WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

Частота выявления микрометастазов в костный мозг не зависела существенным образом от локализации метастазов: у больных с метастазами только во внутренние органы она составила 63,6%, а у больных с метастазами только в кости – 61,5%.

Иммуноцитологическое исследование костного мозга после окончания системного лечения проведено 11 больным. Солитарные опухолевые клетки были обнаружены в 27,3 % случаев (у 3 больных).

Динамика содержания опухолевых клеток в костном мозге отражена в таблице 6.

Таблица 6.

Содержание опухолевых клеток в костном мозге у больных РМЖ до и после системного противоопухолевого лечения.

Количество KL-1- Время забора костного мозга Эффект лечения позитивных (II пробы) клеток/млн миелокариоцитов I проба II проба № После 6 курсов FАС ПЭ 1. 12 После 6 курсов FАС СЗ 2. 0 После 6 курсов FАС ЧР 3. 0 После 6 курсов FАС и операции ПР 4. 1 (РМЭ) через 3 месяца после 6 курсов FАС 5. 0 0 ПЗ После 6 курсов FАС ЧР 6. 1 Через 3,5 месяца после приема СЗ 7. 416 тамоксифена После 8 курсов FAC ЧР 8. 50 После 5 курсов FAC ЧР 9. 2 После 6 курсов FАС СЗ 10. 5 После 8 курсов FАС ЧР 11. 2 Из таблицы видно, что у всех больных при эффективном лечении (частичная или полная регрессия опухоли), а также при стабилизации заболевания количество опухолевых клеток в костном мозге уменьшилось или осталось неизмененным, т.е. совпадало с оценкой эффекта лечения с помощью объективных методов.

В таблице 7 отражены результаты анализа времени до прогрессирования и общей продолжительности жизни в группах больных с наличием и отсутствием поражения костного мозга по данным иммуноцитологического и цитологического исследования. Общая продолжительность жизни оценена у 39 больных (у 33 - IV стадия, у 6 – IIIB стадия РМЖ); время до прогрессирования оценено у 37 больных (у 31 – IV стадия, у 6 больных – IIIb стадия).

Таблица 7.

Время до прогрессирования и общая продолжительность жизни больных РМЖ в зависимости от опухолевого поражения костного мозга по данным иммуноцитологического и цитологического методов исследований Показатель Больные без Больные с Больные с выживаемости микрометастазов в микрометастазами цитологически костный мозг (KL-1 = в костный мозг верифицированным 0/млн) и метастазами в (KL-1 1/млн) костный мозг Медиана времени до 11 10,5 прогрессирования, мес.

(n – 17) (n = 15) (n = 5) Медиана общей 19,5 21 продолжительности жизни, мес.

(n – 17) (n – 17) (n = 5) Из таблицы 7 видно, что при иммуноцитологическом подтверждении наличия микрометастазов в костном мозге показатели времени до прогрессирования и общей продолжительности жизни существенно не различались между позитивной и негативной группами. Имеются преимущества у группы больных без микрометастазов перед группой с метастазами в костный мозг (доказанными цитологическим методом) – медиана времени до прогрессирования у них на 4 месяца длиннее (р = 0,03, рисунок 3).

Рисунок 3.

Время до прогрессирования у больных с метастазами в костный мозг, доказанными цитологическим методом и у больных без микрометастазов (по данным иммуноцитологического исследования) Время до прогрессирования нет микрометастазов в костном мозге (иммуноцитологический метод), n = метастазы в костном мозге (цитологически), n = 0 5 10 15 20 месяцы У больных с наличием опухолевых клеток в костном мозге по данным иммуноцитологического исследования частота выявления ЦОК составила 22,7% (5 из 22), а у больных без микрометастазов в костном мозге – 44,5% (из 18). Однако сопряженности признаков не установлено (р > 0,05).

Субпопуляции опухолевых клеток, циркулирующих в периферической крови больных раком молочной железы.

Изучению иммунофенотипа микрометастазов костном мозге посвящено множество исследований. Показано, что единичные опухолевые клетки в костном мозге экспрессируют антигены главного комплекса гистосовместимости I класса, молекулы адгезии ЕрСАМ, рецепторы erb-Bи трансферрина, маркеры пролиферации (Ki-67, p-120), гены MAGE1,2,3/6,4,12, пролиферативные маркеры Ki-67 и р120. Сообщения о характеристике циркулирующих в периферической крови опухолевых клеток немногочисленны (Cristofanilli M., 2005).

Процент выживших Мы изучили экспрессию на ЦОК молекул главного комплекса гистосовместимости (МНС) II класса – HLA-DR и рецептора СD95, входящей в систему Fas-Fas L, опосредующую клеточный апоптоз.

В большинстве изученных случаев количество циркулирующих опухолевых клеток было достаточно выраженным и только у 3 пациенток из 17 их число было менее 10 ЦОК на миллион лейкоцитов крови (таблица 8).

