевтических препаратов проводили на основе препарата ПС-2 с добавлением антибиотиков широкого спектра действия: экстенциллина, цефтриаксона. Исследованиями установлено отсутствие физической и химической несовместимости лекарственных веществ в комплексных препаратах. Полученные комплексные иммунотерапевтические препараты представляют собой гелеобразную смесь, серо-белого цвета. При стоянии наблюдается небольшое отслаивание, при взбалтывании превращающееся в равномерную взвесь.

Проведенными исследованиями установлены следующие токсикологические свойства препаратов: ПС-3 – ЛД50 равна 2,715 мл/кг массы, коэффициент кумуляции = 9,05 и степень кумуляции = 0,0105; ПС-4 – ЛД50 равна 2,62 мл/кг живой, коэффициент кумуляции = 8,73 и степень кумуляции = 0,0145. Исследованиями определено, что препараты не обладают кумулятивными свойствами и относятся к IV классу безопасности (некумулятивным препаратам) (ГОСТ 12.1.007-76).

Определением превентивных свойств комплексных препаратов установлено, что препарат ПС-3 обладает умеренными предохранительными свойствами, однако, превентивность этого препарата на 5-е сутки снижается. Хорошими предохранительными свойствами обладает препарат ПС-4 при повышении сохранности животных до 80%, однако удаленное действие препарата после 5-и суток снижается. При этом отмечено, что превентивные свойства комплексных препаратов повышаются, чем при отдельном применении ингредиентов на 20%.

Эти данные указывают, что подобранные лекарственные средства обладают синергетическим эффектом.

3.2 Результаты клинических исследований новых комплексных иммунотерапевтических препаратов 3.2.1 Краткая характеристика хозяйства и условий содержания животных Основным направлением деятельности ОАО «Рассвет» является воспроизводство, выращивание и реализация свиней крупной белой породы.

Общее поголовье животных составляет 9809 голов.

Холостых и супоросных свиноматок содержат в групповых станках (по 812 голов) с ежедневным моционом в течение 2-3 часов. Поросята-сосуны содержатся со свиноматками до 40 суток. Для них в станке имеется детское отделение шириной 0,8 м, длиной 2,5 м обогреваемое инфракрасными лампами. Поросята-отъемыши содержатся в групповых станках по 20 голов, а ремонтный молодняк – в станках по 15 голов с выгульными площадками. Параметры микроклимата приведены в табл. 1.

Таблица 1 - Параметры микроклимата в помещениях свинокомплекса Скорость Темпера- Относитель- Серово- УглекисСезон движения Аммиак, тура воз- ная дород, лый газ, года воздуха, мг/м духа С влажность, % мг/м % м/с свинарник - маточник Осень 22,84±0,62 72,76±2,72 0,17±0,01 5,91±0,34 3,44±0,36 0,21±0,Зима 22,16±0,40 71,47±2,61 0,18±0,06 6.10±0,66 3,86±0,40 0,22±0,Весна 23,59±0,48 72,39±2,62 0,18±0,03 6,33±0,58 4,06±0,52 0,22±0,помещение для выращивания поросят-отъемышей Осень 21,10±0,56 76,25±1,68 0,19±0,06 5,84±0,52 4,12±0,39 0,22±0,Зима 21,73±0,49 76,31±2,05 0,19±0,01 5,98±0,62 3,94±0,47 0,23±0,Весна 21,12±0,52 77,01±2,07 0,18±0,02 6,10±0,71 4,22±0.52 0,23±0,Кормление свиней проводят в зависимости от физиологического состояния полнорационными комбикормами. Нормы скармливания комбикормов предусмотрены требованиями технологии производства.

3.2.2 Определение оптимальной терапевтической дозы препаратов Положительное влияние препаратов наблюдали во всех опытных группах поросят, которым вводили препараты. Однако во второй группе поросят происходят более оптимальные изменения в картине крови. Достоверно нормализуется содержание эритроцитов и лейкоцитов в пределах физиологической нормы для данного возраста свиней.

