WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

Внутри вида G. lucidum на полученной дендрограмме можно видеть три стабильные группы изолятов: «А» - штаммы с Кавказа (GL2, GL8) и из Крыма (GL9), «В» - штаммы из Франции и Австрии (GL4 и GL927, соответственно) и «С»- штаммы из Московской области (GL6 и GL7) (рис.

7).

Полученные группы штаммов характеризовались высокой степенью гомогенности RAPD-маркеров (индекс бутстрепа для групп «В» и «С» - до 100%, для группы «А» - до 97%). Представленные в данной выборке штаммы из Московской области (GL6 и GL7) (группа «С»), не являясь клонами по результатам тестов на вегетативную несовместимость, в то же время обладали идентичными молекулярными RAPD-профилями. Таким образом, RAPD-полиморфизм вида G. lucidum позволил выделить несколько внутривидовых групп.

Штамм из Кореи (GL3) продемонстрировал по всем RAPD-маркерам наибольшее отличие внутри кластера G. lucidum, занимая обособленную позицию на расстоянии 0,42 условных единиц генетической дистанции. Что касается штамма из США (GL5), то его степень объединения с группой из южных регионов была относительно невысока, до 61% индекса бутстрепа (рис. 7).

Еще одним методом исследования фенотипических проявлений генотипических различий штаммов является белковый электрофорез.

Было использовано пять изоферментных систем, из которых наиболее репрезентативной оказалась малатдегидрогеназа (МДГ).

На дендрограмме сравнения МДГ-спектров видно, что наибольшее отличие проявили штаммы G. applanatum и штамм G. lucidum из США (GL5), объединившись с остальными географическими изолятами G. lucidum только на уровне 1 единицы генетической дистанции (рис. 8).

 Рисунок 8. Дендрограмма сходства штаммов G. lucidum и G. applanatum по спектру изоферментов МДГ Штаммы из Московской области (GL6 и GL7) объединились в одну группу, поддержанную значением индекса бутстрепа 99%. Остальные штаммы (GL2, GL4, GL8, GL9 и GL927) обнаружили 66% гомологии МДГ-спектров. Штамм из Кореи вновь занял обособленную позицию на уровне 0.34 условных единиц генетической дистанции (рис. 8).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ Исследование изменчивости штаммов G. lucidum с использованием различных подходов и методов позволило сопоставить результаты анализов (табл. 6). Была получена индивидуальная характеристика для каждой RAPDгруппы, отличавшейся географическим происхождением и высокой степенью гомогенности по выбранным маркерам.

Так, штаммы GL2, GL8 и GL9 из южных регионов страны, объединившиеся по данным RAPD-анализа в группу «А», имели сходные спектры малатдегидрогеназы и составили интерстерильную группу I. Для них была показана способность к образованию в чистой культуре хламидоспор и получены веерообразные «лакированные» плодовые тела с ножкой (табл. 6).

Для европейских штаммов, объединившихся в RAPD-группу «В», было обнаружено: высокая степень гомогенности по изоферментам, принадлежность к интерстерильной группе II, наличие хламидоспор и консолевидные матовые плодовые тела.

 Таблица 6. Сравнение результатов анализа полиморфизма штаммов G.lucidum Критерии Характеристика полученных групп штаммов G. lucidum Штамм 2, 8 (Кавказ), 4 (Франция), 6, 7 (Моск. 3 (Корея) 5 (США) обл.) (географ.про- 9 (Крым) 927(Австрия) исх.) -RAPD группа А В С 66% 66% 99% - Изоферменты Интерстериль- Интерстериль- -- Генетически ная группа й анализ ная группа IIII II I I I Морфологический тип - Хламидоспоры - Плодовые тела Что касается RAPD-группы «С» - штаммов из Московской области, - то для нее получена наибольшая степень сходства по МДГ-спектрам, показано отсутствие хламидоспор в чистой культуре и неспособность формировать типичные базидиомы в искусственных условиях.

 ВЫВОДЫ 1. По морфолого-культуральным и микроморфологическим признакам показана гетерогенность изученных штаммов G. lucidum и выделены три морфологические группы.

2. Обнаружена способность некоторых штаммов G. lucidum образовывать базидии с жизнеспособными базидиоспорами в чистой культуре, минуя стадию формирования типичных базидиом.

3. Модифицирована методика получения базидиом путем добавления в субстрат дрожжевого экстракта, что стимулировало процесс плодообразования.

4. Получены группы тестеров и выявлены две интерстерильные группы штаммов G. lucidum.

5. С помощью RAPD-маркеров выявлен ДНК-фрагмент, специфичный для вида G. lucidum.

6. Применение генетических, биохимических и молекулярных методов, наряду с исследованием морфологии, позволило подтвердить правомочность выделения внутривидовых групп штаммов G. lucidum.

7. Исследование с использованием комплекса методов подтвердило сложную структуру вида G. lucidum.

 Список работ, опубликованных по теме диссертации Чистякова Е. Л. Штаммовое разнообразие трутовика лакированного Ganoderma lucidum // Тезисы конференции, посвященной 85-летию кафедры микологии и альгологии МГУ им. М. В. Ломоносова. М. 2004 с. Завьялова Л. А., Чистякова Е. Л., Инсарова И. Д., Антимонова А. В.

Штаммовое разнообразие трутовика лакированного Ganoderma lucidum // Микология и фитопатология. 2005. Т.39. № 1. с. 27-34.  Гарибова Л.В., Завьялова Л.А., Инсарова И.Д., Чистякова Е.Л. 2005. Анализ коллекции штаммов Ganoderma lucidum разного географического происхождения. // Материалы 6-ой Международной конференции «Проблемы лесной фитопатологии и микологии». М.-Петрозаводск, 2005, с.

69 – 72.

Постнова Е. Л. Антибиотическая активность и морфолого-культуральные признаки штаммов Ganoderma lucidum // Тезисы Юбилейной конференции, посвященной 100 - летию со дня рождения М.В. Горленко. М. 2008. с. Постнова Е. Л. Макро - и микроморфология штаммов Ganoderma lucidum раличного географического происхождения // «Современная микология в России». Второй съезд микологов России. Тезисы докладов. М., 2008. Т. 2.

с.Постнова Е.Л., Завьялова Л.А., Инсарова И.Д.. Формирование атипичных плодовых тел и примордиев in vitro у Ganoderma lucidum и влияние на этот процесс абиотических факторов // Микология и фитопатология. 2009. Т.43.

№ 4 (в печати) Постнова Е.Л., Сколотнева Е.С. Комплексный вид Ganoderma lucidum:

внутривидовые группы штаммов с индивидуальной характеристикой // в печати  

Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»