WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


 

На правах рукописи

Орехова Ольга Николаевна

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА АНТИГИПОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ И ПРЕПАРАТА ПЕРФТОРАН НА ПАТОГЕНЕЗ ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ АНЕМИИ У СОБАК

16.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и  морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Москва - 2012

Работа выполнена на кафедре «Незаразные болезни» ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств», Министерства образования и науки РФ

Научный руководитель: Концевая Светлана Юрьевна

доктор ветеринарных наук, профессор

(ФГБОУ ВПО МГУПП)

Официальные оппоненты:  Ватников Юрий Анатольевич

доктор биологических наук, профессор,

(ФГБОУ ВПО РУДН)

Квочко Андрей Николаевич

доктор биологических наук, профессор,

(ФГБОУ ВПО СтГАУ)

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО "Уральская государственная академия 

   ветеринарной медицины" (г. Троицк)

Защита состоится  ________________ в  _____  на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.148.09 при ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств», по адресу: 109316, г. Москва, ул. Талалихина, д.33, в конференц-зале.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств».

Автореферат разослан  __________ 2012 года

Автореферат размещен на официальном сайте Министерства образования и науки РФ http://vak.ed.ru/ _____________ 2012 года

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор ветеринарных наук, профессор Андрианова Т.Г. 

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время практикующие ветеринарные специалисты все чаще выявляют анемию у животных с различными патологиями, когда диагностический поиск не выявляет у них симптомов, которые могли бы характеризовать это явление как самостоятельное заболевание. Такие формы анемии возможны при наиболее часто встречающихся у животных заболеваниях, в связи с чем их называют вторичными, симптоматическими, указывая на значимость основного заболевания в их патогенезе (Брюсов П.Г., 1997).

Чаще симптомы основного заболевания превалируют в клинической картине, но иногда снижение уровня гемоглобина является ранним признаком начала развития сопутствующей анемии (Дементьева И.И., 1998) и может способствовать распознаванию тяжелых синдромов.

В ряде одних случаев анемия становится ведущим симптомом скрыто протекающего заболевания. В ряде других случаев наблюдают прямую связь между степенью нарастания малокровия и тяжестью основного заболевания. Малокровие, развившееся на фоне основного заболевания, чаще всего не требует специальной корригирующей терапии, так как лечение уже направлено на ядро патологии (Новожилова Т.А., 2005, Медведева И.А., 2007). В каждом конкретном случае необходимы уточнение патогенеза анемии и дифференциальная диагностика истинной анемии.

Однако анемия приводит к гипоксии тканей и ее развитие при различных заболеваниях способствует ухудшению прогноза. Таким пациентам необходима лекарственная коррекция малокровия для достижения более быстрого, ярко выраженного и долговременного терапевтического эффекта.

Зачастую подобные состояния организма требуют незамедлительного переливания донорской крови с целью возмещения частично утраченной газотранспортной функции крови в связи с разрушением эритроцитов и падением гемоглобина (Остапченко Д.А., 2000). Однако проведение гемотрансфузии  далеко не всегда возможно из-за отсутствия подходящей донорской крови или при наличии у больного животного противопоказаний к данному методу терапии. Именно поэтому  ветеринарными специалистами продолжается поиск альтернативных методов заместительной терапии у животных  с гемолитической анемией. В настоящее время представляет большой интерес исследование кровезаменителей – переносчиков кислорода, способного в условиях дыхания реципиента газовой смесью, обогащенной кислородом, выполнять одну из важнейших функций крови – дыхательную, которая резко нарушается при различных экстремальных состояниях организма, в том числе и при гемолитической анемии. В препарате Перфторан материализовались компромиссные решения многих физико-химических и биологических проблем. Несмотря на то, что в широкой ветеринарной практике этот препарат используется сравнительно недавно, первые  научно-исследовательские эксперименты по изучению свойств Перфторана проводились именно на собаках.

Ряд исследователей отметили влияние Перфторана на микроциркуляцию и гемокоагуляцию, проявляющееся в улучшении реологических свойств крови за счет снижения ее вязкости, предотвращения агрегации и адгезии эритроцитов, стимуляции фибринолитической активности, что способствует профилактике тромбофилии. Реологические свойства крови в норме и при патологии определяются функционально структурным состоянием эритроцитарной мембраны и составом плазмы крови, определяющих вязкость крови и плазмы, деформационные и агрегационные свойства клеточных элементов. Расстройства микроциркуляторной гемодинамики и связанные с ними нарушения регионарного кровообращения неблагоприятно отражаются на функциях всех органов и систем, что отягощает течение основного заболевания.