Рисунок 1 – Динамика фагоцитарной Рисунок 2 – Динамика бактерицидной активности лейкоцитов крови активности сыворотки крови Нарастание количества лимфоцитов у поросят этой группы после применения препарата происходит без резких колебаний. Изучение показателей неспецифической резистентности (ФА, ЛА, БА) свидетельствует о благоприятном влиянии препаратов ПС-3 и ПС-4 на становление защитных свойств организма свиней.

Таким образом, исследованиями по изучению различных доз препаратов на показатели неспецифической резистентности поросят можно считать, что оптимальной терапевтической дозой препаратов ПС-3 и ПС-4 является 0,1 мл на 1 кг живой массы.

3.2.3 Влияния препаратов на биологический комплекс «мать-плод-новорожденный» В опытах изучали репродуктивные способности свиноматок (количество и качество приплода, крупноплодность и молочность маток), а также морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови.

Таблица 2 - Репродуктивные показатели свиноматок Группа животных Показатель 1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная Опоросилось свиноматок 5 5 5 Получено поросят, всего 53 56 55 на 1 свиноматку 10,60±0,50 11,20±0,30 11,0±0,30 10,4±0,в т. ч. живых 10,40±0,50 11,0±0,28 10,80±0,29 9,9±0,Мертворожденных 0,20±0,13** 0,20±0,13** 0,20±0,13** 0,50±0,Крупноплодность, кг 1,101±0,03 1,06±0,01 1,109±0,01 1,017±0,Молочность свиноматок, кг 59,2±1,46** 53,79±1,34** 53,0±1,16** 40,9±1,Примечание здесь и далее: * = Р<0,05; ** = Р<0,01; *** = Р<0,0Использование иммуностимуляторов в последнюю треть супоросности оказало благоприятное влияние на внутриутробное развитие плодов и жизнеспособность приплода. Установлено повышение крупноплодности поросят в первой опытной группе на 8,2%, во второй – на 4,2, в третьей опытной группе на 9%, улучшение молочности маток опытных групп на 44,7%, 31,5 и 29,6% (Р<0,01) соответственно. Отмечено, что количество мертворожденных поросят в опытных группах было меньше контрольной в 2,5 раза.

Лабораторными исследованиями установлено улучшение у маток опытных групп за 15-10 суток до опороса и на 7-10 сутки после опороса морфологических и биохимических показателей крови. Так, содержание -глобулинов у свиноматок 1-й опытной группы были выше контрольных на 8,4 и 15,51%, 2-й – на 11,32 и 17,82 и 3-й – 13,13 и 13,16% (Р<0,05). Установлено достоверное повышение фагоцитарной активности лейкоцитов у свиноматок 1-й, 2-й и 3-й опытных групп за 15-10 суток до опороса на 4,31%, 5,47 и 6,0 % (Р<0,05), а на 710 сутки после опороса – на 3,77%, 4,73 и 7,75% соответственно. Аналогичная картина наблюдается и по показателям лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что исследуемые препараты активизировали клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности свиноматок. Стимулирующий эффект оказалось выше у препаратов ПС-3 и ПС-4 по сравнению с ПС-2.

Рисунок 3 – Динамика -глобулинов Рисунок 4 – Динамика фагоцитарной активности лейкоцитов крови Изучение влияния препаратов ПС-3 и ПС-4 на заболеваемость и физиологическое состояние поросят, проводили на поросятах, полученных от вышеуказанных свиноматок. Поросятам опытных групп в возрасте 2-3 и 7-8 суток были внутримышечно введены комплексные препараты: 1-й опытной – ПС-2, 2-й опытной – ПС-3, 3-й опытной – ПС-4. Поросятам контрольной группы эти препараты не применяли. Проводили систематический клинический осмотр поросят и исследования показателей неспецифической резистентности. (табл. 3).

