WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

 

На правах рукописи

Марюшина Татьяна Олеговна

  ДИАГНОСТИКА И КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ

ХАРАКТЕРИСТИКА ВТОРИЧНОГО

ГИПЕРПАРАТИРЕОЗА У СОБАК

Специальность 06.02.01 -  Диагностика болезней и терапия

  животных,  патология, онкология и

морфология животных

Автореферат

  диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

 

МОСКВА 2012

Работа выполнена на кафедре «Незаразные болезни» ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств»,

Министерства образования и науки РФ

 

Научный руководитель:

Луцай Владимир Иванович,

кандидат ветеринарных наук, доцент

(ФГБОУ ВПО «МГУПП»)

Официальные

Ватников Юрий Анатольевич,

оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор

(ФГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов»),

заведующий кафедрой анатомии,

физиологии и хирургии животных

Арсланян Григорий Геворгович,

кандидат ветеринарных наук, доцент

ФГБОУ ВПО «Московская государственная

академия ветеринарной медицины и биотехнологии  им. К.И. Скрябина»), 

доцент кафедры биологии, патологии мелких домашних, лабораторных и экзотических животных 

 

Ведущая организация:

«Всероссийский ветеринарный научно-исследовательский институт патологии, фармакологии и терапии» ГСЦ Россельхозакадемии (г. Воронеж)

Защита диссертации состоится «_____» ________ 2012 в _____ часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.148.09  при ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств» по адресу: 109316, г. Москва, ул. Талалихина, д. 33, в конференц-зале. 

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «МГУПП»

Автореферат разослан « ______ « ______________ 2012 г.

Автореферат размещен  на сайте  Министерства образования и науки РФ

http://vak.ed.ru/  «_____» _________ 2012

Ученый секретарь 

диссертационного  совета,

кандидат биологических наук, доцент Нитяга И.М.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Ветеринарная эндокринология  –  одна из молодых и наименее изученных областей ветеринарии. При этом актуальность проблем, связанных с патологией желез внутренней секреции, возрастает с каждым годом. Ветеринарные врачи в последнее время все чаще встречаются с такими заболеваниями у собак, как сахарный и несахарный  диабет, гипо- и гипертиреоз, синдром Кушинга и адиссоновая болезнь. Неотъемлемым звеном  эндокринной системы являются паращитовидные железы, которые продуцируют  паратиреотропный гормон (паратгормон), участвующий  совместно с витамином Д и кальцитонином в регуляции обмена кальция в организме. О физиологическом значении паращитовидных желез известно достаточно (Ежкова А.М., 1999;. Суслов В.П., 2000; Торранс Э., 2006; Фелдмен Э., 2008 и др.). Снижение уровня кальция в крови является основным стимулом к выбросу гормона в кровоток. Органами-мишенями для паратиреотропного гормона являются скелет и почки, он также оказывает влияние на кишечник, усиливая всасывание кальция. Известно и негативное  влияние  паратгормона  на организм при его гиперсекреции, не зря его относят  к универсальному уремическому токсину (Кузина Н.Ю., 2008; Волгина Г.В., 2009; Ильина А.Н., 2009 и др.). 

Однако исследованиям патологии паращитовидных желез у собак в России до последних лет уделялось недостаточно внимания. Косвенно состояние и работу паращитовидных желез оценивали по концентрации кальция, связанного с белками, фосфора и щелочной фосфатазы в сыворотке крови (А.М. Ежова,1999; Н.В. Грищенко,2000; Ф. Каллфельц,2004; Л. Мартан, 2004). 

Лишь в последние годы стали появляться работы отечественных ветеринарных специалистов, посвященные данной проблеме. Это обусловлено  совершенствованием ветеринарных технологий, внедрением в  ветеринарные лаборатории  более точных диагностических методов, которые позволяют всесторонне изучать такие труднодоступные органы, которыми и являются паращитовидные железы, а также широким распространением скриннинговых биохимических исследований крови. Такие исследования динамично изменили процентные соотношения выявления различных форм гиперпаратиреоза.

К глубокому изучению проблем вторичного гиперпаратиреоза (ВГПТ) у собак  нас побудило не только малое количество научных работ, посвященных данной патологии, но и множество противоречий  в этих работах.

В доступной нам отечественной научной литературе мы не нашли статистических данных по выявлению  вторичного  гиперпаратиреоза у собак с хронической почечной недостаточностью и синдромом мальабсорбции,  совокупных результатов биохимических и гормональных исследований, а также описания морфологических  изменений в паращитовидных железах и костной ткани, при том что ссылки на эту патологию встречаются  практически в каждой работе по метаболическим болезням костей у собак и кошек.

Цель работы. Выявление и изучение особенностей течения вторичного гиперпаратиреоза у собак с хронической почечной недостаточностью и мальабсорбцией,  морфологических изменений в паращитовидных железах и костной ткани, оптимизация методов коррекции данного заболевания.

