WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

 

На правах рукописи

Гасанов Руслан Рамизович

ПАТОМОРФОЛОГИЯ ЩИТОВИДНОЙ, ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗ  И НАДПОЧЕЧНИКОВ ПРИ САРКОЦИСТОЗЕ  КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Уфа - 2012

Работа выполнена на кафедре эпизоотологии, патологии и фармакологии ФГБОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Салимов Виктор Андреевич

Официальные оппоненты:  Исмагилова Эльза Равиловна, доктор ветеринарных наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», профессор кафедры анатомии, патологической анатомии, акушерства и хирургии

Митрофанов Петр Митрофанович, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры инфекционных и инвазионных болезней ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия»

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО  «Санкт-Петербургская государственная  академия ветеринарной медицины»

Защита состоится 15 июня 2012г. в 14 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.02 на базе ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» по адресу: 450001, г. Уфа, ул. 50-летия Октября, 34. тел. (347) 228-28-77.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет».

Автореферат разослан «…..» «…..….…..» 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор ветеринарных наук,

профессор  Каримов Фоат Ахметович

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. А.М. Атаев (2010); Ч.Р. Галиева, В.З. Галимова (2010); М.В. Якубовский, Н.Ю. Щемелева (2011); Т.Ю. Чеботарева (2012) считают, что паразитозы сельскохозяйственных животных до сих пор остаются актуальной проблемой животноводства. По сообщениям З.З. Елкановой,  А.М. Биттирова (2010) при гельминтозной инвазии у коров снижается упитанность, прирост массы тела и на 18-30% молочная продуктивность.

Среди инвазионных болезней, по мнению М.Ш. Акбаева, Ф.И. Василевича (2011), особую озабоченность вызывает не изученность саркоцистоза.

Г.С. Сивков (2005) О.В. Сердобинцева (2011) сообщают, что стоимость мяса, отправленного на корм зверям почти в четыре раза ниже стоимости мяса, реализуемого без ограничений. Кроме того, при поражении мышечной ткани саркоцистами повышается обсемененность туш микрофлорой, мясо не созревает, ухудшаются вкусовые качества и питательные свойства, снижается срок хранения.

Как заметили Л. В. Ступина (2008), В. И. Абакумов (2009) степень морфологических изменений в тканях при саркоцистозе и тяжесть заболевания находятся в прямой зависимости от интенсивности саркоцистозной инвазии.

З.Ф. Соминский, В.А. Салимов (1977) при саркоцистозе в корковом слое надпочечников овец заметили прогрессирующий разрост стромы с формированием мелких ложных долек.

Сдвиги в функциональном и морфологическом состоянии эндокринной системы могут играть ведущую роль в выяснении патогенеза саркоцистоза.

Однако патоморфологическая характеристика изменений в щитовидной, поджелудочной железах и надпочечниках у крупного рогатого скота  как при саркоцистозе, так и микстинвазиях практически не изучено, что определило тему наших исследований.

Цель и задачи работы. Цель исследования состояла в том, чтобы путём изучения особенностей патоморфологического состояния желез внутренней секреции крупного рогатого скота при разной интенсивности саркоцистозной инвазии и ее осложнениях цестодозами, трематодозами, понять патогенез болезни, необходимый для разработки патогенетически-направленных лечебно-профилактических мероприятий.

Для достижения поставленной цели определенны следующие задачи:

1. Выявить патоморфологические изменения в щитовидной железе у крупного рогатого скота в зависимости от интенсивности инвазии при саркоцистозе и ассоциации (саркоцистоз + эхинококкоз + фасциолёз).

2. Определить характер патоморфологических изменений в поджелудочной железе у крупного рогатого скота в зависимости от интенсивности инвазии при саркоцистозе и ассоциации (саркоцистоз + эхинококкоз + фасциолёз).

3. Расшифровать характер патоморфологических изменений в надпочечниках у крупного рогатого скота в зависимости от интенсивности инвазии при саркоцистозе и ассоциации (саркоцистоз + эхинококкоз + фасциолёз).

Научная новизна. Впервые изучены морфометрические изменения в щитовидной, поджелудочной железах и надпочечниках крупного рогатого скота в зависимости от слабой, средней, сильной интенсивности саркоцистозной инвазии и ассоциации эхинококкоз : фасциолез.

Автором впервые установлено, что слабая интенсивность саркоцистозной инвазии характеризовалась развитием изменений обратимого в виде дистрофии и апоптоза. При средней и особенно сильной интенсивности инвазии отмечена гибель паренхимы, с очаговым скоплением некротической детритной массы. Указанные процессы протекают на фоне гиперчувствительности замедленного типа с гиперплазией лимфоидно-эпителиоидных клеточных элементов. При микстинвазии патология усугубляется ослаблением функционального состояния в результате гибели паренхимы, образованием микрогеморрагий, гиперплазией лимфоидно-эпителиоидных клеток, разрастанием стромы с формированием «ложных» долек в щитовидной железе без парафолликулярных клеток, поджелудочной без инсулоцитов, надпочечниках без дифференцированных эндокриноцитов.