Таблица 8.

Субпопуляции опухолевых клеток периферической крови больных РМЖ до начала системной химиотерапии.

№ Кол-во %% %% Кол-во Кол-во ЦОК/ HLA-DR+ CD95+ HLA-DR+ CD95+ ЦОК/ млн HEA125+ HEA125+ ЦОК/млн млн лейкоцитов ЦОК ЦОК лейкоцитов лейкоцитов 1 63 22,0 3,6 14 2 30 72,7 0,0 22 3 18 26,2 42,2 5 4 7 33,0 66,0 2 5 76 52,0 0,0 40 6 38 5,3 0,0 2 7 92 8,1 4,0 8 8 5 42,3 0,0 2 9 20 54,5 44,0 11 10 160 0,0 22,0 0 11 4 42,0 0,0 2 12 11 81,8 - 9 13 23 0,0 3,0 0 14 135 0,0 0,0 0 15 307 11,4 1,2 35 16 13 64,0 22,0 8 17 167 23,5 - 39 Частота экспрессии молекулы HLA-DR на ЦОК составила 82% (у 14 из 17 больных). Средний процент HLA-DR+ циркулирующих опухолевых клеток составил 31,6±6,4% при медиане 26,2% и значительном разбросе значений от 0,0 до 81,8%.

Частота экспрессии молекулы CD95 на ЦОК составила 33%. Средний процент CD95+ циркулирующих опухолевых клеток составил 14,8± 5,73%, при медиане 3,3% и разбросе значений от 0 до 66,0%. В четырех случаях из 15 (26,6%) экспрессия антигена на циркулирующих опухолевых клетках составила от 20 до 50% и только в одном случае процент CD95-позитивных опухолевых клеток превысил 50% (66,0%).

После проведения химиотерапии субпопуляционный состав циркулирующих опухолевых клеток оценили у 6 больных. Во всех 6 случаях изучили экспрессию на ЦОК (НЕА-125+) молекулы главного комплекса гистосовместимости 2 класса (HLA-DR) и рецептора CD95, таблица 9.

Таблица 9.

Субпопуляции опухолевых клеток периферической крови больных РМЖ после проведения системной химиотерапии.

№ Кол-во %% Кол-во %% Кол-во ЦОК/млн HLA-DR+ HLA-DR+ CD95+ CD95+ лейкоцитов ЦОК ЦОК/млн HEA125+ ЦОК/млн лейкоцитов клеток лейкоцитов 1 10 44,6 5 11,3 2 17 6,0 1 6,0 3 27 15,7 4 3,8 4 50 3,0 2 0,0 5 204 17,0 35 6,9 6 409 5,0 21 4,0 Как видно из таблицы 9, количество ЦОК у пациенток данной группы в большинстве случаев было достаточно выраженным и превышало 10 клеток на миллион оцененных клеток периферической крови. Субпопуляционный состав опухолевых клеток был разнородным, однако не было отмечено случаев экспрессии антигенов на более 50% опухолевых клеток.

По сравнению с данными до лечения (см. таблицу 8) средний процент ЦОК с иммунофенотипом HLA-DR+HEA125+ был практически в 2 раза ниже и составил 15,2± 6,33 (р = 0,06). Медиана также была значительно ниже и составляла 10,8 %, при разбросе значений от 3,0 до 44,6%.

Средний процент ЦОК с иммунофенотипом CD95+HEA125+ был также значительно ниже, чем в группе больных до лечения и составил 5,3±1,53 (р = 0,02). Однако медиана значений практически не отличалась от таковой до лечения и составила 5,0%. Разброс значений в данной группе был незначительным 0,0-11,3%.

Обращает на себя внимание тот факт, что при большом количестве циркулирующих опухолевых клеток (при распространенном РМЖ) или при увеличении в периферической крови количества ЦОК (например, при прогрессировании заболевания) снижается процент опухолевых клеток, экспрессирующих оба антигена (HLA-DR и CD95) и преобладают негативные по этим антигенам клетки. Это позволяет сделать предположение о том, что при утрате опухолевой клеткой антигенов HLA-DR и CD95, она приобретает больший метастатический потенциал, т.к. становится «невидимой» для клеток иммунной системы (CD4 Т-клеток), и не может быть уничтожена механизмами CD95-зависимого апоптоза.

ВЫВОДЫ 1. Циркулирующие в периферической крови опухолевые клетки выявляются у 41,3% больных диссеминированным раком молочной железы на основании наличия мембранных панэпителиальных антигенов (Egp34, BerEp4) при отсутствии экспрессии CD45; они характеризуются низкими показателями гранулярности и гетерогенны по размеру 2. Циркулирующие в периферической крови клетки рака молочной железы гетерогенны по экспрессии молекул главного комплекса гистосовместимости II класса (HLA-DR) и рецептора CD95. В большинстве случаев отмечается выраженная пропорция HLA-DRнегативных и CD95-негативных клеток, что свидетельствует о неспособности презентировать опухоле-ассоциированные пептиды CD4+ Т-лимфоцитам и невозможности реализации клеточной гибели путем CD-95-опосредованного апоптоза.