Преимущества Перфторана перед другими трансфузионными средами следующие: а) отсутствие проблем, связанных с групповой несовместимостью; б) отсутствие иммунологического конфликта; в) отсутствие опасности заражения вирусными инфекциями; г) длительная циркуляция препарата в крови с сохранением газотранспортной функции; д) возможность длительного хранения и массового производства.

Вышеизложенное послужило для нас основанием для включения кровезаменителя Перфторана в схему инфузионно-трансфузионной терапии при лечении гемолитических анемий различной этиологии. И это позволило в кратчайшие сроки предотвратить развитие гипоксии и последующие за ней другие осложнения.

Цель и задачи исследования. Целью нашей работы явилось повышение эффективности лечения и реабилитации собак с гемолитической анемией, а также проведение сравнительной оценки антигипоксического действия цельной крови и препарата Перфторан на патогенез данной патологии.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Определить эффективность  препарата перфторан при гемолитической анемии у собак, исследовать его влияние на гематологические показатели крови и клиническое состояние организма. 

2. Установить эффективные и переносимые дозы вливания перфторана собакам с гемолитическими анемиями.

3. Исследовать влияние инфузий перфторана на газотранспортную функцию крови и ее кислотно-основного состояния.

4. Разработать и внедрить в клиническую практику схемы применения перфторана при гемолитической анемии у собак различной этиологии.

5. Провести сравнительную оценку антигипоксического действия цельной крови и препарата перфторан на патогенез гемолитической анемии у собак.

Научная новизна работы. Впервые в ветеринарной практике проведены клинические исследования физико-химических и биологических свойств Перфторана на патогенез гемолитической анемии различной этиологии у собак. Показано положительное влияние инфузии Перфторана на биохимический гомеостаз при гемолитической анемии.

Теоретически обоснована и клинически подтверждена высокая лечебная эффективность Перфторана при лечении гемолитической анемии у собак.

Впервые в ветеринарной практике определены эффективные и переносимые собаками дозы инфузий перфторана для коррекции анемического состояния.

Научно-практическая значимость. Клинико-морфологические эффекты и некоторые преимущества Перфторана перед цельной кровью  вносят вклад в представления о методах заместительной терапии при гемолитической анемии у собак. Результаты, выявленные в диссертационной работе, имеют определенное значение для практикующих ветеринарных специалистов, так как могут быть использованы для лечения гемолитической анемии у собак, что позволяет избежать осложнений, сопутствующих данной патологии. Широкое применение перфторуглеродов среди больных собак с гемолитической анемией позволит значительно улучшить качество жизни и снизить показатели смертности, связанные с развитием осложнений данного синдрома и расширяет возможности комбинированной терапии при этой патологии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Клинические исследования физико-химических и биологических свойств перфторана показывают положительное влияние на патогенез гемолитической анемии различной этиологии у собак.

2. Применение Перфторана значительно улучшает гематологические, гемодинамические показатели крови, способствует оптимизации газообмена, кислотно-основного состояния крови, происходит быстрая ликвидация развивающегося ацидоза в условиях высокой кислородной задолженности организма.

3. Переливание Перфторана эффективно при гемолитической анемии у собак, так как он обеспечивает доставку кислорода к тканям и имеет ряд преимуществ перед переливанием цельной крови.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены на:

- заседании кафедры незаразных болезней ФГОУ ВПО МГУПБ 2009г.;

- Всероссийской конференции по вопросам онкологии и анестезиологии мелких домашних животных ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина  12-13 марта  2011г.;

- студенческой конференции, июнь 2011г.;

- научно-практическая конференция по актуальным вопросам ветеринарии Хакасского ГАУ, февраль 2012 г.;

- международной научной конференции Стратегия естественнонаучного образования, проводимой Российской Академией Естествознания 28 июля-4 августа  2012г., Испания-Франция;

- II Международном конгрессе ветеринарных фармакологов и токсикологов в г. Санкт-Петербурге 22-24 мая 2012 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов по кандидатским диссертациям.