Научная и практическая значимость работы. Установленные патоморфологические особенности в щитовидной, поджелудочной железе и надпочечниках при саркоцистозе и микстинвазиях  у крупного рогатого скота способствуют расшифровке патогенетических моментов саркоцистоза и его осложнений эхинококкозом, фасциолезом.

Полученные результаты базируются на комплексном подходе  к изучению макро- и микроскопического строения щитовидной, поджелудочной желез и надпочечников с использованием анатомических, гистологических и морфометрических методов исследования, позволяющих осветить совокупность их морфогенеза и установить ряд новых фактов, которые обобщены в теоретических положениях. Проведено сравнительное количественное морфологическое исследование, сопоставление морфометрических параметров, а также изучение вариабельности параметров щитовидной, поджелудочной желез и надпочечников при саркоцистозной инвазии и осложнениях эхинококкозом, фасциолезом. Установлена изменчивость патоморфологического строения в зависимости от интенсивности саркоцистозной инвазии.

Полученные сведения могут быть использованы при написании соответствующих разделов справочной литературы и учебных пособий по иммунологии, в учебном процессе по гистологии, при проведении научных исследований, связанных с изучением гистологических особенностей щитовидной, поджелудочной желез и надпочечников. 

Данные о патоморфологической реакции изученных желёз послужат научно-обоснованной базой при составлении положения по ветеринарно-санитарной экспертизе говядины, инвазированной саркоцистами, эхинококками, фасциолами, на рынках и мясоперерабатывающих предприятиях и корректировке технологических процессов переработки туш животных, подлежащих убою.

Внедрение результатов исследований. Результаты исследований используются в учебном процессе по курсам патологической анатомии, паразитологии и ветеринарной санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия» и при ветеринарно-санитарной экспертизе туш крупного рогатого скота в лабораториях рынков городских округов Новокуйбышевска, Октябрьска, Сызрани, Кинеля и Кинель-Черкасского района Самарской области. Они могут быть полезны при проведении курсов повышения квалификации соответствующих работников АПК.

Апробация работы. Разработанная тема диссертации выполнялась в рамках научных исследований кафедры эпизоотологии, патологии и фармакологии факультета биотехнологии и ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия» «Разработка системы ранней диагностики и профилактики саркоцистоза крупного рогатого скота и его ассоциации с эхинококкозом, фасциолёзом в хозяйствах Самарской области при разных формах собственности» утверждённой учёным советом факультета (пр. №2 от 23 ноября 2007г.). Указанная тема рассматривалась научно-техническим советом Самарской ГСХА (пр. №3 от 4 декабря 2005г.) и включена самостоятельным разделом научных исследований академии «Разработка новых высокоэффективных методов, средств, технологии воспроизводства крупного рогатого скота и систем диагностики, профилактики и ликвидации болезней животных» до 2012 года.

Материалы диссертационной работы регулярно заслушивались на заседаниях кафедры, учёных советах факультета биотехнологии и ветеринарной  медицины 2009, 2010 гг. Основные положения обсуждены участниками круглого стола ХI Губернской агропромышленной выставки сельского хозяйства (2008 г). Доложены на научно-практических конференциях ФГБОУ ВПО  «Самарская государственная сельскохозяйственная академия» (Кинель, 2008-2010 гг.), Международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию Самарской НИВС Россельхозакадемии (2009 г.), региональной научно-практической конференции Самарской НИВС Россельхозакадемии (2010 г.). Экспозиция материала «Мониторинг саркоцистоза крупного рогатого скота в хозяйствах Самарской области, патоморфологические изменения в органах и железах внутренней секреции», представленная на ХII Поволжской агропромышленной выставке награждена золотой медалью за внедрение инновационных технологий в скотоводстве (2010 г.).

Публикация результатов исследования. По материалам исследований опубликовано 7 статей (четыре из них в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ). В статьях изложены основные положения и выводы диссертационной работы.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений и списка литературы. Работа изложена на 132 страницах компьютерного набора машинописного текста, содержит одну схему опытов, 4 таблицы, иллюстрирована 63 рисунками. Список литературы включает 334 источника, в том числе 66 инностранных.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Патоморфологическая характеристика изменений в щитовидной железе крупного рогатого скота при разной интенсивности саркоцистоза в ассоциации с эхинококкозом, фасциолёзом у крупного рогатого скота.

2. Патоморфологическая характеристика изменений в поджелудочной железе крупного рогатого скота при разной интенсивности саркоцистоза в ассоциации с эхинококкозом, фасциолёзом у крупного рогатого скота.

