WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

Все больные были разделены на 3 группы по вариантам преобладания клинической симптоматики: смешанный вариант, переднероговой и пирамидный.

Смешанный вариант течения заболевания, характеризующийся одинаковой степенью поражения верхнего и нижнего мотонейронов, встречался у большинства больных как в основной группе, так и в группе сравнения (52% случаев в обеих группах).

Также все больные были распределены по темпу прогрессирования заболевания. В основной группе быстрый темп прогрессирования наблюдался у 40% больных, медленный - у 60%. В группе сравнения быстрый – у 68% больных, медленный у 32%.

Длительность заболевания колебалась от 4 месяцев до 10 лет, в среднем 24,месяца. В основной группе длительность заболевания до 12 месяцев встречалась в 32% случаев, от 13 до 24 месяцев – в 24% случаев, 25-36 месяцев – в 20%, более месяцев в 24% случаев.

У 2-х больных наблюдалось «доброкачественное» течение заболевания с длительностью более 9 лет. В группе сравнения длительность заболевания до месяцев наблюдалась у 48% больных, 13-24 месяца – у 44%, 25-36 месяцев – у 4%, более 48 месяцев у 4% Биохимическая часть работы выполнялась на базе лаборатории биохимии свободно-радикальных процессов Российского кардиологического научнопроизводственного комплекса; лаборатории молекулярной биотехнологии НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН; лаборатории «ЭФИС» на базе НИИ физической культуры и спорта.

Забор крови производился в НЦ Неврологии РАМН из локтевой вены натощак в первой половине дня. Образцы крови центрифугировались при 3000 об/мин в течение 10 минут. Полученная плазма замораживалась в холодильнике при температуре -20о С до проведения исследования.

Уровень тестостерона, свободного тестостерона, дигидротестостерона (ДГТ), дигидроэпиандростерона сульфата, андростендиол глюкуронида, андростендиона, 17-ОН-прогестерона, эстрадиола, прогестерона, пролактина, фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), лютеинизирующего гормона (ЛГ), глобулина, связывающего половые гормоны определялся с помощью твердофазного конкурирующего иммунохемилюминисцентного метода на аппарате IMMULITE 2000 (USA) на базе НИИ физической культуры и спорта в лаборатории «ЭФИС».

Уровень VEGF определялся методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) с использованием коммерческого набора Human VEGF QuantiGlo ELISA Kit (R&D Systems, Англия) в НИИ эпидемиологии и микробиологии им.

Н.Ф. Гамалеи. Все образцы были исследованы дважды. Концентрация VEGF в плазме выражалась в пикограммах на миллилитр (пг/мл). Значения представлены в виде средних значений со стандартными отклонениями.

Для определения активности антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазы, глутатион-связанных ферментов, каталазы) образцы цельной крови (0,1 мл) смешивали в соотношении 1:9 с гипотоническим 5мМ К/Na-фосфатным буфером рН 7,4; после гемолиза пробы быстро замораживали и хранили до определения активности ферментов не более 1 месяца при t0 -200 C.

Активность Cu/Zn супероксиддисмутазы-1 (СОД1) в эритроцитарных лизатах определяли после осаждения гемоглобина смесью этанол : хлороформ (3:5), по методу C. Beauchamp, I. Fridovich (1971) по ингибированию восстановления нитротетразолия синего в ксантин-ксантиноксидазной системе.

Измерение проводили на спектрофотометре Hitachi 220A (Япония).

За единицу активности СОД принимали количество фермента, необходимое для 50% ингибирования реакции восстановления нитротетразолия синего в условиях определения. Активность выражали в единицах активности на 1 г гемоглобина (ед/г Нв). Учитывая, что эритроциты лишены митохондрий, следует подчеркнуть, что выявляемая нами активность супероксиддисмутазы представляет собой цитозольную форму Cu/Zn СОД1.

Активность глутатионпероксидазы определяли в сопряженной глутатион - глутатионредуктазной системе по окислению никотинамидадениндинуклеотид фосфата (НАДФ-Н), используя гидроперекись трет-бутила в качестве субстрата по методу D.E. Pagliu, W.N. Valentine (1967) в модификации В.З. Ланкина (1981).

