WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


 

На правах рукописи

ПИЛЮГА

ЮРИЙ АНАТОЛЬЕВИЧ

ИММУННЫЙ СТАТУС ПОДСОСНЫХ ЖЕРЕБЯТ ПРИ КОНТРАКТУРЕ СГИБАТЕЛЕЙ ПАЛЬЦА

06.02.02  Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

06.02.04 Ветеринарная хирургия

  Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Москва – 2012

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ).

Научные руководители:  доктор биологических наук, профессор,

член-корр. РАСХН

  Девришов Давуд Абдулсемедович

доктор биологических наук, профессор

Тимофеев Сергей Владимирович

Официальные оппоненты: Бедоева Залихан Михайловна доктор биологических наук, ОАО «Институт биотехнологии

ветеринарной медицины» ОАО «Росагробиопром»,

заведующая микробиологической лабораторией

Юров Константин Павлович

доктор ветеринарных наук, профессор,

ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко»,

заведующий лабораторией диагностики и профилактики

респираторных болезней лошадей и крупного рогатого скота

Ведущая организация: ФГБУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов»

Защита состоится «22» ноября 2012 года в «12.00» час. на заседании диссертационного совета Д 220.042.01 при ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, г. Москва ул. Академика Скрябина, 23; тел. (495) 377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина».

Автореферат разослан «____»___________2012 года и размещен на сайте htt://www.vak.ed.gov.ru.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

профессор Грязнева Т.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. В период с 2000 по 2011 годы наметился значительный рост заболеваемости у подсосных жеребят приобретенными контрактурами сухожилий мышц сгибателей пальца, являющимися наиболее распространенными и значимыми ортопедическими заболеваниями во многих конных заводах России выявляют порядка 10-15% от всего поголовья жеребят, родившихся в один год, а в отдельных хозяйствах южного региона РФ – до 50%.

Причиной роста заболеваемости являются: неполноценное и несбалансированное кормление, ненадлежащие условия содержания, неблагоприятные климатические условия, провоцирующие нарушение обмена веществ и оказывающие стрессовое воздействие на состояние иммунитета (Александров В., 2001., Александров О., 1991.,Кошаров О.А., 2003.,Лазарев Д.И. 2007., Кондрахин И.П., Архипов А.В., Левченко В.И. и др. 2004). Одной из главных причин возникновения контрактуры сухожилий мышц сгибателей у подсосных жеребят служит возникновение вторичного иммунодефицита, в результате нарушения передачи пассивного иммунитета (Krakowski L., Krzyzanowski J., Wrona Z., et al., 1999; Угадчиков С.Т., 1996; Пэворд Т., Пэворд М., 2005).

Вопросы дифференциальной диагностики, установление и изучение механизмов патогенеза, факторов риска провоцирующих возникновение приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят представляет одну из актуальных проблем ветеринарной медицины.

Цель и задачи исследования. Цель работы – изучить иммунный статус подсосных жеребят при контрактуре сухожилий мышц сгибателей пальца и разработать методику диагностики, лечения и профилактики заболевания.

В соответствии с поставленной целью необходимо выполнить следующие задачи:

1. Выявить факторы риска возникновения и дифференциально-диагностические критерии приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят буденновской породы и изучить их прогностическую значимость.

2. Изучить состояние клеточных факторов иммунитета при контрактуре сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят и определить их прогностическую значимость.

3. Изучить состояние гуморальных факторов иммунитета при контрактуре сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят и определить их прогностическую значимость.

4. Определить состояние обмена веществ у жеребят, с симптомами контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца.

5. Изучить лечебный эффект препарата «Гемобаланс» при использовании в комплексном хирургическом лечении подсосных жеребят с симптомами прогрессирующей контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца.

6. Изучить макро-, микроморфологические изменения сухожилий мышц сгибателей пальца, вовлеченных в патологический процесс при контрактуре.

Научная новизна. Впервые на основании использования комплексного методического подхода к оценке структурного состояния сухожильно-связочного аппарата включающего: субъективные методы и объективные методы оценки сухожильно-связочного аппарата, подтвержденные результатами иммунологических исследований, изучена приобретенная контрактура сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят. На основании изучения факторов риска, развития и особенностей клинического течения заболевания дана комплексная клиническая оценка и установлены дифференциальные критерии стадий болезни.