3. Патоморфологическая характеристика изменений в надпочечниках крупного рогатого скота при разной интенсивности саркоцистоза в ассоциации с эхинококкозом, фасциолёзом у крупного рогатого скота.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа проводилась с 2005 по 2010 гг. согласно схемы исследований  (рис. 2.1). На саркоцистоз проверено 23618 голов, включая 7837 животных, убитых на мясокомбинате ООО «Кинельагро». От 30 голов взяты образцы для патоморфологических исследований из щитовидной, поджелудочной желёз и надпочечников. После фиксации и проводки залито 270 парафиновых блоков и приготовлено 1080 гистологических препаратов для окраски гематоксилином и эозином, методом Ван Гизона.

На базе лаборатории ветеринарно-санитарной экспертизы центрального рынка городского округа Кинель отрабатывалась методика саркоцистоскопии мышечной ткани. Образцы мышечной ткани отбирали всегда с одного и того же места: межжелудочковой перегородки миокарда ближе к предсердиям, корня языка, массетера, ножек диафрагмы, межреберных мышц и длиннейшей мышцы спины. Техника саркоцистоскопии проводилась аналогично трихинеллоскопии. Из образцов перечисленных мышц по ходу волокон глазными ножницами вырезали пробы ткани размером с овсяное зерно. На полную зарядку компрессория требовалось 24 среза ткани, по 4 образца с каждой мышцы, что по массе эквивалентно одному грамму. Контрольное взвешивание материала периодически проводили на настольных электронных весах марки NPA-500г. Взятые образцы помещали на нижнее компрессорное стекло и расплющивали путем надавливания вторым стеклом компрессория.

Затем на расплющенные срезы, в отличие от трихинеллоскопии перед просмотром капали 0,05-процентный спиртовой раствор метиленовой сини. После 3-5-минутного окрашивания излишки краски смывали под слабой струей проточной воды. Мышечные волокна приобретали слабо-синий цвет, ядра волокон и цисты саркоцист – синий (рис. 2.2). Под малым увеличением микроскопа (56) подсчитывалось общее количество цист саркоцист в компрессории. Для деления на слабую, среднюю, сильную интенсивности инвазии учитывали критерии, предложенные В.А. Салимовым (табл. 2.1.1). Работу по саркоцистоскопии проводили совместно с соискателем В.И. Абакумовым.

Место сбора материала и проведения исследований

Рис.  2.1. Схема исследования

Рис. 2.2. Компрессориум. Микросаркоцисты в миокарде (а), языке (б),

массетере (в), длиннейшей мышцы спины (г), окрашенные 0,05% спиртовым раствором метиленовой сини. Ок. 7, об. 8

Таблица 2.1

Критерии оценки интенсивности саркоцистозной инвазии

Интенсивность

инвазии

Количество цист саркоцист (экз. при 56)

в поле зрения микроскопа

в 24 срезах компрессория

Слабая

1-3

до 50

Средняя

до 18

51-200

Сильная

более 18

выше 201

Одновременно изучалась динамика распространения ассоциации саркоцистоза с эхинококкозом и фасциолезом. Отработав методики, накопив материал по динамике распространения инвазий, в условиях мясокомбината согласно указанной схеме по принципу аналогов, сформировали 5 групп.

Распределение скота по группам провели после убоя животных на основании результатов экспертизы туш, органов и саркоцистоскопии мышечной ткани. Первая группа (6 гол.) не инвазированные животные служили контролем. Вторая-четвертая группы (18 гол.) инвазированные микросаркоцистами, в том числе 6 гол. со слабой степенью инвазии, 6 – средней и 6 – сильной. Пятая группа (6 гол.) включала ассоциативное заражение животных микросаркоцистами с эхинококками и с фасциолами.

Животные, поступившие на мясокомбинат, согласно ветеринарной сопроводительной документации были клинически здоровыми. Дополнительно для уточнения общего физиологического состояния скота использовали методики, изложенные в материалах С. Д. Балаховского, М. С. Балаховского (1959); В. Е. Предтеченского (1960); М. Д. Лемперта (1964); С. А. Ивановского (1965).

Обсеменённость органов, тканей для исключения заболеваний бактериального происхождения, выборочно проводили в областной ветлаборатории (директор Д.А. Гулин), вирусного и инвазионного характера – Самарской научно-исследовательской ветеринарной станции (директор, д.в.н. К.М. Садов). Распространение эхинококкоза и фасциолёза в хозяйствах области определяли путем анализа отчётов областного департамента ветеринарии (начальник к. б. н., доцент С.В. Овчинников).

Для патоморфологического исследования и снятия микрометрических замеров от животного каждой группы, с одного и того же места вырезали не менее трех кусочков из щитовидной, поджелудочной желез и надпочечников. Взятые образцы фиксировали раствором 10% нейтрального формалина, после ацетоно-ксилолной проводки в Центральной научно-исследовательской лаборатории при Самарском государственном медицинском университете готовили парафиновые блоки, а затем срезы толщиной 5-7 мкм. Гистологические препараты окрашивали гематоксилином и эозином, на соединительную ткань по Ван-Гизону. Препараты изучали под микроскопом Биолам. Наиболее характерные места фотографировали для объективного подтверждения полученных данных.