3. Циркулирующие опухолевые клетки в периферической крови больных РМЖ IIIb-IV стадий достоверно чаще выявляются при инфильтративно-дольковом раке по сравнению с инфильтративнопротоковым раком (69,2% и 31%, р = 0,02) и у больных в менопаузе (47,8% и 26,7%, р = 0,045).

4. Обнаружение клеток рака молочной железы в периферической крови больных РМЖ IIIb-IV стадий не имеет прямой ассоциации с наличием иммуноцитологически выявляемых микрометастазов в костном мозге.

5. Микрометастазы в костном мозге до лечения обнаруживаются в 54,8% случаев рака молочной железы IIIb-IV стадий. Наличие микрометастазов в костном мозге больных на момент начала лечения не влияет на продолжительность интервала без прогрессирования и общую продолжительность жизни в этой группе больных. Морфологически доказанное метастатическое поражение костного мозга при диссеминированном раке молочной железы достоверно ухудшает показатели выживаемости без прогрессирования по сравнению с больными без метастазов в костном мозге (р = 0,03).

6. Общая продолжительность жизни больных РМЖ с метастазами в кости (при отсутствии висцеральных метастазов) и наличием ЦОК в периферической крови до начала лечения меньше, чем у больных без ЦОК (11 и 21,5 месяцев соответственно, р = 0,06). Взаимосвязи наличия ЦОК с продолжительностью времени до прогрессирования у больных раком молочной железы IIIb-IV стадий не установлено.

7. Динамика содержания циркулирующих опухолевых клеток в процессе химиотерапии в 71% случаев совпадает с клинической оценкой эффективности лечения. При нарастании количества циркулирующих опухолевых клеток, несмотря на хороший клинический эффект (полная или частичная регрессия опухоли) отмечено прогрессирование заболевания в короткие сроки после окончания противоопухолевой терапии.

8. Динамика содержания циркулирующих опухолевых клеток в процессе химиотерапии является дополнительным, объективным критерием эффективности лечения. У больных без увеличения количества циркулирующих опухолевых клеток после проведения полихимиотерапии, наблюдается достоверно более длительная продолжительность интервала без прогрессирования по сравнению с больными, у которых в динамике отмечалось повышение уровня циркулирующих опухолевых клеток, р = 0,0126.

Список сокращений 1. РМЖ – рак молочной железы 2. ЦОК – циркулирующие опухолевые клетки 3. млн – миллион 4. ПЦР – полимеразная цепная реакция 5. МКА – моноклональные антитела 6. ЦК – цитокератины 7. АТ – антитела 8. АГ – антигены 9. ПХТ – полихимиотерапия 10. ПЭ – полный эффект 11. ЧР – частичная регрессия 12. СЗ – стабилизация заболевания 13. ПЗ – прогрессирование заболевания 14. РЭ – рецепторы эстрогенов 15. РП – рецепторы прогестерона 16. ОВ – общая выживаемость 17. ВДП – время до прогрессирования 18. FITC – флуоресцеин-изотиоцианат 19. PE – фикоэритрин 20. PerCP – пиридинин-хлорофилл Список опубликованных работ 1. O. B. Bzhadug, S. A. Tjulandin, L. J. Andreeva, G. Moldenhauer, N. N.

Tupitsyn. Immunologic identification and characterization of single tumor cells in peripheral blood and bone marrow of patients with metastatic breast cancer.

Educational and

Abstract

book of the ESMO Summer Educational Conference, 2003, 14: abstract 54, р.52.

2. О.Б. Бжадуг, Н.Н. Тупицын, С.А. Тюляндин Значение выявления микрометастазов в периферической крови и костном мозге у больных раком молочной железы. Современная онкология. 2004. -Том 6, №4, с.

149-154.

3. О.Б. Бжадуг. Рак молочной железы. Значение выявления микрометастазов в периферической крови и костном мозге. Иммунология гемопоэза (ISBN 5-9534-0052-7). – М.: Издательская группа ГУ РОНЦ им.

Н.Н. Блохина РАМН. 2005 (ISBN5-9534-0052-7), вып. 2, с.78-111.

4. О.Б. Бжадуг, Л.Ю. Гривцова, Н.Н. Тупицын, С.А. Тюляндин Циркулирующие опухолевые клетки в крови больных местнораспространенным и диссеминированным раком молочной железы.

Вестник Российского онкологического научного центра имени Н.Н.Блохина РАМН, № 3, 2007, с.19-22.

Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»