Практическая значимость. На основе разработанных теоретических положений и результатов экспериментальных данных разработана и внедрена в ветеринарную практику система лечебно-профилактических мероприятий. Разработан алгоритм исследования дистального отдела конечности лошади, включающий с себя оценку состояния копытного, венечного и путового суставов рентгенографическими исследованиями. Показана целесообразность проведения биохимических исследований сыворотки крови жеребят, позволяющая выявлять патологию на ранней стадии развития. Полученные результаты исследования являются важными в расшифровке механизма и характера течения контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят, а также в диагностике до клинической стадии заболевания.

Сведения о практическом использовании научных результатов.

Полученные результаты экспериментальных исследований используются в учебном процессе по дисциплинам «Клиническая иммунология» и «Частная хирургия» ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина». Разработанная методика диагностики, лечения и профилактики приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят внедрена в ветеринарную практику ООО «АгроСоюз Юг Руси» ФПКЗ «им.С.М. Буденного», а также применяется ветеринарными специалистами ЗАО «Кировский конный завод».

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на научно-практической конференции в Северо-Кавказском зональном научно-исследовательском институте (Новоцеркаск, 2012), на 13-й Международной научно-практической конференции «Болезни лошадей: диагностика, профилактика, лечение» (Москва, 2012), на 14-й Международной конной выставке «Эквирос-2012» (Москва, 2012).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 2 научных статьи в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 143 страницах машинописного текста и состоят из следующих разделов: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы (111 литературных источника: 82 отечественных и 29 зарубежных авторов), 6 страниц приложений. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 56 рисунками.

Положения, выносимые на защиту:

1. Факторы риска способствующие возникновению и развитию приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца.

2. Клиническая картина течения контрактуры на разных стадиях развития.

3. Состояние клеточных и гуморальных факторов иммунитета и их значимость в диагностике и прогнозе приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца.

4. Состояние обмена веществ у жеребят, с симптомами контрактуры.

5. Система мониторинга структурно-функционального состояния сухожилий мышц сгибателей пальца и критерии оценки хирургического лечения жеребят с прогрессирующими контрактурами.

6. Макро-, микроморфологические изменения сухожилий мышц сгибателей пальца при контрактуре, вовлеченных в патологический процесс.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа по теме диссертации выполнялась в период с 2009 по 2012 год. Клинические, иммунологические, биохимические, анатомические, гистологические исследования проводились на базе кафедры иммунологии ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» и ООО «АгроСоюз Юг Руси» Филиал «Племенной конный завод им. С.М. Буденного». Клиническое обследование 546 голов подсосных жеребят буденовской породы с симптомами приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца осуществлялось в летне-осенний период.

Научно-экспериментальный опыт проведен в производственных условиях ООО «АгроСоюз Юг Руси» Филиал «Племенной конный завод им. С.М. Буденного», без изменения технологии выращивания жеребят, принятой на предприятии в летне-осенний период, с целью установления причины заболевания. В опыт были взяты подсосные жеребята буденновской породы в возрасте 5-5,5 мес., в количестве 21 гол. Были сформированы три группы животных по принципу аналогов: опытная и две контрольных. В опытную группу отобрали - 11 гол. с клиническими симптомами контрактуры сухожилий сгибателей пальца – на 2-й стадии заболевания, в первую контрольную группу вошли – 5 гол. с первичными клиническими признаками контрактуры – на 2-й стадии болезни и во вторую контрольную группу включили – 5 гол. клинически здоровых жеребят. Животным, взятым в опыт до начала эксперимента лечение не проводилось.

Жеребятам опытной группы вводили комплексный препарат «Гемобаланс» по схеме: курсом – 8 инъекций, внутривенно, с интервалом 48 ч, 4мл/гол, из расчета 1мл на 45 кг живой массы.

Животным обеих контрольных групп вводили плацебо (0,85% раствор NaCl) по схеме: курсом – 8 инъекций, внутривенно, с интервалом 48 ч, 4мл/гол.

Биохимическое исследование сыворотки крови проводили на биохимическом анализаторе Стат Факс 3300 (Stat Fax 3300). При проведении исследований учитывали уровень содержания кальция, фосфора, общего белка, альбумина, глюкозы.

Для определения содержания абсолютного и относительного количества Т- и В-лифоцитов в крови исследуемых животных и разделения лимфоцитов на субпопуляции использовали метод Эрнст Л.К., Павленко С.П., Орловой А.Р. и др. (1998).