В щитовидной железе определяли площадь фолликулов, количество резорбционных вакуолей, высоту фолликулярного эпителия, минимальный и максимальный диаметры ядер; в поджелудочной железе измеряли размер долек, диаметр ацинусов, ациноцитов, островков Лангерганса, панкреацитов, инсулоцитов и их ядер; в надпочечниках – высоту наружного и внутреннего слоев капсулы, клубочковой, пучковой и сетчатой зон, мозгового вещества, эпинефроцитов, минимальный и максимальный диаметры ядер.

Полученные данные заносили в протокольные карточки, определяли показатели средней арифметической, её ошибки и коэффициента достоверности при Р <0,05*, <0,01** и <001***, которые высчитывали общепринятыми в биологии методами с использованием пакета программ Microsoft Office Excel 2007. Аналогичным образом с использованием статистического анализа обрабатывали цифровой материал таблиц.

З. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Патоморфологические изменения в щитовидной железе при саркоцистозе и его осложнениях эхинококкозом, фасциолезом. У животных при слабой и средней интенсивности инвазии внешне и на разрезе щитовидная железа тоже имела ровную, гладкую поверхность, по цвету почти не отличалась от таковой у животных первой группы. При слабой интенсивности инвазии и гистологическая структура железы мало чем отличалась от таковой контрольной группы животных. Среди округло-овальной формы фолликулов встречались фолликулы продолговато-вытянутой формы. Размер фолликулов колебался в пределах 67,2-80,270,4-120,2 мкм (табл. 3.1.1). В них хорошо просматривалась каемка резорбционных вакуолей аналогичной высоты, что и в группе неинвазированных животных 6,419,2 мкм. Цвет коллоида в отдельных фолликулах становился более насыщенным и даже двухцветным. Единичные ядра находились в состоянии пикноза или лизиса, такие клетки погибали, слущивались в просвет и примешивались к коллоиду. В фолликулах продолговато-вытянутой формы клетки сохранившегося эпителия выглядели слегка уплощенными. Поперечный диаметр ядер таких клеток не превышал 3,2 мкм при той же длине (6,4 мкм) продольного диаметра. Между указанных фолликулов располагались нежные волокна соединительной ткани.

К характерным признакам средней интенсивности инвазии можно отнести наличие увеличенных фолликулов, диаметр которых вдвое превышал диаметр фолликулов контрольной группы животных. Многие тироциты таких фолликулов из-за пикноза содержали компактные угловатой формы ядра. Масса коллоида в отдельных фолликулах имела ярко-красный цвет, выглядела плотной гиалинизированной. В ядрах тироцитов и парафолликулярных эндокриноцитов замечено формирование апоптозных телец (рис. 3.1.1).

Рис. 3.1.1. Средняя интенсивность инвазии. Неодинакового размера фолликулы (1), уплотнение коллоида (2), апоптозные тела (3). Гематоксилин и эозин. Ок. 12. об. 40, насадка 2.5, фотоаппарат 2,4

При сильной интенсивности инвазии интрафолликулярный коллоид становился более светлым и пенистым. Базальная мембрана не просматривалась, трудно было заметить контуры сохранившихся тироцитов. Контуры ядер многих тироцитов изменяли традиционную форму и содержали компактной структуры угловатой формы пикнотичные ядра. Отдельные ядра содержали апоптозные тела. Многие лизированные ядра не имели четких границ. Обилие десквамированных ядер сопровождалось нарушением строения железы. Во вновь образованных фолликулах вместе с пикнотичными ядрами клеток эпителия встречались клетки с ядрами большого размера (6,48,2 мкм). Указанные клетки больше напоминали парафолликулярные эндокриноциты. В железе преобладали микрофолликулы с единичными фолликулами большого размера (238,8454,4). В некоторых крупных фолликулах просматривались участки разрушения базальной мембраны  (рис. 3.1.2).

Рис. 3.1.2. Сильная интенсивность инвазии. Фолликулы крупного размера (1) с участком разрыва базальной мембраны (2). Гематоксилин и эозин. Ок. 12. об. 20, насадка 2.5, фотоаппарат 2,4

