WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |

подварианта железистого рака легкого В работе использована гистологическая классификация, предложенная Гистологическая структура Н.А.Краевским, А.С. Ягубовым (1969) и И.Г. Ольховской (1982), в которой же­ Ста­ TNM Число лезистый рак легкого разделен на высоко- (ВАК или AKI), умеренно- (УАК или БАР AKI АКП AKIII АК дия боль­ ных АКП), малодифференцированную аденокарциному (МАК или AKIII) и бронIA T1N0M0 258 82 59 68 16 хиолоальвеолярный рак (БАР). В соответствии с этой классификацией больные 23,3% 40,6% 29,1% 20,0% 8,7% 18,3% срезы толщиной 8 мкм с презентабельной гистологической картиной. Ставили Гистологическая структура Ста­ TNM Число позитивные и негативные контроли. В качестве хромогена применялся диамиБАР АК1 АК11 АКП1 АК дия боль­ нобензидин (DAB), а в качестве фонового красителя - гематоксилин Караци.

ных IB T2N0M0 254 39 51 96 42 Оценку результатов окрашивания проводили с применением светового микро­ 22,9% 19,3% 25,1% 28,2% 22,8% 14,4% скопа «МикМед-2» (Россия) при увеличении х10, х40. Для всех маркеров оце­ 2А T1N1M0 36 5 9 13 6 3,2% 2,5% 4,4% 3,8% 3,3% 1,6% нивали локализацию окрашивания в клетке (ядро, цитоплазма, мембрана).

T2N1M0 104 15 19 41 15 При этом количество положительных клеток подсчитывали в зонах, 9,4% 7,4% 9,4% 12,1% 8,2% 7,7% 2В T3N0M0 31 6 2 11 8 содержащих их максимальное количество.

2,8% 2,9% 0,9% 3,2% 4,3% 2,2% В ИГХ исследованиях применяли следующие критерии:

T2N1M0 + 135 21 21 52 23 T3N0M0 12,2% 10,4% 10,3% 15,3% 12,5% 10,0% • уровень экспрессии Ki67, топоизомеразы Па, онкогена р53 и CAS T1-2N2M0 149 16 26 57 28 подсчитывали путем определения соотношения окрашенных 13,4% 7,9% 12,8% 16,8% 15,2% 12,2% T3N1-2M0 51 3 4 8 22 DABOM ядер к неокрашенным в 10 полях зрения при увеличении ЗА 4,6% 1,5% 1,9% 2,4% 11,9% 7,7% х40 и выражали в процентах. При этом подсчитывали количество T1-2N2M0 200 19 30 65 50 + позитивно окрашенных клеток, приходящееся на 800-1000 опухо­ 18,0% 9,4% 14,7% 19,1% 27,2% 20,0% T3N1-2Mлевых клеток.

T1-3N3M0 18 0 3 7 4 1,6% 1,5% 2,1% 2,2% 2,2% • оценку экспрессии Е-кадгерина осуществляли в баллах (от 1 до 6) T4N1-3M0 63 10 7 13 14 путем определения процента окрашенных DABOM мембран и/или зв 5,7% 4,9% 3,5% 3,8% 7,6% 10,5% T1-3N3M0 81 10 10 20 18 23 цитоплазмы опухолевых клеток. Опухоли с окрашиванием менее + 7,3% 4,9% 4,9% 5,9% 9,8% 12,7% 5% клеток оценивали в 1 балл, окрашивание более 5% - в 2 балла, T4N1-3Mокрашивание менее 50% - в 4 балла и окрашивание более 50% 4 T1-4N1- 145 26 23 26 29 ЗМ1 13,1% 12,9% 11,3 7,6% 15,7% 22,7% клеток - в 6 баллов.

ИТОГО 1109 202 203 340 184 180 Статистический анализ проводили на персональном компьютере с исполь­ 100% 100% 100% 100% 100% 100% зованием программы "Statistica Microsoft Windows" версия 6.0, StatSoft Inc.