Фагоцитарную активность нейтрофилов определяли методом Leirer et al., (1967) и Берман В.М., Славской Е.М. (1968) в модификации Клечикова Л.З. (1967), и Емельяненко П.А. (1980). При определении фагоцитарной активности учитывали следующие показатели: фагоцитарный индекс, фагоцитарное число, % фагоцитоза, % переваримости на стадии поглощения.

Бактерицидную активность сыворотки крови изучали нефелометрическим методом Смирновой О.В., Кузьминой Т.А. (1966). Оптическую плотность исследуемого бульона определяли посредством фотоэлектроколориметра Ланге. В качестве тест-микроба использовали 12-16 часовую агаровую культуру штамма E.coli 04, с концентрацией 2,5 млрд.м.т./мл.

Лизоцимную активность в сыворотке крови опытных животных исследовали методом Osserman E. D. Lawlor, (1966) в модификации О.Н. Грызловой, П.А. Емельяненко, В.Н. Денисенко (1980).

Светооптические, микроморфометрические исследования и микрофотосъёмку осуществляли с помощью микроскопа Jenamed-2 фирмы Carl Zeiss Jena, совмещённого с компьтерной программой анализа изображений ImageScope версия Lite S.

Статистическую обработку полученных результатов в начале и в конце опыта провели с помощью парного непараметрического теста Уилкоксона (Wilcoxon test). Достоверными принимали значения при р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Факторы риска возникновения и дифференциально-диагностические критерии приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят в подсосный период

В ходе проведенных нами исследований установили, что ведущими факторами риска в возникновении приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят в подсосный период – является воздействие первичного пускового механизма: неполноценное и несбалансированное кормление, ненадлежащие условия содержания жеребят на пастбище, неблагоприятные климатические условия, провоцирующие нарушение обмена веществ и оказывающие стрессовое воздействие на состояние иммунитета жеребят.

Было установлено, что контрактура развивается стадийно, в зависимости от возраста животных, патологические изменения сопровождаются нарушением постановки конечностей, деформацией и нарушением пропорций копыт.

На 1-й, начальной, до клинической стадии развития болезни в возрасте 4-4,5-5 месяцев происходят первичные нарушения обмена веществ - кальциево-фосфорного соотношения, а именно - гиперкальциемия; клинические признаки болезни отсутствуют.

Вторая стадия - в возрасте жеребят 5-5,5 месяцев – проявление первых клинических симптомов болезни и деструктивных изменений в структуре сухожилий.

Третья, критическая стадия болезни - в возрасте 5,5-6-6,5 месяцев - начинают развиваться необратимые патологические изменения в сухожильно-связочном аппарате конечностей у жеребят.

Четвертая, заключительная стадия болезни в возрасте 6,5-7,5 месяцев, характеризуется необратимыми патологическими изменениями в сухожильно-связочном аппарате и суставах дистального отдела конечностей у жеребят.

На основании проведенных исследований нами разработана методика дифференциальной диагностики стадий приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца с учетом возраста жеребят и степени выраженности клинических признаков болезни (таблица 1).

Таблица 1. Методика дифференциальной диагностики стадий приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца с учетом возраста жеребят и степени выраженности клинических признаков

Возраст, мес.

4-4,5-5

5-5,5

6-6,5

6,5-7,5

Стадия болезни

I

II

III

IV

Степень выраженности клинических признаков

отсутствует

Животные облегчают передние конечности; первые сиптомы хромоты

Хромота, сухожилие глубокого сгибателя пальца напряжено

Хромота, животные передвигаются с трудом, часто лежат, сухожилия сгибателей напряжены

Степень ограничения подвижности суставов дистального отдела

отсутствует

Ограничения подвижности копытного сустава отсутствуют

Ограни-ченная подвиж-ность венечного и копытного суставов

Ограничение подвижности путового, венечного и копытного суставов

Болезненность при пальпации сухожилий

отсутствует

Глубокого сгибателя пальца

Глубокого и поверхност-ного сгибателей

Глубокого, поверхностного сгибателей, суставов дистального отдела конечности

Угол копыта передних конечностей

45-50°

55-70°

70-80°

90° и более

Пропорции зацепной,

боковой и пяточной стенки копыта

3:2:1

2:2:1

1,5:1,5:1

1:1:1; 1:1:1,5

Степень патологических изменений сухожильно-связочного аппарата

отсутствует

обратимые

обратимые

необратимые

Результаты исследования клеточных факторов иммунитета жеребят и их значение в патогенезе контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца

Целью исследований являлась характеристика клеточных факторов при контрактуре сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят. Изучение закономерностей состояния иммунитета, установление иммунологических факторов риска и определение клинико-иммунологических критериев прогноза возникновения контрактуры.

