WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


 

На правах рукописи

ХАРЛАМОВ ВЛАДИМИР КОНСТАНТИНОВИЧ

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ

ПРИ ПАТОЛОГИИ ПЕЧЕНИ У НОРОК И ИХ КОРРЕКЦИЯ С ПОМОЩЬЮ

ЭНТЕРОСОРБЕНТА

06.02.01 Диагностика болезней и терапия животных, патология,

онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Москва, 2012 г.

Работа выполнена на кафедре «Незаразные болезни»  ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств».

Научный руководитель: Уша Борис Вениаминович,

  академик РАСХН,

  доктор ветеринарных наук, профессор,

  (ФГБОУ ВПО «Московский государственный

  университет пищевых производств»)

 

Официальные

оппоненты: Брагин Геннадий Иванович,

доктор ветеринарных наук, профессор

  (ФГБОУ ВПО «Московский государственный

  университет пищевых производств») 

 

Геллер Вера Иосифовна,

кандидат ветеринарных наук,

ведущий научный сотрудник

  (ГНУ «Научно-исследовательский  институт

пушного звероводства и кролиководства

им. В.А. Афанасьева»  Россельхозакадемии

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Российский университет

  дружбы народов»

Защита диссертации состоится  «_21__»_декабря____2012 г. в __12____часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.148.09 при ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств» по адресу: 109316, г. Москва, ул. Талалихина, д. 33, в конференц-зале.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств».

Автореферат разослан «___»____________2012 г.

Автореферат размещен на сайте Министерства образования и науки РФ http://vak.ed.ru/  «___»____________2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор ветеринарных наук, профессор  Андрианова Т.Г. 

ВВЕДЕНИЕ



Актуальность работы. Большое внимание в Российской Федерации  уделяется развитию пушного звероводства, в том числе и разведению норок. Численность норки в Российской Федерации составляет приблизительно 90 % от общей численности пушных зверей. Норки относятся к плотоядным животным (хищникам), в рационе которых преобладают мясные и рыбные корма. 

Незаразные болезни являются наиболее острой проблемой пушного звероводства. К числу этих болезней относятся болезни печени, в том числе гепатоз, который, являясь полиэтиологичным заболеванием, наиболее часто регистрируется у норок и является одной из самых распространенных патологий в звероводстве всех стран. В России до 90 % падежа зверей происходит от болезни печени (Квартникова Е.Г., 2001; Шкуратова И.А. и др., 2005).

В настоящее время проблема гепатоза у норок является весьма актуальной, так как в последние годы это заболевание получило широкое распространение в звероводческих хозяйствах нашей страны и за рубежом. По данным  многих авторов,  заболевания печени и желудочно-кишечного тракта у норок в хозяйствах регистрируют в среднем в 38,4-47,3 % и 15,9-29,1 % случаев соответственно. Высокая заболеваемость норок негативно отражается на продуктивности, качестве меха (73,5% выбракованных шкурок), жизнеспособности потомства, что выражается в большом отходе щенков – 21,8-31,1 % и взрослых самок 15,9-4-7,3 % от общего убоя.  Поэтому изыскание новых путей нормализации обмена веществ пушных зверей, особенно  в условиях недостаточности и несбалансированности кормовой базы, является актуальным (Ежков В.О., 2000; Илюха В.А., 2001; Берестов В.А., 2002; Дашукаева К.Т., Зибров, 2003; Слугин В.С., 2004).

С целью нормализации обмена веществ у пушных зверей применяются различные препараты, однако проблема еще полностью не решена. В медицине широко и успешно применяется метод детоксикации организма с помощью энтеросорбентов, который дает положительный эффект при токсикоинфекциях и кишечных инфекциях, хронических образованиях, аллергических заболеваниях, печеночной и почечной недостаточности. В настоящее время положительные результаты применения энтеросорбентов для лечения животных получены также и в ветеринарной практике (Бгатов В.И., 1997; Лудынов Ц., Старовойтова Т., 1997; Бабкина Т.Н., Таран Г.Г., 2002; Гайдулина М.К.; 2004, Равилов А.З., 2010 и др.).

В ветеринарии энтеросоробенты широко применяют при заболеваниях органов пищеварения  молодняка (Даминов В.В., 2002). Однако их применение  и влияние на морфофункциональные показатели организма норок при гепатозе  норок изучены недостаточно, что и определило цель нашей работы.

Цель и задачи исследования. Цель исследования – изыскание эффективного средства коррекции морфофункциональных показателей обмена веществ у норок при гепатозе. Для достижения поставленной цели были решены следующие задачи:

- изучить распространение жирового гепатоза у норок в зависимости от возраста животных;

- изучить характер морфофункциональных изменений в крови больных гепатозом норок в зависимости от возраста;

- изучить характер морфофункциональных изменений к крови норок после применения энтеросорбентов;

- изучить возможность применения энтеросорбентов для коррекции гепатоза  норок.

Научная новизна. Предложен новый метод профилактики  гепатоза норок на основе применения энтеросорбентов.  В условиях зверохозяйства «Мелковский» испытан препарат Полифепан для нормализации обмена веществ и профилактики гепатоза  молодняка норок. Впервые на основании комплексных исследований крови определена оптимальная доза применения энтеросорбента Полифепан для норок. Экспериментально доказана способность препарата Полифепан регулировать метоболизм и нормализовать морфологические показатели крови как у клинически здоровых, так и у больных гепатозом норок.

Практическая значимость работы. Доказана эффективность применения энтеросорбента  Полифепана  с терапевтической и профилактической целью у клинически здоровых и больных гепатозом норок.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Степень распространения гепатоза норок во взаимосвязи с типом кормления на примере ОАО «Зверохозяйство Мелковское» Тверской области.

2. Морфо-биохимический статус клинически здоровых  и больных гепатозом норок различного возраста. 

3. Влияние энтеросорбента Полифепана на морфологические, биохимические показатели  крови и  морфологические показатели печени при гепатозе норок.

4. Определение оптимальной дозы энтеросорбента Полифепана  для норок.