Скорость окисления НАДФ-Н при длине волны 340 нм на химическом анализаторе Labsystem Oy Fp-901 (Финляндия). За единицу активности принимали количество фермента, необходимое для окисления 1 мкмоля восстановленного глутатиона в условиях определения (что соответствует окислению 0,5 мкмоль НАДФ-Н в минуту). Результаты выражали в единицах активности на 1 г гемоглобина (ед/г Нв).

Активность глутатионредуктазы определяли методом J. Carbery, B.

Mannervik (1975) по окислению НАДФ-Н в реакции восстановления окисленного глутатион-дисульфида. Результаты выражали в единицах активности на 1 г гемоглобина (ед/г Нв).

Активность глутатион-S-трансферазы определяли по образованию конъюгатов глутатиона с 1-хлор-2,4-динитробензолом по методу J.H. Keen, W.B.

Jakoby (1978). За единицу активности глутатион-S-трансферазы принимали количество фермента, необходимое для конъюгирования 1 мкмоль глутатиона в минуту. Результаты выражали в единицах активности на 1 г гемоглобина (ед/г Нв).

Измерение содержания общих сульфгидрильных групп проводили спектрофотометрически с использованием реагента Эллмана (Habeeb A.F., 1972) при 412 нм. Для определения небелковых SH-групп проводили предварительное осаждение белков 50% ТХУ. Уровень белковых SH-групп определяли по разности между общим количеством SH-групп и небелковыми SH-группами. Результаты выражали в мкмолях на 1 г гемоглобина (мкмоль/г Нв).

Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6,0 (StatSoft Inc., США) для персонального компьютера. Для нормально распределенных признаков вычислялось среднее значение и стандартное отклонение, результаты представлены в виде m±. При выполнении описательной статистики для количественных признаков, распределение которых не подчинялось законам нормального распределения, вычислялись медиана и интерквартильный размах-нижний 25% и верхний 75%-ный интервалы. Результаты представлены в виде медианы [нижний квартиль (LQ)=; верхний квартиль (UQ)=]. Сравнение двух независимых групп по одному признаку для количественных, качественных, порядковых и номинальных признаков проводилось с помощью критерия Манна-Уитни. Сравнение трех независимых групп по одному признаку выполнялось по методу Краскела-Уоллиса.

Взаимосвязь двух признаков анализировалась при помощи корреляционного анализа по Спирмену, с вычислением коэффициента корреляции R. Уровень достоверности установлен при р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Результаты исследования гормонального статуса у больных БАС Нами было обследовано 25 молодых пациентов (15 мужчин и 10 женщин), средний возраст составил 33,2±6,1 года. Группу сравнения составили 20 пациентов с достоверным диагнозом БАС старше 40 лет (13 женщин и 7 мужчин), средний возраст составил 56,9±9,8 лет. Контрольная группа состояла из 10 человек (мужчин и 5 женщин), не имеющих какой-либо неврологической симптоматики.

Средний возраст составил 28±5,3 лет.

Всем исследуемым был определён уровень тестостерона, свободного тестостерона, дигидротестостерона, андростендиола глюкуронида, андростендиона, прогестерона, 17-ОН-прогестерона, эстрадиола, лютеинизирующего гормона, ФСГ, пролактина, дигидроэпиандростерона сульфата, гормона, связывающего белки в плазме крови.

При сравнении мужчин из молодой группы с мужчинами старшей возрастной группы было выявлено статистически значимое повышение уровня дигидротестостерона (517,00 [467,00; 937,00] пг/мл и 442,00 [340,00; 486,00] пг/мл соответственно; р=0,04). С возрастом уровень большинства гонадальных гормонов неуклонно снижается, достигая своего минимума к 60-65 годам, поэтому более высокий уровень ДГТ у молодых пациентов физиологически обоснован.

Достоверных различий в концентрациях других гормонов в этих двух группах выявлено не было. Концентрация тестостерона, свободного тестостерона, андростендиона у молодых пациентов была несколько ниже по сравнению с пациентами из старшей возрастной группы, хотя достоверных различий между ними не наблюдалось (таб. 1). Отсутствие статистически значимой разницы в концентрациях данных гормонов в зависимости от возраста, тенденция к снижению их уровня у мужчин молодого возраста, возможно может являться одной из причин более раннего заболевания боковым амиотрофическим склерозом у молодых мужчин.