Результаты исследования содержания Т- и В- лимфоцитов в периферической крови жеребят с симптомами контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца в течение эксперимента

В результате выделения лимфоцитов и разделения их на субпопуляции у жеребят опытной (ТL=1690±308,8; BL=586±308,8) и 1-й контрольной группы (ТL=1710±198,1; BL=570±75,8) выявили: лимфопению, характеризующуюся снижением содержания абсолютного количества Т- лимфоцитов на 26%, В- лимфоцитов на 19%, по сравнению с контрольными животными. Во 2-й контрольной группе уровень содержания абсолютного количества лимфоцитов был в пределах физиологической нормы (ТL=2270±329,01; BL=720±115,1), животные были клинически здоровы.

Таблица 2. Относительное и абсолютное содержание Т-, В- лимфоцитов в периферической крови опытных животных в начале опыта

Группы

Показатели

TL, M±m

BL, M±m

Абс. кол-во, тыс кл./мл

Отн. кол-во, %

Абс. кол-во тыс кл./мл

Отн. кол-во %


Опытная, n=11

1690±308,8

73,8±1,94

586±308,8

26,2±1,94


1-я контрольная, n=5

1710±198,1

74,6±1,95

570±75,8

25,4±1,95


2-я контрольная, n=5

2270±329,01

75,4±2,51

720±115,1

24,6±2,51

р<0,05

В результате иммунологических исследований нами было установлено, что у животных опытной группы, после применения гемобаланса достоверно повысилось содержание абсолютного количества Т-лимфоцитов 1 мл в периферической крови - на 44% (2986±138,01), по сравнению с началом опыта и на - 27%, по сравнению с контролем-1 (2180±275,23), на - 36% выше, в сравнении с контролем-2 (1910±285,2); содержание абсолютного количества В-лимфоцитов в 1 мл периферической крови жеребят опытной группы увеличилось на - 45% (1063±71,03), по сравнению с началом эксперимента и на - 32% выше чем в 1-й контрольной группе (730±103,68), на 40% выше чем во 2-й контрольной группе (640±129,42), соответственно (таблица 3).

Таблица 3. Уровень Т-, В- лимфоцитов в крови опытных животных в конце опыта

Группы

Показатели

TL, M±m

BL, M±m

Абс. кол-во, тыс кл./мл

Отн. кол-во, %

Абс кол-во, тыс кл./мл

Отн. кол-во, %

Опытная, n=11

2986±138,01

73,2±1,37

1063±71,03

26,8±1,1

1-я контрольная, n=5

2180±275,23

74,6±1,52

730±103,68

25,4±1,52

2-я контрольная, n=5

1910±285,2

75,4±1,14

640±129,42

24,6±1,14

р<0,05

Сравнительная характеристика абсолютного содержания T-, B- лимфоцитов в периферической крови у жеребят опытной группы по сравнению с контрольными животными в течение эксперимента, подтверждает обоснованность иммунобиологических исследований, позволяющих прогнозировать развитие контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца в до клиническую стадию развития болезни.

Результаты оценки фагоцитарной активности лейкоцитов в течение эксперимента

Фагоцитарный индекс в опытной группе находился на уровне - 1,44±0,28; фагоцитарное число - 2,11±0,43; % фагоцитоза составлял - 69,09±9,48; % переваримости на стадии захвата был - 7,29±6,87; (р<0,05).

Фагоцитарный индекс в 1-й контрольной группе составлял - 1,67±0,30; фагоцитарное число - 2,42±0,27; % фагоцитоза составлял - 68±8,00; % переваримости на стадии захвата был - 6,2±6,57; (р<0,05), (таблица 4).

Фагоцитарный индекс во 2-й контрольной группе находился на уровне - 1,9±0,60; фагоцитарное число - 2,64±0,62; % фагоцитоза составлял - 69,6±8,76; % переваримости на стадии захвата был - 3,8±4,82; (р<0,05).