При микстинвазии на разрезе железа имела неоднородную окраску: мелкие фокусы слабо-розового цвета чередовались с участками насыщенно-красного цвета. С поверхности разреза таких участков выделялась кровеподобная жидкость. В срезах, окрашенных по Ван-Гизону, хорошо просматривались участки разросшейся соединительной ткани, площадь которой часто равнялась площади фолликулярной ткани, поэтому нарушалась архитектоника железы. Увеличение размеров фолликулов сопровождалось, уменьшением размеров ядер клеток фолликулярного эпителия поэтому они выглядели уплощёнными. В фолликулах округло-овальной формы коллоид уплотнился и сконцентрировался в центре со слабозаметными бледно-розового цвета резорбционными вакуолями. В основной массе клеток эпителия ядра не содержали ядрышков, или ядра находились в состоянии пикноза, лизиса. Рядом расположенные капилляры  переполнялись кровью, эндотелий разрушался с образованием обширных кровоизлияний. Указанный процесс сопровождается гибелью паренхимы и прогрессирующим разрастанием соединительной ткани как вокруг кровеносных сосудов, так и сохранившихся фолликулов. В железе преобладали микро- и макрофолликулы. Как те, так и другие не содержали коллоида. В межфолликулярной строме ближе к капсуле железы встречаются инфильтраты, в которых можно обнаружить лаброциты и парафолликулярные эндокриноциты с апоптозными телами. В капсуле железы встречались различного размера островки фолликулярной ткани, состоящие из одного или нескольких фолликулов с хаотично расположенными резорбционными вакуолями, уплощенными или слущенными тироцитами.

Таблица 3.1.1.

Морфометрические изменения в щитовидной железе крупного рогатого скота

Показатели

Группы животных

контроль

интенсивность саркоцистозной инвазии

микстинвазия***

слабая***

средняя***

сильная***

1

2

3

4

5

Площадь

фолликулов, мм2

5,393±0,004

3,899±0,07

1,368±0,02

1,108±0,40

1,2±0,005

Высота эпителия, мкм

9,21±0,1

2,24±0,02

4,61±0,01

12,35±0,01

3,23±0,01

Площадь ядер

тиреоцитов, мкм2

23,02±0,01

17,41±0,27

15,29±0,14

39,74±0,03

12,41±0,12

Таким образом, в щитовидной железе у инвазированных животных при слабой интенсивности саркоцистозной инвазии в отдельных фолликулах коллоид становился более насыщенным, и даже двухцветным. Характерным признаком средней интенсивности инвазии можно считать появление микрофолликулов, апоптозных телец и пикноз ядер тироцитов.

При сильной интенсивности саркоцистозной инвазии интрафолликулярный коллоид становился более светлым и пенистым. Вокруг фолликулов с резорбционными вакуолями наблюдалось разрастание соединительной ткани.

При микстинвазии площадь разросшейся соединительной ткани часто равнялась площади фолликулярной ткани, поэтому нарушалась архитектоника железы. Гибель паренхимы, сопровождалась уменьшением количества и размеров парафолликулярных клеток, образованием микрогеморрагий, разрастанием соединительной ткани с формированием участков фолликулярной ткани на несвойственных местах, включая капсулу железы.

3.2 Патоморфологические изменения в поджелудочной железе при саркоцистозе и его осложнениях эхинококкозом, фасциолезом. При слабой интенсивности саркоцистозной инвазии внешних признаков изменений не замечено. В гистологических препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, среди хорошо заметных треугольной и продолговато-овальной форм экзокринных панкреацитов появились ациноциты с погибшими ядрами. В округло-овальной форме островков не замечено ни качественных, ни количественных изменений.

Средняя интенсивность инвазии характеризовалась нарушением формы и цвета железы, особенно ее тела. Тело железы выглядело неравномерно окрашенным. На общем фоне бледно-розового цвета располагались участки интенсивно-красного цвета, занимающие площадь 0,3-1 см2. В железе четко проявлялось дольчатое строение. При изучении гистологических препаратов в поле зрения микроскопа среди экзокринных панкреацитов встречались фокусы, в которых основная масса ациноцитов имела округлую и даже уплощенную форму.

Многие клетки содержали или пикнотичные ядра, или ядра в состоянии лизиса. Расположенные с такими участками капилляры, переполнялись кровью вплоть до разрушения стенок сосуда. В эпителиальных межацинозных протоках встречались крупные, почти квадратной формы клетки с пикнозом ядер. Островки эндокринной части имели округло-продолговатую форму и состояли, как в контрольной группе животных, из большого количества (100-120 экз.) инсулоцитов. Многие ядра как ациноцитов, так инсулоцитов, содержали апоптозные тела или находились в состоянии пикноза, лизиса. При сильной интенсивности инвазии в цитоплазме отдельных экзокринных панкреоцитов формировались вакуоли, поэтому цитоплазма выглядела пенистой с более бледной окраской. В результате гибели паренхимы образовывались фокусы детритной массы. В островках заметно уменьшилось количество клеток. В железе появляются сдвоенные островки с апоптозными телами и детритной массой. Вокруг междольковых протоков разрастается соединительная ткань. Внутри протока формируется мощный пласт, состоящий из нескольких слоев клеток. К отличительным признакам во внешнем строении железы при микстинвазии можно отнести: уплотнение структуры органа, наличие кровоизлияний под капсулой и на разрезе. В экзокринной части железы лишь в половинной части ациноцитов цитоплазма клеток имела розовый цвет, в ядрах можно заметить ядрышки хроматина и часть вставочного протока, примыкающего к ациноцитам. Островки Лангерганса обычно занимали вдвое-втрое меньшую площадь. В некоторых из них можно обнаружить все присущие клетки, но с дезорганизацией хроматиновой субстанции. Встречались обширные участки железы без островков, или островки состояли из единичных клеток. Разросшаяся соединительная ткань сдавливала сосуды и протоки, поэтому со стороны эпителия протоков формируются эпителиальные складки. Иногда диффузный разрост соединительной ткани сопровождался образованием различного размера и формы ложных долек (рис. 3.2.1).