Подтверждением нарушений метаболизма гормонов у мужчин в возрасте до 40 лет явилось достоверное снижение уровней ДГТ, прогестерона и эстрадиола по сравнению с группой контроля (таб. 2).

Таблица 1.

Концентрации гормонов в группе мужчин группы Мужчины <40 лет Мужчины >40 лет р (n=15) (n=7) гормоны тестостерон, нмоль/л 15,70 [12,80; 18,30] 17,80 [15,00; 18,10] 0,св. тестостерон, пг/мл 15,80 [12,00; 18,90] 14,30 [10,30; 15,00] 0,ДГТ, пг/мл 517,00 [467,00; 937,00] 442,00 [340,00; 486,00] 0,андростендиол, нг/мл 8,70 [7,08; 9,20] 7,29 [5,92; 8,20] 0,андростендион, нмоль/л 3,50 [1,70; 8,20 ] 9,20 [4,40; 10,10] 0,прогестерон, нмоль/л 1,25 [1,07; 1,84] 0,94 [0,66; 1,65 ] 0,17-ОН-прогестерон, 4,00 [3,20; 6,69] 3,20 [3,00; 4,20] 0,нмоль/л эстрадиол, нмоль/л 0,28 [0,08; 31,70 ] 0,07 [0,07; 20,00] 0,ЛГ, мМЕд/мл 2,80 [1,75; 4,32 ] 3,14 [2,66; 5,95] 0,ФСГ, мМЕд/мл 3,12 [1,97; 6,67 ] 5,56 [3,73; 11,00] 0,пролактин, мМЕд/мл 135,00 [116,00; 161,00] 71,54 [64,90; 212,00] 0,SHBG, нмоль/л 38,00 [23,60; 45,90 ] 44,20 [34,50; 72,50 ] 0,ДЭА-С, мкг/мл 1,62 [1,27; 2,26] 1,37 [0,59; 1,97] 0, Таблица Концентрации гормонов у молодых мужчин и в контроле группы Мужчины <40 лет Мужчины >40 лет р гормоны (n=15) (n=5) тестостерон, нмоль/л 15,70 [12,80; 18,30 ] 19,00 [17,80; 20,30] 0,св. тестостерон, пг/мл 15,80 [12,00; 18,90] 14,00 [11,70; 16,60] 0,ДГТ, пг/мл 517,00 [467,00; 937,00] 1193,00 [1164,00; 1601,00] 0,андростендиол, нг/мл 8,70 [7,08; 9,20] 9,60 [8,60; 18,70] 0,андростендион, нмоль/л 3,50 [1,70; 8,20 ] 6,30 [6,30; 8,20] 0,прогестерон, нмоль/л 1,25 [1,07; 1,84] 1,82 [1,77; 3,05] 0,17-ОН-прогестерон, нмоль/л 4,00 [3,20; 6,69] 4,30 [3,90; 4,50] 0,эстрадиол, нмоль/л 0,28 [0,08; 31,70 ] 33,90 [23,50; 37,60] 0,ЛГ, мМЕд/мл 2,80 [1,75; 4,32 ] 4,33 [4,18; 4,60] 0,ФСГ, мМЕд/мл 3,12 [1,97; 6,67 ] 3,94 [3,45; 4,06] 0,пролактин, мМЕд/мл 135,00 [116,00; 161,00] 159,00 [146,00; 178,00] 0,SHBG, нмоль/л 38,00 [23,60; 45,90] 23,70 [20,70; 24,00] 0,ДЭА-С, мкг/мл 1,62 [1,27; 2,26] 2,85 [2,18; 3,32] 0,При анализе результатов исследования у женщин молодого возраста отмечалось достоверное повышение концентрации большинства гормонов по сравнению с пациентками из старшей возрастной группы. Выявлена тенденция к повышению уровня ДГТ и андростендиола глюкуронида по сравнению со старшей возрастной группой, не достигшая уровня статистической достоверности (таб. 3).

Относительно высокие концентрации основных нейростероидов у молодых женщин, вероятно, обуславливают более редкие случаи заболевания по сравнению с мужчинами.

