WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||

На основе полученных данных можно сделать вывод о том, что происходит увеличение стабильности IgG собаки, специфичного к яичному альбумину, в денатурирующих условиях в результате химической модификации. Это может быть связано с тем, что в процессе модификации в химерных молекулах происходит экранирование сайтов в области остатков лизина, аспарагина и глутамина, подвергающихся атаке гентамицина или других денатурирующих агентов.

Для исследования иммунобиологических свойств нативных и модифицированных форм IgG собаки осуществляли пассивную и активную иммунизацию собак, песцов и кроликов. При пассивной иммунизации нативные и модифицированные IgG собаки вводили внутримышечно собакам и песцам (животные-реципиенты). Активной иммунизации подвергали кроликов (животные-продуценты) в соответствии с рекомендациями Dresser (1987).

Образцы сывороток крови животных-реципиентов исследовали на 20-й и 40-й день после двухкратного введения нативных и модифицированных форм IgG. Образцы сывороток крови животныхпродуцентов исследовали после первого цикла иммунизации. Наличие антител определяли в ДИД с добавлением в агарозу ПЭГ до конечной концентрации 3 %. Результаты представлены табл. Таблица Оценка потенциально возможной иммуногенности нативных и модифицированных форм IgG собаки на основе регистрации антител с помощью ДИД IgG собаки, Животное-реципиент Животноеапробированные как продуцент потенциальные песец собака кролик иммуногены IgG нативная форма 0 0 1/IgG модифицированная форма(IgG/совиаль) 1/2 0 0 1/1/5 0 0 1/1/10 0 0 1/1/15 0 0 1/1/20 0 0 1/1 (цельная) На основании полученных результатов полагаем, что модификация IgG собак сополимером винилпирролидона с диацеталем акролеина обеспечивает экранирующий эффект и не вызывает образование новых антигенных детерминант. Обобщающий вывод не противоречит теории искусственных иммуногенов, т.к. в составе использованного сополимера и синтезированного комплекса отсутствует иммуногенная составляющая типа цепных полимеров с электростатически заряженными функциональными группировками.

ВЫВОДЫ 1. Установлено, что 2-х стадийный хроматографический процесс, выполненный на слабом анионообменном сорбенте (типа DEAE) и эксклюзионная хроматография на геле типа сефадекс G-200 (S-200), обеспечивает изготовление электрофоретически гомогенных образцов IgG без олигомеров и фрагментов целевого белка.

2. Разработана исследовательская технология выявления антигенных свойств IgG среди животных из семейства псовых. Предлагается на основе электрофоретически гомогенных образцов в прямом и прямом конкурентном методах иммуноферментного анализа воспроизводить градуировочные зависимости и по контрольным точкам вычислять уровень иммунологического сродства.

3. Оптимизирована реакция поликонденсации на основе индукции альдегидных групп в составе сополимера винилпирролидона с диацеталем акролеина и свободных -аминогрупп лизина IgG. Отработана электрофоретическая система анализа для определения соотношений нативного и модифицированного IgG в составе коньюгированных форм.

4. Проведен биохимический скрининг модифицированных IgG, т.ч. определены закономерности экранирующего эффекта сополимерной матрицы на антигенное представительство и физиологическую активность антител.

5. Разработана, согласована и утверждена нормативнотехническая и технологическая документация в соответствии с порядком, действующим в РФ, на производство и исследование экспериментальных серий иммуноглобулинового биопрепарата «Иммуно С» нового поколения.

СПИСОК ОСНОВНЫХ ПУБЛИКАЦИЙ 1. Барсуков А.К. К вопросу о совершенствовании технологии производства фармацевтических биопрепаратов / А.В Бармин, О.Ю.

Нестерова, Е.Н. Желтышев, А.И. Кузнецов, О.В. Кожевникова, В.А. Грачева, Ф.М. Касимов, А.Н. Панин, В.И. Смоленский, В.И. Уласов// Сельскохозяйственная биология. – 2005. - № 6. – С. 84-91.

