WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 |

На правах рукописи

Борисов Игорь Валерьевич "КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ГЕНИТАЛЬНОГО ГЕРПЕСА" 14.00.11 – кожные и венерические болезни

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва - 2007

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования "Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию"

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор Уджуху Владислав Юсуфович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Суколин Геннадий Иванович доктор медицинских наук, профессор Осипов Сергей Георгиевич

Ведущая организация:

ГОУ ВПО Российский Университет Дружбы Народов

Защита диссертации состоится «19» февраля 2007 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета К 208.072.03 при Российском государственном медицинском университете по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянова, д.1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке РГМУ по адресу:

117997, Москва, ул. Островитянова, д.1 Автореферат разослан «16» января 2007 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор Л.Ф.Марченко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы В настоящее время герпес является одной из наиболее распространенных вирусных инфекций человека (Бутов Ю.С., 2002; Haddow L.J., Dave B. et. al., 2006). По данным серологических исследований (Фицпатрик Т., 1999; Самгин М.А., Халдин А.А., 2002), у 80% взрослого населения выявляются антитела к вирусу простого герпеса (ВПГ-1 и ВПГ-2), причем в 6-10% течение герпетической инфекции сопровождается клиническими проявлениями (Кубанова А.А., 2004; Patel R. et. al., 1997). Высокая частота инфицирования вирусом герпеса (Бутов Ю.С., Малиновская В.В., 2000; Cunningham A.L.,Taylor J.et. al., 2006) гениталий сексуально активных лиц, вероятность вертикальной передачи вируса от матери к плоду позволяют рассматривать герпес как серьезную медикосоциальную проблему (Иванов О.Л. и соавт., 2004). Так, герпетическая инфекция у новорожденных является неконтролируемой причиной перинатальной заболеваемости и смертности (Мирзоян Ж.В., 2001). Иммуногенез герпеса чрезвычайно сложен и недостаточно изучен. Многие стороны его патогенеза дискутабельны. В настоящее время считается, что активация и репликация ВПГ контролируется различными факторами клеточного и гуморального звеньев иммунитета, такими как: цитотоксические Т-лимфоциты, различные интерлейкины и цитокины, сывороточные иммуноглобулины, макрофаги, естественные киллеры и интерфероны (Исаков В.А. и соавт., 1999; Халдин А.А., 2000; Бутов Ю.С., Полеско И.В., 2001). Ряд авторов (Шуршалина А.В, 2001; Сотникова Н.Ю., Кудряшова А.В. и соавт., 2006) считают, что основную функцию контроля за размножение ВПГ в организме выполняет клеточный иммунитет, в частности система интерлейкинов. Другие же (Марченко Л.А., 1997; Исаков В.А. и соавт., 1999) основную роль в формировании противовирусного иммунитета отводят системе естественных клеток киллеров. Вместе с тем ни одна из теорий не позволяет объяснить закономерности нарушений гуморальной регуляции иммун ного ответа у больных с герпетической инфекцией, что придает изучению альтерации основных показателей систем макроорганизма ответственных за противовирусную защиту особую актуальность.

Современная химиотерапия герпесвирусных инфекций основывается на избирательном подавлении отдельных звеньев репродукции вирусов без существенного нарушения жизнедеятельности клеток макроорганизма (Исаков В.А.

и соавт., 2004; Кубанова А.А., 2004). Однако монотерапия ациклическими нуклеозидами (Егорова Е.А., 2004) во многих случаях не позволяет оптимизировать терапию таким образом, чтобы на длительный период времени у больных сохранялось состояние клинической ремиссии (Томас П. Хебиф, 2006). Частые рецидивы герпесвирусной инфекции определяют необходимость патогенетического лечения (Белозеров Е.С., Буланьков Ю.И., 2005; Кубанова А.А., 2006).

Комплексный терапевтический подход в значительной степени повышает клиническую эффективность лечебных мероприятий у больных герпетической инфекцией. В связи с этим перспективным является внедрение новых сочетанных методов лечения больных, включающих ациклические нуклеозиды и новые средства иммуномодулирующей направленности.

Цель исследования Патогенетически обосновать применение ацикловира, генферона и стемокина, изучить их влияние на показатели иммунитета и оценить клиническую эффективность у больных генитальным герпесом.