Задачи исследования.

1. Изучить распространенность  вторичного гиперпаратиреоза среди собак разных пород, возрастных групп и выявить особенности клинического течения различных форм вторичного гиперпаратиреоза.

2. Исследовать морфологические изменения паращитовидных желез и костной ткани у собак с вторичным  гиперпаратиреозом, провести лабораторный биохимический и гормональный скрининг  у собак, страдающих хронической почечной недостаточностью, собак с  синдромом мальабсорбции, с нарушениями кальций-фосфорного  равновесия и здоровых.

3.  Определить эффективность применения препаратов кальция и витамина Д  при  лечении собак  с вторичным  гиперпаратиреозом  с учетом индивидуальных особенностей и тяжести патологического процесса. 

Научная новизна. Впервые получена объективная картина заболеваемости и изучены особенности клинического течения кишечной и почечной форм  вторичного гиперпаратиреоза  у собак. Проведена дифференциальная диагностика  от других заболеваний, сопровождающихся нарушением минерального обмена. Проведены и систематизированы исследования крови по показателям: ПТГ, костной щелочной фосфатазы, ионизированного кальция, витамина Д у собак с разными формами вторичного гиперпаратиреоза. Установлена  зависимость между повышением уровня паратгормона  в крови и морфологическими изменениями в паращитовидных железах  у собак.

Практическая значимость. Полученные данные  по исследованию ВГПТ у собак позволяют дифференцировать  и выявлять заболевания паращитовидных желез на ранних стадиях, комплексно подходить к проблемам лечения и профилактики. Представленные в работе лабораторные данные, рентгеновские снимки и гистологические препараты  являются наглядным пособием для  студентов ветеринарных вузов, изучающих эндокринологию. 

Апробация работы и внедрение результатов исследования. Основные результаты исследований по диссертационной работе доложены на научно-практических конференциях «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции» (Москва, 2002); Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди аспирантов и молодых ученых высших научных заведений МСХ РФ по секции «Ветеринария» (Москва, 2007), 1й Всероссийской межвузовской конференции по ветеринарной хирургии (Москва, 2010) (доклад); Международной научной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной хирургии» (Ульяновск, 2011) (доклад), результаты работы внедрены в учебный процесс ФГБОУ ВПО МГУПП, ФГБОУ ВПО ХГУ им. Катанова.

Публикации. По теме диссертационной работы было опубликовано 6 научных работ, 2 из которых – в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Данные мониторинга ВГПТ у собак с ХПН и мальабсорбции.

2. Результаты исследований биохимических показателей у собак с ВГПТ.

3. Результаты исследований гормональных показателей  у собак со ВГПТ.

4.  Морфологические изменения паращитовидных желез и костной ткани у собак с вторичным парагипертиреозом.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 152 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора научной литературы, собственных исследований, включающих разделы: материалы и методы, результаты собственных исследований, их обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 152 источника, из них 112 отечественных и 40 зарубежных авторов. Работа содержит 24 таблицы и иллюстрирована 33 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследования.  Настоящая работа проводилась в период 2008- 2011 г.г. на кафедре «Незаразные болезни» и ветеринарной клинике «На Талалихина» при ФГБОУ ВПО МГУПП, в ветеринарной лаборатории «Шанс», лаборатории «Инвитро», в паталогоанатомическом отделении городской клинической больницы  № 33.  Объектом исследования стали 208 собак (исследуемая группа) разных возрастных групп, пород и разного пола, из них 138 - животные в возрасте 5-11 лет с хроническими болезнями почек, 70 – щенки в возрасте 3-7 месяцев с синдромом мальабсорбции. Контрольная группа составила 35 здоровых собак  разных пород и пола,  из них  20 собак возрастной группы 5-11 лет и 15  -  щенки возраста 3-7 месяцев.  Все животные были доставлены в клинику для амбулаторного приема и наблюдались в течение всего периода исследований. Основными критериями включения животных в опытную группу было наличие в анамнезе хронической почечной недостаточности (для взрослых собак) и синдрома амальабсорбции  в сочетании с нарушениями  работы опорно-двигательного аппарата (для щенков). Общее количество обследованных животных составило 243.

Окончательный диагноз - хроническая почечная недостаточность устанавливался в соответствии с классификацией, предложенной Международным  обществом, занимающимся изучением заболеваний почек (International  Renal  Interest  Society), основанной на величине показателя креатинина в плазме крови.

В процессе выполнения работы использовали  следующие методы.

Клиническое обследование животных проводили по общепринятой методике. Особое внимание уделялось обследованию опорно-двигательного аппарата.