Личный вклад автора. Представленная диссертационная работа является результатом четырехлетних научных исследований аспиранта. Основная экспериментальная часть исследований выполнена автором лично. Работа выполнялась под руководством доктора ветеринарных наук, профессора кафедры незаразных болезней ФГБОУ ВПО «МГУПП» С. Ю. Концевой, которая оказывала научно-методическую помощь в проведении исследований и анализе полученных результатов. Также выражаем огромную благодарность  академику РАСХН, доктору ветеринарных наук, профессору ФГБОУ ВПО «МГУПП» Б.В. Уша за консультации и помощь в проведении экспериментов. Во всех совместных публикациях личный вклад автора составляет не менее 80%.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из общей характеристики работы, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, приложений. Работа изложена на 144 страницах компьютерного набора, иллюстрирована 10 таблицами и 21 рисунками. Список литературы включает 162 источника, в том числе 42 иностранных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследований

Работа выполнялась с 2008  по 2012 годы на базе ветеринарной клиники «Центр» и кафедры «Незаразные болезни» ФГБОУ ВПО «Московского государственного университета пищевых производств».

Всего в экспериментах был использован материал, полученный от 60 животных с различными заболеваниями, сопровождаемые гемолитической анемией.

Возраст животных составил от 3 до 13 лет, средний возраст – 7,6±2,3 лет (2,3 – выборочное стандартное отклонение).

Количество особей с монозаболеванием, сопровождающимся гемолитической анемией, составило 33 (55%), а с сочетанными – 27 (45%).

Обследование начинали с осмотра пациента, при котором оценивали габитус, состояние шерсти, кожных покровов и слизистых оболочек, проводили аускультацию грудной и пальпацию брюшной полостей. После физикального переходили к инструментальным методам обследования.

Производился общий клинический анализ крови, включавший определение гемоглобина, гематокрита, количества эритроцитов, а также описание мазка крови в отношении морфологии эритроцитов. Окраска мазков производилась по Романовскому-Гимзе (рис.1, 2, 3).

Рис. 1. Гемолитическая анемия, развивающаяся вследствие пироплазмоза.

Рис. 2. Гемолитическая анемия, развивающаяся вследствие хронической почечной недостаточности

Рис. 3. Гемолитическая анемия, развившаяся вследствие острого отравления

Микроскопию мазков проводили под увеличением  UPlanFl 100х/1.30 Oil iris JAPAN.

Подсчет красных клеток крови, концентрация гемоглобина, гематокрит, эритроцитарные индексы: средний объем клетки, средний клеточный гемоглобин и средняя клеточная концентрация гемоглобина  выполнялись с помощью автоматизированного счетчика IDEXX ProCyte DxTM

Для определения КОС, газов крови, лактата и аммиака мы использовали венозную и артериальную кровь. Взятие крови производили в гепаринизированные капилляры, прилагаемые к прибору Osmetech OPTITM CCA-TS Blood Gas Analyzer фирмы OSME FCH Critical Care.

Поскольку все показатели КОС тесно коррелируют друг с другом, при анализе буферных систем мы ориентировались на pH крови, стандартный бикарбонат плазмы, сдвиг буферных оснований (ВЕ).

Содержание ионов водорода [H+] в плазме крови в основном определяется соотношением между парциальным давлением углекислого газа (PaCO2) и анионами бикарбоната (HCO3-). Это соотношение можно выразить следующим уравнением:

H+ (мЭкв/л) = 24 (PaCO2 / HCO3-).

Изменение концентрации водородных ионов на 1 мЭкв/л приводит к изменению pH на 0,01. концентрация ионов водорода во внеклеточной жидкости поддерживается в узком диапазоне –  36 – 43 ммоль/л (что соответствует pH 7,33-7,43), конечной целью организма является поддержание pH в пределах этих значений, так как при них происходит большинство ферментативных реакций в клетках.

pH крови определяется уравнением Henderson-Hasselbalch:

pH = 6,1 + Ig [HCO3 - ]/(PaCO2 0,03).