5. Влияние применения энтеросорбента Полифепана на сохранность молодняка норок.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены: на Ученых советах Института ветеринарной экспертизы, санитарии и экологии ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств»; Международной научно-практической конференции «Повышение интенсивности и конкурентоспособности отраслей животноводства» (Минск, 2011);  Всероссийской научно-практической конференции ГНУ СКЗНИВИ РАСХН «Научное обеспечение инновационного развития отечественного животноводства» (Новочеркасск, 2011).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 4 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 129 страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, предложения для производства, список использованной литературы. Список литературы включает 168 источника, в том числе 43 иностранных, работа иллюстрирована 34 таблицами и 37 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на кафедре  «Незаразные болезни» ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств».

Экспериментальная часть выполнена в 2010-2012 гг. в ОАО «Зверохозяйство Мелковское» и в лабораториях ГНУ НИИПЗК Россельхозакадемии на норках «стандартного» коричневого окраса как клинически здоровых, так и с признаками гепатоза.

Распространенность гепатоза в зверохозяйстве в сравнении с другими незаразными болезнями норок изучали по ветеринарной документации зверохозяйства «Мелковское» за 2009-2011 гг. и результатам собственных исследований.

Исследования проводили на самках норок в возрасте 1,5-2 года, массой  1,8-2,2  кг  и щенков норок в возрасте 8-10 месяцев, массой 0,800- 1,00 кг. Все звери находились в одинаковых условиях содержания и кормления, подвергались одинаковым ветеринарным обработкам, принятым в хозяйстве. Инфекционные и инвазионные болезни были исключены.

В первой серии опытов проводили клиническое обследование норок по общепринятым методикам (Берестов В.А., 2003). Изучали гематологические, биохимические и ферментативные показатели крови здоровых и больных гепатозом щенков и взрослых норок. Больных норок отбирали в опытные группы по клиническим признакам и формировали по принципам аналогов (возрасту, массе). Было задействовано 2 группы больных гепатозом и 2 группы здоровых норок разного возраста по 40 голов в каждой. Пробы крови брали утром до кормления животных. В крови определяли количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина, скорость оседания эритроцитов по общепринятым методикам. Определение биохимических и ферментативных показателей проводили на полуавтоматическом биохимическом анализаторе BioChem SA (USA).

Морфологию печени больных гепатозом норок изучали после убоя. Проводили патологоанатомический осмотр органов и тканей. Печень отбирали сразу после убоя, пробы фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина и заливали в парафин по общепринятой методике. Срезы готовили на санном микроскопе МС-2 толщиной 5-=10 мкм. Окраску проводили по общепринятой методике гематоксилином-эозином. Из полученных образцов тканей печени дополнительно готовили срезы и окрашивали их Суданом черным III «B» для выявления липидов.

Во второй серии опытов изучали влияние энтеросорбента Полипефан на морфофункциональные показатели крови и печени норок. Содержание и кормление норок соответствовало зоотехническим нормам и возрастным особенностям.

Применяли следующую схему введения препарата. Энтеросорбент вводили животным с кормом, двукратно в течение  10 дней с интервалом 7 дней. Были сформированы 2 опытные группы щенков и взрослых норок, больных гепатозом,  по 10 голов в каждой. Препарат задавали в дозах 2,0; 3,0 и 4,0 г/кг живой массы для щенков и 4,0; 6,0 и 8,0 г/кг живой массы для взрослых норок. По результатам исследований отбирали оптимальную дозу для дальнейших исследований.

Кровь для исследований брали дважды: до и после применения препарата. Взятие материала проводили с соблюдением правил асептики и антисептики по общепринятой методике (БерестовВ.А., 1981). В цельной крови определяли количество эритроцитов и лейкоцитов, содержание гемоглобина и скорость оседания эритроцитов (СОЭ). В сыворотке крови определяли содержание общего белка, глюкозы, билирубина, холестерина и мочевины, активность аминотрансфераз (АсАТ, АлАТ), щелочной фосфатазы и лактатдегидрогеназы. Контролем служили интактные животные, не получавшие препарат.

Морфофункциональные изменения в печени после применения препарата оценивали по гистологическим изменениям органа.

В третьей серии опытов изучали  возможность использования  энтеросорбента  для профилактики гепатоза пушного молодняка норок. Были сформированы 2 опытные группы (самцы и самки) по 50 голов в каждой.  Препарат задавали в дозе 3,0 мг/кг живой массы двукратно в течение  10 дней с интервалом 7 дней.  Оценивали прирост живой массы. Во время планового убоя норок изучали  патологоморфологические изменения печени.

В четвертой серии опытов изучали влияние энтеросорбента Полисорб ВП на организм норок, больных гепатозом,  по вышеприведенной схеме. Полисорб задавали в дозе 0,15 г/кг живой массы курсом по 10 дней, двукратно, с интервалом 7 дней.

Статистическая обработка результатов исследования проведена общепринятыми методами.  Результаты исследований обрабатывали на IBM PC с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel и Winstat 577, коэффициента достоверности Р с учетом критерия Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Краткая характеристика ОАО «Зверохозяйство Мелковское»

ОАО «Зверохозяйство Мелковское» Тверской области Конаковского района – предприятие полного технологического цикла. Здесь выращивают норку и песца, осуществляют первичную обработку пушнины, а затем выделывают мех на фабриках. «Мелковское» является одним из ведущих звероводческих хозяйств Тверской области и  имеет статус племенного хозяйства.  Среднегодовой объем производства – более 65 тыс. шкур норки пород СТК, пастель, сапфир, белая хедлунд, скан-блэк и около 2,5 тысяч шкур песца вуалевого и серебристого.





Хозяйство благополучно по инфекционным и паразитарным болезням. Норки содержатся в 5- или 7-местных шедах.

Основными видами кормов для норки является  рыба и продукты ее переработки,  мясные субпродукты.  Хозяйство располагает холодильниками, что позволяет принимать крупными партиями кормовую рыбу, замороженные мясные субпродукты в сезон их поступления и иметь постоянный резерв этих кормов.