Таблица 3 – Показатели заболеваемости и сохранности поросят Группа животных Показатель 1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная Количество поросят, гол. 53 56 55 Заболело,гол. 6 5 5 Выздоровело,гол. 5 5 5 Пало, гол. 1 - - Продолжительность бо2,3±0,5*** 2,6±0,5*** 2,2±0,3*** 7,2±0,лезни, сут.

Заболеваемость, % 11,3 8,9 9,10 19,Сохранность,% 98,2 100 100 94,Живая масса 1,101± 0,03 1,06±0,01 1,109±0,01* 1,07±0,после рождения, кг в возрасте 21 сут., кг 5,86±0,16** 4,89±0,23** 4,91±0,17** 4,35±0,в возрасте 40 сут., кг 11,85±0,22* 11,82±0,44 12,14±0,13* 10,76±0,Выявлено, что препараты ПС-3 и ПС-4 обладают выраженной профилактической эффективностью при заболеваниях молодняка болезнями желудочнокишечного тракта и ростостимулирующей эффективностью.

Состояние естественной резистентности организма свиноматок оказало существенное влияние на внутриутробное развитие плодов и здоровье новорожденных (рис. 5, 6).

Рисунок 5 – Динамика фагоцитарной Рисунок 6 – Динамика бактерицидной активности лейкоцитов крови активности сыворотки крови Количество лейкоцитов в крови поросят опытной группы повышалось за счет увеличения числа лимфоцитов и в 28-суточном возрасте превосходило контрольных показателей на 15,8 и 17,8% (P<0,05). Уровень Т-лимфоцитов у поросят 1-й опытной группы на 14 и 28 сутки жизни был выше в 32,6 и 48,0%, у поросят 2-й опытной группы – на 37,2 и 30,8%, чем в контроле. Содержание В-лимфоцитов в опытных группах на 14-ые сутки жизни превышало контрольных данных на 15,2 и 4,7%, на 28-ые сутки – на 24,3 и 20,5% соответственно.

Исследованием белкового состава сыворотки крови отмечено повышение общего белка. На 14-е сутки жизни у поросят 1-й и 2-й опытных групп данный показатель был достоверно выше контрольных на 2,98 и 2,87% (P<0,05) соответственно, а на 28-е сутки содержание их превышало контрольных на 3,16 и 3,48% (P<0,05). Отмечено достоверное повышение уровня -глобулинов.

Эти данные свидетельствуют о раннем становлении клеточного звена иммунитета у поросят в неонатальном онтогенезе, а в последующем гуморальных факторов резистентности.

3.2.4 Профилактическая и терапевтическая эффективности новых комплексных препаратов при болезнях животных Для изучения профилактической и терапевтической эффективностей препаратов были подобраны 4 группы по 20 голов поросят. Поросятам 1-й опытной группы инъецировали препарат ПС-2, 2-й – ПС-3, 3-й – ПС-4 в дозе 1 мл на животное. Повторное введение препаратов проводили через 7-8 суток. Четвертая (контрольная) группа содержалась без применения препаратов. Проводили систематический клинический осмотр животных и взятие крови для лабораторных исследований в 30- и 60-суточном возрасте.

Таблица 4 – Показатели заболеваемости и сохранности поросят Опытная группа Контрольная Показатель группа первая вторая третья Количество поросят 20 20 20 Заболело 2 2 2 Выздоровело 1 2 2 Пало 1 - - Продолжительность болезни, сут. 2,5±0,3*** 2,0±0,1*** 1,9±0,7*** 7,5±0,Заболеваемость, % 10 10 10 Сохранность,% 95 100 100 Анализ полученных данных указывает на выраженную профилактическую эффективность испытуемых препаратов. Так, заболеваемость в первой группе составила 10% с сохранностью 95%, во 2-й – 10% с сохранностью 100%, в третьей – 10% с сохранностью 100%, в контрольной – 25 и 90% соответственно.

Заболевшим поросятам опытных групп при первых признаках болезни инъецировали соответствующие препараты в лечебных дозах. При этом наблюдали улучшения их состояния и сокращение длительности болезней. Что свидетельствует о проявлении терапевтической эффективности испытуемых препаратов.

