WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


 

На правах рукописи

ШАБИЕВ ЛОГМАН ФИРУДИН ОГЛЫ

ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА СОЕДИНЕНИЙ НА ОСНОВЕ ЯНТАРНОЙ КИСЛОТЫ И ИХ ЭФФЕКТИВНОСТЬ

В ПУШНОМ ЗВЕРОВОДСТВЕ

06.02.03 – Ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Казань 2012

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»

Научный руководитель:        доктор ветеринарных наук, профессор

Гарипов Талгат Валирахманович

Официальные оппоненты: Новиков Валерий Александрович,

доктор ветеринарных наук, профессор, ФГБУ

«Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», ведущий научный сотрудник отдела токсикологии

Алексеев Геннадий Александрович,

доктор ветеринарных наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» профессор кафедры незаразных болезней

Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Башкирский государственный аграрный университет» (ФГБОУ ВПО «БГАУ»)

Защита состоится «  » в «  » часов на заседании диссертационного совета Д 220.034.02 при ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»

по адресу: 420029, г. Казань, ул. Сибирский тракт, 35.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО  «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени  Н.Э. Баумана»

Автореферат разослан «____» _________ 2012 года и размещен на сайтах  http: // www.mon.gov.ru/ и // www.ksavm.senet.ru/

Ученый секретарь диссертационного

совета, доктор биологических наук,

профессор  Р.Я. Гильмутдинов

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Увеличение продуктивности зверей, улучшение качества пушнины и снижение её себестоимости – являются важнейшими задачи, стоящими перед пушным звероводством.

Эти задачи решаются звероводческими хозяйствами всесторонним совершенствованием производства с учётом современных достижений науки и передового опыта. Основным элементом в технологии производства пушнины является рациональное кормление зверей. От кормления зависят общее состояние и воспроизводительная способность зверей, качество шкурок и в конечном итоге – экономическая эффективность производства (Н. Ш. Перельдик, Л. В. Милованов, А. Т. Ерин, 1981).

В кормлении животных широко применяются различные вещества для ускорения роста и откорма (антибиотики, тканевые, ферментные, бактериальные,  витаминные, белковые препараты, заменители белка и другие). Однако некоторые соединения могут отрицательно влиять на организм (гормональные препараты), другие, накапливаясь в органах и тканях, представляют потенциальную опасность для человека и животных (антибиотики и др.).

Макро- и микроэлементы также играют важную роль в жизнедеятельности животных. Они являются мощными регуляторами обмена белков, липидов, углеводов, минеральных веществ. Известно около 200 ферментных систем, активность которых связана с наличием в их молекуле микроэлементов (Ф. Я. Беренштейн, 1966).По сообщению Ф.Ф.Асадуллиной и др. (2005) под влиянием комплекса микроэлементно-витаминных препаратов коэффициент переваримости сухого вещества корма увеличивается на 3,78-5,36%, органического – на 3,41- 4,81%. 

Так как минеральные вещества постоянно выносятся из почвы растениями и не восполняются, содержание микроэлементов в кормах для животных становится заниженным и обеспечивает лишь 30-70% потребности организма животных в них. В кормах растительного происхождения наблюдается дефицит фосфора, магния, меди, цинка, марганца, кобальта, йода и других элементов (Ю. Н. Кондратьев, 1997). Известно, что в кормосмеси для пушных зверей в значительном количестве входят продукты животноводства (мясо, молоко, жир и др.). Однако в продуктах животноводства при недостатке микроэлементов в кормах, содержание их снижается в 5-10 раз (В. Т. Самохин, 1997; В. И. Шушлебин, 1997).

Имеется ряд сообщений о применении янтарной кислоты и ее препаратов в различных отраслях сельскохозяйственного производства: животноводстве (Ю. Ю. Ивницкий, 1994; А. В. Иванов, 1996; А.В. Басанкин, В.А. Антипов, 2002; В.А. Беляев, 2007), свиноводстве (Е. В. Наумкин, 1994; Н. С. Васильева, 1997; А. В. Иванов с соавт., 1998; Т.А. Трошина, Л.А. Бочкарева, 2010) и птицеводстве (Р. Р. Хисамов, 1999). Авторы сообщают, что янтарная кислота в организме животных активирует обменные процессы, стимулирует гемопоэз, повышает продуктивность сельскохозяйственных животных. Вместе с тем, многие вопросы фармакологии и токсикологии янтарной кислоты и ее производных до сих пор раскрыты не полностью.

Исходя из вышеизложенного, изучение фармако-токсикологических свойств соединений янтарной кислоты, возможности их применения в звероводстве имеют большое научное и практическое значение.

Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ФГБ ОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана» (регистрационный номер 01980002094).

Цель и задачи исследований. Целью работы являлось изучение фармако-токсикологических свойств препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс», синтезированных в МСАЦ «Хромас» (г.Казань) и разработка методов их применения для повышения продуктивности пушных зверей.

В соответствии с целью работы перед нами стояли следующие задачи:

1. Изучить острую, хроническую токсичность и кумулятивные свойства препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс».

2. Выяснить влияние препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» на морфо-биохимический состав крови и на содержание макро- и микроэлементов в тканях норок.

3. Изучить возможность использования препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» пушным зверям в составе кормосмесей.

4. Изучить отдельные факторы неспецифической резистентности пушных зверей при введении в организм «Янтарос» и «Янтарос плюс».

5. Изучить влияние препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» на размеры шкурок и товарные качества пушно-мехового сырья.