В зависимости от их удельного веса в рационе преобладают три типа кормления: рыбный, мясной и промежуточный, при котором удельный вес рыбы и мясных субпродуктов примерно одинаковый.

Как показали результаты исследования,  в хозяйстве в 2009-2010 гг. преобладал рыбный тип кормления, при котором удельный вес рыбных продуктов в рационе норок составил  51,01±1,95  и 50,30±2,15 % соответственно. В  2011 г. удельный вес рыбных продуктов в рационе составил всего 33,01±1,37 %.  Удельный вес мясных субпродуктов в рационе норок  колебался в 2009-2010 гг.  в пределах 30,21±1,15  %, в 2011–достигал 39,41±1,67 %.

Высокий удельный вес рыбных продуктов в рационе норок, в основном голов трески,  приводит к нарушению обмена веществ и изменению функционального состояния печени, что способствует повышению  количества случаев заболеваний желудочно-кишечного тракта, в том числе и гепатозом.

Анализ ветеринарной отчетности позволил установить, что в 2009-2011 гг. в хозяйстве у норок преобладали заболевания органов пищеварения незаразной этиологии (36,5 и 35,1 % от общего числа заболеваний), а в 2011 - отмечали снижение уровня заболеваний до 27,7 %, при этом уровень гепатопатологий оставался  примерно на одном уровне – 20,5; 19,3 и 18,5 %.

Изучение распространения гепатоза норок в хозяйстве в возрастном

аспекте

Проведенное в эти сроки обследование 400 голов  норок в возрасте 1,8-2,3 года показало, что у 34,25 %  (137 голов) выявлены клинические признаки гепатоза. Отмечали угнетение, малоподвижность, отсутствие аппетита, потерю в весе, иногда истощение норок, диарею. Волосяной покров на брюшке, в области ануса и промежности был влажным и «свалявшимся». Видимые слизистые оболочки  - желтушные.

При патологоанатомическом вскрытии трупов отмечали вздутие живота, асцит. Сердце округло-овальной формы, наполнено кровью, миокард дряблый, цвета вареного мяса. На слизистой желудка и кишечника наличие густой слизи. Печень увеличена в размере, дряблой консистенции, легко рвется, рисунок печеночных долек на разрезе сглажен,  цвет  от темно-вишневого до охряно-желтого.  Желчный пузырь переполнен желчью темно-зеленого цвета. Селезенка увеличена в размере, темно-вишневого цвета, почки увеличены, бледно-серого цвета.

При гистологическом исследовании срезов печени наблюдали жировую дистрофию гепатоцитов, с наличием мелких, чаще крупных капель жира, очаговое нарушение балочного строения органа. В отдельных участках отмечали дистонию синусоидальных капилляров с явлением агрегации эритроцитов. Междольковая соединительная ткань отечна, содержание лимфодиогистоцитарных клеток в ней незначительно. Выявляли гепатоциты перстневидной формы в результате смещения ядра клетки к периферии. 

При клиническом обследовании 380 голов щенков норок в возрасте  8-10 месяцев у  67 голов (17,63 %) были выявлены признаки заболевания желудочно-кишечного тракта. Отмечали  угнетение, кратковременные эпилептические припадки, жажду.

У 13 голов (3,42 %) отмечали диспептические расстройства, признаки общей интоксикации. В брюшной полости наблюдали скопление желтоватой прозрачной жидкости. Слизистая оболочка желудка и кишечника отечна, гиперемирована, с полосчатыми и мелкоточечными кровоизлияниями.  Печень при пальпации несколько увеличена, уплотненная, болезненна, что характеризует острую форму гепатоза.  Селезенка увеличена  в размере, полнокровна, темного цвета. Почки увеличены в объеме, упругой консистенции, граница коркового и мозгового вещества на разрезе сглажена, мозговой слой темно-красного цвета. Легкие розового цвета, тестообразной консистенции, на разрезе бронхов выделяется пенистая жидкость. Температура, пульс, частота дыхания в пределах физиологической нормы. 

При микроскопии гистологических препаратов печени щенков норок выявляли  неравномерно увеличенные в объеме гепатоциты, ядра которых неправильной формы, уменьшены в объеме. Балочная структура слегка различима, что соответствует мелкокапельной жировой дистрофии. 

Кроме того, отмечали явления острого катарального воспаления тонкого отдела кишечника, застойную гиперемию сосудов слизистой оболочки тонкого отдела кишечника.

Таким образом, в результате наших исследований установлено, что в зверохозяйстве «Мелковское» гепатоз регистрируется у взрослых норок в пределах 34,25 % , и,  как правило, в хронической форме,  у щенков норок – в пределах 17,63 %, при этом в 3,42 %  у них  отмечали гепатоз в острой форме.

Гематологические и биохимические показатели крови норок

Основным индикатором метаболизма в организме животных, является кровь, поэтому гематологические и биохимические показатели крови позволяют выявлять скрыто протекающие патологические процессы (Громыко Е.В.,  2005). Кроме того, исследование биохимических показателей крови является неотъемлемой частью мониторинга заболеваний желудочно-кишечного тракта, с помощью которого можно оценить обмен веществ в организме и состояние внутренних органов животных (Уша Б.В., 2003 и др.).

Гематологическое исследование крови здоровых норок в возрасте  1,5-2,0 года и щенков в возрасте 8-10 месяцев позволило установить, что количество эритроцитов и лейкоцитов сохранялось в пределах физиологической нормы для данного вида и возраста животных. При этом  в лейкограмме взрослых норок отмечали эозинофилию  с повышенным количеством эозинофилов до 5,1-5,7 %, количество лимфоцитов достигало верхних границ нормы, а нейтрофилов – нижних границ нормы, что свидетельствует о низком защитном статусе организма.

Показатели белкового  и углеводного обмена у норок различных возрастных групп были ниже физиологической нормы для данного вида и возраста животных, при этом содержание глюкозы в сыворотке крови взрослых норок было ниже, чем у щенков. Снижение уровня общего белка происходит, как правило, за счет снижения альбуминов, выполняющих, помимо различных функций, и роль белкового дезинтоксикатора.