2. Барсуков А.К. Стандартизация биопрепаратов крови / А.В Бармин, Ф.М. Касимов, А.И. Кузнецов, О.Ю. Нестерова, Г.Н. Бурдов, А.Н. Панин, В.И. Смоленский, В.И. Уласов, В.Л. Свидерский, А.Е. Хованских// Ветеринария. – 2005. - № 7. – С. 43-48.

3. Barsukov A.K. Informational priority of international development of socially usefull biotechnology / Zhuravlev V.A., Savinsky S.S., Barmin A.V., Kuznetsov A.I., Nesterova O.Yu., Kozhevnikova O.V., Ushnurtseva S.A., Zheltyshev E.N.// International Conference on Engineering Education. - Gliwice, Poland. 2005. – Conference Proceedings. – Р. 76-81.

4. Нестерова О.Ю. Гомология IgG семейства псовых in vitro и in vivo / А.К. Барсуков,А.В. Бармин, Е.Н. Желтышев, А.И. Кузнецов, О.В.

Кожевникова, Ф.М. Касимов., С.А. Ушнурцева // I съезда физиологов СНГ.

Сборник научных трудов. – Сочи. 2005. – С. 87.

5. Барсуков А.К. Совершенствование технологии производства биопрепаратов крови / О.Ю. Нестерова, А.И. Кузнецов, Ф.М. Касимов, В.А.

Журавлев, Е.Н. Желтышев, В.А. Храмов // XIX Международная научнотехническая конференция «Химические реактивы, реагенты и процессы малотоннажной химии». Сборник материалов. – Уфа. 2006. – С. 54-55.

6. Барсуков А.К. Необходимые составляющие целесообразного развития нормативно-технической базы за контролем качества фармацевтических биопрепаратов / О.Ю. Нестерова, А.И. Кузнецов, О.В. Кожевникова, Е.Н.

Желтышев, В.А. Храмов // Третья международная научно-практическая конференция «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности». Сборник трудов. - Санкт-Петербург. 2007. - С. 160162.

7. Барсуков А.К. Биохимические основы технологии производства биопрепаратов из некондиционной (утильной) плазмы (сыворотки) крови / О.Ю. Нестерова, А.И. Кузнецов // Четвертая международная научнопрактическая конференция «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности». Сборник трудов. - СанктПетербург. 2007. – С. 250-251.

8. Барсуков А.К. Исследование иммуногенеза, индуцированного нативными и сополимерно модифицированными формами IgG / О.Ю.

Нестерова, А.И. Кузнецов // VI конференции иммунологов Урала.

Материалы конференции. - Ижевск. 2007. – С.23-24.

9. Барсуков А.К. Выделение белков-стандартов иммуноглобулина G и альбумина, изучение их олигомеризации и антигенных свойств в процессе хранения в насыщенном растворе сульфата аммония / А.В. Бармин, А.И.

Кузнецов, О.Ю. Нестерова, С.А. Ушнурцева, А.Н. Панин, В.И. Смоленский, В.И. Уласов, В.Л. Свидерский, А.Е. Хованских // Прикладная биохимия и микробиология.- 2009 г.- Т. 45.- №3.- С. 378-383.

10. Барсуков А.К. Разработка экспериментальных подходов на основе белков-стандартов для оценки качества биопрепаратов крови и иммунопероксидазных коньюгатов, специфичных к иммуноглобулинам G человека и животных / А.В. Бармин, А.И. Кузнецов, О.Ю. Нестерова, С.А.

Ушнурцева, А.Н. Панин, В.И. Смоленский, В.И. Уласов, В.Л. Свидерский, А.Е. Хованских // Прикладная биохимия и микробиология.- 2009 г.- Т. 45.- №4.- С. 487-492.

11. Патент на изобретение № 2338375 «Способ хранения плазмы или сыворотки крови для получения иммуноглобулиновых и альбуминовых биопрепаратов».

Просьба отзывы отправлять по факсу:

(843) 238-76-Отдел аспирантуры Казанского государственного университета или на e-mail: zina.abramova@mail.ru

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»