WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 |

На правах рукописи

БОРГУЛЬ Ольга Валентиновна ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ КОЖНЫХ МЕТАСТАЗОВ ПРИ ДИССЕМИНИРОВАННОЙ МЕЛАНОМЕ КОЖИ 14.00.19 – лучевая диагностика, лучевая терапия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Обнинск - 2007

Работа выполнена в отделе лазерной и фотодинамической терапии и радиологическом отделении ГУ - Медицинский радиологический научный центр Российской академии медицинских наук.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Каплан Михаил Александрович, доктор медицинских наук, профессор Кудрявцева Галина Терентьевна.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Золотков Алексей Григорьевич, кандидат медицинских наук Сухова Татьяна Евгеньевна.

Ведущая организация:

Федеральный Государственный научный центр лазерной медицины ФА по здравоохранению и социальному развитию.

Защита диссертации состоится 27 ноября 2007 года в 1100 часов на заседании диссертационного совета Д 001.011.01 при ГУ - Медицинский радиологический научный центр РАМН по адресу: 249036, г. Обнинск Калужской обл., ул.

Королева, 4.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ - Медицинского радиологического научного центра РАМН.

Автореферат разослан «» октября 2007 года.

Ученый секретарь диссертационного совета Палыга Г.Ф.

2

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время практически во всех регионах мира зафиксирован устойчивый и интенсивный факт заболеваемости населения меланомой кожи (МК) [Лемехов В.Г., 2001]. В структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями меланома занимает особое место. Так, структурно составляя не более 10% от всех форм рака кожи, на ее долю приходится от 65% до 79% всех летальных исходов в группе злокачественных опухолей кожи [Демидов Л.В., Харкевич Г.Ю., 2001; Носов Д.А., 2001]. В отличие от других опухолей кожи меланома в значительно большей степени представляет собой модель злокачественной опухоли, для которой характерны не только местный рецидив или проявления регионарных лимфогенных метастазов, но и в значительно большей степени развитие отдаленных метастазов в различных тканях и внутренних органах (печень, легкие, головной мозг) [Барчук А.С., 2001; Демидов Л.В., 2001]. За последние 30 лет не достигнуто улучшения показателей выживаемости больных с метастатической (или диссеминированной) меланомой. Средняя продолжительность жизни больных, страдающих этим недугом, колеблется от 6 до 9 мес. при 5-ти летней выживаемости менее 5% [Анисимов В.В., 2000; Булат Ю.В., 2000].

На сегодняшний день лекарственная противоопухолевая и иммунотерапия являются ведущими направлениями в лечении метастатической меланомы.

Однако эффективность различных комбинаций лечения не превышает 30-35%.

Одним из перспективных методов в онкологии является фотодинамическая терапия (ФДТ). Суть метода состоит в использовании свойства опухолевых клеток накапливать определенные вещества – фотосенсибилизаторы (ФС) – в значительно большей степени, чем здоровые клетки. При облучении светом, спектральный состав которого соответствует спектру поглощения сенсибилизатора, в опухолевых клетках развивается фотохимическая реакция, результатом которой является разрушение клетки [Maziere J.C., 1991; Thomas J.P., 1989]. ФДТ является сложным воздействием, важным компонентом которого является влияние на клетки иммунной системы [Ярилин А.А., 1999; Васильев Н.Е., 2006]. Уникальность действия ФДТ обусловлена индукцией повреждений биологических структур под действием природных регуляторов клеточной пролиферации, метаболизма и апоптоза [Agarwal M.L., 1991; Kessel D., 1998; Lilge L., 2000]. В настоящее время рассматривается три основных механизма противоопухолевого действия ФДТ - прямое повреждение опухолевых клеток, нарушение сосудистой стромы опухолей, элиминация под действием иммунных клеток [Фильченкова А.А., 1998; Странадко Е.Ф., 1999; Куценок В.В., 2003; Якубовская Р.И., 2004; Nowis D., 2005]. Важным фактором индукции ФДТ-опосредованного иммунного ответа является повреждение клеточных мембран и сосудов опухоли [Васильев Н.Е., 2006]. Фотоокислительные нарушения индуцируют выделение медиаторов, провоцирующих местную воспалительную реакцию. Cледствием этих процессов является окклюзия сосудов опухоли и индуцированная цитотоксическая активность клеток воспаления в отношении опухолевых клеток. Разрушение клеток и сосудов опухоли служит пусковым фактором развития специфических иммунных реакций [Ярилин А.А., 1999].