В процессе исследования был применен комплекс методов, включающих (США). Для проверки достоверности различий значений признаков в группах клинические, лабораторные, рентгено-бронхологические, гистологические и использовали тесты «хи-квадрат», z-критерий и точный критерий Фишера. Раз­ иммуногистохимические. Иммуногистохимические исследования (ИГХ) прово­ личия считались статистически достоверными при р<0,05 (95% точности). Рас­ дили проспективно на серийных криостатных срезах опухолей с помощью чет выживаемости проводили методом Каплана-Мейера. Сравнение двух криостатного микротома фирмы «Leica», модель СМ 1900 (Германия).

кривых выживаемости проводили с помощью логранкового критерия. Для ИГХ окрашивание выполняли с помощью моноклональных антител и вто­ оценки независимости признаков использовали модель пропорционального рег­ ричной системы детекции фирмы «Novocastra, UK». Для анализа использовали рессионного анализа Кокса.

Результаты исследований Особенности регионарного и отдаленного метастазирования железистого рака легкого Регионарное метастазирование (МТС) отражает прогрессию опухолевого процесса по лимфатической системе и является важнейшим прогностическим фактором при раке легкого. В литературе продолжают обсуждаться вопросы взаимосвязи регионарного и отдаленного метастазирования с возрастом и по­ лом больных раком легкого, с клинико-анатомической формой и гистологиче­ ской структурой опухоли, а также степенью ее дифференцировки (подварианРис. 1. Частота регионарного метастазирования при различных гистологических подтом). Представленный клинический материал у однородной группы больных вариантах железистого рака легкого.

позволяет оценить закономерности регионарного и отдаленного метастазирова­ Анализ частоты метастатического поражения регионарных лимфатиче­ ния при ЖРЛ.

ских узлов при различных гистологических подвариантах в зависимости от Т Метастатическое поражение регионарных лимфатических узлов наблю­ показывал: при Т1 метастазирование в лимфатические узлы имеет тенденцию к далось у 492 (44,4%) больных, одинаково часто у женщин (45,5%) и мужчин повышению от БАР (20,2%) к AK1II (38,9%) (рис. 2); при Т2 МТС поражение (44,0%). Метастазы в отдаленных органах в 2 раза чаще наблюдались среди регионарных узлов диагностируют у 41,1-50,6% (рис. 3), а при ТЗ-4 - у 50,0женщин-у 21,5±2,4%, чем мужчин- 10,1±1,1%(р<0,05).

63,6% больных и не имеет связи с гистологическим подвариантом.

Клинически важно знать частоту метастазирования во внутригрудные лимфатические узлы у лиц в возрасте до 60 лет и 60 лет и старше при одинако­ вых размерах опухоли. Частота метастазирования в обеих возрастных группах повышается с увеличением символа Т. Так, у больных в возрасте до 60 лет при 3T1NТ1-2 регионарные метастазы обнаружены достоверно чаще (40,1%), чем в воз­ растной группе старше 60 лет (31,4%) (р<0,05).

При расширенных операциях (лоб- или пневмонэктомии) также статисти­ чески достоверно (р<0,05) установлено более частое метастазирование во внут­ ригрудные лимфатические узлы у лиц до 60 лет по сравнению с более старшей возрастной группой.

Рис. 2. Частота регионарного метастазирования при различных гистологических под­ вариантах железистого рака легкого Т1.

На частоту метастатического поражения регионарных лимфатических уз­ Таким образом, на частоту регионарного метастазирования железистого лов влияние оказывает гистологический подвариант ЖРЛ (рис. 1): чем ниже рака легкого гистологический подвариант опухоли оказывает влияние при Т1 и степень дифференцировки опухоли, тем чаще выявляются регионарные мета­ Т2; при большем распространении первичной опухоли частота регионарного стазы (р<0,05).

14 ренхиму (37,2%). Метастазы в отдаленных органах вне грудной полости чаще метастазирования не зависит от подварианта опухоли.

всего располагались в головном мозгу, печени, ребрах, позвонках, мягких тка­ нях туловища.

Таким образом, при первично распространенном ЖРЛ IV стадии чаще наблюдается внутригрудная диссеминация опухоли в легочной паренхиме и на плевре, реже - метастазы обнаруживают в отдаленных органах (головной мозг, печень и др.).