При определении содержания электролитов и бикарбоната традиционно используют пробы венозной крови, а для измерения рСО2, pH и рО2 – артериальной. В норме физиологические показатели венозной крови прямо зависят от КОС тканей, в то время как артериальная кровь отражает в большей степени газообмен в легких. Однако, у больных животных, находящихся в критических состояниях, венозная кровь может и не отражать КОС тканей, что обусловлено действием микроциркуляторных шунтов, направляющих кровь мимо тканей с активным метаболизмом.

Взятие пробы артериальных и венозных газов крови осуществляется путем однократной пункции периферической артерии или вены, либо из постоянно установленного артериального или венозного катетера. Наиболее удобным местом для проведения пункции по ряду причин традиционно считается лучевая артерия или вена. Для большинства современных газоанализаторов достаточно 0,2-0,3 мл крови.

Для поддержки адекватного уровня газов крови необходимо каждые несколько часов (4-6) выполнять газометрические исследования. Однако, проводя их каждые 60 минут, что вызвало бы значительную потерю крови на одни только анализы (возможная анемизация пациента), не будем знать, что делается с этими параметрами между исследованиями. Чтобы расширить во времени сведения об оксигенации крови и парциальном давлении двуокиси углерода, а также иметь возможность вовремя корригировать их нарушения, мы осуществляли  постоянный контроль неинвазивной методикой – пульсоксиметрией..

Работа пульсоксиметра основана на способности гемоглобина связанного (HbO2) и не связанного с кислородом (Hb) абсорбировать свет различной длины волны. Измеряя разницу между количеством света абсорбируемого во время систолы и диастолы, пульсоксиметр определяет величину артериальной пульсации (рис. 4).

.

Рис. 4. Проведение пульсоксиметрии собаке Корнелии, породы пудель, возраст 8 лет с диагнозом хроническая почечная недостаточность и хронический гепатит, сопровождающиеся гемолитической анемией. ИБ №10653, ИРК №50

Накопление молочной кислоты (лактат-ацидоз) – традиционный признак анаэробного гликолиза при неадекватной оксигенации тканей (тканевая гипоперфузия – скорость обмена веществ в тканях превышает скорость снабжения их кислородом), что является не первичной патологией, а маркером метаболических нарушений (John M. Lorenz, MD et. al., 1999).

Содержания лактата и аммиака определяли с помощью метода «сухого слайда» на анализаторе VetTest 8008 фирмы IDEXX Europe Technical Support.

Стратификация пациентов

В соответствии с поставленным диагнозом основного заболевания, сопровождающегося наличием гемолитической анемии, пациентов стратифицировали  (разделили на группы) на две группы.

Основная группа (n=30). В группу вошли животные, у которых в классическую схему терапии как метод борьбы с гемолитической анемией и ее последствиями был включен перфторан.

Контрольная группа (n=30). В группу вошли животные, у которых методом борьбы с гемолитической анемией была выбрана гемотрансфузия.

Статистическая обработка результатов выполнена с помощью программы MedCalc для Windows, версия 11.1.1 (MedCalc Software, Mariakerke, Belgium).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Первичные реакции организма на гемолитическую анемию зависят от ее этиологии, скорости разрушения эритроцитов и как следствие снижение гемоглобина и гематокрита и возможности развития анемической комы. Угроза последней возникает при нарушении функции сердечной мышцы, обусловленной повышенной нагрузкой на миокард вследствие уменьшения доставки кислорода к тканям организма. Это в первую очередь связано с потерей эритроцитов или дефицитом глобулярного объема (ГО). Поэтому основным в лечении и профилактике анемической комы при гемолитической анемии является быстрое и качественное устранение нарушений микроциркуляции и реологических свойств крови, восстановление гемодинамики, а также  повышение или восстановление кислородотранспортной функции крови.

Инфузия Перфторана сможет улучшить снабжение тканей кислородом, так как он является уникальным плазмозаменителем с газотранспортной функцией. Кроме того, ПФ, растворяясь в мембране эритроцитов, делает их более эластичными и легко деформируемыми, уменьшая вязкость крови, что улучшает их прохождение через капилляры, а, следовательно, и доставку кислорода тканям. Повышая фибринолитическую активность, снижая концентрацию фибриногена и фактора XIII, Перфторан устраняет последствия внутрисосудистого свертывания крови, т.е. способствует реканализации сосудистого русла. Обладая дезагригационным действием на тромбоциты, ПФ разрушает тромбоцитарные агрегаты, что также способствует реканализации сосудистого русла.