Научная новизна исследования. Впервые установлены фармако-токсикологические свойства и корригирующее влияние производных янтарной кислоты – «Янтарос» и «Янтарос плюс» на биохимический и морфологический состав крови, плодовитость норок, а также энергию роста и сохранность молодняка норок и качество меха и шкур.

Изучено влияние соединений на минеральный (содержание ряда микроэлементов и тяжелых металлов в органах и тканях), углеводный (уровень глюкозы и концентрация лактатдегидрогеназы) и белковый (содержание общего белка и его фракций) обмены.

Основные положения, выносимые на защиту.

  1. Производные янтарной кислоты – Янтарос и Янтарос плюс являются малотоксичными соединениями, у которых ЛД50 для крыс составляет соответственно 9333,3±1554,3 мг/кг и 10166,67±1276,9 мг/кг, не обладают кумулятивными свойствами, относятся ко 4 классу опасности.
  2. Янтарная кислота и ее производные – Янтарос и Янтарос плюс в рекомендуемых нами дозах оказывают стимулирующее действие на гемопоэз беременных норок, не оказывают отрицательного влияния на течение беременности и на приплод, способствуют нормализации белкового и минерального обменов.
  3. Янтарос и Янтарос плюс стимулируют энергию роста молодняка норок и обеспечивают высокое качество их меха.

Практическая значимость.

Разработаны методы использования препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» в пушном звероводстве. В установленном порядке утверждено наставление по применению. Использование препаратов позволило значительно повысить интенсивность роста и качество меха у пушных зверей.

Апробация результатов исследования.

Материалы диссертации доложены на научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и животноводства (Казань, 1997, 1998, 1999); международной научно-производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения чл-корр. ВАСХНИЛ В.Г. Котова «Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных (Воронеж, 1999); республиканской научно-производственной конференции «Актуальные проблемы животноводства и ветеринарии (Казань, 1999); расширенном заседании кафедры физиологии ФГБОУ ВПО «КГАВМ имени Н.Э. Баумана».

Публикации результатов исследования.

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, в том числе 2 работы – в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, изложения материалов и методов исследования, результатов собственных исследований  и их обсуждения, выводов, практических предложений и библиографического списка литературы. Работа иллюстрирована 21 таблицами и 16 рисунками. Список литературы включает в себя 205 источников, в том числе  21 иностранных авторов.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальные исследования проведены в период с 1994 по 2010 годы в условиях лаборатории на кафедре физиологии животных ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана». В опытах использовано: 124 крысы белые беспородные, норок стандартных темно-коричневых – 459, в том числе 289 самок и 170 щенков мехового молодняка (табл. 1).

Таблица 1 Объем выполненной работы

№ п/п

Исследования

Объект исследований

Количество животных

Количество исследований

1.

Определение острой и хронической токсичности препаратов

крысы

142

142

2.

Гематологические

кровь

20

60

3.

Биохимические

кровь

20

60

4.

Исследование органов и тканей на содержание ряда микроэлементов и тяжелых металлов

племенное стадо

4

120

5.

Учёт воспроизводительных функций норок

племенные

самки

225

225

6.

Определение энергии роста молодняка

меховой

молодняк

20

80

7.

Оценка качества меха норок

шкурки 6-месячных

норок

150

150

8.

Действие препаратов на изолированный отрезок кишечника

кролики

6

24

Схемы и условия проведения экспериментов, количество использованных животных, дозы и кратность применения испытуемых препаратов приведены в соответствующих разделах работы.

Контрольные и опытные группы животных формировали по принципу аналогов с учетом возраста, пола и массы тела. Во всех группах в период проведения опыта поддерживали одинаковые условия кормления и содержания.

В опытах использованы:

1. Янтарная кислота, синтезированная в Технологическом Научном Центре КГТУ при КМ РТ, отвечающая требованиям ТУ 2634001-12993724-93.

2. Препарат «Янтарос» (10% янтарной кислоты, 3% крахмала, 87% глюконата кальция), выпускаемый МСАЦ «Хромас» (г. Казань), соответствующий ТУ 93-004-13012044-84.

3. Препарат «Янтарос плюс» (ТУ 9337-004-13012074-94), содержит в своем составе янтарную кислоту – 10%; глюконат кальция – 69,46 %; крахмал – 3%; неорганические соли железа – 9,58%; цинка – 2,79%; марганца – 3,63%; меди – 1,25%; кобальта – 0,29%. Выпускается МСАЦ «Хромас» (г. Казань) по лицензии Технологического Научного Центра КГТУ при КМ РТ.

Животные до и в ходе эксперимента в соответствующие сроки подвергались клиническому обследованию, а кровь морфологическому и биохимическому анализу. Кровь для исследования получали в утренние часы до кормления зверей из мякиша пальца или путем отсечения когтя. Для морфологических исследований кровь собирали в специальные пробирки “Microvette CB 1000”  (Germany), обработанные антикоагулянтом калий-EDTA, а для биохимических – в центрифужные пробирки.

Морфологические исследования крови включали определение количества эритроцитов и лейкоцитов по общепринятой методике, определение лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина – гемоглобинцианидным методом с использованием диагностического набора «Биоконт гем».

Биохимический анализ крови сводился к определению содержания общего белка биуретовым методом, общего сахара – на анализаторе “Eskan-g”. Определение содержания железа в сыворотке крови осуществляли бетафенактролиновым методом.

Определение содержания микроэлементов в органах норок проводили методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии.