Биохимическими  исследованиями сыворотки крови определяли уровень креатинина, мочевины, общего и ионизированного кальция, неорганического фосфора, щелочной фосфатазы по стандартным методикам на автоматическом биохимическом анализаторе «Марс». Забор крови для исследования ионизированного кальция осуществляли в вакуумную систему с гелевым наполнителем в анаэробных условиях.

У 138 собак с почечной недостаточностью определяли: креатинин  кинетическим методом по Яффе (набор фирмы DiaSys); мочевину - «уреазным – глутаматдегидрогеназным»: ферментативным УФ-тестом (набор фирмы «DiaSys»); общий кальций - унифицированным колориметрическим методом при длине волны 570 нм (набор фирмы «Vital Diagnostics»); неорганический фосфор  определяли спекторофотометрическим (UV) методом (набор фирмы «Ольвекс Диагностикум»). Метод основан на способности фосфат-ионов образовывать в кислой среде с молибдатом аммония в присутствии детергента фосфорномолибденовый комплекс, оптическая плотность которого при длине волны 340 нм пропорциональна концентрации неорганического фосфора в исследуемом образце.

Щелочную фосфатазу определяли оптимизированным кинетическим методом (набор фирмы «Vital Diagnostics»). Принцип метода:

п-Нитрофенилфосфат + вода   щелочная фосфатаза   п-нитрофенол  +

+ фосфат.

Количество образовавшегося в единицу времени п-нитрофенола, пропорциональное активности фермента, определяется по изменению оптической плотности образца в единицу времени при длине волны 405 нм.

Ионизированный кальций определяли методом ионселективных электродов на автоматическом ионселективном анализаторе ЭЛИТ-041. Метод основан на измерении межэлектродного потенциала, образующегося при контакте с исследуемым раствором кальций- селективного электрода и электрода сравнения.

Костный изофермент щелочной фосфатазы (остазу) определяли методом радиоиммунного анализа (РИА) на счетчике «Wizard 1470» с меткой йод 125.

Витамин Д  определяли  методом ВЭЖХ-МС, ААС (высокоэффективная жидкостная хроматография) на системе ВЭЖХ/МС/МС АРI 2000 (AB SCIEX).

О состоянии костного метаболизма судили по активности костного изофермента щелочной фосфатазы.  О наличии в организме кальция судили по концентрации общего и  ионизированного кальция в  крови. 

С целью выявления вторичного  гиперпаратиреоза проводили гормональное исследование. Для этого у собак производили забор венозной крови с предварительной 12-часовой голодной выдержкой. Исследование паратиреотропного гормона проводили методом твердофазного  хемилюминисцентного иммуноанализа с помощью реактивов и системы Immulite.

У 70 щенков проводили макроскопическое и микроскопическое  исследование фекалий. Наличие крахмала определяли с помощью раствора Люголя, мыла  - по образованию кристаллов после смешивания с уксусной кислотой и с последующим нагреванием. Дополнительно выявляли присутствие простейших (лямблий, изоспор, саркоцист), а также проводили биохимические исследования фекалий, рН  определяли с помощью экспресс-теста фирмы НЕРТА РНАN.  Микроскопию мазков фекалий проводили на фазово-контрастном световом микроскопе фирмы Zeiiss. Увеличение х120, х400, х900.

Оценка внешнесекреторной функции поджелудочной железы  (протеолитическая активность)  проводили при помощи желатинового теста.

С целью выявления тяжести течения ВГПТ проводили морфологические исследования. Для этого  от 13 павших животных были отобраны фрагменты паращитовидных желез и костной ткани.  Гистопрепараты  паращитовидных желез приготовлены путем заливки в парафиновые блоки и окрашиванием гематоксилин эозином. Костная ткань из проксимального отдела лучевой и локтевой костей была первично декальцинирована, залита в парафиновые блоки  и окрашена гематоксилинэозином. Парафиновые срезы приготовлены на микротоме «Микром», толщина среза 5-10 микрон. Исследования проводились методом световой микроскопии на микроскопе «Никон Эклипс» Е-200 с цифровой видеокамерой.

Исследования мочи проводили у группы собак с почечной недостаточностью.  Исследования проводили на основные физические и химические показатели по общепринятым методикам.

Рентгенологическое исследование проводилось в группе щенков с мальабсорбцией и у собак с выраженной костной патологией в группе с хроническими болезнями почек. 

Ультразвуковую диагностику проводила в группе собак с хроническими болезнями почек для подтверждения диагноза на ультразвуковом диагностическом приборе - эхотомоскопе «РАСКАН» ЭТС-Д-05.

За полный период исследований нами не было подвергнуто эвтаназии с экспериментальной целью ни одно животное. Патологический материал для гистологических исследований отбирали у животных, умерших естественным путем или после эвтаназии по просьбе владельцев.