Проведенные исследования по применению комплексных препаратов при болезнях молодняка свидетельствуют об их высокой профилактической и терапевтической эффективности.

3.2.5 Влияние иммунотерапевтических препаратов на особенности формирования иммунитета при вакцинации свиней Изучение влияния комплексных иммунопрепаратов на формирование иммунитета при вакцинации свиней против сальмонеллеза и классической чумы свиней проведено путем одновременного введения препаратов ПС-3 и ПС-во время вакцинации поросят. Поросята третьей группы были контрольными, им не применяли препараты.

Таблица 5 – Титры сальмонеллезных агглютининов у поросят Количество Титр агглютининов после второй вакцинации Группа животных поросят, го- (lоg2), через суток лов 10 15 Первая опытная 20 2,3±0,17*** 2,5±0,22*** 2,5±0,35*** Вторая опытная 20 2,4±0,32*** 2,6±0,24*** 2,5±0,28*** Контрольная 20 1,2±0,40 1,6±0,40 1,5±0,Установлено, что титры специфических сальмонеллезных агглютининов в сыворотке крови поросят опытных групп были выше на 10-е сутки в 1,92 – 2,раза, на 15-е сутки – 1,56 – 1,62, на 30-е сутки – 1,67 раза (Р<0,001), чем в группе, где применяли только вакцину (контроль), что указывает о положительном влиянии исследуемых иммунотерапевтических препаратов на формирование специфического напряженного иммунитета.

Таблица 6 – Титры антител к вирусу классической чумы свиней Средний титр антител (lоg2) после Количество поросят, ревакцинации, через суток Группа животных голов 15 Первая опытная 20 2,68±0,17*** 2,82±0,11*** Вторая опытная 20 2,75±0,16*** 2,86±0,17*** Контрольная 20 1,71±0,09 1,76±0,Данные таблицы показывают, что средний титр антител к вирусу классической чумы свиней на 15-е сутки после вакцинации в 1-й опытной группе превышает контрольные показатели на 56,72%, во 2-й опытной группе – на 60,81%.

На 30-е сутки после вакцинации средний титр антител в первой опытной группе оказался выше на 60,22%, во второй опытной группе на 62,5%, чем в контроле.

3.2.6 Ветеринарно-санитарная оценка свинины на фоне применения иммунотерапевтических препаратов Для оценки санитарно-гигиенических и биологических показателей мяса проведен убой по три подсвинка из каждой группы (таблица 7).

Таблица 7 – Органолептическая оценка качества свинины Группа животных Показатель 1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная Внешний вид и цвет туши подопытных животных имели сухую корочку подсыхания поверхности мяса и бледно-розовый цвет.

плотная, упругая, при надавливании пальцем на поверхность Консистенция мяса образовывалась ямочка, которая быстро выравнивалась слегка влажные, не оставляли влажного пятна на Мышцы на разрезе фильтровальной бумаге, имели светло-розовый цвет. Кровь в них и в кровеносных сосудах отсутствовала Запах специфический, свойственный для свежей свинины Жир Наружный и внутренний жир не отличался от контроля прозрачный, ароматный, со специфическим запахом, на Прозрачность и поверхности бульона жир собирается в виде капель средней аромат бульона величины. Вкус бульона приятный, без посторонних привкусов.

рН 6,18±0,01 6,08±0,01 6,15±0,02 6,24±0,Подсвинки опытных групп превосходили контрольных сверстников по предубойной массе, массе парной туши, убойному выходу и площадью мышечного глазка. Проведенными органолептическими, биохимическими исследованиями установлено, что свинина подопытных животных соответствовала требованиям санитарно-эпидемиологических правил и нормативов «Гигиенические требования к безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. СанПиН 2.3.2.1078-01», что свидетельствует об экологической безопасности испытуемых иммунопрепаратов и о доброкачественности мяса.