Уровень холестерина у взрослых самок и щенков норок  был выше верхней границы физиологической нормы в среднем на 16,66 и 8,54 % соответственно, а концентрация мочевины была ниже нормативной границы у взрослых норок на 17,70 %, а у щенков – на 9,26 %.

В доступной нам научной литературе установлено, что  биохимические показатели крови норок имеют значительную вариабельность, что связано с условиями  их содержания, сезонностью и разнообразием методик исследований, поэтому мы считаем, что более важным функциональным показателем состояния печени является уровень ферментов в сыворотке крови. 

Активность ферментов сыворотки крови норок – щелочной фосфатазы (ЩФ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), аланинаминотрансферазы (АлАТ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) – находилась в пределах физиологической нормы. Коэффициент де Ритиса  (АсАТ/АлАТ) составил 2,23±0,04 для щенков норок и 2,30±0,07 - для взрослых норок.

Проведенные исследования показали, что у здоровых животных имеются значительные колебания гематологических и биохимических показателей крови, однако показатели ферментного обмена свидетельствуют о незначительных нарушениях обмена веществ у норок.

Гематологические показатели крови норок разного возраста при гепатозе представлены в табл. 1.

Таблица 1 Гематологические показатели крови норок больных гепатозом

Группа

животных

n

Эритроциты,

1012/л

Гемоглобин,

г/л

Лейкоциты,

109/л

СОЭ, 

мм/час

Щенки в возрасте 8-10 месяцев

Больные

40

8,01±0,10

145,07±4,62

9,25±0,13

3,29±1,0

Здоровые

40

7,98±0,09

157,39±5,83

8,34±0,24

3,08±0,12

Взрослые норки (самки) в возрасте 1,5-2,0 года

Больные

40

7,80±0,08

161,02±3,21

9,21±0,06

3,24±0,05

Здоровые

40

7,90±0,02

169,26±7,18

7,85±0,35

3,04±0,13

Количество эритроцитов и лейкоцитов в крови щенков норок при гепатозе сохранялось в пределах нормы, однако уровень лейкоцитов в крови щенков при гепатозе был выше на 10,91 % по сравнению со здоровыми животными. У взрослых животных содержание лейкоцитов было выше на  21,14 %. Уровень гемоглобина снижался на 7,82  % у щенков и на 4,86 %  - у взрослых норок. 

Более низкое содержание гемоглобина в крови  норок при гепатозе может быть связано с нарушением синтеза гемоглобина при поражении печени.

В табл. 2 представлены биохимические показатели крови норок, больных гепатозом.

Таблица 2 - Биохимические показатели крови норок, больных гепатозом

Группа

животных

N

Общий белок,  г/л

Глюкоза,

ммоль/л

Билирубин,

Моль/л

Холестерин,

ммоль/л

Мочевина,

ммоль/л

Щенки норок в возрасте 8-10 месяцев

Больные

40

41,25±0,39

2,19±0,08

62,95±0,95

11,02±0,08

12,01±0,08

Здоровые

40

43,68±0,83

2,01±0,75

56,37±1,28

7,61±1,39

9,89±0,08

Взрослые норки (самки) в возрасте 1,5 -2,0 года

Больные

40

41,01±0,90

2,04±0,05

65,42±1,20

10,92±0,20

10,01±0,21

Здоровые

40

44,80±0,90

1,73±0,01

59,91±1,01

8,19±1,20

8,97±0,09

У больных гепатозом норок обнаруживали  гипопротеинемию, билирубинемию, что согласуется с данными В.Н. Байматова (1991), В.А. Берестова (2002), Л.А. Есауловой (2004). Содержание общего белка в сыворотке крови щенков, больных гепатозом,  было ниже на 5,56 %, чем у здоровых, а в сыворотке крови самок – на 8,45 %. Снижение уровня общего белка происходит за счет снижения содержания альбуминов, которые помимо разнообразных функций, играют роль белкового дезинтоксикатора.

У самок норок и щенков содержание глюкозы при гепатозе было  ниже нижней границы физиологической нормы. Снижение уровня глюкозы в крови может быть обусловлено  изменением функционального состояния печени при гепатозе.

Содержание общего билирубина в сыворотке крови взрослых норок было в  2,5 раза выше верхней  границы физиологической нормы и в 1,09 раза выше, чем у здоровых животных.  У щенков  норок содержание общего билирубина было в 2,4 раза выше физиологической нормы, и в 1,1 раза выше, чем у здоровых щенков.  Повышение общего билирубина в сыворотке крови у здоровых норок свидетельствует об изменении функционального состояния печени даже без проявления признаков гепатоза.

Определение активности ферментов в настоящее время все чаще используется для диагностики заболеваний различной этиологии. Являясь белками, локализованными внутри  клеток, в норме в сыворотке и плазме крови они имеют низкую активность или она вообще отсутствует. Патологический процесс сопровождается повышением проницаемости клеточных мембран, в результате чего ферменты поступают в кровь, где резко возрастает их ферментативная активность. Увеличение уровня содержания ферментов  всегда является  показателем патологического процесса в организме (Уша Б.В., 2000; Уиллард М. и соавт., 2004).  В табл. 3 приведены показатели активности ферментов сыворотки крови норок при гепатозе.

Таблица 3 - Показатели ферментов крови больных гепатозом норок

Группа

Животных

n

ЩФ,

нмоль/СхЛ

ЛДГ,

нмоль/СхЛ

АсАТ,

мккал/л

АлАТ,

мккал/л

Щенки норок в возрасте 8-10 месяцев

Больные

40

1628,92±29,74

2010,50±62,01

0,88±0,01

0,60±0,01

Здоровые

1196,0±40,70

2944,45±75,31

0,96±0,19

0,43±0,01

Взрослые норки (самки) в возрасте 1,5 -2,0 года

Больные

40

1680,10±25,41

2027,50±60,01

0,78±0,02

0,56±0,03

Здоровые

1200,09±37,70

2981,30±69,30

0,97±0,02

0,42±0,03

У больных зверей отмечали резкое повышение активности  щелочной фосфатазы, снижение активности АсАт и ЛДГ по сравнению со здоровыми животными, при этом  активность АлАТ была на 39,53 % выше , чем у клинически здоровых норок.  Коэффициент де Ритиса был резко снижен по отношению к физиологической норме и составил для щенков норок 1,46±0,04 и для взрослых самок  1,39±0,01.