Результаты собственных исследований

Проведение  биохимического скриннинга  у собак с хроническими болезнями почек. Нами было обследовано 138 собак (опытная группа) разных пород в возрасте от 5 до 11 лет с  нарушениями почечной функции. Критерий включения в опытную группу  – установленный диагноз хроническая почечная недостаточность. Основными симптомами для отбора животных служили клинические проявления; полиурия, полидипсия,  снижение аппетита, прогрессирующая кахексия. В сыворотке  крови этих животных отмечались повышение содержания уровней мочевины, креатинина, щелочной фосфатазы, неорганического фосфора; концентрация общего кальция находилась на нижней границе нормы или была снижена.

У этих  собак  дополнительно определяли уровень паратиреотропного гормона, кальция,  фосфатов, ионизированного кальция,  костной фракции щелочной фосфатазы  и витамина Д в сыворотке крови. Контрольная группа включала 20 клинически здоровых животных такой же возрастной категории с показателями крови, находящимися в пределах референтных значений, характерных для данного вида.

Для определения динамики развития вторичного гиперпаратиреоза с прогрессированием почечной недостаточности, обследуемых собак мы разделили на 4 группы, соответствующие стадиям заболевания  (почечной недостаточности) в зависимости от уровня креатинина в сыворотке крови. К первой группе относятся собаки с уровнем креатинина 149-192 , ко второй группе – 193-250, к третьей – 250-340, к четвертой – более  341мкмоль/л.

У собак с разными стадиями ХПН не наблюдалось одинаковой клинической картины уремических проявлений, зависящих от стадии заболевания. Тем не менее, тенденция к ухудшению общего состояния на более поздних стадиях почечной недостаточности была очевидна. Кроме того мы наблюдали нарушения со стороны опорно-двигательного аппарата.

Клинические проявления,  связанные с патологическими процессами в опорно-двигательном аппарате собак с хроническими болезнями почек, вызваны  развитием вторичного  почечного гиперпаратиреоза. Примером таких проявлений служит фиброзно-кистозный остеит в костях,  не несущих нагрузки. У собак встречается достаточно редко, тем не менее в наших исследованиях описаны два случая остеодистрофии  костей черепа у собак.

Для оценки нарушения кальций-фосфорного обмена и метаболических изменений в костной ткани определяли следующие лабораторные показатели: уровни кальция, фосфора, общей щелочной фосфатазы и ее костного изофермента в сыворотке крови.

У собак с 1  стадией почечной недостаточности средние значения уровня кальция, фосфора и отношения Са/Р мало отличаются от контрольной группы и не выходят за границы референтных значений данного вида животных. У собак со 2 и 3 стадиями ХПН наблюдается снижение уровня кальция и повышение концентрации фосфора в крови, максимальные нарушения обмена кальция и фосфора наблюдаются у собак с  4  степенью ХПН. Отношение кальция к фосфору менялось в обратную сторону относительно нормы. Сравнительная характеристика состояний кальций-фосфорного обмена указывает на достоверно высокий уровень фосфора и низкий уровень кальция у собак с 4 степенью почечной недостаточности по сравнению с 1 степенью (р< 0,01; р< 0,001). Так же достоверно различаются показатели кальция и фосфора у собак с почечной недостаточностью разных стадий относительно группы здоровых животных.

Согласно нашим исследованиям, интенсивность костного обмена возрастает с увеличением тяжести почечной недостаточности. Уровень ЩФ у собак с 1 стадией почечной недостаточности превышает показатели референтных значений на 17,28 % , со 2 стадией – на 36,60 %, с 3 стадией – на 80,33 % и с 4 стадией – на 107,77 %. Референтные показатели для ЩФ в наших исследованиях составляют до 90 Е/л. Уровень КЩФ у собак с 1 стадией почечной недостаточности не превышает показатели референтных значений, со 2 стадией превышает референтные показатели на 21 %, с 3 стадией – на 114,6 %, с 4 стадией на 150,9 %. Референтные значения для КЩФ в наших исследованиях составили 2,9 – 10,6 мкг/л.  При сравнительной оценке ЩФ и КЩФ собак с 1 стадией почечной недостаточности и контрольной группой мы получили значения, которые существенно ниже критерия Стьюдента, что говорит об отсутствии значимой разницы между выборками. Таким образом, у собак с 3 и 4 стадиями почечной недостаточности скорость костного ремоделирования повышена, на что прямо указывают сопряженное увеличение маркеров метаболизма костей и косвенно – клинические проявления этого процесса.

Исследование развития вторичного гиперпаратиреоза у собак с почечной недостаточностью. Для изучения развития вторичного гиперпаратиреоза  у собак на разных стадиях  почечной недостаточности мы изучали функциональное состояние паращитовидных желез. Для этого мы определяли уровень паратиреотропного гормона и ионизированного кальция в сыворотке крови.