Общетоксическое действие препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» оценивали, определяя острую и хроническую токсичности в соответствии с «Методическими указаниями по определению токсичных свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (1991), утвержденными ГУВ СССР и «Методическими рекомендациями по токсико-экологической оценке лекарственных средств, применяемых в ветеринарии», одобренных секцией отделения ветеринарной медицины РАСХН (1998).

Острую токсичность препаратов определяли на белых беспородных крысах массой 100-120 г путем внутрижелудочного введения и последующей обработкой полученных результатов согласно формуле Кербера (1931). Большие дозы препаратов вводили дробно в течение 12 часов. Показатели хронической токсичности препаратов определяли по методу Limm с соавт. (1961).

Воспроизводительные функции норок, получавших исследуемые соединения, определяли по количеству щенят в помете и их сохранности. Контроль за энергией роста и развитием молодняка осуществляли путем взвешивания зверей.

Влияние препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» на моторику изолированной петли тонкого отдела кишечника кроликов изучали по методу Магнуса.

Полученный цифровой материал подвергали вариационно-статистической обработке с применением критерия Стьюдента.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Токсические свойства препаратов «Янтарос плюс»

и «Янтарос»

Исследования острой токсичности «Янтарос плюс» проведены на 42 белых крысах обоего пола массой тела 185-200 г, разделенные на 7 групп по 6 животных в каждой. Первые 6 групп животных получали препараты, седьмая группа служила контролем (вводили в равном объеме дистиллированную воду). Первой группе крыс препарат вводили в дозе 8000 мг/кг, второй – 9000, третьей – 10000, четвертой – 11000, пятой – 12000 и шестой – 13000 мг/кг. Препарат вводили крысам в желудок дробно в виде суспензии на растительном масле при помощи металлического зонда.

Наблюдения за животными вели в течение 24 дней с момента введения препарата. Во время наблюдения учитывали сроки развития интоксикации, клиническую картину отравления, сроки и процент гибели животных, а у выживших животных определяли быстроту восстановления функций организма. Всех павших крыс подвергали патологоанатомическому вскрытию.

В результате проведенного исследования установлено, что «Янтарос плюс» в дозе 8000 мг/кг не вызывает гибели подопытных животных. Через 20-30 минут после введения препарата в вышеуказанной дозе отмечали незначительное угнетение общего состояния животных. Спустя 60 минут с начала опыта отмеченные признаки исчезали, а через 2-3 часа животные внешне не отличались от контрольных. Охотно принимали корм и воду, адекватно реагировали на внешние раздражители.

После введения препарата в дозах 9000 и 10000 мг/кг через 20-40 минут отмечали повышенную рефлекторную возбудимость, появлялись судорожные движения конечностями, судорожное сокращение скелетной мускулатуры. Во время судорог животные принимали боковое положение, и часть из них погибла через 4-7 часов после введения препарата. Оставшиеся в живых крысы пришли в нормальное состояние спустя 5-10 часов.

Препарат «Янтарос плюс» в дозах 11000 и 12000 мг/кг вызывал гибель 4 и 5 крыс из групп соответственно от остановки дыхания в период судорог. Выжившие животные проявляли признаки беспокойства, активно двигались по клетке, вставали на задние конечности. Через 2-3 часа признаки возбуждения сменялись угнетением, а через 9-15 часов состояние животных начало приближаться к норме. На вторые сутки животные, получавшие препарат, внешне не отличались от контрольных.

В дозе 13000 мг/кг препарат вызвал гибель всех опытных животных в течение 20-40 минут после его введения.

При вскрытии погибших животных наблюдали выраженную гиперемию и отек легких, полнокровие печени, селезенки и почек, асфиксическое сердце.

ЛД50 препарата «Янтарос плюс» для крыс при внутреннем введении составляет 10166,67±1276,9 мг/кг.

Острая токсичность «Янтарос» изучена на 42 крысах массой тела 190-200 г по той же схеме, что и «Янтарос плюс».

«Янтарос» в дозе 5000 мг/кг не вызывает гибели подопытных животных. После введения препарата в дозе 7000 мг/кг у крыс наблюдались судороги и погибла одна крыса. В третьей группе животных  через 20-40 минут после введения препарата отмечали повышенную рефлекторную возбудимость, судорожные движения конечностями, сокращение скелетной мускулатуры, погибли три крысы. В четвертой и пятой группах в результате введения препарата погибло 4 и 5 крыс соответственно.

Препарат «Янтарос» в дозе 13000 мг/кг вызвал гибель всех животных шестой группы в течение 20-40 минут после его введения.

На вскрытии погибших животных установили выраженную гиперемию и отек легких, полнокровие печени, селезенки и почек, асфиксическое сердце.

В результате произведенных расчетов установлено, что ЛД50 препарата «Янтарос» равна 9333,3±1554,3 мг/кг.

Определение хронической токсичности  препаратов при внутрижелудочном введении было проведено на 20 белых крысах, массой тела 260-350 г по методу Лимма с соавт. (1961) в течение 30 суток. Первоначально вводимая доза составляла 1/10 от ЛД50.

Клиническая картина отравления в хроническом опыте аналогична той, которая описана при остром отравлении крыс при внутреннем применении препарата. Гибель крыс началась при введении суммарной дозы 8641,8 мг/кг на 7 день опыта, в последующие дни по мере увеличения получаемой дозы количество погибших крыс увеличивалось, а при дозе 173239,6 мг/кг на 30 день опыта все животные пали.

Таким образом, ЛД50хрон препарата «Янтарос плюс» составляет 58880,1±17110,8 мг/кг для белых крыс при внутреннем применении, для препарата «Янтарос» - 59708,335±11801,7 мг/кг.