Рис. 3.2.1. Микстинвазия. «Ложная» долька с переполненным капилляром  Ван Гизон. Ок. 12. об. 40, насадка 2.5, фотоаппарат 4

Таблица 3.2.1

Морфогистометрические данные поджелудочной железы

Показатели

Группы животных

контроль

интенсивность саркоцистозной инвазии

микстинвазии

слабая

средняя

сильная

1

2

3

4

5

Ацинусы, мкм

126,83±0,56

78,34±0,32

59,32 ±0,21

59,21±0,32

59,31±0,42

Островки

Лангерганса, мкм

197,61±0,65

154,41±0,52

93,21±0,12

43,01±0.42

34,12±0,36

Кол-во

инсулоцитов, шт.

115,50±0,44

96,53±0,24

44,21±0,22

24,80±1,20

22,32±1,22

Инсулоцит, мкм

0,52±0,09

       0,51±0,08

0,62 ±0,11

0,51±0,08

0,52±0,06

Ядро

инсулоцитов, мкм

0,16 ±0,02

0,18 ±0,01

0,18 ±0,03

0,18±0,01

0,16±0,02

Из материалов таблицы заметно, что с увеличением интенсивности саркоцистозной инвазии из всех снятых данных замеров островков не достоверные колебания получены преимущественно между группой животных при микстинвазии и групп животных с сильной интенсивностью инвазии, а также по размерам инсулоцитов и их ядер.

Следовательно, при слабой интенсивности саркоцистозной инвазии, среди хорошо заметных треугольной и продолговато-овальной форм экзокринных панкреацитов, появляются ациноциты с погибшими ядрами. Средняя интенсивность инвазии характеризовалась формированием апоптозных тел с наличием пикнотичных и лизированных ядер ациноцитов. В межацинозных протоках среди клеток кубического эпителия протоков, встречались более крупные клетки. При сильной интенсивности инвазии внутри междолькового протока формировался мощный пласт, состоящий из нескольких слоев клеток. Указанные изменения повидимому, связаны с функциональными нарушениями поджелудочной железы, вследствие интоксикации на фоне инвазии и замещением функциональных элементов на клетки соединительнотканного происхождения.

3.3 Патоморфологические изменения в надпочечниках при саркоцистозе и его осложнениях эхинококкозом, фасциолезом. При слабой интенсивности саркоцистозной инвазии видимых изменений внешнего вида и структуры надпочечников на разрезе не выявлено. При изучении гистологических препаратов заметно расширение синусоидных капилляров, расположенных ближе к сетчатой зоне. В отдельных ядрах эпинефроцитов, особенно расположенных ближе к синусоидным капиллярам не просматривались ядрышки хроматина и выявлены лишь единичные норэпинефроциты. Не выявлены достоверные колебания сравниваемых величин у животных при средней интенсивности инвазии. В мозговом веществе обнаружены эндокриноциты с пикнотичными ядрами. При внешнем осмотре разрезанных пополам надпочечников от животных с сильной интенсивностью инвазии в подкапсулярном пространстве просматривались серо-беловатого цвета, диффузно заполненные образования размером не больше просяного зерна. Граница между слоями слабо выражена, особенно ближе к центральной части надпочечников. Там же локализовались мелкоточечные кровоизлияния. При морфометрическом измерении выявлено достоверное (Р < 0,001) увеличение ширины внутреннего слоя оболочки и мозгового вещества (талб. 3.3.1). Причиной расширения оболочки видимо послужило, во-первых отсутствие четко выраженных границ между слоями оболочки и границ тяжей соединительной ткани, уходящей вглубь органа, из-за чего трудно определить границу начала клубочковой зоны. Во внутреннем слое капсулы и на границе с клубочковой зоной располагались лимфоидно-эпителиальные клетки в виде тяжей и узелков (рис. 3.3.1). Скопление аналогичных клеток в виде тяжей и расположенных ближе к синусоидным капиллярам встречались в пучковой зоне надпочечников. В сетчатой зоне заметно расширение стромы, переполнение сосудов и формирование микрогеморрагий в результате разрыва сосудистой стенки. В ядрах эндокриноцитов как коркового, так и мозгового вещества надпочечников выявлена концентрация хроматинового вещества в виде апоптозных телец.