Таблица  1 - Функциональное состояние паращитовидных желез у собак с хронической почечной недостаточностью разных стадий

Параметры исследования

I стадия

2стадия

3 стадия

4 стадия

Контрольная

группа

Ионизированный кальций, ммоль/л

1,188±0,058

1,092±0,094*

0,996±0,120*

0,906±0,119***

1,345±0,064

ПТГ, пммоль/л

11,605±2,960

15,86±4,510*

27,34±9,010*

37,02±11,981**

6,17±2,932

Примечание: * р< 0,05;  ** р< 0,01;  *** р< 0,001 по отношению к контрольной группе.

Из приведенных табличных данных видно, что концентрация паратиреотропного гормона в крови собак с хронической почечной недостаточностью возрастает по мере ее прогрессирования. Уровень паратиреотропного гормона в крови собак с 4 стадией почечной недостаточности статистически значимо выше, чем у собак с 1 стадией (р< 0,001) и контрольной группы  (р< 0,001). Уровень ионизированного кальция значительно ниже у собак с  4 стадией по сравнению с собаками на 1 стадии заболевания (р<0,05).  Не выявлено достоверно значимых различий в уровнях ионизированного кальция и ПТГ у собак с 1 стадией почечной недостаточности по сравнению с контрольной группой. Концентрация ионизированного кальция в крови собак с почечной недостаточностью  снижается по мере прогрессирования заболевания.

При сравнительном анализе  лабораторных показателей собак с разными стадиями почечной недостаточности  обнаружены статистически значимые различия в показателях ПТГ в крови. В связи с этим в каждой группе животных был проведен  анализ уровня паратиреотропного гормона.  У собак с 1 стадией почечной недостаточности (n= 19)  повышение концентрации ПТГ более чем на 40 % от референтных значений (2-13 пммоль/л ) наблюдалось у 2 животных, что составило 10 %  в группе. У собак со 2 стадией почечной  недостаточности (n = 28 ) повышение концентрации ПТГ более чем на 50 % отмечено у 8 животных  - 28,5 % в группе. У собак с 3 стадией почечной недостаточности (n=55) повышение концентрации ПТГ более чем на 70 % отмечено у 34 собак и составило 61,8 % в группе. У собак с 4 стадией почечной недостаточности (n=36) повышение концентрации ПТГ более чем на 90 % от референтных значений отмечено у 28 собак и составило 77,7 % в группе. 

Результаты сравнительного анализа уровней ПТГ и ионизированного кальция у собак на 1-4 стадиях почечной недостаточности приведены в табл. 2.

Таблица  2 -  Сравнительный анализ уровней ПТГ и ионизированного кальция у собак на 1-4 стадиях почечной недостаточности

Показатель

1 стадия

2 стадия

3 стадия

4 стадия

ГПТ+

n=2

ГПТ –

n =17

ГПТ +

n =8

ГПТ –

n =20

ГПТ +

n =34

ГПТ –

n =21

ГПТ +

n =28

ГПТ –

n =8

Ионизированный кальций, ммоль/л

1,075± 0,021**

1,202± 0,044

0,970 ±0,050*

1,142 ±0,053

0,918 ±0,084*

1,123 ±0,014

0,870 ±0,111

1,090 ±0,019

ПТГ, пммоль/л

18,610

±0,841***

10,78

±1,722

21,27

±1,526***

13,201

±1,680

32,91±

6,880***

18,311

±1,570

41,410

±9,750*

21,360

±1,851

Примечание::  +  повышенный уровень ПТГ в крови; - уровень ПТГ в пределах референтных значений; *р<0,05,  **р< 0,01, ***р< 0,001  .

Полученные результаты подтверждают  достоверность высказываний  о повышении частоты выраженности и встречаемости ВГПТ по мере прогрессирования хронической почечной недостаточности (Кузина Н.Ю., 2008; Волгина Г.В., 2009 и др.).

Оценка влияния гиперпаратиреоза на состояние кальций-фосфорного обмена и интенсивности костного метаболизма осуществлялась путем проведения сравнительного и корреляционного анализа между животными с гиперпаратиреозом и нормальным уровнем ПТГ в крови.

В табл. 3 приведены результаты  корреляционного анализа между уровнем ПТГ и концентрацией кальция и фосфора в крови собак на разных стадиях почечной недостаточности.

Таблица 3  - Коэффициент корреляции (r) между уровнем ПТГ и концентрацией кальция и фосфора в крови собак на разных стадиях почечной недостаточности

Параметр

  Коэффициент корреляции, r

ХПН I  стадии n= 2

ХПН II стадии n = 8

ХПН  III стадии n = 34

ХПН IV стадии n =28

Кальций

----

0,38

-0,04***

-0,13***

Фосфор

-----

0,01

0,06***

0,02***

Примечание: *** р<0,001

Посредством корреляционного анализа установлена прямолинейная отрицательная связь между паратиреотропным гормоном и уровнем общего кальция крови у собак с 3-4  стадиями почечной недостаточности.