Дозы и способы введения Перфторана. ПФ вводится внутривенно струйно или капельно. Дозы рассчитываются индивидуально, зависят от показателей гемоглобина и гематокрита и варьируются от 2 до 15мл/кг. Возможно повторное введение препарата в той же дозе с интервалом от нескольких часов (при массивном разрушении эритроцитов и острой гипоксии) до 3 дней в зависимости от состояния пациента, результатов от введения предыдущих доз. Перед введением основного количества препарата необходима постановка биологической пробы: после введения первых 5-30 капель ПФ нужно сделать перерыв на 15-20 минут для выявления возможных анафилактоидных реакций. При отсутствии последних можно продолжать вливание в среднем со скоростью 15 капель в минуту. Эффективность действия препарата максимальна, если во время или после инфузии в течение суток больное животное вдыхает смесь, обогащенную кислородом (20%-40%).

Поскольку всем животным основной группы с целью профилактики развития аллергических реакций перед инфузией перфторана вводили внутривенно струйно преднизолон (2 мг/кг) и димедрол (0,05-1мг/кг), побочных реакций зарегистрировано не было.

В контрольной группе перед гемотрансфузией, с целью профилактики развития иммунологического конфликта, также вводили преднизолон и димедрол, однако у некоторых животных все же наблюдались повышение температуры тела до 400С и одышка. Введение жаропонижающих препаратов (анальгин и димедрол) достаточно быстро купировало неблагоприятные признаки.

Изменения гематологических показателей на фоне введения перфторана

В таблицах 1 и 2 представлены данные гематологических показателей у собак в обследованных группах при поступлении в стационар и в динамике лечения. Полученные при первичном обследовании данные свидетельствуют о том, что в обеих группах низкий уровень гемоглобина при гемолитической анемии коррелировал со снижением количества эритроцитов в единице объема крови и гематокритом. 

Таблица 1

Гематологические показатели собак у основной группы

Показатели

Исходные значения

Через 1 час

Через сутки

Через 3-е суток

Эритроциты 1012 /л

3,03±0,07

2,74±0,06

3,22±0,05

4,99±0,06

Гемоглобин г/л

62,3±0,29

60,63±0,24

65,5±0,24

78,05±0,24

Гематокрит %

18,19±0,17

17,76±0,16

20,08±0,09

23,93±0,1

Ретикулоциты %

1,27±0,01

-

2,09±0,04

2,53±0,03

(р<0,05)

Таблица 2

Гематологические показатели собак у контрольной группы

Показатели

Исходные значения

Через 1 час

Через сутки

Через 3-е суток

Эритроциты 1012 /л

3,0±0,08

4,07±0,08

3,82±0,05

4,56±0,06

Гемоглобин г/л

64,95±0,25

70,11±0,24

67,75±0,24

70,96±0,25

Гематокрит %

18,48±0,14

19,16±0,16

18,9±0,16

20,67±0,17

Ретикулоциты %

1,27±0,02

-

1,98±0,04

2,17±0,01

(р<0,05)

Восстановление газотранспортной функции крови Перфтораном в исследуемой группе приводило, однако, и к гемодилюции. В связи с этим, в первые несколько часов после переливания Перфторана, наблюдалось снижение содержания гемоглобина и эритроцитов в крови. Так, содержание гемоглобина крови (Hb) через час после переливания Перфторана снижалось  с 62,3±0,29  до 60,63±0,24 г/л (р<0,05). Однако в последующем в основной группе концентрация Hb имела тенденцию к увеличению и составила на 3-е сутки 78,05±0,24 г/л в основной группе против 70,96±0,25 г/л в контрольной.

Содержание эритроцитов в крови у больных животных, получавших Перфторан, уменьшалось с 3,03±0,07 до 2,74±0,061012 /л (р<0,05). На третьи сутки количество эритроцитов в основной группе составило 4,99±0,061012 /л и 4,56±0,061012/л в контрольной. Также была отмечена тенденция к снижения гематокритного показателя (Ht) крови – с 18,19±0,17%  до 17,76±0,16%. С течением времени, через 3 дня в основной группе он был равен 23,93±0,1%, в контрольной – 20,67±0,17% (р<0,05).