       Микстинвазия характеризовалась слегка увеличенным объемом  надпочечников. Под капсулой просматривались округло-овальной формы уплотнения. Надпочечники не имели присущий коричневый оттенок с поверхности и на разрезе. Визуально не просматривалась граница между корковым и мозговым веществом. Эндокриноциты мозгового вещества располагались хаотично, часто около внутреннего слоя капсулы, вместо компонентов клубочковой зоны, среди эндокриноцитов пучковой и сетчатой зон. Ядра эндокриноцитов в результате лизиса имели слабозаметные контуры. Или они наоборот приобретали темно-фиолетовый цвет из-за пикноза. Цитоплазма эндокриноцитов насыщена вакуолями. Среди эндокриноцитов мозгового вещества просматривались участки в виде обширного некроза однородной бесструктурной (детритной) массы бледно-розового цвета. Сохранившиеся ближе к периферии ядра находились в состоянии лизиса, пикноза и даже редко наблюдаемого рексиса. Кровеносные сосуды наполнены кровью, стенки некоторых утолщены в результате гиалиноза или разрушены с формированием кровоизлияний.

Рис. 3.3.1. Сильная интенсивность саркоцистозной инвазии. Клеточный узелок (1) во внутреннем слое капсулы (2). Гематоксилин и эозин. Ок. 12. об. 40, насадка 2.5, фотоаппарат 4

Таблица 3.3.1

Микрометрические параметры надпочечников

Показатели

Группы животных

контроль

интенсивность саркоцистозной инвазии

микстинвазии

слабая

средняя

сильная

1

2

3

4

5

Слои капсул

а) наружный

71±0,13

71,9±1,59

85,7±7,44

75,2±3,04

90,2±0,66

б) внутренний

57,3±0,56

59±0,12

119±1,76

106±0,61

90,2±0,66

зоны

клубочковая

481±0,32

591±0,89

433±9,13

475± 3,49

298±1,69

пучковая

2233± 46,6

2083±2,29

1713 ± 7,81

25636±6,91

2833±7,79

сетчатая

1403±4,03

367± 2,88

833± 4,36

1303± 10,6

796±3,96

Мозговое вещество

948±3,65

161± 5,1

872± 9,44

2213± 57,7

3623± 22,8

Полученные материалы, представленные в таблице, убедительно свидетельствуют о достоверных колебаниях снятых замеров, кроме наружного слоя капсулы. Установлено, что в надпочечниках слабая интенсивность саркоцистозной инвазии сопровождалась расширением синусоидных капилляров. В отдельных ядрах эндокриноцитов не просматривались ядрышки хроматина. При средней интенсивности инвазии появляются эндокриноциты с пикнотичными ядрами. В ядрах эндокриноцитов выявлена концентрация хроматинового вещества в виде апоптозных телец.

При сильной интенсивности инвазии выявлено достоверное (Р < 0,001) увеличение ширины внутреннего слоя оболочки и мозгового вещества. В капсуле, на границе с клубочковой зоной, в пучковой зоне встречались лимфоидно-эпителиоидные клетки в виде тяжей и узелков. В сетчатой зоне заметно расширение стромы, переполнение сосудов и формирование микрогеморрагий.

У животных при микстинвазии полностью нарушена архитектоника надпочечников: элементы клубочковой зоны обнаружены во внутреннем слое капсулы, здесь же эндокриноциты мозгового вещества. Ядра эндокриноцитов лизируются или уплотняются. Стенки кровеносных сосудов гиалинизируются, разрушаются с  формированием кровоизлияний.

ВЫВОДЫ

1.  Проведёнными исследованиями установлено, что изученные сочлены паразитоценоза находились в синергической ассоциации, характер патоморфологических изменений в щитовидной, поджелудочной железах и надпочечниках, как и в паренхиматозных органах, зависел от интенсивности саркоцистозной инвазии.

2. Развитие дистрофических изменений в щитовидной железе с образованием апоптозных телец в ядрах фолликулярного эпителия, наблюдаемое в отдельных тироцитах при слабой интенсивности инвазии, при средней интенсивности дополняется появлением единичных фолликулов большего размера, увеличением количества апоптозных телец, пикнозом ядер тироцитов и десквамированных клеток в коллоиде. Сильная интенсивность характеризовалась  прогрессированием гибели ядер тироцитов в виде пикноза, лизиса. Коллоид становится пенистым и более светлым.

3. В щитовидной железе замечено достоверное (Р<0,001) уменьшение площади фолликулов при слабой на 7,23%, средней – 2,54, сильной – 2,05, микстинвазии – 2,23%; достоверное (Р<0,001) уменьшение площади ядер тироцитов соответственно до 17,41±0,27 мкм, 15,29±0,14, 13,74±0,03 и 12,41±0,12 мкм с достоверным (Р<0,001) снижением высоты фолликулярного эпителия.

4. В поджелудочной железе при слабой интенсивности инвазии более чувствительными оказались отдельные ациноциты, в ядрах которых наблюдался пикноз, лизис и изредка рексис хроматиновой субстанции. Средняя интенсивность характеризовалась появлением апоптозных телец и погибших ядер инсулоцитов. При сильной – появляются фокусы детритной массы, в цитоплазме экзокринных панкреацитов – вакуоли, она становится более светлой и пенистой.