Коэффициент кумуляции «Янтарос плюс» составил 5,79, «Янтарос» - 6,4.

Следовательно, по степени воздействия на организм в соответствии с нормативами ГОСТ 12.1.007-76  «Янтарос» относится к 4-му классу опасности – малоопасные вещества.

    1. Влияние препаратов «Янтарная кислота», «Янтарос» и «Янтарос плюс» на морфологический и биохимический состав крови самок норок

Для проведения исследования было отобрано 20 половозрелых самок норок стандартного темно-коричневого окраса в возрасте 18 месяцев, которых разделили на 4 равные по числу животных группы. Животным первой группы задавали с кормом Янтарную кислоту, второй – Янтарос, третьей группе – Янтарос плюс. Все препараты вводили в дозе 2 мг/кг массы норок ежедневно в течение 30 дней.

С целью изучения испытуемых препаратов на некоторые гематологические показатели самок норок в период воспроизводства проводили морфологические и биохимические исследования крови до начала введения препаратов, и через 20 и 30 дней после последнего введения. Второй этап исследования крови у норок проводили через 2 месяца после щенения, по аналогичной схеме. Одновременно проводили взвешивание исследуемых норок в утреннее время перед кормлением.

Установлено, что применение препаратов «Янтарная кислота», «Янтарос» и «Янтарос плюс» в указанных дозах самкам норок во время беременности и лактации оказывает стимулирующее влияние на гемопоэз.

Если исходное содержание гемоглобина и эритроцитов в крови у всех животных было на уровне нижних границ физиологической нормы, то через 20-30 дней после начала применения препаратов во всех экспериментальных группах количество эритроцитов и содержание гемоглобина возросли соответственно на 3,96 и 15,8% (в первой группе); во второй группе 6,94 и 17%; а в третьей – на 6,8 и 23,2% (табл. 2).

Таблица 2 – Морфологический состав крови беременных норок (n=20)

Группа

Срок исследования

исходные данные

На 20-й день

На 30-й день

Гемоглобин, г/л

1 группа (Янтарная кислота)

152±0,35

159±0,14*

176±0,16*

2 группа (Янтарос)

153±0,16

160±0,21*

179±0,16*

3 группа (Янтарос плюс)

151±0,27

163±0,22*

186±0,13*

4 группа контрольная

153±0,23

156±0,22

154±0,16

Лейкоциты, 109/л

1 группа (Янтарная кислота)

5,0±0,37

5,14±0,38

5,33±0,37

2 группа (Янтарос)

4,5±0,33

4,64±0,33

4,79±0,34

3 группа (Янтарос плюс)

4,89±0,39

5,19±0,46

5,34±0,44

4 группа контрольная

4,85±0,32

4,9±0,31

4,86±0,32

Эритроциты, 1012/л

1 группа (Янтарная кислота)

7,26±0,28

7,12±0,29

7,34±0,30

2 группа (Янтарос)

6,91±0,20

6,92±0,13

7,39±0,18

3 группа (Янтарос плюс)

7,16±0,34

7,29±0,34

7,65±0,31

4 группа контрольная

7,02±0,15

7,36±0,14

7,02±0,15

Цветной показатель

1 группа (Янтарная кислота)

1,8±0,2

1,74±0,2

1,68±0,05

2 группа (Янтарос)

1,7±0,1

1,65±0,17

1,58±0,04

3 группа (Янтарос плюс)

1,75±0,2

1,68±0,1

1,52±0,17

4 группа контрольная

1,7±0,1

1,8±0,1

2,06±0,06

Содержание гемоглобина в эритроците, пг

1 группа (Янтарная кислота)

29,6±1,2

29,0±1,1

28,7±1,01

2 группа (Янтарос)

28,3±2,1

26,2±1,2

25,8±0,98

3 группа (Янтарос плюс)

30,0±1,3

29,6±1,05

28,5±0,8

4 группа контрольная

29,7±3,8

31,0±2,2

33,6±2,86

*– достоверно при р0,05)

На начало опыта количество лейкоцитов у норок всех групп находилось на нижних границах нормы. К окончанию исследования содержание лейкоцитов несколько увеличилось во всех трех экспериментальных группах, в то время как в контрольной группе средние значения оставались на прежнем уровне. В первой группе количество лейкоцитов увеличилось на 6,6%; во второй группе на 6,4%; в третьей группе, получавшей «Янтарос плюс», на 9,2%.

В лактационный период организм норок испытывает сильную нагрузку, поэтому значительный интерес представлял изучение влияния янтарной кислоты, препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» на морфологический состав крови кормящих норок. Исследования продолжены на тех же животных, что и в предыдущем опыте.

Установлено, что в период лактации и кормления щенят под влиянием препаратов количество эритроцитов и уровень гемоглобина в крови у животных экспериментальных групп оставались увеличенными по сравнению с контролем в первой группе на 5,8 и 14%, во второй группе на 8,4 и 16,4%, в третьей на 7,6 и 19,5%, соответственно. Количество лейкоцитов в крови норок также имело тенденцию к возрастанию, причем во всех группах: в первой группе (Янтарная кислота) – на 9,3%; во второй (Янтарос) – на 9,5% и в третьей (Янтарос плюс) – на 10,2% и в четвертой контрольной группе – на 9,7%.

В лейкоцитарной формуле у зверей всех групп отмечали умеренный лимфоцитоз, а при изучении морфологии эритроцитов у всех животных на протяжении опыта устанавливали полихромазию эритроцитов (указывает на интенсивную регенерацию клеток красной крови), а у контрольной группы норок, кроме того, анизохромию и пойкилоцитоз эритроцитов.