В отделе лазерной и фотодинамической терапии ГУ-Медицинский радиологический научный центр РАМН в течение ряда лет разрабатывается метод ФДТ для разрушения метастатических очагов в кожу при диссеминированных формах МК вопреки бытующему мнению о резистентности к ФДТ тканей, богатых пигментом. Однако вопрос о выборе наиболее эффективной методики ФДТ, а также ФС для лечения МК остается нерешенным. Известно, что лазерное излучение с длиной волны менее 800 нм плохо поглощается пигментом, и соответственно, для разрушения клеток пигментной меланомы в процессе ФДТ эффективны ФС и источники излучения с длиной волны более 800 нм. Возможно это связано с содержанием неодинакового количества и неоднородного распределения пигмента в клетках меланомы, фотоиндуцированной деструкции сосудов, питающих опухоль, а также с активацией неспецифических иммунных механизмов под воздействием ФДТ. Вместе с тем появился ряд экспериментально-клинических работ, показывающих высокую эффективность ФДТ в лечении МК с применением ФС с длиной волны 660-680 нм [Bussetti A., 1998; Shopova M., 1999].

Цель работы. Целью настоящей работы является разработка и оценка эффективности методики фотодинамической терапии кожных метастазов при диссеминированной меланоме кожи.

Основные задачи исследования.

1. Разработать методику фотодинамической терапии экспериментальной опухоли меланомы В16.

2. Изучить фармакокинетику фотосенсибилизаторов «Фотолон» и «Фотосенс»;

фотодинамический эффект при различных параметрах проведения фотодинамической терапии экспериментальной опухоли меланомы В16.

3. Разработать методику фотодинамической терапии с фотосенсибилизатором «Фотолон» кожных метастазов при диссеминированной меланоме кожи в клинике.

4. Оценить эффективность разработанной методики фотодинамической терапии в зависимости от расположения метастатических опухолей (интра- и субдермальных).

Научная новизна.

1. Впервые разработана и оценена методика фотодинамической терапии меланомы В16 с фотосенсибилизаторами «Фотолон» и «Фотосенс» в эксперименте. Определено время оптимального накопления, доза вводимых фотосенсибилизаторов, параметры лазерного облучения для эффективной ФДТ меланомы В16.

2. Впервые представлена и апробирована методика фотодинамической терапии кожных метастазов при диссеминированной меланоме кожи с фотосенсибилизатором хлоринового ряда. Впервые изучено влияние разработанной методики на регрессию интра- и субдермальных метастазов при диссеминированной меланоме, на улучшение качества жизни больных с данной патологией и даны рекомендации для применения в практическом здравоохранении.

Практическая значимость работы. Экспериментально разработанная методика ФДТ меланомы В16 дала возможность применить данный метод в лечении кожных метастазов при диссеминированной меланоме в клинике. ФДТ является эффективным методом паллиативной помощи больным диссеминированной меланомой. Применение этого метода улучшает результаты комбинированного лечения, повышает качество жизни больных диссеминированной меланомой, что позволяет рекомендовать разработанную методику ФДТ для более широкого внедрения в клиническую практику.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы докладывались и обсуждались на Научно-практической конференции «Современные достижения лазерной медицины и их применение в практическом здравоохранении», Москва, 2006; на VI Всероссийской научнопрактической конференции «Отечественные противоопухолевые препараты», Москва, 2007; на XVI Научно-практической конференции «Современные возможности лазерной медицины и биологии», Великий Новгород, 2007. По материалам исследования опубликовано 8 печатных работ в отечественных изданиях.

Диссертация апробирована на научной конференции клинического сектора ГУ - Медицинский радиологический научный центр РАМН 05 июня 2007 г (протокол № 5).

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, двух глав собственных исследований, обсуждения и заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа содержит 10 таблиц, 15 рисунков.

Библиографический указатель включает 189 источников, из них отечественных и 128 иностранных.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Работа включает экспериментальную и клиническую части.

Экспериментальные исследования выполнены на 135 животных (мыши линии F1(CBA*C57Bl/6)). В экспериментальной части работы изучена динамика накопления фотосенсибилизатора «Фотолон» (длина волны 666 нм) и «Фотосенс» (длина волны 670 нм) в меланоме В16, оценен эффект ФДТ опухоли меланомы В16 в зависимости от параметров лазерного излучения с длиной волны 660-670 нм, дозы вводимых фотосенсибилизаторов. В клинической части разработана наиболее эффективная методика ФДТ с фотосенсибилизатором «Фотолон» кожных метастазов при диссеминированной меланоме, представлена эффективность разработанной методики по результатам лечения метастатических очагов у 45 больных диссеминированной меланомой.