Было отмечено, что ретикулоцитарный криз (компенсаторное увеличение концентрации ретикулоцитов при значительном снижении количества эритроцитов) в основной группе наблюдался на 3-е сутки и проявлялся увеличением числа ретикулоцитов в 1,9 раза относительно исходных значений (1,27±0,01% и 2,53±0,03% соответственно), а в контрольной группе – в 1,7 раза (1,27±0,02% и 2,17±0,01% соответственно). Различия в динамике концентрации ретикулоцитов в основной и контрольной группах определялись меньшими расстройствами микроциркуляции после применения Перфторана, а также улучшением газотранспортной функции крови, способствующей активации обменных процессов в тканях организма, в том числе и в органах кроветворения.

Влияние Перфторана на газотранспортную функцию крови

Нами выявлено отчетливое влияние Перфторана на газообмен крови. С началом инфузий препарата, даже при низкой концентрации гемоглобина (62,3±0,29 г/л в основной группе), отмечено значительное повышение напряжения кислорода в артериальной  крови, что свидетельствует о достаточном ее насыщении кислородом (таблица 3, 4).

Таблица 3

Динамика показателей газотранспортной функции крови у основной группы

Показатели

Норма

Основная группа

Исходные значения

Через 1 сутки

Через 3 суток

M1 ± m1

M1 ± m1

M1 ± m1

PaO2,

мм рт.ст.

80-95

83,67±0,21

153,21±0,26

103,26±0,15

PвO2,

мм рт.ст.

35-49

29,9±0,2

48,8±0,11

47,6±0,15

PaСO2,

мм рт.ст.

35-45

24,49±0,19

34,45±0,09

33,95±0,1

PвСO2,

мм рт.ст.

41-51

26,1±0,2

40,25±0,09

38,83±0,12

Р<0,05 – разница достоверна в сравнении с исходными значениями

При этом выявлено, что процентное содержание кислорода во вдыхаемой смеси от 20% до 40% при переливании Перфторана повышает кислородную емкость крови в 1,5-2 раза.

Через сутки после инфузии Перфторана напряжение кислорода в артериальной крови оставалось на достаточно высоком уровне – 153,21±0,26 мм рт. ст. при вдыхании кислородной смеси на уровне 20%. При переводе больных животных на самостоятельное дыхание, парциальное давление кислорода в артериальной крови уменьшалось в 1,5 раза и равнялось 103,26±0,15 мм рт. ст.  Таким образом, даже малое присутствие в кровеносном русле дополнительных носителей кислорода (частиц перфторуглерода) существенным образом увеличивает РаО2 , что обеспечивает лучшие условия оксигенации тканей.

Таблица 4

Динамика показателей газотранспортной функции крови у контрольной группы

Показатели

Норма

Контрольная  группа

Исходные значения

Через 1 сутки

Через 3 суток

M1 ± m1

M1 ± m1

M1 ± m1

PaO2,

мм рт.ст.

80-95

82,93±0,17

84,63±0,2

83,99±0,21

PвO2,

мм рт.ст.

35-49

30,1±0,19

31,6±0,14

33,3±0,16

PaСO2,

мм рт.ст.

35-45

24,18±0,24

25,98±0,13

25,9±0,1

PвСO2,

мм рт.ст.

41-51

26,5±0,19

33,44±0,17

32,35±0,13

Р<0,05 – разница достоверна в сравнении с исходными значениями

Через сутки после инфузии Перфторана повышалось напряжение кислорода в венозной крови, что можно рассматривать как признак уменьшения гипоксии тканей. Кроме этого, следует отметить, что РвО2 в основной группе не превышало значений физиологической нормы (35-49 мм рт. ст.), при которых осуществляется полноценный газообмен посредством гемоглобина в тканях.

Более полное извлечение тканями кислорода из эритроцитарного гемоглобина в присутствии частиц Перфторана, при одинаковой потребности в условиях доставки, обеспечивалось, скорее всего, за счет его ускоренной диффузии. Другим фактором, определяющим более высокое извлечение кислорода из эритроцитарного гемоглобина в присутствии частиц используемой эмульсии, стало облегчение условий его дезоксигенации за счет снижения сродства Hb к кислороду в силу увеличения РвСО2 крови. Результаты прямого измерения РвСО2  и pH крови показали положительное действие Перфторана в вымывании углекислоты из тканей и транспорте ее к легким.