Таблица 4. Показатели фагоцитоза в начале опыта

Группы

Показатели

ФИ

M±m

ФЧ

M±m

% фагоцитоза M±m

% переваримости на стадии поглощения

Опытная, n=11

1,44±0,28

2,11±0,43

69,09±9,48

7,29±6,87

1-я контрольная, n=5

1,67±0,30

2,42±0,27

68±8,00

6,2±6,57

2-я контрольная, n=5

1,9±0,60

2,64±0,62

69,6±8,76

3,8±4,82

р<0,05

В результате исследований выявили, что у жеребят больных контрактурой (опыт) ФИ на 25% и ФЧ на 20% ниже по сравнению с контрольными животными.

После проведенной фармакокоррекции с помощью препарата «Гемобаланс» фагоцитарный индекс в опытной группе увеличился на 43% (2,51±0,35), по сравнению с началом опыта, и на 25% выше по сравнению с 1-й контрольной группой (2,15±0,6); и по сравнению со 2-й контрольной группой (2,3±0,36) этот показатель был выше на 9%, (р<0,05).

Фагоцитарное число в опытной группе возросло на -33% (3,15±0,37) по сравнению с началом эксперимента, на 6% по сравнению с 1-й контрольной группой (2,98±0,85), и на одном уровне по сравнению со 2-й контрольной группой (3,16±0,73), (р<0,05).

Значение % фагоцитоза в опытной группе также возросло на 11% (80±3,1) по сравнению с началом опыта, и выше на 9% по сравнению с 1-м контролем (71,2±3,35), также выше на 6,4% по сравнению со2-м контролем (73,6±6,07), (р<0,05). Показатель % переваримости на стадии поглощения в опытной группе (8,64±3,59) не значительно увеличился - на 1,4% по сравнению с началом эксперимента, также не значительно выше на - 1%, чем в 1-й контрольной группе (7,6±2,88), и на 2% этот показатель оказался ниже по сравнению со 2-й контрольной группой (10,6±4,45), (р<0,05); (таблица 5).

Таблица 5. Показатели фагоцитоза в конце эксперимента

Группы

Показатели

ФИ

M±m

ФЧ

M±m

% фагоцитоза M±m

% переваримости на стадии поглощения

Опытная, n=11

2,51±0,35

3,15±0,37

80±3,1

8,64±3,59

1-я контрольная, n=5

2,15±0,6

2,98±0,85

71,2±3,35

7,6±2,88

2-я контрольная, n=5

2,3±0,36

3,16±0,73

73,6±6,07

10,6±4,45

р<0,05

Анализ полученных данных показал, что на фоне контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца происходит угнетение фагоцитарной активности нейтрофилов у жеребят опытной группы.

Результаты исследования гуморальныхных факторов иммунитета жеребят и их значение в патогенезе контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца

Состояние и активность гуморальных факторов характеризует функциональное состояние иммунной системы организма. Наиболее информативными - являются бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови животных.

Результаты исследования бактерицидной активности сыворотки крови у жеребят с симптомами контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца

В результате исследований установили - показатели бактерицидной активности сыворотки крови были на достаточно высоком уровне в начале исследования: в опытной группе – 99,07±2,06 %, в 1-й контрольной группе – 99,48±1,16 %, во 2-й контрольной группе – 98,5±3,35 %, (р<0,05) (таблица 6).

В конце опыта показатели бактерицидной активности сыворотки крови в опытной группе (86,37±10,49) снизились на - 12%, по сравнению с началом опыта, и по сравнению с 1-й контрольной группой (85,99±6,04) уровень БАСК был практически таким же, по сравнению со 2-й контрольной группой (94,4±5,58) этот показатель был ниже на 8% (р<0,05).

Таблица 6. Показатели бактерицидной активности (БАСК) в сыворотке крови в начале и в конце опыта

Группы

Показатели

БАСК, % M±m

(в начале)

БАСК,%

M±m( в конце)

Опытная, n=11

99,07±2,06

86,37±10,49

1-я контрольная, n=5

99,48±1,16

85,99±6,04

2-я контрольная, n=5

98,5±3,35

94,4±5,58

р<0,05

Результаты исследования лизоцимной активности сыворотки крови у жеребят с симптомами контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца

Уровень содержания лизоцима в начале эксперимента в опытной группе был –38,78±6,87 мкг/мл, на 13% выше чем в 1-й контрольной группе (25,85±7,94 мкг/мл), и на 7% выше по сравнению со 2-й контрольной группой (31,65±9,01 мкг/мл), (р<0,05).