Таким образом,  очевидно, что общий сдвиг метаболизма у норок отчетливо проявляется изменениями активности целого ряда ферментов крови и других биохимических компонентов, в частности,  таких  как трансаминазы, щелочная фосфатаза и лактатдегидрогеназа. Выход в кровь индикаторных ферментов печени – трансаминаз – является достаточно специфичным маркером и указывает на  изменения в гепатоцитах (Уша Б.В., 2003).

Проведенные исследования еще раз подтвердили, что при гепатозе наблюдаются выраженные изменения морфологического, биохимического и ферментативного статуса крови, сопровождающиеся гипопротеинемией, гиперхолестеринемией, гипербилирубинемией, снижением активности щелочной фосфатазы, АсАТ и  ЛДГ на фоне низкого коэффициента де Ритиса, что отражается на всех других видах обмена и  согласуется с результатами других авторов.

Изучение влияния препарата Полифепан на гематологические

и биохимические показатели крови норок при гепатозе

Для изучения  влияния  препарата  полифепан на  обмен веществ  норок  нами были сформированы по принципу аналогов  3 опытные группы по 10 голов в каждой из щенков и взрослых самок норок, у которых отмечали  изменения клинического и морфофункционального статуса, характерные для гепатоза. Контролем служили здоровые животные того же возраста, пола  и  массы, не получавшие  Полифепан.

Развитие методов эфферентной терапии, в частности энтеросорбции, и обоснование их применения тесно связаны, прежде всего, с современной концепцией, направленной на общее понимание процессов интоксикации, вытекающей из клинико-лабораторных исследований и клинико-практических наблюдений. Нарушения обмена  веществ  у животных являются одной из причин  возникновения гепатоза, поэтому  при  лечении и профилактики  этого заболевания  основное внимание  следует уделять  снижению  уровня токсинов и стимуляции  процесса оздоровления  путем восстановления основных  функций  печени (Koch Н., 1980).

Полипефан  – энтеросорбент,  получаемый  путем глубокой переработки древесины хвойных пород. Обладает адсорбирующим, детоксилирующим и регенерирующим действием. Улучшает липидный обмен, нормализует содержание билирубина, активность аминотрансфераз  и  другие  биохимические  показатели.

Препарат  щенкам  задавали  в дозе 2, 0; 3,0; 4,0 г/кг живой массы с кормом, двукратно, курсом по 10 дней, с интервалом 7 дней.  Определяли  гематологические, биохимические показатели крови у  норок, а также уровень ферментов в сыворотке крови норок, получавших Полифепан  в различных дозах.

Было установлено, что у щенков  норок, получавших Полифепан, в ходе эксперимента гематологические показатели значительно изменились. Наилучший терапевтический эффект был получен у щенков норок, получивших Полифепан в дозах 3,0 и 4,0 г/кг живой массы.  В конце эксперимента  у щенков норок, получавших препарат в дозе 2,0 г/кг живой массы, количество эритроцитов повысилось на 4,84±0,19; 3,0 и 4,0 г/кг живой массы – на 15,59±0,24  и 17,93±0,56 % соответственно, гемоглобина  - 6,01±0,19; на 16,93±0,46 и -15,71±0,58 % соответственно.  Уровень лейкоцитов в крови щенков норок снизился на 3,87±0,13; 12,17±0,46 и 11,60±0,38 % соответственно. Скорость оседания эритроцитов у щенков норок снизилась на 2,32±0,06; 18,55±0,27 и 17,39±0,65 % соответственно.

Анализ биохимических показателей крови щенков норок, больных гепатозом, получавших Полифепан в различных дозах, позволил установить, что происходит увеличение уровня общего белка, глюкозы и снижение уровня холестерина, билирубина и мочевины. Уровень общего белка в конце эксперимента увеличился в зависимости от дозы препарата, на 4,91±0,15; 3,24±0,12 и 8,09±0,14 % соответственно, уровень глюкозы – 6,40±0,23; 19,77±0,59 и 16,99±0,48 % соответственно. Уровень холестерина снизился соответственно на 9,13±0,36; 9,37±0,35 и 9,28±0,16 %, билирубина – на 5,19±0,19; 5,58±0,17 и 5,72±0,18 %, мочевины – на 1,97±0,08; 5,93±0,15 и 4,94±0,17 % соответственно. Количество холестерина и мочевины достигло границ физиологической нормы для данного вида животных.

Показатели активности ферментов крови щенков норок при применении Полифепана в разных дозах представлены в табл. 4.

Установлено, что содержание АсАТ снизилось в сыворотке крови щенков норок на 8,98±0,19 % при применении препарата в дозе 2,0 г/кг живой массы, при дозе 3,0 г/кг – на 13,04±0,26  и при дозе 4,0 г/кг – на 11,70±0,43 %, АлАТ – на 8,80±0,34; 18,60±0,39 и 16,27±0,15 % соответственно.  Уровень ЩФ снизился на 16,45±0,16 % при дозе 2,0 г/кг живой массы и  на 43,32±0,09 и 43,27±1,19 % при дозе  3,0 и 4,0 г/кг живой массы соответственно.