Оценка степени злокачественности железистого рака легкого на основе клиБАР AKI АКИ АК III нико-морфологического и иммуногистохимического исследования онкомаркеров Гистологический подвариант Клиническая практика показывает, что при одной и той же стадии забо­ левания, гистологической структуре опухоли, включая степень ее дифференциРис. 3. Частота регионарного метастазирования при различных гистологических подвариантах железистого рака легкого Т2.

ровки, несмотря на радикальное хирургическое лечение больных РЛ, одни па­ Отдаленное метастазнрование железистого рака легкого циенты выздоравливают, а у других наблюдается быстрое прогрессирование На этапе первичной диагностики у 145 (13,1%) больных диагностированы заболевания. Следовательно, клиницисту, наряду с вышеуказанными фактора­ отдаленные метастазы (Ml), среди мужчин - 10,1% (83 из 821), среди женщин в ми прогноза, необходимы дополнительные критерии оценки степени злокаче­ 2 раза больше - 21,5% (62 из 288) (р<0,0001). Частота поражения метастазами ственности (СЗ) опухоли. К таким факторам в настоящее время относят морфо­ отдаленных органов не имела связи с возрастом.

логические особенности, включающие опухолевые маркеры, которые опреде­ Несмотря на то, что в группе больных с отдаленными метастазами (МТС) ляют уровень пролиферативной активности (ПА), клеточной гибели (апоптоза), общее распределение больных по символу Т было таким же, как и у больных межклеточные связи и другие свойства опухоли. Однако до настоящего време­ без отдаленных МТС, удельный вес первичных опухолей размером ТЗ-4 в ни морфологические критерии степени злокачественности РЛ, в отличие от, группе Ml был в 2 раза выше (31,8% против 15,5%, р<0,0001).

например, рака молочной железы (метод Блюмм-Ричардсона), в онкологии не Метастатическое поражение регионарных лимфатических узлов стати­ разработаны.

стически достоверно чаще наблюдалось при Ml, по сравнению с МО (63,5% и Для установления дополнительных критериев СЗ ЖРЛ, нами совместно с 41,5% соответственно). Среди первичных больных с IV стадией отдаленные сотрудниками кафедры патологической анатомии Московской медицинской МТС в органах грудной полости локализовались у 75,2%, МТС в отдаленных академии им. И.М. Сеченова, у 97 больных исследованы следующие онкомарорганах вне грудной полости - у 11,7% и у 13,1% больных наблюдалось одно­ керы - KJ67, топоизомераза На, ген-су прессор рака р53, С AS, онкоген межкле­ временное поражение органов грудной полости и отдаленных органов. Внутриточной адгезии - Е-кадгерин.

грудные отдаленные МТС наиболее часто в виде милиарных диссеминатов по­ Маркеры пролиферации ражали висцеральную и париетальную плевру - 46,9% (из них у 23,5% опухоле­ Онкоген KJ67. Продукт реакции обнаруживали в ядрах опухолевых кле­ вая диссеминация сопровождалась раковым плевритом), реже - легочную паток и его экспрессия колебалась от 1,6% до 81,7%, при 95% доверительном 16 интервале (ДИ) - 27,2-32,3%. БАР и АКП, БАР и АК.Ш; AKI и AK.III). Таким образом, экспрессия топоизоме­ Статистический анализ показал, что между экспрессией Ki67 и такими разы Па коррелирует с индексом ПА KJ67 и гистологическим подвариантом клиническими параметрами, как возраст и пол, корреляция отсутствует. В то же опухоли, поэтому может рассматриваться как критерий степени злокачествен­ время уровень экспрессии Ki67 имеет корреляционную связь с размером опу­ ности железистого рака легкого.

холи (р<0,05): чем больше размер опухоли, тем выше в ней уровень клеточного Scatterplot: Ki67 vs. Топо (Casewise MD deletion) Tono = 11,207 +,48405 * Kiделения.

Correlation: r =,Между уровнем экспрессии Ki67 и метастатическим поражением внутригрудных лимфатических узлов выявлена положительная корреляционная связь (р<0,05). При этом у больных с метастазами во внутригрудных лимфатических узлах средний уровень KJ67 составил 33,9±1,9%, а у больных без регионарных метастазов - 27,9±1,6%. По мере снижения уровня дифференцировки ЖРЛ на­ блюдается повышение ПА опухолевых клеток. Так, при БАР средний уровень экспрессии Ki67 составил 17,2±3,2%, а при АК III - 42,1±2,4% (р<0,05).