Таблица 7. Показатели лизоцимной активности в сыворотке крови в начале и в конце опыта

Группы

Показатели

Лизоцим, мкг/мл

M±m (в начале)

Лизоцим, мкг/мл

M±m(в конце)

Опытная, n=11

38,78±6,87

19,89±4,75

1-я контрольная, n=5

25,85±7,94

68±10,60

2-я контрольная, n=5

31,65±9,01

83,8±30,4

р<0,05

Лизоцимная активность при повторном исследовании в опытной группе находилось на уровне (19,89±4,75; р<0,05), что было ниже по сравнению с началом опыта, также этот показатель был ниже по сравнению с 1-й контрольной группой (68±10,6; р<0,05), значение содержания лизоцима было ниже по сравнению со 2-й контрольной группой (83,8±30,4; р<0,05).

Результаты изучения биохимических показателей сыворотки крови жеребят с клиническими симптомами контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца

Результаты исследования биохимических показателей у жеребят с клиническими признаками контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца показали, что закономерным нарушением обмена веществ при данном заболевании является дисбаланс кальциево-фосфорного соотношения.

Результаты биохимического исследования сыворотки крови жеребят взятых в опыт в начале эксперимента

В начале эксперимента, при изучении результатов биохимических экспертиз сыворотки крови жеребят опытной группы установили нарушение кальциево-фосфорного соотношения. При норме Са:Р, 2:1-0,75, у животных из опытной группы этот показатель соответствовал уровню 1,5:1. Другие показатели находились в пределах физиологической нормы.

В результате исследования биохимических показателей 1-й контрольной группы, также выявили нарушение кальциево-фосфорного соотношения, при норме 2:1, в сыворотке животных это соотношение было на уровне 2,5:1, что превышает уровень физиологической нормы – гиперкальциемия. Остальные показатели были в пределах физиологической нормы.

При оценке результатов биохимических показателей 2-й контрольной группы установили, что кальциево-фосфорное соотношение не было нарушено Са:Р, 2:1, но содержание этих показателей в сыворотке крови превышало физиологическую норму. Другие показатели соответствовали физиологической норме.

Результаты биохимического исследования сыворотки крови жеребят взятых в опыт в конце эксперимента

В конце эксперимента, при изучении биохимических показателей сыворотки крови жеребят опытной группы после проведенной фармакокоррекции посредством препарата «Гемобаланс» установили, что кальциево-фосфорное соотношение восстановилось до уровня физиологической нормы Са:Р, 2:1. Другие показатели также находились в пределах физиологической нормы. Все животные опытной группы были клинически здоровы.

При исследовании биохимических показателей жеребят 1-й контрольной группы, выявили нарушение кальциево-фосфорного соотношения, при норме 2:1, в сыворотке животных это соотношение было на уровне 1,5:1, что не соответствовало уровню физиологической нормы. Другие показатели находились в пределах физиологической нормы.

При оценке результатов показателей 2-й контрольной группы установили, что кальциево-фосфорное соотношение было нарушено, при норме Са:Р, 2:1, фактическое соотношение было 1,5:1. Кроме того, содержание этих показателей в сыворотке крови превышало физиологическую норму как и в начале опыта. Другие биохимические показатели были в пределах физиологической нормы.

После проведенного курса лечения кальциево-фосфорное соотношение у жеребят опытной группы восстановлено до уровня физиологической нормы.

Результаты комплексного хирургического лечения подсосных жеребят с прогрессирующей контрактурой сухожилий мышц сгибателей пальца

Для лечения жеребят опытной группы с прогрессирующей контрактурой сухожилий мышц сгибателей пальца использовали разработанную нами схему комплексного хирургического лечения, заключающуюся в применении препарата «Гемобаланс» для фармакоррекции вторичного иммунодефицита и нарушений минерального обмена веществ в сочетании с корректирующей расчисткой и ортопедическим подковыванием для устранения структурных изменений в сухожильно-связом аппарате конечностей. Для лечения жеребят 1-й контрольной группы применили только ортопедическое лечение, заключающееся в выполнении корректирующей расчистки и ортопедического подковывания.

В результате проведенного комплексного хирургического лечения препарат «Гемобаланс» в сочетании с корректирующей расчисткой и ортопедическим подковыванием оказал 100%-й терапевтический эффект.

Результаты анатомического и гистологического исследований сухожильно-связочного аппарата жеребят с симптомами контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца

При анатомическом исследовании патологического материала - конечностей, взятых от трупов 10 гол жеребят с симптомами контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца, на макроскопическом уровне выявлена аналогичная патология - деформация добавочной головки глубокого сгибателя.