Таблица  4 - Показатели активности ферментов крови щенков норок при

применении разных доз препарата Полифепана

Дозы препарата, г/кг

АсАТ, мккат/л

АлАТ,  мккат/л

ЩФ,  нмоль/(СхЛ)

ЛДГ,  нмоль/(СхЛ)

до

экспери-мента

после

экспери-мента

до

экспери-мента

после

экспери-мента

до

экспери-мента

после

экспери-мента

до

эксперимента

после

эксперимента

2

0,89±

0,03

0,81±

0,03

0,45±

0,04

0,41±

0,02

1092,44±

83,79

912,68±

73,23

4145,77±

233,85

4168,26±

152,6

3

0,92±

0,03

0,80±

0,02*

0,43±

0,04

0,35±

0,03**

1156,06±52,56

654,85±

43,56***

3568,31±

205,04

4175,76±

132,12**

4

0,94±

0,04

0,83±

0,03

0,43±

0,02

0,36±

0,03*

1080,49±

82,57

612,90±

25,42***

4415,66±302,28

4470,67±181,94

Достоверность разницы по сравнению с началом опыта: *** р<0,001; ** р<0,01;  * р<0,05.

Таким образом, можно отметить, что использование энтеросорбента Полифепана в дозе 3,0-4,0 г/кг живой массы приводит к нормализации гематологических и биохимических показателей крови у щенков норок. У щенков норок нормализовались показатели углеводно-липидного обмена, что указывает на восстановление потенциала печени и подтверждается динамикой белкового обмена.

Препарат  взрослым норкам задавали в дозе 4, 0; 6,0; 8,0 г/кг живой массы,  с кормом, двукратно курсом по 10 дней, с интервалом 7 дней.  Определяли  гематологические, биохимические показатели крови у  норок, а также уровень ферментов в сыворотке крови норок, получавших полифепан в различных дозах.

У взрослых норок гепатоз, как правило, протекает в хронической форме и сопровождается интоксикацией организма, нарушением белкового и липидного обмена, снижением функций печени.

Отмечали  достоверное повышение уровня эритроцитов на 3,60-4,45  %, гемоглобина – на 9,86-8,18 %, общего белка – на 34,54-47,68 %, глюкозы – на 25,60-26,08  % при даче препарата в дозе 6,0 и 8,0 г/кг живой массы на фоне снижения билирубина, холестерина и мочевины. У норок, получавших 4,0 г/кг  Полипефана, изменение показателей было незначительным.  В табл. 5 представлены показатели ферментативной активности самок норок, получавших Полифепан в разных дозах.

Установлено, что при применении энтросорбента в дозах 6,0 и 8,0 г/кг живой массы активность АсАТ  в конце эксперимента снижалась на 18,61 и 20,38 % соответственно,  при дозе 4,0 г/кг живой массы – на 13,18 %. Активность АлАТ  снижалась на 16,98  % при дозе 4,0 г/кг живой массы,  % при дозах 6,0 и 8,0 г/кг живой массы на 23,52 и 24,24 % соответственно. Отмечали снижение уровня ЩФ и ЛДГ  в зависимости от дозы препарата.

Уровень гематологических, биохимических и ферментативных показателей у контрольных  норок  соответствовал физиологической норме для возраста животных и практически не изменялся в период эксперимента.

Таблица 5 - Показатели ферментативной активности самок норок,

получавших  Полифепан в разных дозах

Дозы препарата,

г/кг

АсАТ,  мккат/л

АлАТ,  мккат/л

ЩФ,  нмоль/(СхЛ)

ЛДГ,  нмоль/(СхЛ)

до

экспери-мента

после

экспери-мента

до

экспери-мента

после

экспери-мента

до

экспери-мента

после

эксперимента

до

эксперимента

после

эксперимента

4,0

0,91±

0,04

0,79±

0,64

0,53±

0,04

0,44±

0,05**

1635,88±45,93

1189,96±42,87***

2016,66±68,13

2533,94±75,86***

6,0

1,02±

0,09

0,83±

0,03***

0,51±

0,03

0,39±

0,03*

1611,43±44,30

1081,88±31,80***

2084,13±61,09

2646,37±53,76***

8,0

1,03±

0,06

0,82±

003**

0,50±0,03

0,66±0,03**

1723,95±27,45

1100,90±31,80*

2009,16±108,12

2054,14±54,06

Достоверность разницы показателей приведена в сравнении с началом опыта: *** р<0,001; ** р<0,01;  * р<0,05.

Применение энтеросорбента Полифепан позволяет восстановить нарушения функционального статуса печени при гепатозе. Препарат оказывает положительное влияние на морфологические, биохимические и ферментативные показатели крови и метаболизм норок. При этом следует отметить, что динамика гематологических, биохимических и ферментативных показателей крови взрослых норок аналогична динамике этих  показателей у щенков.

Применение Полифепана на меховом молодняке норок с целью

профилактики гепатоза

С целью профилактики гепатоза алиментарного происхождения у мехового молодняка норок применяли препарат Полифепан в дозе  3,0 мг/кг живой массы по приведенной выше схеме. Были сформированы опытная  и контрольная группы по 25 голов в каждой. 

Установлено, что к концу опыта у самцов и  самок опытных  групп, получавшие Полифепан в дозе 3,0 мг/кг живой массы, прирост массы составил в среднем 989,26±30,11 г  при 752,09±23,49 г в контроле для самцов и 220,0±10,00 г  при 199,70±8,59 г для самок. Результаты исследований представлены в табл. 6 и 7. 

Увеличение живой массы молодняка является положительной динамикой, так как ведет к увеличению размеров конечной продукции – шкурок. Применение Полифепана с целью профилактики гепатоза позволило увеличить живую массу мехового молодняка норок у самцов на 12,0 %, у самок на 13,0 %.

Во время планового убоя провели паталогоанатомическое  и гистологическое исследование печени норок опытной и контрольной групп, что позволило  провести анализ распространения гепатоза и определить степень его выраженности (табл. 8)

Таблица  6 -  Прирост живой массы молодняка самцов норок при

применении Полифепана

Показатель

Контроль

Опыт

n

Живая масса, г

n

живая масса, г

После отсадки

25

1260,34±45,38

25

1250,57±19,80

Перед убоем

25

2012,43±56,20

25

2239,83±48,72

Прирост за опытный период

25

752,09±23,49

25

989,26±30,11

Относительный  к контролю, %

25

100

25

112,0

Таблица 7 - Прирост живой массы молодняка самок норок при

применении Полифепана

Показатель

Контроль

Опыт

n

живая масса

n

живая масса

После отсадки

25

867,56±15,24

25

859,82±9,67

Перед убоем

25

1067,35±20,36

25

1093,35±21,32

Прирост за опытный период

25

199,79±7,89

25

220,10±8,05

Относительный к контролю, %

25

100

25

113,0

Таблица 8 - Проявление гепатоза  при вскрытии мехового молодняка

норок

Исследо-вано, гол.