Задачи исследования В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучить особенности клинического течения герпетического процесса, цитокинопосредованные межклеточные взаимодействия иммунорегуляторных клеток, уровень сывороточных иммуноглобулинов, состояние естественной цитотоксичности и системы интерферона у больных генитальным герпесом как в активной фазе заболевания, так и в период его ремиссии.

2. Исследовать динамику основных показателей интерферонового статуса, активности естественных клеток киллеров и нейтрофильных гранулоцитов у больных генитальным герпесом в процессе применения ацикловира и генферона.

3. Оценить влияние ацикловира и стемокина на субпопуляционный состав лимфоцитов, их функциональное состояние, уровень сывороточных иммуноглобулинов и систему интерлейкинов у больных генитальным герпесом.

4. Провести анализ клинической эффективности комплексного применения ацикловира, генферона и стемокина у больных генитальным герпесом.

Научная новизна У больных генитальным герпесом установлено снижение эффективности межклеточных взаимодействий иммунокомпетентных клеток, проявляющееся дисбалансом цитокинов, с повышением их активационности на стадии клинических проявлений с последующим формированием иммунодефицита. На всех стадиях течения герпесвирусной инфекции выявлены снижение уровня цитотоксического индекса и диспропорции в системе интерферона на фоне усиления функциональной активности нейтрофилов. Показано, что ацикловир понижает уровень провоспалительных цитокинов и Fas-индуцированный апоптоз лимфоцитов, не препятствуя развитию иммунодефицитного состояния. Использование генферона, оказывая положительное воздействие на систему интерферонов, приводило к повышению интерферона -, что способствовало стабилизации функциональной активности естественных клеток киллеров и нейтрофильных гранулоцитов. Применение стемокина способствовало нормализации основных показателей клеточного иммунитета и цитокинопосредованных межклеточных контактов иммунокомпетентных клеток. Патогенетически обоснованный подход к лечению больных генитальным герпесом ацикловиром, генфероном и стемокином обеспечивал развитие клинической ремиссии в 33% случаев на протяжении года и более.

Практическая значимость работы Уточнен механизм развития генитального герпеса, заключающийся в стойком снижении естественной цитотоксичности, нарушении субпопуляционного состава иммунорегуляторных клеток, диспропорциях в системе интерферона, цитокиновом профиле и усилении продукции свободных радикалов. Впервые разработанный комплексный метод лечения больных генитальным герпесом, включающий применение ацикловира, генферона и стемокина, отличается клинической эффективностью, позволяющей значительно удлинить безрецидивный период заболевания. Разработанные клинико-лабораторные критерии (особенности клинических проявлений, уровень провоспалительных цитокинов, цитотоксический индекс, амплитуды вспышки хемилюминисценции) позволяют прогнозировать дальнейшее течение герпетического процесса и могут применяться для контроля эффективности проводимой терапии. Полученные результаты внедрены в практику работы кафедры кожных и венерических болезней педиатрического факультета ГОУ ВПО РГМУ Росздрава, 4 кожного отделения 52 Городской клинической больницы г. Москвы и клиники «Семейной».

Основные положения, выносимые на защиту 1. Установлен факт отклонения от нормы показателей клеточного и гуморального иммунитета у больных генитальным герпесом. Обострения герпетического процесса сопровождались выраженным дисбалансом регуляторных субпопуляций лимфоцитов, нарушением синтеза и экспрессии цитокинов, резким повышением уровня провоспалительных интерлейкинов, компенсаторной гиперактивацией клеточного иммунитета с повышением активационной способности иммунокомпетентных клеток и усиленной продукцией Т-хелперов I порядка. Выявлялись также нарушения в процессах пролиферации и дифференцировки Т-лимфоцитов в виде усиления Fas-индуцированного апоптоза, что свидетельствовало об определенной вирусной нагрузке на макроорганизм. Течение герпетической инфекции характеризовалось также угнетением естест венной цитотоксичности, низкой эффективностью межклеточных взаимодействий, выраженными диспропорциями в системе интерферона.

2. Ацикловир, улучшая Fas-индуцированную регуляцию апоптоза Тлимфоцитов, не предотвращает после регресса клинических проявлений заболевания развития иммунодефицитного состояния. Генферон оказывает стимулирующее действие на такие факторы неспецифической защиты организма как:

естественная цитотоксичность, система интерферона. Стемокин обладает коррегирующим действием на клеточные и гуморальные звенья иммунитета, нормализуя цитокиновый профиль и эффективность межклеточных взаимодействий у больных генитальным герпесом.

