WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

В реакциях между гемопротеидами и органическими гидропероксидами возникают алкоксильные и алкилпероксильные радикалы, являющиеся интермедиатами свободнорадикального окисления липидов. С другой стороны, при взаимодействии перекиси водорода или органических гидропероксидов с гемопротеидами образуется оксоферрилгем (порфиринСигнал ЭПР, отн.

ед.

FeIV=O), также способный вызывать окислительную модификацию биологически важных молекул. В ряде работ показано, что оксид азота (NO) снижает прооксидантное действие оксоферрилгемопротеидов и восстанавливает их до ферриформы (порфирин-FeШ).

Образование оксоферрилмиоглобина, наблюдалось в системе содержащей метмиоглобин и гидропероксид трет-бутила. Восстановление оксоферрилмиоглобина сопровождалось быстрым снижением концентрации ДНКЖ, которая контролировалась по характерному для динитрозильных комплексов железа сигналу ЭПР (Рис.9).

Рис.9. Кинетика деструкция 0,15 мМ ДНКЖ (по изменению сигнала ЭПР) в процессе инкубации с 0,1 мМ метмиоглобином в присутствии 0,мМ гидропероксида трет-бутила.

Перед регистрацией спектров ЭПР к образцам добавляли 4 мМ цистеин. 0 5 10 15 Время, мин Этот факт согласуется с выдвинутым нами предположением о способности ДНКЖ взаимодействовать с органическими свободными радикалами и оксоферрилмиоглобином.

В модельной системе, содержащей гидропероксид трет-бутила и метмиоглобин, весьма сложно было установить вклад в деструкцию ДНКЖ свободных радикалов с одной стороны и оксоферрилформы миоглобина с другой. Для определения этого вклада мы исследовали влияние на ДНКЖ только оксоферрилмиоглобина. Последний получали в реакции метмиоглобина и Н2О2, избыток которой удалялся каталазой. Взаимодействие сигнал ЭПР ДНКЖ, отн.

ед.

ДНКЖ с оксоферрилмиоглобином действительно вызывало деструкцию исследуемых комплексов, причем этот процесс сопровождался восстановлением оксоферрилгема до его метформы, однако это снижение было не столь значительно как в системах содержащих гидропероксид третбутила. Исходя из этого мы полагаем, что одной из важных функций нитрозильных комплексов железа in vivo является детоксикация образующихся при окислительном стрессе оксоферрилформ гемопротеидов.

В седьмой глава описано исследование взаимодействия убихинола и GSNO в условиях моделирующих окислительный стресс. Известно, что в ходе свободнорадикального окисления биологических мембран происходит быстрое снижение концентраций липофильных антиоксидантов. При интенсивной генерации свободных радикалов возможна окислительная деструкция молекул этих антиоксидантов. В связи с этим, наиболее объективным параметром оценки влияния окислительного стресса на белоклипидные комплексы является измерение концентрации липофильных антиоксидантов. При изучении свободнорадикального перекисного окисления гомогената миокарда крыс мы оценивали изменение концентрации различных форм убихинона. Перекисное окисление инициировалось гидропероксидом трет-бутила. Было показано, что деструкцию убихинона хорошо ингибирует S-нитрозоглутатион. Защитное действие GSNO в ходе перекисного окисления гомогената согласуется с высокой антиоксидантной эффективностью производных оксида азота, содержащих катион нитрозония, продемонстрированных нами в других модельных системах.

В заключении подведены итоги и сформулированы выводы диссертационной работы.

ВЫВОДЫ 1. В системе содержащей гемопротеиды в сочетании с H2O2 или гидропероксидом трет-бутила, а также в условиях генерации супероксидного анион-радикала происходит быстрый распад низкомолекулярных и белковых динитрозильных комплексов железа.

2. Обнаружено, что ассоциированные с гемоглобином динитрозильные комплексы железа могут защищать этот гемопротеид от окислительной модификации под действием перекиси водорода.

3. Установлено, что S-нитрозоглутатион и содержащие глутатион динитрозильные комплексы железа эффективно защищают митохондриальные мембраны от индуцированного миоглобином и ферритином свободнорадикального перекисного окисления.