Группа

Доза полифе-пана, г/кг ж.м.

Жировая дистрофия печени

Умеренная, гол.

%

значительная, гол.

%

Всего

%

50

Опыт

3,0

6

12,0

6

12,0

50

Контроль

-

12

22,0

5

12

17

36,0

Установлено, что у норок, получавших полифепан в дозе 3,0 г/кг живой массы, морфологические изменения в печени, характерные для жирового гепатоза, выявлены у 3 голов или в 6 % случаев, тогда как у контрольных животных  морфологические изменения в печени выявляли в 36 % случаев или у 17 голов. При этом у норок, получавших полифепан, при микроскопии срезов печени выявляли четко выраженное балочное строение паренхиматозных клеток печени. Гепатоциты овальной формы, окраска цитоплазмы равномерная, ядра с четко выраженными ядрышками, локализуются преимущественно в центральной части клетки.

  При гистологическом исследовании препаратов печени норок с умеренной жировой дистрофией, установлено: набухшие гепатоциты неравномерно увеличены в объеме, в основной массе гепатоцитов обнаруживается помутнение  и набухание цитоплазмы.  Ядра находятся в центре печеночных клеток, уменьшены в объеме, неправильной формы. Балочная структура слабо различима, что соответствует диффузной мелкокапельной жировой дистрофии .

При гистологическом исследовании печени 5 голов норок, не получавших энтеросорбент,  выявляли резко выраженную застойную гиперемию, особенно в центрах долек, дистрофию гепатоцитов, исчезновение балочной  их структуры, наличие крупных капель жира в гепатоцитов, что свидетельствует о выраженной жировой дистрофии. 

Поражения гепатоцитов, эндотелиальных (звездчатых) клеток печени ведут к прежде всего к нарушению синтеза и распаду белков, нарушению процессов обезвре­живания токсических веществ, поступающих извне или образую­щихся в ходе межуточного обмена, снижению фагоцитоза звездча­тыми эндотелиоцитами микроорганизмов и их токсинов, иммун­ных комплексов (антиген - антитело), жировых капель и других агентов. 

Мелкокапельная жировая дистрофия является более легкой степенью проявления гепатоза и носит обратимый характер. Поэтому можно считать, что применение Полифепана обусловило снижение количества больных гепатозом  норок и явилось профилактикой развития более тяжелых поражений печени.

Влияние энтеросорбента Полисорб ВП  на организм норок,

больных гепатозом

Полисорб ВП (ветеринарный пероральный) - неорганический, неселективный, полифункциональный энтеросорбент на основе высокодисперсного кремнезема.  Обладает выраженными сорбционными и детоксикационными свойствами. В просвете желудочно-кишечного тракта препарат связывает и выводит из организма эндогенные и экзогенные токсические вещества различной природы. Полисорб сорбирует также некоторые продукты обмена веществ организма, в том числе избыток билирубина, мочевины, холестерина и липидных комплексов, а также метаболиты, ответственные за развитие эндогенного токсикоза.

С целью проведения оценки терапевтической эффективности Полисорба ВП при гепатозе норок были сформированы 2 опытные группы по 10 молодых и 10 взрослых самок с клиническими признаками гепатоза (вялость, отказ от корма, обесцвечивание кала).  Полисорб ВП задавали в  дозе 0,15 г/кг живой массы животного (0,3-0,6 г на голову) курсом по 10 дней, двукратно с интервалом 7 дней.  Контролем служили по 10 интактных самок каждого возраста, которые не получали  препарат.

По окончании опыта у норок брали кровь и подвергали морфологическому и биохимическому исследованию. Гематологические и биохимические показатели крови после применения препарата значительно изменялись, достигнув физиологической нормы для данного вида животных или значительно приблизившись к ней. Уровень эритроцитов повысился соответственно на 4,4 и  7,7 % (Р<0,001), гемоглобина на 20,45 % (Р<0,001) и 167,5 %, количество лейкоцитов понизилось на 13,8 % (Р<0,01), 36,9 % (Р<0,001), СОЭ понизилось до 1,2-2,0 (Р<0,001), уровень общего белка увеличился на 3,4 (Р<0,01), 97,1 %, гемоглобина на 20,45 % (Р<0,001), 16,5 % (Р<0,05), глюкозы на 48,5 % (Р<0,01), 52,1 %, содержание холестерина  понизилось на 11,91 % (Р<0,01), билирубина на 16,3 % (Р<0,01). Содержание мочевины снизилось на 19,1 % (Р<0,01).

Каталитическая активность АсАТ повышалась на 13,3 % и 32,5 %, показатели АлАТ понизились на 22,3 % (Р<0,001) и 4,1 % соответственно.

У интактных норок гематологические, биохимические и ферментативные показатели остались на том же уровне, что и до эксперимента.

Сравнивая показатели крови норок, полученные при применении Полифепана и Полисорба ВП  при гепатозе,  можно заключить, что препараты нормализуют гематологические, биохимические и ферментативные показатели, положительно влияют на функциональное состояние печени. Однако, необходимо учитывать немаловажный фактор – Полифепан приблизительно в 3 раза дешевле, чем Полисорб ВП. Полифепан по ценам 2012 года стоит 45 рублей за 100 г, тогда как упаковка препарата Полисорб ВП  100 г – 144 руб.