ВЫВОДЫ 1. Установлены следующие токсикологические свойства препаратов: ПС3 – ЛД50 = 2,715 мл/кг массы, коэффициент кумуляции = 9,05 и степень кумуляции = 0,0105; ПС-4 – ЛД50 = 2,62 мл/кг массы, коэффициент кумуляции = 8,73 и степень кумуляции = 0,0145. Исследованиями определено, что препараты не обладают кумулятивными свойствами и относятся к IV классу безопасности (некумулятивным препаратам) (ГОСТ 12.1.007-76).

2. Определено, что препарат ПС-3 обладает умеренными превалентными свойствами, однако, превентивность этого препарата на 5-е сутки снижается.

Хорошими предохранительными свойствами обладает препарат ПС-4 с сохранностью подопытных животных до 80%, однако удаленное действие после 5-и суток снижается. Подобранные лекарственные средства обладают синергетическим эффектом. Оптимальные терапевтические дозы комплексных иммунотерапевтических препаратов ПС-3, ПС-4 равны 0,1 мл/кг массы.

3. Изучением влияния комплексных препаратов на биологический комплекс «мать-плод-новорожденный» установлено благоприятное влияние их на воспроизводительную способность, крупноплодность и молочность маток.

Улучшение антенатального и постнатального развитие плодов способствовало повышению живой массы поросят при рождении, снижению заболеваемости и повышению сохранности. Отмечено улучшение у свиноматок и поросят гемопоэза, повышение белкового обмена, фагоцитарной, лизоцимной и бактерицидной активности крови, что свидетельствует об улучшении клеточных и гуморальных факторов неспецифической резистентности.

4. Применение комплексных иммунотерапевтических препаратов ПС-3, ПС-4 в ранний постнатальный период онтогенеза способствует снижению заболеваемости молодняка до 90%, повышению сохранности животных на 95 – 100%. Использование их для лечения болезней улучшает их физиологическое состояния и сокращает длительность течения болезней. Эти данные свидетельствует о высокой профилактической и терапевтической эффективности данных препаратов.

5. Использование препаратов ПС-3 и ПС-4 совместно с вакцинами способствует выработке более высоких титров антител против классической чумы свиней и сальмонеллеза. Установлено повышение титра вируснейтрализующих антител к вирусу КЧС на 56,7 – 62,5%, сальмонеллезных агглютининов в 1,56 – 2 раза, что указывает о формировании у животных напряженного специфического иммунитета.

6. Органолептические и биохимические показатели ветеринарносанитарной оценки свинины подопытных животных были идентичными и соответствовали требованиям Санитарно-эпидемиологических правил и нормативам «Гигиенические требования к безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. СанПиН 2.3.2.1078-01», что свидетельствует о безопасности разработанных биологических препаратов и доброкачественности мяса.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ На основании проведенных исследований с целью полной реализации неспецифической резистентности и иммунологической реактивности организма животных и особенно молодняка рекомендуем:

1. С целью повышения воспроизводительной способности, улучшения антенатального и постнатального развитие плодов, снижения заболеваемости молодняка в ранний неонатальный период и повышения сохранности внутримышечное введение препаратов ПС-3, ПС-4 за 50-45 и 20-15 суток до родов в дозе 0,1 мл на 1 кг живой массы.

2. Для профилактики неонатальных болезней молодняка введение комплексных иммунотерапевтических препаратов на 2-3 и 7-8 сутки жизни в дозе 0,1 мл/кг массы внутримышечно. С лечебной целью использование препаратов по схеме: на 1 и 2 сутки, затем на 4, 6 и 8 сутки в дозе 0,15-0,20 мл/кг живой массы внутримышечно.

3. С целью повышения напряженности иммунитета при иммунизации животных введение комплексных иммунотерапевтических препаратов одновременно с вакциной в дозе 0,1 мл/кг живой массы внутримышечно (только при вакцинации инактивированными вакцинами).