Поверхностный и глубокий сгибатели пальца при детальном исследовании на макроскопическом уровне видимых изменений не имели.

По результатам проведенного анатомического исследования сухожильно-связочного аппарата животных сложно сделать окончательное заключение, поэтому для окончательных выводов мы сочли целесообразным провести гистологическое исследование добавочной головки и сухожилий мышц сгибателей пальца.

Результаты гистологического исследования сухожилий мышц сгибателей пальца жеребят.В результате проведенных гистологических исследований установили, что наибольшим изменениям при контрактуре сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят подвергается сухожилие глубокого сгибателя пальца. Об этом свидетельствуют обнаруженные признаки: мультиочаговые рубцовые изменения ткани сухожилия; утолщение пучков коллагеновых волокон разных порядков, увеличение «волнистости» пучков коллагеновых волокон, что соответствует склеротическим изменениям; склеротические изменения в пери- и эндотеноне, что, очевидно, ухудшает трофическое обеспечение сухожилий. В сухожилии глубокого сгибателя пальца имеет место хронический фиброзирующий процесс, усугубляющийся трофическими нарушениями.

В добавочной головке глубокого сгибателя пальца выявили изменение конфигурации пучков коллагеновых волокон, чередующиеся регионами с повышенной и пониженной волнистостью, также установили изогнутость пучков коллагеновых волокон. В сухожилии поверхностного сгибателя пальца наблюдается усиление извитости пучков коллагеновых волокон и небольшие единичные очаги дезорганизации.

В межкостном III мускуле рубцовые изменения и признаки дезорганизации не выявлены.

Ближайшие и отдаленные результаты лечения контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят

При оценке результатов в отдаленный период учитывали состояние сухожильно-связочного аппарата, постановки конечностей у жеребят, угла и пропорций копыт, подвижность суставов дистального отдела конечности. При обследовании жеребят опытной группы через 3 и 6 месяцев после окончания курса лечения симптомы контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца не выявили, животные были клинически здоровы: постановка конечностей, углы и пропорции копыт, подвижность суставов дистального отдела соответствовали физиологической норме. Результаты наблюдения подтверждают, что контрактура сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят имеет возрастную принадлежность и возникает только в подсосный период.

Разработка схемы профилактики контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят в подсосный период

Разработанная нами схема профилактики контрактуры проводилась в ООО «АгроСоюз Юг Руси» Филиал «Племенной конный завод им. С.М. Буденного» с целью иммунопрофилактики организма жеребят и профилактики нарушения минерального обмена веществ. Схема включала введение в рацион подсосных жеребят, начиная с 4-х месячного возраста специализированной лечебно-профилактической подкормки «Нутрил-Se», содержащей в своем составе незаменимые аминокислоты, комплекс водо- и жирорастворимых витаминов, макро- и микроэлементы (таблица 8).

Таблица8. Схема профилактики контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца

Кормление

Дневная норма

Дробленое зерно овса и ячменя (1:1), кг/гол

1,5

Пшеничные отруби, кг/гол

0,5

Нутрил-Se, г/гол. в течение 7 дней каждого месяца (первая неделя каждого месяца, 3 недели перерыв)

первые 2 месяца 6 г

вторые 2 месяца 8 г

В связи с тем, что подкормка «Нутрил-Se» выпускается в виде порошка скармливали ее жеребятам, предварительно тщательно перемешав с дробленным зерном и пшеничными отрубями.

В конных заводах принята культурно-табунная система содержания лошадей, при которой жеребята находятся круглые сутки под матками на пастбище, поэтому технологически сложно скармливать жеребятам специализированные подкормки и премиксы. В качестве профилактики возможно использование комплексного препарата «Гемобаланс», начиная с 4-х месячного до 6-месячного возраста - вводить препарат по схеме: внутривенно или внутримышечно, двукратно в неделю, с интервалом 72 ч, из расчета 1мл на 45 кг живой массы.

ВЫВОДЫ

1. Ведущими факторами риска в возникновении приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят буденновской породы в подсосный период – является воздействие первичного пускового механизма: неполноценное и несбалансированное кормление, ненадлежащие условия содержания, неблагоприятные климатические условия, и как следствие нарушение иммунологической реактивности.