5. Увеличение интенсивности инвазии сопровождалось достоверным (Р<0,001) уменьшением диаметра ацинусов, островков Лангерганса, снижением количества инсулоцитов в островках.

6. В надпочечниках, уже при слабой интенсивности инвазии уменьшилось количество норэпинефроцитов. Средняя интенсивность характеризовалась появлением эндокриноцитов с пикнотичными ядрами. Количество погибших клеток при сильной интенсивности увеличивается, что сопровождается сглаживанием границы между слоями. Во внутреннем слое капсулы появляются лимфоидно-эпителиоидные узелки, в сетчатой зоне – микрогеморрагии.

7. Морфометрически в надпочечниках установлено достоверное (Р<0,001) уменьшение клубочковой, пучковой, сетчатой зон и увеличение площади мозгового вещества.

8. Картина изменений в экзокринном и эндокринном аппарате изученных желёз при ассоциации инвазий имела несколько однотипный характер и сводилась к нарушению морфологической структуры всех желёз, наличию микрогеморрагий, прогрессирующему разрастанию стромы с захватом части паренхимы и формированию, так называемых, «ложных» долек в щитовидной железе без парафолликулярных клеток, в поджелудочной – без инсулоцитов, надпочечниках – без дифференцированных эндокриноцитов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ

Результаты исследований используются в учебном процессе по курсам паразитологии, патологической анатомии и ветеринарной санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия» и практической работе по экспертизе мяса, мясных продуктов крупного рогатого скота на мясоперерабатывающих предприятиях г. Новокуйбышевска, г. Октябрьска, Областной ветеринарной лаборатории, районных лабораториях Сызранского, Кинельского и Кинель-Черкасского районов Самарской области.

Сведения о патоморфологическом строении изученных желёз у крупного рогатого скота целесообразно использовать при разработке научно-обоснованной инструкции по ветеринарно-санитарной экспертизе мяса, субпродуктов. Они могут быть полезны при проведении курсов повышения квалификации соответствующих работников АПК.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гасанов, Р.Р. Мониторинг саркоцистоза коров в хозяйствах Самарской области / Р.Р. Гасанов, В.И. Абакумов, В.А. Салимов // Известия ФГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия». – Самара, 2008. – №1. – С. 127-129.

2. Гасанов, Р.Р. Морфомикрометрические изменения в щитовидной железе коров при спонтанном саркоцистозе и микстинвазиях / Р.Р. Гасанов, В.А. Салимов // Материалы международной конференции посвященные 80-летию Самарской НИВС Россельхоз академии. – Самара, 2009. – С. 3-4.

3. Гасанов, Р.Р. Гельминто-протозойная ассоциация и гематолого-биохимические показатели крови коров / Р.Р. Гасанов, В.И. Абакумов,  В.А. Салимов // Известия ФГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия». – Самара, 2009. – №1. – С. 31-32.

4. Гасанов, Р.Р. Морфологические изменения в поджелудочной железе крупного рогатого скота при осложненном саркоцистозе / Р.Р. Гасанов, В.А. Салимов //  Зоотехния. Москва, 2009. №11. С. 20-21.

5. Гасанов, Р.Р. Патоморфология почек крупного рогатого скота при саркоцистозе и его осложнениях микстинвазиями / Р.Р. Гасанов, В.И.  Абакумов, В.А. Салимов //  Российский паразитологический журнал. Москва, 2010. №4. С. 69-73.

6. Гасанов, Р.Р. Патоморфология надпочечников крупного рогатого скота при саркоцистозе и его осложнениях микстинвазиями / Р.Р. Гасанов,  В.И. Абакумов, В.А. Салимов //  Российский паразитологический журнал. Москва, 2011. №1. С. 81-85.

7. Гасанов, Р.Р.  Распространение эхинококкоза и фасциолеза крупного рогатого скота в хозяйствах Самарской области / Р.Р. Гасанов,  В.И. Абакумов // Известия ФГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия». Самара, 2011. №1. С. 58-62.

Гасанов Руслан Рамизович

ПАТОМОРФОЛОГИЯ ЩИТОВИДНОЙ,

ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗ И НАДПОЧЕЧНИКОВ

ПРИ САРКОЦИСТОЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

АВТОРЕФЕРАТ

Диссертация на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

ЛР № 020444  от 10.03.98 г.

Подписано в печать ……...2012.

Формат 6084 1/16. Печ.л.1

  Заказ …., тираж 100 экз

  Редакционно-издательский центр Самарской ГСХА

446442, Самарская обл., пос. Усть-Кинельский, ул. Учебная 2

Тел.: (84663) 46-2-44, 46-2-47

Факс 46-2-44

E-mail: ssaariz@ mail.ru




© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.