Исследования проводили с применением морфологических, клинических, ультразвуковых, математических методов. Статистическая обработка результатов производилась при помощи программы Statistica 6.0. В случае сравнения двух несвязанных выборок использовали непараметрический метод с U-критерием (критерий Уилкоксона-Манна-Уитни) МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ В работе использовали фотосенсибилизаторы второго поколения – «Фотосенс» (=670 нм, производный фталоцианинов), «Фотолон» (=666 нм, производный хлорина Е6). Источниками светового излучения служили полупроводниковые лазерные аппараты «Аткус-2» (ЗАО «Полупроводниковые приборы», Санкт-Петербург), длина волны 661±1 нм, максимальная мощность рабочего излучения на выходе оптического разъема аппарата 2 Вт и «ЛД 6802000» (ЗАО «Биоспек», Москва), длина волны 675±5 нм, максимальная мощность рабочего излучения на выходе оптического разъема аппарата 1,5 Вт.

Для определения динамики накопления фотосенсибилизаторов в экспериментальной опухоли 74 животным вводили внутрибрюшинно ФС «Фотолон» в дозе 9 и 12 мг/кг, 61 животному – ФС «Фотосенс» в дозе 4 мг/кг массы тела. Количество вводимых фотосенсибилизаторов соответствовало минимальной клинической дозе (0,8-1 мг/кг для «Фотолона» и 0,3 мг/кг для «Фотосенса») с учетом коэффициента перерасчета дозы для мышей.

Измерения накопления ФС в опухолевой и здоровой тканях проводили на диагностическом спектрометрическом комплексе «Lesa-6» (ЗАО «Биоспек», Москва). Комплекс имеет оптоволоконное устройство для проведения зондирующего излучения к объекту исследования и регистрации обратно отраженного, обратно рассеянного и флюоресцентного излучений. Датчики подводили к коже над опухолью в четырех точках под прямым углом к объекту.

Накопление в здоровых тканях определяли на противоположном бедре. Время экспозиции составляло 1-2 с. Анализ полученных спектров проводили по форме, величине и амплитуде сигнала. Фиксировали площадь (S1) под пиком флюоресценции, определяющей содержание флюорофоров в тканях, площадь (S2) под пиком отраженного лазерного излучения и их отношение (S2/S1). Sзависело от: степени пигментации анализируемого объекта, рельефа поверхности анализируемого объекта, пространственного положения световода в момент регистрации спектра. По отношению S2/S1 оценивали уровень флюоресценции, что позволило определить среднее значение накопления препарата в тканях на определенный срок после введения ФС. По отношению накопления ФС в пигментированной ткани опухоли и здоровой ткани определяли индекс контрастности (Iконтр.), при котором будет эффективна ФДТ меланомы В16 с ФС «Фотолон» и «Фотосенс»:

S2 / S1 опухоли Iконтр. = S2 / S1 здоровой ткани Во время сеанса ФДТ облучение проводили перпендикулярно к поверхности опухоли. Границы поля облучения формировались с захватом здоровой ткани не менее 3-5 мм от видимой или пальпируемой границы опухоли. При введении ФС «Фотолон» эксперимент проводили с плотностью энергии падающего излучения (Е): 75, 150, 200 и 300 Дж/см2 и плотностью мощности (PS): 0,38; 0,25; 0,12 Вт/см2. При введении ФС «Фотосенс» - плотность энергии падающего излучения: 150 и 300 Дж/см2, плотность мощности: 0,38; 0,25; Вт/см2.

Динамику роста опухоли регистрировали на 3, 7, 10, 14 сутки после сеанса ФДТ. Объем опухоли вычисляли по формуле:

V = d1 d2 d3, где: d1,2,3, - три взаимно перпендикулярные диаметры опухоли, 1/6=0,52 – постоянная величина, V-объем опухоли в см3.

Фотодинамический эффект оценивали с помощью показателя полной регрессии (отсутствие пальпируемой опухоли), показателя продолженного роста (рост опухоли после ФДТ) и коэффициента абсолютного прироста опухоли (К), рассчитываемого по формуле :

Vt - VK = V0, где V0 – исходный объем опухоли, Vt – объем опухоли на определенный срок наблюдения.

При этом рассматривались градации К:

К=-1, соответствует полной регрессии опухоли, когда визуально и пальпаторно опухоль не определяется;

К >0, указывает на рост опухоли.

Контролем служили интактные животные-опухоленосители (число особей n=30).

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование динамики накопления «Фотолона» в меланоме В16 и здоровой тканях показало, что с увеличением дозы введенного препарата с 9 до 12 мг/кг повышается уровень накопленного сенсибилизатора в опухоли. Через 1,5 ч после введения «Фотолона» (рис. 1) при всех использованных дозах индекс контрастности достигает значения 1,4 (при введении ФС в дозе 9 мг/кг) и 2,(при введении ФС в дозе 12 мг/кг).

Pages:     || 2 | 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»