Биохимические исследования сыворотки крови взрослых племенных норок в возрасте 1,5 года, получавших препараты «Янтарос» и «Янтарос плюс» в течение 30 дней внутрь с кормом в период лактации, проводились по следующим показателям: общий белок, глюкоза, лактатдегидрогеназа, сывороточное железо.

Исследования показали, что в начале эксперимента у всех животных наблюдалась гиперпротеинемия, характерная для алеутской болезни. Под влиянием введенных препаратов содержание общего белка в сыворотке крови зверей первой и второй опытной групп на 30 день лактации оставалось на прежнем уровне, в то время как у контрольных норок наблюдали дальнейшее его увеличение – концентрация белка увеличилась на 14,3% по сравнению с фоновыми показателями.

Содержание сывороточного железа в крови подопытных животных в течение опыта находилось в пределах границ физиологической нормы. Однако у интактных животных данный показатель за период исследования изменился незначительно, а у опытных норок концентрация железа в сыворотке крови на 30 день лактации увеличилась по сравнению с фоновыми значениями в среднем на 14,4% (в первой группе) и 10,4% (во второй группе).

Колебания концентраций лактатдегидрогеназы и глюкозы в сыворотке крови норок всех трех групп были недостоверны. Все самки, получавшие препараты, охотно ухаживали за потомством до момента их отъема.

При наблюдении за самками в период лактации у контрольных животных были отмечены случаи каннибализма и отказа от щенков (потеря материнского инстинкта). Новорожденные щенята, полученные от самок контрольной группы, были вялыми, малоподвижными, часто с нарушениями функции пищеварительной системы.

Таблица 3 - Биохимические показатели крови подопытных самок в период лактации (n=20)

Группа

Срок исследования

фон

30 день лактации

Общий белок, г/л

1 группа (Янтарос плюс)

98,5±7,3

100,9±6,5

2 группа (Янтарос)

104,7±7,2

104,6±6,3

3 группа контрольная

95,7±3,00

109,4±2,9

Глюкоза, ммоль/л

1 группа (Янтарос плюс)

5,28±0,6

5,88±0,6

2 группа (Янтарос)

5,32±0,7

6,38±1,43

3 группа контрольная

5,34±0,9

5,44±0,8

Лактатдегидрогеназа, ед/л

1 группа (Янтарос плюс)

1354±274

1254±215

2 группа (Янтарос)

1185±186

1178±256

3 группа контрольная

1035±179

1211±328

Сывороточное железо, мкг%

1 группа (Янтарос плюс)

285±18

326±24*

2 группа (Янтарос)

288±14

318±29*

3 группа контрольная

290±21

278±16

Таким образом, применение препаратов «Янтарная кислота», «Янтарос» и «Янтарос плюс» в указанных дозах самкам норок в период воспроизводства стимулирует гемопоэз, способствует нормализации лейкопоэза, белкового и минерального обменов.

    1. Влияние препаратов  «Янтарос» и «Янтарос плюс» на содержание макро- и микроэлементов в тканях

мехового молодняка норок

С целью изучения влияния препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» на распределение и содержание в органах и тканях подопытных зверей ряда микроэлементов (медь, цинк, железо, марганец, магний) и тяжелых металлов (свинец, никель, кобальт) была проведена атомно-абсорбционная спектрофотометрия мышц, печени, почек, сердца и селезенки, полученных от мехового молодняка 6-месячного возраста.

Установлено, что у животных всех групп наибольшее количество железа содержится в печени, а наименьшее – в почках. Однако у зверей второй опытной группы (Янтарос плюс) содержание железа было выше, чем у зверей первой (Янтарос) и контрольной групп во всех исследуемых органах, а именно: в печени на 23,4 и 13,8%, в почках на 28,8 и 25%, в сердце на 68,4 и 33,2%, в мышцах на 36 и 37,2%, в селезенке – на 9,25 и 24,7%, соответственно.

Максимальное содержание меди было отмечено в печени, почках и сердце у всех групп животных, минимальное – в мышцах и селезенке, но при этом у щенков, получавших «Янтарос плюс», показатели были намного выше, чем у остальных животных – так, количество меди в печени было выше на 74,3 и 9,8%, в почках в 2,3 и 2,6 раза, соответственно первой и контрольной группам.

Содержание цинка было наиболее высоким в печени, почках и селезенке, причем количество его в почках зверей первой (Янтарос) и второй (Янтарос плюс) опытных групп было в 3,0 и 2,93 раза выше, чем у контрольной группы. Кроме этого, концентрация цинка в селезенке зверей второй группы была на 26% выше значений контрольной группы.

Высокий уровень марганца отмечался в селезенке, почках и сердце у животных всех трех групп.

Наивысшее количество магния наблюдалось в сердце, селезенке и почках животных опытных групп. А в селезенке был существенно ниже такового у контрольных животных: в первой группе (Янтарос) – в 9,3 раза, во второй группе (Янтарос плюс) – в 8,7 раза. В сердце опытных животных количество магния было выше, чем у контрольной группы на 92% и 42,5% соответственно в первой и второй группах.

При исследовании внутренних органов норок на содержание тяжелых металлов – свинца, кобальта и никеля, было установлено, что в селезенке животных контрольной группы количество свинца в среднем в два раза превышает таковое количество у опытных норок. Наибольшее количество кобальта было отмечено в мышцах контрольных животных, в 7 и 3,8 раза превышающее уровень кобальта в мышцах первой и второй опытных групп соответственно. Более высокое содержание никеля было в печени и селезенке контрольных животных, в то время как у опытных норок первой группы (Янтарос) накопление никеля было отмечено в мышцах – в 2,7 раза выше, чем во второй группе и в 2,3 раза выше, чем в контрольной группе.