Основной механизм таких изменений заключается в том, что частицы эмульсии Перфторана, принимая активное участие в транспорте газов крови, увеличивают скорости доставки кислорода к тканям и способствуют быстрой элиминации углекислоты. Однако, R.N. OBrien (1982) показал, что общий массоперенос газов в перфторорганических соединениях намного больше, чем в водной среде при практически одинаковых величинах соответствующих коэффициентов диффузии. Это обусловлено большими значениями констант диффузии Крога для этих газов за счет повышенной их растворимости.

Таким образом, благодаря непосредственному участию Перфторана в доставке кислорода к тканям и ускорению его диффузии из эритроцитов, увеличивается потребление его тканями. в результате влияния Перфторана на ускорение диффузии СО2  из тканей и его элиминацию происходит увеличение напряжения СО2 в крови, что приводит к росту суммарной СО2 венозной крови. Вследствие такого участия Перфторана в транспорте О2 и СО2 наблюдается оптимизация газообмена в условиях высокой кислородной задолженности организма.

Влияние Перфторана на кислотно-основное состояние крови

Гемолитическая анемия, вызванная ею гипоксия, приводит к развитию метаболического ацидоза разной степени выраженности. В наших исследованиях pH крови у животных в среднем составлял 7,27±0,004 в обеих группах,  дефицит оснований (ВЕ) -  -6,78±0,08 ммоль/л в основной группе и -6,89±0,07 ммоль/л в контрольной, бикарбонат плазмы – 19,27±0,16 и 19,2±0,11  ммоль/л в основной и контрольной группах соответственно. Значительное снижение уровня напряжения кислорода в венозной крови свидетельствовало о том, что функции внешнего дыхания и кровообращения приближаются к грани исчерпания компенсаторных возможностей.

Через сутки после начала вливания Перфторана отмечено достоверное увеличение pH крови с 7,27±0,004 до 7,37±0,005 (р<0,05), к концу третьих суток – 7,35±0,004. Дефицит буферных оснований продолжал снижаться значительно быстрее, чем у больных контрольной группы. Так, в основной группе дефицит оснований через сутки от начала инфузии Перфторана составлял -5,75±0,09 ммоль/л. В то же время у больных животных контрольной группы дефицит буферных оснований не имел тенденции к изменению и оставался в пределах -6,83±0,06 ммоль/л.

Бикарбонат плазмы достоверно повышался по сравнению с исходным уровнем, как в основной, так и в контрольных группах. Однако если в основной группе эти показатели были стабильны на протяжении первых суток после начала интенсивной терапии, то в контрольной группе отмечена тенденция к их снижению. Показатели уровня лактата и NH3 также свидетельствовали о более быстрой нормализации кислотно-щелочного гомеостаза организма в основной группе (таблица 5).

Таким образом, использование Перфторана у больных животных с гемолитической анемией значительно улучшает кислотно-основное состояние крови и способствует быстрой ликвидации развивающегося ацидоза.

Таблица 5

Динамика показателей КОС в исследуемых группах

Показатели КОС

Норма

Основная группа

Контрольная группа

Исходные значения

Через сутки

Через 3 суток

Исходные значения

Через сутки

Через 3 суток

pH

7,33-7,43

7,27±

0,004

7,37±

0,005

7,35±

0,004

7,27±

0,004

7,31±

0,003

7,3±

0,003

ВЕ

±2 ммоль/л

-6,78±

0,08

-5,75±

0,09

-2,55±

0,06

-6,89±

0,07

-6,83±

0,06

-6,56±

0,06

НСО3

24-28

Моль/л

19,27±

0,16

22,34±

0,15

23,19±

0,16

19,2±

0,11

22,26±

0,18

22,4±

0,19

NH3

0-95

мкмоль/л

97,7±

0,27

92,6±

0,25

89,31±

0,02

97,4±

0,25

97,54±

0,19

96,72±

0,08

Лактат

0,5-2,5

ммоль/л

2,93±

0,04

2,41±

0,03

2,34±

0,02

3,01±

0,05

2,88±

0,05

2,86±

0,01

ВЫВОДЫ

  1. Применение перфторана при гемолитической анемии у собак как метод борьбы с гипоксией в основной группе улучшает клинические показатели: наполнение пульса и подкожных вен, потепление кожных покровов, происходит ликвидация периферического сосудистого спазма и восстановление диуреза, частота сердечных сокращений (ЧСС) через 30 минут после начала введения перфторана уменьшалась с 144,4±2,16 до 135,9±3,09 уд./мин.
  2. Определены эффективные и переносимые дозы вливания