Список опубликованных работ по теме диссертации 1. Фомина, О.А. Изучение биологических свойств комплексного иммуностимулятора ПС-5 / О.А. Фомина // Вклад молодых ученных в будущее Чувашии: мат. VI всерос. науч.-практ. конф. молодых ученых, аспирантов и студентов, посвящ. 90-летию создания Чувашской Республики.- Чебоксары, 2010.- С.109-112.

2. Фомина, О.А. Изучение превентивных свойств новых комплексных иммуностимуляторов / О.А. Фомина, Ф.П. Петрянкин // Молодые ученые в решении актуальных проблем сельского хозяйства: мат. VII всерос. науч.-практ.

конф. молодых ученых, аспирантов и студентов, посвящ.80-летию Ч ГСХА. – Чебоксары, 2011.- С. 377-379.

3. Фомина, О.А. Определение токсикологических свойств препарата ПС-/ О.А. Фомина, О.Ю. Петрова, Ф.П. Петрянкин // Молодые ученые в решении актуальных проблем сельского хозяйства: мат. VII всерос. науч.-практ. конф.

молодых ученых, аспирантов и студентов, посвящ.80-летию ЧГСХА. – Чебоксары, 2011.-С. 379-382.

4. Фомина, О.А. Воспроизводительная способность свиноматок на почве применения новых комплексных иммуностимуляторов / О.А. Фомина, Ф.П.

Петрянкин // Аграрная наука – сельскому хозяйству: мат. всерос. науч.-практ.

конф. молодых ученых, аспирантов и студентов, посвящ.80-летию ФГБОУ ВПО ЧГСХА. – Чебоксары, 2011.- С. 386-389.

5. Фомина, О.А. Заболеваемость и сохранность поросят при применении новых комплексных иммуностимуляторов / О.А. Фомина, Ф.П. Петрянкин // Аграрная наука – сельскому хозяйству: мат. всерос. науч.-практ. конф. молодых ученых, аспирантов и студентов, посвящ.80-летию ФГБОУ ВПО ЧГСХА. – Чебоксары, 2011.- С. 390-393.

6. Фомина, О.А. Изучение токсикологических свойств нового иммуностимулятора ПС-5 / О.А. Фомина, О.Ю. Петрова, Ф.П. Петрянкин // Актуальные проблемы ветеринарной фармакологии, токсикологии и фармации: мат. III съезда фармакологов и токсикологов России.- Санкт-Петербург, 2011.- С. 472474.

7. Фомина, О.А. Влияние иммуностимуляторов ПС-2, ПС-3 на физиологический статус коров и телят / О.А. Фомина // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.- Казань, 2011.- Т.208.- С.266-270.* 8. Фомина, О.А. Влияние иммуностимуляторов ПС-3, ПС-4 на физиологический статус свиноматок и поросят / О.А. Фомина // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.- Казань, 2011.- Т.208.- С.270-276.* 9. Фомина, О.А. Ветеринарно-санитарная экспертиза свинины на фоне применения иммуностимуляторов / О.А. Фомина, Ф.П. Петрянкин // Молодежь и инновации: мат. VIII всерос. науч.-практ. конф. молодых ученых, аспирантов и студентов. – Чебоксары, 2012.- С. 333-336.

10. Фомина, О.А. Влияние новых комплексных иммуностимуляторов на гематологические показатели свиноматок / О.А. Фомина // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.

Баумана.- Казань, 2012.- Т.209.- С.301-305.* * - публикации в центральных изданиях согласно перечню ВАК России.

ФОМИНА ОЛЬГА АЛЕКСАНДРОВНА ВЕТЕРИНАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ КОМПЛЕКСНЫХ ИММУНОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ РЕАЛИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА СВИНЕЙ Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Подписано в печать 02.11.12 г.

Формат 60х84/16. Печать офсетная. Усл.печ.л. 1,0.

Тираж 100 экз. Заказ № 177.

Полиграфический отдел ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия».

428003, г. Чебоксары, ул. К. Маркса, 29.







© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.