Таким образом, уровень экспрессии Ki67 отражает СЗ ЖРЛ, коррелируя с размером опухоли, метастазами во внутригрудных лимфатических узлах и гис­ тологическим подвариантом опухоли.

Онкоген топоизомераза Па, также как и КЛ67, располагался в ядре опухо­ Рис. 4. Корреляция между уровнями экспрессии топоизомеразы Па и Ki67.

левой клетки. Биологическая роль топоизомеразы Па до конца не изучена, она, Общеизвестно, что выживаемость больных РЛ существенно ухудшается с одной стороны, обеспечивает пространственную ориентацию ДНК и готов­ при наличии метастазов в регионарных лимфатических узлах. Учитывая это об­ ность клетки к апоптозу, с другой - отвечает за чувствительность к противоопу­ стоятельство, проведен дополнительный корреляционный анализ ИГХ марке­ холевым препаратам (эпиподофиллотоксинам и антрациклинам), которые яв­ ров, включая и топоизомеразу Па, относительно уровня экспрессии Ki67, у ляются ингибиторами топоизомеразы На.

больных с и без МТС в лимфатических узлах. Выше нами было установлено, При анализе экспрессии топоизомеразы Па достоверных корреляций ее что средний уровень экспрессии Ki67, составляющий менее 28%, чаще наблю­ экспрессии с возрастом, полом больных, а также размером опухоли и пораже­ дается у больных без МТС во внутригрудных лимфатических узлах. Исходя из нием лимфатических узлов не найдено. При этом установлена статистическая выявленной корреляции между KJ67 и экспрессией топоизомеразы На, изучен связь средней силы между уровнем экспрессии топоизомеразы Па и индексом вопрос о возможных различиях уровней топоизомеразы Па в двух сравнитель­ ПА Ki67 (р<0,05; рис. 4).

ных группах - с KJ67 до 28% и с индексом Ki67 28% и выше. При наличии та­ Уровень экспрессии топоизомеразы На, также как и KJ67, зависел от гис­ ких различий клиницист по уровню экспрессии топоизомеразы На может полу­ тологического подварианта железистого рака легкого: при БАР он составил чить дополнительную информацию о СЗ опухоли. Проведенный сравнительный 16,6±3,1%, AK.I - 21,1±1,9%, АКИ - 28,0*2,1% и AK.III - 30,9±3,2% (р<0,05 для анализ выявил значимые различия в этих группах, при этом у больных с уров­ нем Ki67 до 28% средний уровень топоизомеразы Па (Торо I) составил 20,3±2,3%, а в группе больных с KJ67 более 28% экспрессия топоизомеразы Па (Торо II) составила 29,9±1,6% (р<0,05).

Таким образом, уровень экспрессии топоизомеразы Па свыше 20% явля­ ется одним из параметров высокой СЗ ЖРЛ. Больные с уровнем ПА Ki67 более 28% и экспрессией топоизомеразы Па свыше 20% имеют потенциально высо­ коагрессивные опухоли.

ИГХ белкового гена супрессора р53. Ген р53 получил название «страж ге­ нома» благодаря своей центральной роли в поддержании стабильности гено­ ма многоклеточного организма и предотвращения удвоения поврежденной ДНК.

Этот ген блокирует процесс деления клетки через апоптоз в случае повреждения ее ДНК. Считается, что «мутантный» р53 (в отличие от гена-супрессора рРис. 5. Корреляция между индексом Ki67 и экспрессией гена-супрессора р53.

«дикого» типа) не способен распознать дефектный генетический материал в Для оценки СЗ ЖРЛ также, как при анализе топоизомеразы Па, больные с инициированной клетке и запустить программу апоптоза. Таким образом, гене­ экспрессией р53 были разделены на две группы: одну (р53 I) - составили паци­ тические изменения в клетках опухоли приводят к потере контроля за пролифе­ енты с индексом Ki67 до 28% и другую (р53 II) - с индексом Ki67 более 28%.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»