Для определения активности костного метаболизма мы использовали показатели КЩФ как основного маркера и ЩФ – как дополнительного. Анализ показателей маркеров костного метаболизма  у собак на разных стадиях почечной недостаточности с «ГПТ+» и «ГПТ-» выявил, что значения КЩФ отличались у животных в группах с «ГПТ+» и «ГПТ-». Так, у собак с «ГПТ-» в 1 стадии почечной недостаточности уровень КЩФ был несколько выше, чем у собак в контрольной группе, тем не менее практически не превышал референтные значения характерные для данного вида. Не наблюдалось статистически значимых различий в показателях КЩФ у собак с« ГПТ+» и « ГПТ-» (р<0,01) на I стадии хронической почечной недостаточности.  Животные со 2, 3, 4 стадиями почечной недостаточности  показывали более интенсивное повышение КЩФ в сыворотке крови  в группе « ГПТ+» по сравнению с « ГПТ-». Уровень щелочной фосфатазы  в сыворотке крови был статистически значимо выше  у собак в группе « ГПТ+ » на всех стадиях хронической почечной недостаточности.

  Коэффициент корреляции между уровнем ПТГ и маркерами костного метаболизма у собак с почечной недостаточностью и ПТГ+ представлен в табл. 4.

Таблица № 4 - Коэффициент корреляции между уровнем ПТГ и маркерами костного метаболизма у собак с почечной недостаточностью и ПТГ+

Параметр

Коэффициент корреляции,r

ХПН  I стадии, n=2

ХПН II стадии, n=8

ХПН  III стадии, n=34

ХПН IV стадии, n=21

ЩФ

-----

0,18

0,34*

0,29

КЩФ

------

0,43*

0,25

0,41*

Примечание: р <0,05

Таким образом,  результаты наших исследований показали, что вторичный гиперпаратиреоз при хронической почечной недостаточности регистрируется на всех стадиях болезни, при этом наибольшее число случаев выявляется на 4 стадии хронической печеночной недостаточности.

Коррекция вторичного гиперпаратериоза  при почечной

недостаточности собак

Терапевтическая коррекция ВГПТ в нашей работе осуществлялась по следующим направлениям:

1. Контроль уровня фосфатов в крови, достигается путем ограничения потребления фосфора с кормом, применением  препаратов, связывающих фосфор.

2. Применение препаратов кальция для коррекции гипокальциемии.

3. Применение активных метаболитов витамина Д.

В качестве фосфатсвязывающих препаратов мы применяли карбонат кальция, в качестве активного метаболита витамина Д - его синтетический аналог «Альфа Д3 Тева». 

У всех животных, получающих лечение карбонатом кальция и «Альфа Д3 Тева», произошло статистически значимое снижение уровня ПТГ в крови. Средняя величина изменений  ПТГ снизилась на 17 % от исходных значений у собак со 2 стадией ХПН, на 16,8 % у собак с 3 стадией и на 22 % у собак с 4 стадией ХПН.

Использование данных  препаратов позволяет сдерживать негативные проявления ВГПТ, осложняющие течение почечной недостаточности, при этом соблюдая экономическую корректность.

Исследование развития вторичного алиментарного гиперпаратиреоза

у щенков с мальабсорбцией

Объектом исследования стали  70 собак разных пород в возрасте от 3 до 7 месяцев с синдромом мальабсорбции (исследуемая группа) и 15 здоровых животных той же возрастной категории (контрольная группа).  Важно отметить, что у обследуемых  нами собак,  патологические процессы в кишечнике носили хронический характер и часто сопровождались нарушениями со стороны опорно-двигательного аппарата, что побудило нас к изучению вторичного алиментарного гиперпаратиреоза. Для выявления ВГПТ был проведен лабораторный скрининг  показателей ионизированного кальция, ПТГ, витамина Д, ЩФ и КЩФ в крови молодых собак с нарушением пищеварения.  Полученные результаты отражены  в табл. 5.

Таблица 5 -  Содержание ионизированного кальция, КЩФ, ЩФ, витамина Д и ПТГ в крови здоровых и с мальабсорбцией щенков

Группа животных

Щенки с мальабсорбцией

(n =70)

Здоровые щенки

(n =15)