Показано также, что S-нитрозоглутатион предотвращает деструкцию убихинона в ходе перекисного окисления гомогената миокарда крысы.

4. Показано, что S-нитрозоглутатион и динитрозильные комплексы железа ингибируют окислительную деструкцию липофильного антиоксиданта -каротина под действием пероксинитрита. В то же время это антиоксидантное действие S-нитрозоглутатиона снижается в присутствии восстановленного убихинона.

5. Показано что, комплексы NO+ могут играть роль антиоксидантов защищающих биологические молекулы от активных форм кислорода и азота, причем их взаимодействие с кислородными радикалами и пероксинитритом может регулировать уровень оксида азота в биологических системах.

Результаты диссертационной работы изложены в следующих публикациях:

1. Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Свиряева И.В., Тимошин А.А., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Взаимодействие динитрозильных комплексов железа с интермедиатами окислительного стресса // Биофизика, 2006, т. 51, №3, 472-477.

2. Заббарова И.В., Шумаев К.Б., Ванин А.Ф., Губкин А.А., Петрова Н.Е., Рууге Э.К. Взаимодействие ферритина и миоглобина как индукторов перекисного окисления липидов, роль активных форм кислорода и азота // Биофизика. 2004. Т. 49. С. 659-665.

3. Тимошин А.А., Лакомки В.Л., Губкин А.А., Руге Э.К. Влияние коэнзима Q10 на свободнорадикальные центры ткани изолированного миокарда крысы // Биофизика. 2003. Т. 48. вып. 4. С. 717-721.

4. Шумаев К.Б., Губкина С.А., Губкин А.А., Гудков Л.Л., Ланкин В.З., Ванин А.Ф. Антиоксидантные и прооксидантные свойства метаболитов оксида азота // XIV Международная конференция и дискуссионный научный клуб.

“Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармокологии и экологии.” Ялта-Гурзуф. 31 мая - 9 июня. 2006. Т. 8. С. 416-417.

5. Шумаев К.Б., Ванин А.Ф., Топунов А.Ф., Губкина С.А., Губкин А.А., Гудков Л.Л., Каленикова Е.И., Городецкая Е.А., Ланкин В.З., Рууге Э.К.

Взаимодействие с активными формами кислорода как механизм антиоксидантного действия динитрозильных комплексов железа и Sнитрозоглутатиона. // IV международная научно-практическая конференция с международным участием “Активные формы кислорода, оксид азота антиоксиданты и здоровье человека”. Смоленск. 26-30 сентября. 2005.

Сборник трудов. С. 114-115.

6. Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Каленикова Е.И., Топунов А.Ф., Рууге Э. К. Антиоксидантная роль производных оксида азота содержащих катион нитрозония. // Евразийский конгресс по медицинской физике и инженерии. Медицинская физика. 21-24 июня 2005. С. 375.

7. Гудков Л.Л., Губкин А.А., Шумаев К.Б. Антиоксидантные процессы и активные формы азота в ткани сердечной мышцы // Международная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых по фундаментальным наукам “Ломоносов-2005” апрель 2005. Сборник тезисов. Т. 1. С. 201.

8. Тимошин А.А., Орлова Ц.Р., Губкин А.А., Ванин А.Ф., Капелько В.И., Руге Э.К. Применение комплекса N-митил-D-глюкомин дитиокарбомата (MGD) и железа для регистрации уровня радикалов оксида азота в организме // III съезд биофизиков России. Воронеж. 24-29. 2004. Сборник тезисов. С. 385386.

9. Губкин А.А., Лакомкин В.Л., Тимошин А.А. Влияние потребления коэнзима Q10 сократительную и митохондриальную функции миокарда // Международная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых по фундаментальным наукам “Ломоносов-2004” апрель 2004. Сборник тезисов.

Т. 1. С. 214.

10. Timoshin A.A., Lakomkin V.L., Shumaev K.B., Gubkin A.A., Kapelko V.I., Ruuge E.K. Coenzyme Q10 containing water-soluble substance Kudesan as a potential cardiac protector and oxygen radical scavenger // International conference “Reactive oxygen and nitrogen species, antioxidants and human health” Smolensk.

September. 22-25. 2003. Abstracts. P. 69.

Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»