Таким образом, введение препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» в организм мехового молодняка норок оказывает благоприятное влияние на содержание и распределение микроэлементов в органах и тканях щенков.

3.4 Влияние препаратов «Янтарная кислота», «Янтарос» и «Янтарос плюс» на воспроизводительные функции норок

Для решения поставленной задачи по методу аналогов было сформировано четыре группы самок стандартного окраса: по 50 норок в экспериментальных группах и 75 животных в контрольной группе. Нагрузка на одного самца – 5 самок норок. Животные первой группы получали с кормом препарат «Янтарная кислота», второй группы – препарат «Янтарос», третьей – препарат «Янтарос плюс», все препараты вводили из расчета 2 мг/кг массы тела. Препараты задавали с кормом в период гона, беременности и лактации до момента отсадки щенков. Четвертая группа животных была контрольной и получала корма, определенные общехозяйственным рационом. Все животные охотно принимали весь объем предоставленного им корма.

Установлено, что препараты в составе корма в примененных дозах не извращает вкусовые качества корма, не оказывает отрицательного влияния на ход гона и благоприятно действует на течение беременности и лактации самок, повышает сохранность их потомства.

Во второй группе, получавшей «Янтарос», получен 451 щенок. На основную самку приходится только 5,6 щенка, а сохранность щенков на 2,6% выше, чем в контрольной группе.

Применение препарата «Янтарная кислота» повысило количество щенков на основную самку на 27,6% по сравнению с контрольной группой.

В третьей группе, получавшей препарат «Янтарос плюс», сохранность молодняка на 3,7% выше контрольной группы, а выход щенков на одну самку выше на 1,4.

Плодовитость самок норок, получавших в период воспроизводства препараты «Янтарная кислота», «Янтарос» и «Янтарос плюс» составила соответственно 6,6; 5,6 и 6,44 щенка, в то время как в контрольной группе зверей – 5,05.

Также в период проведения опыта в экспериментальных группах наблюдалось низкая заболеваемость норок алеутской болезнью (всего 30%), в то время как в общем стаде доля больных зверей доходила до 80%.

    1. Влияние препаратов на массу тела норок и на энергию роста мехового молодняка норок

Для исследования влияния препаратов Янтарная кислота, Янтарос и Янтарос плюс на массу тела взрослых норок по принципу аналогов было сформировано четыре группы по 5 животных в каждой (1 самец и 4 самки), которым с кормом задавали препараты из расчета 2 мг/кг массы тела в течение 90 дней.

Взвешивания производились на 60-й день и повторно на 80-й и 90-й дни после начала подкормки.

Исследуемые препараты оказывали положительное влияние на прирост массы тела опытных норок. На конец опыта живая масса норок, получавших препараты янтарную кислоту, «Янтарос» и «Янтарос плюс» в среднем по группе была выше, чем у контрольных на 7,1; 20,4 и 27,5% соответственно.

С целью изучения влияния препаратов на энергию роста и морфологический состав крови норок было сформировано четыре группы молодняка норок в возрасте от 5 до 7 месяцев, по пять животных в каждой (1 самец и 4 самки в каждой группе). Исследования проводились в течение 90 дней. Животные первой группы получали ежедневно с кормом янтарную кислоту в дозе 10 мг на зверя, второй группы – препарат «Янтарос» из расчета 50 мг на зверя, третьей группы – препарат «Янтарос плюс» 25 мг на зверя. Щенки четвертой группы являлись контрольными и получали только корма, указанные в общехозяйственном рационе, сбалансированном по питательным веществам.

При клиническом исследовании, проведенном до начала эксперимента, у всех животных было установлено некоторое снижение пищевой возбудимости, выражающееся плохой поедаемостью корма.

Анализ фоновых гематологических показателей показал, что у них наблюдается незначительная эритропения, уровень гемоглобина находился в пределах нижних границ физиологической нормы.

Через 30 дней после начала подкормки препаратами, количество эритроцитов в крови зверей опытных групп увеличилось соответственно на 7,8; 17,7 и 16,8% по сравнению с исходными данными, достигнув тем самым оптимального уровня физиологической нормы, и оставалось стабильным до конца эксперимента.

У щенков контрольной группы на протяжении 90 дней отмечали прогрессирующую эритропению, к концу опыта уровень эритроцитов в крови составил лишь 69% от фонового показателя.

При анализе динамики уровня гемоглобина в крови молодняка замечена тенденция к его повышению в течение всего периода во всех трех опытных группах. На конец опыта данный показатель в первой группе (янтарная кислота) был выше, чем у контрольных норок, на 34,7 %; во второй группе (Янтарос) –  на 44,9 %, а в третьей группе (Янтарос плюс) – на 49,6 %.

При исследовании клинического состояния контрольных животных наблюдалась бледность видимых слизистых оболочек и подушечек лап, взъерошенность и сваливание меха. Уровень гемоглобина оставался в пределах нижней границы физиологической нормы, а к концу эксперимента снизился до 147,0 г/л. В сочетании с прогрессирующей эритропенией это свидетельствует о развитии анемии.