Референтные значения для группы

Исследуемый параметр

Ионизированный кальций, ммоль/л

1,110±0,111

1,360±0,052*

1,240-1,451

Витамин Д, мкг/л

0.0278±0,0081

0,0306±0,0056

0,022-0,040

ПТГ, пмоль/л

12,150±7,280

4,810±1,390

2.5-13

КЩФ

13,80±6,49

7,60±1,99

2,9-10,6

ЩФ, Е/л

108,0±25,1

78,8±9,7

До 90,0

Примечание: *р0,05

Анализ полученных результатов показал, что у щенков с мальабсорбцией уровень ионизированного кальция в крови ниже, чем у щенков контрольной группы. Уровни ЩФ, КЩФ  и ПТГ незначительно превышают верхние границы референтных показателей,  при этом следует отметить большую вариабельность показателей в группе исследуемых животных. Уровень витамина Д находится в пределах показателей, характерных для данного вида животных. Большой разброс исследуемых параметров в опытной группе, не дает объективно оценить статистическую достоверность и корелляционные связи исследуемых параметров. Поэтому для  оценки влияния мальабсорбции на развитие вторичного гиперпаратиреоза  мы проводили дисперсионный анализ с последующим определением  критерия достоверности Фишера - F. Полученные данные показывают, что степень влияния синдрома мальабсорбции на  уровень ионизированного кальция составляет 61 % (=0,61).Степень влияния синдрома мальабсорбции на уровень паратиреотропного гормона в крови составляет  2=0,099, что соответствует 9 %, Р>0,95 (критерий Фишера).Степень влияния мальабсорбции на уровень ЩФ составляет 81 % (=0,81), р>0,95 (критерий Фишера), степень влияния мальабсорбции на уровень КЩФ составляет 73 % (=0,73 ), р>0,99 (критерий Фишера).

Проведенные нами исследования показали, что встречаемость вторичного алиментарного гиперпаратиреоза в группе щенков с синдромом мальабсорбции составляет 9 %.  Основным нарушением,  приводящими к патологии опорно-двигательного аппарата у молодых собак с синдромом мальабсорбции, является гипокальциемия.

Коррекция  вторичного гиперпаратиреоза и нарушений минерального обмена направлена на устранение вызывающих их причин.

  Морфологические изменения в паращитовидных железах  и

костной ткани при вторичном гиперпаратиреозе

В данной работе  нами был изучен гистологический материал от 13 животных со ВГПТ, павших в процессе наблюдения. У 8 исследуемых собак павших в результате осложнений, связанных с хронической почечной недостаточностью, наблюдалась диффузная  гиперплазия всех паращитовидных желез. У 1 собаки наблюдали увеличение одной паращитовидной железы, у 4 животных видимых изменений в размере паращитовидных желез. не наблюдали.

Для изучения  морфологических изменений макропрепараты паращитовидных желез подвергали гистологическому исследованию. Гистологическая структура характеризовалась признаками усиленной пролиферативной активности клеток паренхимы, увеличением количества этих клеток, гиперхроматозом ядер. Патологические изменения  в паращитовидных железах были обнаружены  в 9 из 13 случаев, что составило 69,7 %. Такой высокий процент встречаемости измененных желез объясняется тем, что практически все  павшие  собаки входили в группу с четвертой стадией почечной недостаточности.

На рис. 1 показана  гистограмма аденомы паращитовидной железы,  состоящей из главных клеток полигональной формы с выраженным полиморфизмом, образующие крупные солидные поля.  Отчетливо наблюдается ободок соединительной ткани и скопления стромальных жировых клеток.

Рисунок 1 - Аденома паращитовидной железы собаки  с хронической почечной недостаточностью и установленным вторичным гиперпаратиреозом.. Ув. х 600, окраска гематоксилин-эозином

Остеопорозные изменения, сочетанные с  аденоматозной гиперплазией паращитовидных желез,  верифицированы у 4 (44 %) из 9 собак. У остальных животных костная ткань соответствовала возрастным категориям на момент смерти.

На рис. 2  приведена гистограмма фрагмента костной ткани лучевой кости собак с хронической почечной недостаточностью и установленным диагнозом вторичный гиперпаратиреоз.

Отмечается выраженный остеопороз, сопровождающийся уменьшением толщины кортикальной пластинки, разрежением рисунка костных балок и истончением трабекул губчатой кости.

Рисунок 2 Фрагмент декальцинированной лучевой кости собаки. Увеличение  х150, окраска гематоксилин-эозин

Таким образом, результаты наших исследований показали, что при ВГПТ происходят морфологические изменения в структуре паращитовидных желез и костной ткани.

ВЫВОДЫ

1. Хроническая почечная недостаточность и синдром мальабсорбции являются причиной развития вторичного гиперпаратиреоза у собак.

2).  У собак вторичный  гиперпаратиреоз, сопряженный с почечной недостаточностью,  наблюдается чаще, чем у собак с мальабсорбцией и составляет 51,2 % от общей группы.

3.  По мере прогрессирования почечной недостаточности повышается  выраженность и встречаемость ВГПТ (1 стадия -10 %, 2 стадия - 28,5 %, 3 стадия  - 61,8 %, 4 стадия  - 77,7 %).