перфторана собакам с гемолитической анемией, которые рассчитываются индивидуально и зависят от показателей гемоглобина и гематокрита и варьируются от 2 до 15 мл/кг; при массивном разрушении эритроцитов и острой гипоксии возможно повторное введение препарата в той же дозе от нескольких часов до 3 дней в зависимости от состояния пациента и результатов  введения предыдущих доз.

  1. При инфузии перфторана отмечается значительное увеличение напряжения кислорода в артериальной крови (с 83,67±0,21 до 103,26±0,15 мм рт.ст. в основной группе и с 82,93±0,17 до 83,99±0,21 мм рт.ст. в контрольной), что свидетельствует о достаточном ее насыщении кислородом; достоверно способствуют увеличению pH крови с 7,27±0,004 до 7,35±0,004, тогда как в контрольной группе только до 7,3±0,003.
  2. Дефицит буферных оснований уже через сутки после инфузий перфторана снижался с -6,78±0,08 до -5,75±0,09 ммоль/л, а к концу третьих суток уже до -2,55±0,06 ммоль/л, в то время как в контрольной группе снижение буферных оснований не наблюдалось.
  3. Показатели лактата и аммиака в крови животных в основной группе к третьим суткам после начала терапии нормализовывались (с 2,93±0,04 до 2,34±0,02 ммоль/л и с 97,7±0,27 до 89,31±0,02 мкмоль/л соответственно), а в контрольной группе эти показатели оставались практически без изменений.
  4. Сравнительная оценка антигипоксического действия цельной крови и Перфторана на патогенез гемолитической анемии у собак, показала, что Перфторан обладает более ярко выраженными антигипоксическими свойствами, чем цельная кровь.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

  1. Установленное положительное влияние перфторана на кислотно-основное состояние организма рекомендуем использовать как метод борьбы с ацидозом.
  2. Положительное воздействие перфторана на газотранспортную функцию крови рекомендуем использовать как метод борьбы с гипоксией любой этиологии.
  3. Полученные данные могут быть использованы как основа для изучения воздействия на патогенез гемолитической анемии различной этиологии у собак.
  4. Полученные результаты дополняют сведения в области коррекции гемолитических анемий у собак и рекомендуются к использованию в учебном процессе высших ветеринарных вузов и врачебной практике.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Орехова, О.Н. Гемолитические анемии у собак / О. Н. Орехова, С. Ю. Концевая // Сборник материалов научно-практической конференции к юбилею д.в.н., проф. Троева Ю.А. – Улан-Удэ: БГСХА, 2009.  –– с. 38-42.

2. Орехова, О.Н. Некоторые свойства кровезаменителя Перфторан / О.Н. Орехова // журнал Ветеринарный доктор. – 2009. - №11. – С. 9-12.

3. Орехова, О.Н. Эффективность применения Перфторана при анемии различной этиологии / О.Н. Орехова //  Ветеринарный доктор. – 2010. - №1. – С. 15-17.

4. Орехова, О.Н. Определение и коррекция лактат-ацидоза у собак и кошек / О.Н. Орехова // Ветеринарный доктор. – 2010. - №12. – С. 22-25.

5. Орехова, О.Н. Эффективность применения и физико-химические свойства Перфторана у собак, переболевших пироплазмозом / О. Н. Орехова, Б. В. Уша, С. Ю. Концевая  // журнал Ветеринария. – 2012. - № 2. – С. 53-55.

6. Орехова, О.Н. Опыт применения Перфторана при лечении травматизации и прободения пищевода инородными телами у мелких домашних животных / О.Н. Орехова, А.А. Данилова // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2012. - № 7. – С.107-108.

7. Орехова, О.Н. Применение перфторана при гемолитических анемиях различной этиологии у собак / О.Н. Орехова, Б.В. Уша, С.Ю. Концевая // Методические указания к практической работе для студентов по специальности 111801 – Ветеринария. – М.: МГУПП, 2012.









© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.