Установлено положительное влияние препаратов на прирост массы тела норок. Прирост массы тела щенков за период опыта составил: в первой группе 29,6 %, во второй 43,8 % и в третьей 56,3 %, в то время как у интактных норок прирост составил 28%.  На конец опыта живая масса молодняка норок, получавших с кормом янтарную кислоту, в среднем по группе была выше, чем у контрольных зверей, на 7,1%, у норок, получавших «Янтарос» – на 15,1 %, а у норок, получавших «Янтарос плюс» – на 26,7 %.

Таким образом янтарная кислота, препараты на ее основе – «Янтарос» и «Янтарос плюс» оказали положительное влияние на гемопоэз, повышая содержание в крови эритроцитов и уровень гемоглобина, а также стимулирующе действовали на энергию роста молодняка норок и не оказывали отрицательного воздействия на общее состояние и массу тела взрослых животных.

    1. Действие препаратов «Янтарная кислота» и «Янтарос плюс» на моторику изолированного отрезка кишечника

Для проведения опыта были использованы кролики. Исследование было проведено по методу Магнуса. Изолированные отрезки тонкого кишечника кроликов помещали в теплый раствор Рингера-Локка, один конец прикрепляли к стеклянному крючку, второй – к рычагу Энгельмана, сокращения мышц кишечника фиксировали на ленте кимографа. Применялись растворы препаратов «Янтарная кислота» и «Янтарос плюс» в концентрации от 1:1500 до 1:2000000. В качестве средства, влияющего на М-холинореактивные структуры кишечника был использован ареколина гидробромид.

Установлено, что янтарная кислота и Янтарос плюс в использованных концентрациях оказывают тормозящее влияние на частоту и амплитуду сокращений кишечника. Высокие концентрации препаратов проявляют более выраженное угнетающее действие. Растворы препаратов в разведении 1:2000000 уменьшают амплитуду сокращений кишечника в 2 раза, а частоту на 25%, а в концентрации 1:1500 вызывают резкое расслабление моторики кишечника с незначительной амплитудой и редкой частотой. При этом отмечено, что действие раствора препарата «Янтарос плюс» выражено ярче.

Отрезок кишечника, угнетенный янтарной кислотой и Янтарос плюс, сохраняет чувствительность к ареколина гидробромиду. Последний вызывает резкое спазматическое сокращение отрезка кишечника, не расслабляющееся в течение длительного времени. Отмечено, что применением ареколина гидробромида не удается в полной мере восстановить амплитуду и частоту сокращений отрезка кишечника, угнетенного янтарной кислотой и препаратом на ее основе «Янтарос плюс».

При применении препарата хлорида бария, как средства, возбуждающего непосредственно мускулатуру кишечника, были вызваны ритмические сокращения кишечника, подвергнутого воздействию изучаемых соединений.

Все это позволяет прийти к выводу, что «Янтарная кислота» и «Янтарос плюс» в указанных концентрациях не оказывают неблагоприятного и повреждающего воздействия на мускулатуру и рецепторы кишечника животных.

4.7 Влияние препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» на качество шкурок норок

Опыты проводились на базе зверосовхоза «Тойминский» на 150 норках пятимесячного возраста обоего пола, разделенных на три группы по 50 голов по методу аналогов. Все животные содержались в одинаковых условиях и получали сбалансированный рацион. Животным первой группы с кормом задавали препарат «Янтарос плюс» в дозе 2 мг/кг массы тела ежедневно в течение 2 месяцев, а норкам второй группы – «Янтарос» также в дозе 2 мг/кг в день в течение 2 месяцев. По окончании опыта животных умерщвляли внутримышечной инъекцией 2% раствора дитилина в дозе 1 мл. После съемки шкурки подвергали обезжириванию, правке, сушке, откатке и сортировке по дефектам. Оценку шкурок осуществляли комиссионно с участием главного ветврача, главного зоотехника, заведующего забойным цехом и других специалистов хозяйства. В конце опыта был составлен комиссионный акт.

Рис 1. Шкурки норок второй группы (Янтарос плюс) – слева и  контрольной группы справа

Рис.2. Шкурки норок первой группы (Янтарос) слева и контрольной группы справа.

Норки охотно принимали корм с добавлением препаратов. По реакции на окружающую среду, обслуживающий персонал и другие раздражители животные не отличались от контрольных.

Наружным осмотром установлено, что шкурки животных, получавших Янтарос и Янтарос плюс, были несколько крупнее, их мех был более блестящим по сравнению с контролем (рис. 1, 2).

Количество шкурок, отвечающих требованиям ГОСТ, в первой группе (Янтарос плюс) было 86%, во второй группе (Янтарос) – 80%, в контрольной группе только – 74%. Поступление в организм норок «Янтарос плюс» полностью предотвратило появление на шкурках больших дефектов и свело к минимуму количество шкурок со средним дефектом (2%), во второй группе (Янтарос) количество шкурок с большим и средним дефектом составило 4 и 2% соответственно, в контрольной группе животных шкурки со средним дефектом составили 6%, а с большим дефектом 4%.

Анализ шкурок по размерам показал, что общая площадь шкурок животных первой группы была на 16%, а второй группы на 13,6% больше, чем в контрольной группе. Шкурки первой группы относились к 1-5 подразмерам, тогда как шкурки второй группы – к 1-6, а контрольной группы – к 3-9 подразмерам, то есть в первой группе было 34% шкурок, относящихся к 1 и 2 подразмерам и во второй группе – 22%, в то время как в контрольной группе шкурок такого размера не наблюдалось. В контрольной группе 38% шкурок норок были отнесены к 7-9 подразмерам, которые оцениваются комиссией как шкурки гипотрофиков.