4. Коррекция ВГПТ, вызванного почечной недостаточностью, осуществляется путем введения в курс лечения активных метаболитов витамина Д и фосфатсвязывающих препаратов.

5. ВГПТ у собак характеризуется сопряженным увеличением уровня паратиреоидного гормона, сниженным уровня ионизированного кальция и повышенной скоростью костного метаболизма. Маркерами костного метаболизма, отражающими глубину нарушений, являются щелочная фосфатаза и ее костный изофермент.

6. Мальабсорбция у щенков в активной фазе роста может привести к нарушению в формировании опорно-двигательного аппарата, связанного с гипокальциемией.  Встречаемость вторичного гиперпаратиреоза у  щенков с синдромом мальабсорбции в исследуемой группе составила  9 %.  Развития гиповитаминоза Д у щенков с синдромом мальабсорбции в наших исследованиях не наблюдали.

7. Коррекция ВГПТ у щенков с  синдромом мальбсорбции и нарушением в работе опорно-двигательного аппарата направлена на устранение причин ее вызывающих.

8. Гиперплазия и аденома околощитовидных желез отражают тяжесть  течения вторичного гиперпаратиреоза и коррелируют с высокими  уровнями  паратиреотропного гормона, щелочной фосфатазы и костной щелочной фосфатазы в сыворотке крови.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании выше изложенного предложены практические рекомендации.

1. Для выявления ВГПТ у собак с хроническими болезнями почек  рекомендуется  проведение  биохимического и гормонального  скрининга.

2. При  лечении хронической почечной недостаточности необходимо учитывать воздействие на организм паратиреотропного гормона.

3. При исследовании глубины метаболических изменений в костной ткани рекомендуем использовать маркер костеобразования – костный фермент щелочной фосфатазы.

4. Введение в курс ветеринарной диагностики и хирургии мелких домашних животных изучения проблем, связанных с вторичным гиперпаратиреозом.

Список научных работ, опубликованных по теме

1. Марюшина Т. О. Использование препаратов паращитовидной железы при лечении нарушений опорно-двигательного аппарата у собак/ Т.О. Марюшина //Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции. Материалы 4-й Международно-практической конференции, М., 2002. – С. 207-208.

2. Марюшина Т. О. Применение препаратов POIIDEX® «Поливит-Кальций плюс», «Гелабон плюс», «Глюкогекстрон» в профилактике и лечении заболеваний опорно-двигательного аппарата у собак / Т.О. Марюшина, М.В.  Матвеева // Ветеринарный доктор. -  июнь 2009. - С . 19-20.

3. Марюшина Т.О. Нарушение кальций-фосфорного обмена у щенков крупных пород и методы коррекции их лечения /Т.О. Марюшина, М.В. Матвеева, В.И. Луцай, Г.М. Крюковская //Ветеринарная практика. – 2010.- № 4.- С. 42-46.

4. Марюшина Т.О. Профилактика и лечение воспалительных и дегенеративных изменений суставов у кошек /Т.О.Марюшина, М.В. Матвеева, Г.М. Крюковская// Ветеринарный доктор. -  февраль 2010. – С.21-22.

5. Марюшина Т. О. Вторичный гиперпаратиреоз при хронической почечной недостаточности у собак /Т.О. Марюшина, Б.В.Уша , В.И. Луцай// Российский ветеринарный журнал. - 2011. - № 3.- С. 19-21.

6. Марюшина Т.О. Изменение морфологии эритроцитов коз после торакального вмешательства на реберном каркасе / Т.О. Марюшина, В.И. Луцай, М.В. Матвеева, Г.М. Крюковская // Ветеринарная практика.- 2011.- № 3 (54).- С. 20-25.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

1. ВГПТ вторичный гиперпаратиреоз

2. ЖКТ желудочно-кишечный тракт

3. ГПТ гиперпаратиреоз

4. КЩФ костная щелочная фосфатаза

5. ПГПТ первичный гиперпаратиреоз

6. ПТГ паратиреотропный гормон

7. ПЩЖ паращитовидные железы

8. Р неорганический фосфор

9. Са общий кальций

10. Са2+ - ионизированный кальций

11. СКФ скорость клубочковой фильтрации

12. ХПН хроническая почечная недостаточность

Список принятых сокращений

ХПН - хроническая почечная недостаточность

ПТГ паратиреотропный гормон

ВГПТ вторичный гиперпаратиреоз

ПГПТ первичный гиперпаратиреоз

ГПТ - гиперпаратиреоз

ПЩ  (ОЩЖ) паращитовидные (околощитовидные) железы

Са - кальций

Са2+ - ионизированный кальций

ЩФ щелочная фосфатаза

КЩФ костная щелочная фосфатаза

Р фосфат

УЗИ ультразвуковое исследование

ЖКТ желудочно- кишечный тракт

СКФ скорость клубочковой фильтрации




© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.