Установлено, что при даче Полифепана в дозе 3,0 и 4,0 г/кг живой массы для щенков,  6,0 и 8,0 г/кг  для взрослых норок  гематологические, биохимические и ферментативные показатели  практически не отличались друг от друга, а у норок, получавших  2,0 г/кг  для щенков и 4,0 г/кг живой массы для взрослых норок изменение показателей было незначительным. Поэтому за рекомендуемую дозу  Полифепана порошковой консистенции была принята суточная доза 3,0 г/кг живой массы  на голову для молодых и  6,0 г /кг живой массы для взрослых норок. 

Таким образом, результаты наших исследований показали, что изменения в морфофункциональном состоянии печени и крови норок являются одной из основных причин гепатоза. Применение энтеросорбентов оказало положительное влияние на статус крови щенков и самок норок. После применения препаратов у них наблюдалось повышение содержания общего белка, глюкозы при одновременном снижении концентрации общего билирубина, мочевины, холестерина.  Полученные результаты дают возможность рекомендовать данные препараты с профилактической целью для нормализации метаболических процессов в организме норок.

ВЫВОДЫ

1. При рыбно-мясном типе кормления в хозяйстве заболевания органов пищеварения незаразной этиологии в 2009-2010 гг. составили 36,5 и 35,1 % соответственно, а в 2011 при  мясо-рыбном типе  – 27,7 %, при этом уровень гепатопатологий остался примерно на одном уровне – 20,5; 19,3 и 18,5 соответственно.

2. Основные клинические симптомы гепатоза проявлялись поведенческой реакцией, снижением пищевой возбудимости вплоть до анорексии, усилением жажды, диспепсическими и копростатическими расстройствами органов пищеварения.

3. Патологоморфологически у щенков норок, больных гепатозом, отмечали  мелкокапельный липидоз, у взрослых норок – жировую дистрофию с наличием крупных капель жира в гепатоцитах, дистонию синусоидальных капилляров с явлением агрегации эритроцитов

4. Гематологическими и биохимическими признаками гепатопатологии у норок являются снижение количества эритроцитов, гемоглобина, уровня глюкозы  и содержания общего белка в сыворотке крови, увеличение количества лимфоцитов и лейкоцитов, активности аминотранфераз, холестеринемия, билирубинемия.

5. Применение препарата Полифепан в дозе 3,0 г/кг живой массы  у больных гепатозом щенков  норок способствует повышению количества эритроцитов на 15,59±0,24 %, гемоглобилина на 16,93±0,46 %, общего белка на 3,24±0,12 %, глюкозы на 19,77±0,59 %. Количество лейкоцитов на снизилось на 12,17±0,46 %,  холестерина и мочевины на 9,37±0,35 и 5,93±0,15  соответственно. Все перечисленные показатели приблизились к физиологической норме.

6. При применении препарата Полифепана в дозе 6,0 г/кг живой массы  у больных  гепатозом взрослых норок установлено достоверное повышение уровня эритроцитов на 3,60-4,45  %, гемоглобина – на 9,86-8,18 %, общего белка – на 34,54-47,68 %, глюкозы – на 25,60-26,08  % на фоне снижения билирубина, холестерина и мочевины.

7. При применении Полифепана на молодняке мехового поголовья достигнуто повышение живой массы тела на 8,3-11,3 %, что ведет к соответствующему увеличению шкурковой продукции и, как следствие, дает ощутимый экономический эффект.

8. Применение энтеросорбента Полисорб ВП с терапевтической целью щенкам после отъема и взрослым норкам дает положительный эффект по всем основным морфологическим и биохимическим показателям крови, достигая физиологической нормы для данного вида животных или значительно приближаясь к ним.

9. Применение энтеросорбента Полифепан в промышленном звероводстве более обосновано в виду его низкой стоимости по сравнению с энтеросорбентом Полисорб ВП.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1.  Результаты гематологических, биохимических, ферментативных показателей следует использовать для оценки нарушений обмена веществ у норок при диагностике гепатоза.

2. С целью снижения уровня гепатоза в звероводческих хозяйствах и увеличения показателей выхода шкурковой продукции следует включать в рацион щенков норок после отсадки энтеросорбент Полифепан в дозе 3,0 г/кг живой массы. Препарат применять с кормов перорально двумя курсами по 10 дней с интервалом 7 дней.

3. Основные положения и выводы диссертации используются в учебном процессе при чтении лекций, проведении лабораторных занятий по курсу «Незаразные болезни печени».

4. По результатам исследований подготовлены методические рекомендации «Применение энтеросорбентов Полифепана и Полисорба ВП для профилактики гепатоза норок».

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ

ДИССЕРТАЦИИ

1. Харламов В.К. Реакция ферментов (АлАТ и AсАT) сыворотки крови норок при кормовом стрессе //«Адаптация и становление физиологических функций у животных.  Международная научно-практическая конференция». – Москва: МГАВМиБ,  2010. – С.

2. Харламов В.К. Этиология и морфологические признаки гепатоза у норок / В.К. Харламов,  А.Н. Семикрасова //«Повышение интенсивности и конкурентоспособности отраслей животноводства»: Международная научно-практическая конференция. – Минск,  2011. – С.

3. Харламов В.К. Морфологические изменения в печени норок при нарушении белково-жирового баланса в рационе норок  //«Научное обеспечение инновационного развития отечественного животноводства»:  Всероссийская научно-практическая конференция (16-17 июня 2011г., г. Новочеркасск:  ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадеми, 2011. - С.  177-179.

4. Харламов В.К. Энтеросорбент Полифепан для профилактики гепатоза норок.- //Ветеринария. – 2012. - № 11.- С. 55-56

5. Харламов В.К. Гепатоз норок как следствие нарушения белково-жирового баланса в рационе // Веткорм.- 2012. -  №4. -С.48

6. Харламов В.К. Симптомы и морфологические признаки гепатоза алиментарного происхождения у норок» // В.К. Харламов, Б.В. Уша //Ветеринарный врач. – 2012.-  № 5.- С. 53-55

Подписано в печать Усл. печ. л. 1,5

Тираж 100 экз.  Заказ

МГУПП 109316, Москва, ул. Талалихина, 33

ООО «Франтера»






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.