Следовательно, введение в организм молодняка препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» положительно влияет на товарное качество и размер шкурок норок.

ВЫВОДЫ

1. Среднесмертельная доза «Янтарос» при внутрижелудочном введении для белых беспородных крыс составляет 9333,3±1554,3 мг/кг, «Янтарос плюс» – 10166,67±1276,9 мг/кг. Коэффициент кумуляции соответственно равен 5,79 и 6,74; оба соединения относятся к 4 классу опасности – малотоксичным веществам.

2. Длительное (в течение 30 дней) поступление янтарной кислоты, Янтароса и Янтароса плюс в организм норок в дозе 2 мг/кг благотворно влияет на морфологический состав крови: общее число эритроцитов возросло на 3,96-6,8%; лейкоцитов на 6,4-9,2%; содержание гемоглобина от 15 до 23,2%. Наивысшие результаты получены при применении «Янтарос плюс».

3. Янтарная кислота, «Янтарос» и «Янтарос плюс» в дозах 2 мг/кг массы тела при ежедневном длительном поступлении в организм кормящих самок обеспечивает возрастание общего числа эритроцитов и гемоглобина в крови соответственно от 5,8 и 14% (янтарная кислота) до 7,6 и 19,5% (Янтарос плюс), при возрастании содержания лейкоцитов от 9,3 до 10,2% без существенных сдвигов в лейкоформуле.

4. «Янтарос» и «Янтарос плюс» у беременных норок оказывают благоприятное влияние на содержание и распределение микроэлементов в органах и тканях щенков норок. Содержание железа в тканях зверей, получавших «Янтарос плюс», было выше, чем у зверей, получавших «Янтарос» и контрольных зверей: в печени на 23,4 и 13,8%; в почках на 28,8 и 25%; в селезенке на 9,25 и 24,7% соответственно.

5. «Янтарос» и «Янтарос плюс» в дозах 2 мг/кг самок норок в период гона, беременности и лактации положительно влияет на их плодовитость: выход молодняка увеличивается в среднем на 0,71 и 1,57 щенка; сохранность щенков к моменту отъема повышается на 2,65% и 3,7%; плодовитость самок составляет 4,1 и 5,56 щенка по сравнению с контролем – 3,7 щенка от одной самки.

6. Использование янтарной кислоты и препаратов «Янтарос» и «Янтарос плюс» в качестве подкормки самок норок увеличивает прирост массы их тела соответственно на 7,1; 20,4 и 27,5% по сравнению с контрольными животными.

7. Введение с кормом меховому молодняку норок янтарной кислоты в дозе 10 мг на зверя, «Янтарос» 50 мг на зверя и «Янтарос плюс» 25 мг на животное в течение 90 дней увеличивает количество эритроцитов в крови на 7,8; 17,7 и 16,8%; уровень гемоглобина возрастает на 4,2; 21,7 и 20,2% соответственно; прирост массы тела щенков составил 29,6; 43,8 и 56,3%, значительно повышает размеры шкурок и качество пушнины.

8. «Янтарная кислота» и «Янтарос плюс» в разведении от 1:1500 до 1:2000000 не оказывают неблагоприятного и повреждающего воздействия на рецепторы и мускулатуру кишечника животных.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Янтарная кислота, «Янтарос» и «Янтарос плюс» рекомендуются в звероводческих хозяйствах с целью нормализации уровня форменных элементов в крови, соотношения микро- и макроэлементов в тканях и органах, а также с целью повышения воспроизводительной функции самок норок.

2. «Янтарос» и «Янтарос плюс» рекомендуется вводить в организм молодняка норок с момента отъема от матерей до убоя, что обеспечивает получение высококачественной пушнины.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

  1. Шабиев, Л.Ф. Влияние янтарной кислоты и других препаратов на ее основе на воспроизводительные функции самок норок / Л.Ф. Шабиев, Т. В. Гарипов, К.Х. Папуниди // Материалы республиканской научн.-производ. конф. по актуальным проблемам ветеринарии и животноводства. – Казань, 1997. – С.154.
  2. Шабиев, Л.Ф. Влияние производных янтарной кислоты на общий белок и минеральный состав периферической крови / Л.Ф. Шабиев // Материалы международной конф., посвящ. 125-летию Казанской гос. акад. вет. медицины (часть 2). – Казань, 1998. – С. 172.
  3. Гарипов, Т.В. Действие янтарной кислоты и янтарос плюс на моторику кишечника. / Т.В. Гарипов, Л.Ф. Шабиев // Матер. Республ. научно-производств. конф. «Актуальные проблемы животноводства и ветеринарии». – Казань, 1999. – С.200.
  4. Шабиев, Л.Ф., Действие янтарной кислоты и других соединений на организм норок при длительном применении / Л.Ф. Шабиев, Т.В. Гарипов, К.Х. Папуниди, В.В. Титов //Материалы научно- произод.конф.посв.100- летию чл.-корр. ВАСХНИЛ В.Г.Котова « Экологические аспекты эпизоот. и патологии животных» – Воронеж, 1999. – С. 285-286.
  5. Шабиев, Л.Ф. Влияние производных янтарной кислоты на организм животных / Л.Ф. Шабиев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана. Казань. 2006. Т.185. С.362-367.
  1. .Шабиев, Л.Ф. Влияние  препаратов «Янтарная кислота», «Янтарос» и «Янтарос плюс» на морфологический состав крови норок / Л.Ф. Шабиев, Т.В. Гарипов, А.С. Гасанов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана Казань, 2012. Т. 209. С. 349- 352.






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.