Таблица Концентрации гормонов в группе женщин группы Женщины <40 лет Женщины >40 лет р (n=10) (n=13) гормоны тестостерон, нмоль/л 2,30 [1,71; 3,55 ] 1,10 [0,93; 1,62 ] 0,св. тестостерон, пг/мл 2,39 [0,70; 3,76] 0,40 [0,20; 0,78] 0,ДГТ, пг/мл 393,50 [333,00; 434,00] 342,00 [254,00; 398,00] 0,андростендиол, нг/мл 5,44 [4,00; 6,10] 3,90 [2,60; 5,50] 0,андростендион, нмоль/л 9,15 [2,70; 11,90 ] 2,60 [1,50; 5,50] 0,прогестерон, нмоль/л 2,72 [1,60; 4,13 ] 0,94 [0,78; 1,26] 0,17-ОН-прогестерон, 3,75 [3,40; 4,40 ] 3,02 [1,80; 3,77] 0,нмоль/л эстрадиол, нмоль/л 1,18 [0,35; 37,20] 0,07 [0,07; 0,11 ] 0,ЛГ, мМЕд/мл 6,55 [2,38; 10,06] 21,20 [16,60; 33,00] 0,ФСГ, мМЕд/мл 6,10 [3,98; 7,44] 62,90 [48,40; 92,00] 0,пролактин, мМЕд/мл 326,00 [166,00; 490,00] 158,00 [124,00; 174,00] ] 0,SHBG, нмоль/л 17,30 [15,30; 21,90] 58,00 [45,00; 74,10] 0,ДЭА-С, мкг/мл 2,13 [1,77; 2,60] 0,83 [0,65; 1,10] 0,Нами было выявлено достоверное снижение уровня эстрадиола (1,18 [0,35;

37,20] нмоль/л и 78,00 [62,20; 89,50] нмоль/л соответственно) и уровня белка, связывающего половые гормоны у молодых женщин по сравнению с контрольной группой (таб. 4).

Таблица Концентрации гормонов у молодых женщин и в контроле Группы Молодые женщины Контроль, женщины р (n=10) (n=5) гормоны тестостерон, нмоль/л 2,30 [1,71; 3,55 ] 1,63 [1,45; 1,99] 0,св. тестостерон, пг/мл 2,39 [0,70; 3,76] 1,06 [1,03; 1,33] 0,ДГТ, пг/мл 393,50 [333,00; 434,00] 306,60 [301,40; 327,00] 0,андростендиол, нг/мл 5,44 [4,00; 6,10] 4,60 [4,60; 5,80] 0,андростендион, нмоль/л 9,15 [2,70; 11,90 ] 7,60 [6,00; 7,80] 0,прогестерон, нмоль/л 2,72 [1,60; 4,13 ] 19,70 [4,96; 24,50] 0,17-ОН-прогестерон, 3,75 [3,40; 4,40 ] 4,30 [3,90; 6,20] 0,нмоль/л эстрадиол, нмоль/л 1,18 [0,35; 37,20] 78,00 [62,20; 89,50] 0,ЛГ, мМЕд/мл 6,55 [2,38; 10,06] 1,80 [1,13; 4,08] 0,ФСГ, мМЕд/мл 6,10 [3,98; 7,44] 2,65 [2,47; 4,99] 0,пролактин, мМЕд/мл 326,00 [166,00; 490,00] 135,00 [128,00; 339,00] 0,SHBG, нмоль/л 17,30 [15,30; 21,90] 71,30 [48,80; 78,00] 0,ДЭА-С, мкг/мл 2,13 [1,77; 2,60] 1,81 [1,25; 2,79] 1,Для выяснения роли выявленных изменений в формировании клинических особенностей заболевания были выделены группы больных с быстрым и медленным темпом прогрессирования заболевания. В группе молодых мужчин пациентов (66,6%) были с медленным темпом прогрессирования заболевания и пациентов (33,4%) – с быстрым прогрессированием. При сравнении показателей гормонального статуса у этих пациентов достоверной разницы в концентрациях половых гормонов выявлено не было. У пациентов с быстрым темпом прогрессирования имелась тенденция к увеличению уровня фолликулостимулирующего гормона, однако достоверной разницы в концентрациях между двумя группами выявлено не было (таб. 5).

Таблица 5.

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»