2. Установлены 4 стадии клинического развития приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят:

- 1-я до клиническая стадия характеризуется нарушением минерального обмена веществ и отсутствием клинических признаков заболевания;

- 2-я стадия характеризуется первыми клиническими симптомами болезни;

- 3-я стадия – начало формирования необратимых патологических изменений в сухожильно-связочном аппарате;

- 4-я заключительная стадия болезни – характеризуется необратимыми патологическими изменениями сухожильно-связочного аппарата и суставов дистального отдела конечности.

3. Иммунодепрессивное состояние организма у жеребят клинически больных контрактурой сопровождается снижением абсолютного количества: Т-лимфоцитов на 26 %, В-лимфоцитов на 19 %, а также понижением фагоцитирующей и перевариющей активности нейтрофилов: ФИ на 25 %, ФЧ на 20 %, по сравнению с контрольными животными. При этом клеточные реакции отнесены к иммунологическим факторам риска возникновения контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца.

4. У жеребят с клиническими симптомами контрактуры отмечается нарушение минерального обмена веществ: дисбаланс кальциево-фосфорного соотношения в сыворотке крови, а именно – гиперкальциемия.

5. Использование препарата «Гемобаланс» в комплексном хирургическом лечении контрактуры, вводимого курсом 8 инъекций, внутривенно, с интервалом 48 ч, 4 мл/гол, из расчета 1 мл на 45 кг живой массы, в сочетании с корректирующей расчисткой и ортопедическим подковыванием оказало 100% терапевтический эффект.

6. Препарат «Гемобаланс» обладает выраженным иммуномодулирующим действием на клеточные факторы иммунитета жеребят; после применения препарата у животных в опытной группе достоверно повысилось: содержание абсолютного количества Т-лимфоцитов - на 44 %, В-лимфоцитов - на 45 %, значение ФИ увеличилось – на 43 %, ФЧ – на 33 %, по сравнению с началом опыта.

7. Проведенные анатомические исследования позволили установить патологические изменения добавочной головки глубокого сгибателя пальца; гистологические исследования выявили деструктивные изменениями тканей сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят, а именно выявлены: множественные мелкие очаги рубцовой ткани и небольшие единичные очаги дезорганизации, изменения конфигурации пучков коллагеновых волокон, чередующиеся регионами с повышенной и пониженной волнистостью, изогнутостью пучков коллагеновых волокон.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. Ветеринарным специалистам рекомендуется при лечении приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца у жеребят использовать разработанную методику для дифференциальной диагностики заболевания.

2. Рекомендуем осуществлять лечение приобретенной контрактуры сухожилий мышц сгибателей пальца, обусловленной функциональной недостаточностью неспецифического звена иммунитета и сопровождающейся нарушением минерального обмена веществ у подсосных жеребят в возрасте 5-5,5 мес. с помощью комплексного препарата «Гемобаланс» курсом 8 инъекций, внутривенно, с интервалом 48 ч,4 мл/гол, из расчета 1 мл на 45 кг живой массы, в сочетании с корректирующей расчисткой и ортопедическим подковыванием.

3. При ортопедическом подковывании необходимо применять подковы в зависимости от условий, в которых выращиваются жеребята. При конюшенно-пастбищном содержании, когда подсосный жеребята содержатся индивидуально с матками возможно использование «клювовидных» подков, способствующих быстрому восстановлению сухожилий. Если же животные содержатся круглосуточно на пастбище – при культурно-табунной системе содержания, применяются только стандартные, облегченные, стальные подковы, которые сохранят целостность копытного рога и не доставляют дискомфорт жеребятам на пастбище. Крепятся подковы после корректирующей расчистки посредством специальных ковочных гвоздей или акрилового клея, коммерчески доступного в настоящее время.

4. Результаты диссертационных исследований рекомендуется использовать в учебном процессе по дисциплинам: «Клиническая иммунология», «Частная хирургия», «Анатомия сельскохозяйственных животных», а так же при проведении научных конференций и в практической работе ветеринарных специалистов.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Девришов Д.А., Тимофеев С.В., Пилюга Ю.А. Лечение контрактуры сгибателей пальца у подсосных жеребят комплексным препаратом «Гемобаланс» в сочетании с ортопедическим подковыванием / Ветеринарная медицина - 2010. - №5-6 – С. 72-74.

2. Девришов Д.А., Тимофеев С.В., Пилюга Ю.А. Динамика развития контрактуры сухожилий сгибателей конечности лошади / Ветеринарная медицина -2012. - №1 – С. 23-24.

 






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.