3. Комплексное лечение, включающее ацикловир, генферон и стемокин у больных генитальным герпесом, обладая высокой клинической эффективностью, значительно улучшает результаты лечения.

Апробация работы Основные положения диссертации представлены на симпозиуме "Человек и лекарство" (2005), на научно-практических конференциях кафедры кожных и венерических болезней педиатрического факультета ГОУ ВПО РГМУ Росздрава (2005, 2006).

Публикации По материалам диссертации опубликовано 4 научных работы.

Структура и объем диссертации Работа изложена на 139 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций.

Указатель литературы включает 159 работ отечественных и зарубежных авторов. Текст иллюстрирован 22 рисунками и содержит 36 таблиц.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования Лабораторные методы исследования В работе использовали как общепринятые, так и специальные методы исследования. Назначались комплексные общелабораторные исследования: общий анализ крови, клинический анализ мочи, биохимический анализ крови, УЗИ внутренних органов и др.

Использовался метод иммуноферментного анализа (ИФА) с целью типирования вируса простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типов, а также метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Верификация диагноза генитального герпеса устанавливалась на основании скрининговых методов ИФА и ПЦР.

Клеточное звено иммунитета оценивалось по количественному содержанию лейкоцитов, относительному (%) и абсолютному (в 1 мкл.) содержанию лимфоцитов, Т-лимфоцитов, их иммунорегуляторных субпопуляций. Функциональная активность клеточного звена иммунитета оценивалась по количеству Т-лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности рецептор к интерлейкину-2 (ИЛ-2), СD25+ клетки и антигены HLA-DR, а также по их пролиферативной активности при внесении стимуляторов-митогенов. Исследования проводили с помощью моноклональных антител производства НПО «Сорбент» Российского центра аллергологии и иммунологии МЗ России на лазерных цитометрах методом проточной цитофлюорометрии (Facscan, "Becton Dickenson"). Гуморальное звено иммунитета включало комплексную оценку относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов, концентрации иммуноглобулинов классов А, М, G в сыворотке крови, активированных лимфоцитов, экспрессирующих на мембране антигены HLA-DR. В наборе РгоСоn для измерения уровней ИЛ-1, ФНО-, ИЛ-2, ИЛ-4, в сыворотке крови использовался твердофазный иммуноферментный метод с применением пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента.

Интерфероновый статус определяли в соответствии с методическими рекомендациями Минздрава РФ "Определение интерферонового статуса в цельной крови у людей при массовых обследованиях".

Для определения литической активности естественных клеток-киллеров (ЕКК) использовали стандартный Н-уридиновый микроцитотоксический тест.

Методы статистической обработки данных Для статистической обработки данных использовался персональный компьютер с предустановленной операционной системой Microsoft Windows XP и пакет прикладных программ Microsoft Office 2003 SP-2 (Microsoft Office Word 2003, Microsoft Office Excel 2003). Материалы исследования обрабатывали методом вариационной статистики, используя среднеарифметическое, среднеквадратичное отклонение, критерий Стьюдента и критерий Фишера. Достоверность различий определяли с помощью уровня достоверной вероятности. Парную корреляцию показателей определяли отдельно для каждой группы.

Методы лечения Была использована следующая схема лечения. Ацикловир внутрь по мг каждые 4 часа 5 раз в сутки на протяжении 5 дней. Одновременно в течении 10 дней применялся генферон в виде ректальных (1000000 МЕ) суппозиториев 2 раза в сутки. Затем в течение 10 дней один раз в сутки внутримышечно вводился 0,01% раствор стемокина.

Результаты исследования Всего под нашим наблюдением находилось 57 мужчин с генитальным герпесом в возрасте от 19 до 65 лет (табл. 1).

Таблица Распределение больных с герпесом по возрастному составу Возраст, Мужчины лет абс. % до 30 24 42,31-50 21 36,51 и старше 12 21,Итого: 57 У 48 из них генитальный герпес протекал с клиническими проявлениями и у 9 пациентов диагностирована латентная форма заболевания (Рис. 1).

Pages:     || 2 | 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»