WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 |

Лейкоциты>10, бактерии выявлены Видовой состав выделенных культур бактерий в этиологически значимом количестве (не менее 104 КОЕ), изученный по историям болезней пациентов, наблюдавшихся с 2005 по 2007гг. в поликлиниках МЦ УДП РФ с диагнозом хронической простатит, представлен в таблице 4.

Таблица 4. Микроорганизмы, выделенные у амбулаторных больных хроническим простатитом (n=600).

1. S.epidermidis – 31,6% 2. Enterococcus faecalis – 20,6% 3. Enterococcus species – 9,5% 4. Streptococcus viridans – 8,8% 5. E.coli – 7,3% 6. Corynebacterium species – 6% 7. Streptococcus agalactiae – 4,4% 8. Streptococcus pneumoniae – 3,6% 9. Staphylococcus aureus – 2,3% 10. Acinetobacter spp. – 1,5% 11. Proteus mirabilis – 3,6% 12. Klebsiella species – 0,9% 13. Enterobacter species – 0,8% 14. Streptococcus haemolyticus – 0,75% 15. Лактозонегативные энтерококки – 0,2% Выделенные микроорганизмы в среднем в 50% случаев находились в виде ассоциаций. При этом самыми «ассоциативными» оказались S.epidermidis:

в 2003г. – 24,7% от общего количества микроорганизмов, вступивших в ассоциации, в 2006г. – 31,5%, в 2007г. – 30%. Enterococcus faecalis (соответственно по годам): 25,5%, 27%, 10,5%; E.coli: 9%, 8%, 8%;

Corynebacterium species: 5,5%, 8%, 8%; Acinetobacter spp. выявляли только в ассоциях; другие микроорганизмы встречались реже.

3. Определение факторов патогенности выделенных культур.

Нами была изучена патогенность выделенных стафилококков, стрептококков, кишечных бактерий, синегнойной палочки, поскольку данных о проведении таких исследований при хроническом простатите в литературных источниках найдено не было.

К факторам патогенности стафилококков относят наличие капсулы, ферментов лецитиназу и коагулазу, вызывающей свертывание сыворотки, - и -гемолизинов. Также определяли наличие некротоксина, который в наших исследованиях вызвал некроз кожи у 8 кроликов от введения культуры S.aureus.

Воспалительные изменения у лабораторных животных вызывали S.epidermidis, S.warneri, S.haemolyticus. Факторы вирулентности выделенных стафилококков представлены в таблице 5.

Таблица 5. Факторы вирулентности стафилококков.

Всего капсула коагулаза лецитиназ гемолизины некротоксин а 61 штамм 47 8 33 8 штаммов -41 штамм штаммов штаммов штамма -16 штаммов Патогенность стрептококков оценивали по способности давать гемолиз на кровяном агаре, наличию капсулы, способности к адгезии. Также патогенные свойства стрептококков определяли в биопробе на линейных мышах. Для заражения использовали 18-20 часовые бульонные культуры, которые вводили внутрибрюшинно трем мышам. Культуру считали патогенной при гибели не менее двух мышей. 30% выделенных культур стрептококков оказались патогенными для белых беспородных мышей.

Патогенные стрептококки обладали адгезинами, при помощи которых способны прикрепляться к рецепторам клеток и компонентам межклеточного вещества; внеклеточными ферментами, обеспечивающими распространение микробов в тканях предстательной железы и вызывающими их повреждение и воспаление; гемолизинами, оказывающими цитотоксическое воздействие.

Выявленные факторы вирулентности представлены в таблице 6.

Таблица 6. Факторы вирулентности выделенных стрептококков.

Всего Гемолизин Капсула Адгезины Патогенность для белых мышей 47 штаммов 47 штаммов 20 штаммов 20 штаммов 14 штаммов Патогенность бактерий семейства Enterobacteriaceae рода Escherihia – E.coli определяли по наличию капсулы (К-антигена), маскирующей ее поверхностные антигены; адгезивных антигенов, позволяющих колонизировать клетки; жгутиками, обеспечивающими подвижность бактерий и способствующих распространению инфекции в тканях предстательной железы; липолисахаридом, вызывающим гибель белых мышей.

Биопробу проводили на белых лабораторных мышах. Готовили суспензию культуры в физиологическом растворе с концентрацией клеток 1хв 9ст./мл по бактериальному стандарту мутности и вводили внутрибрюшинно трем белым мышам массой 14-16г. За животными наблюдали в течение 3 суток:

в случае гибели двух и более зараженных мышей, культуру считали патогенной. Факторы вирулентности энтеробактерий представлены в таблице 7.

Таблица 7. Факторы вирулентности энтеробактерий.

Гемолизины Всего Капсула Адгезины Жгутики Патогенность для белых мышей 28 штаммов 28 штаммов 18 штаммов 18 штаммов 28 штаммов 14 штаммов Все выделенные нами штаммы синегнойной палочки индуцировали большое количество внеклеточной слизи и вызывали гибель белых мышей при подкожном введении на вторые сутки, что свидетельствовало об их высокой вирулентности.

Таким образом, из 166 выделенных штаммов бактерий - 160 (96,4%) определялись в диагностическом титре (не менее 104 КОЕ/мл) и обладали факторами вирулентности, которые при наличии соответствующих общих и местных факторов, давали им возможность проникнуть в простату и вызвать воспалительный процесс или ухудшить его течение. Наличие данных факторов дает основания считать вышеперечисленные микроорганизмы патогенными для предстательной железы и способными вызывать и/или поддерживать воспаление предстательной железы.

У микробов, выделенных из секрета простаты условно-здоровых мужчин (n=50), мы также определили факторы вирулентности. Результаты представлены в таблице 8.

Таблица 8. Факторы вирулентности микробов, выделенных из секрета простаты условно-здоровых мужчин.

Микроорганизм Факторы вирулентности Staphylococcus Капсула Коагулаза Лецитиназа Гемолизин Некротоксин Лейк< epidermidis + - + - - Капсула Адгезины Гемолизины Патогенность для мышей Streptococcus - - - - viridans Corynebacterium Факторы вирулентности не изучены, методики их определения не разработаны Staphylococcus Капсула Коагулаза Лецитиназа Гемолизин Некротоксин Лейк> 15 epidermidis - - + + - Таким образом, наличие клиники зависит от наличия факторов вирулентности - z =141,18 (зависимость практически при любом уровне значимости).

Большинство выделенных нами микробов относится к условно-патогенным, и могут присутствовать в составе нормальной микрофлоры в качестве комменсалов. Однако, высокая степень роста выделенных микроорганизмов как в виде монокультуры, так и в сочетании нескольких видов микроорганизмов, наличие у возбудителей факторов патогенности, а также патогенность для лабораторных животных указывает на них, как на этиологический фактор воспаления предстательной железы.

4. Определение чувствительности выделенных культур к антибиотикам.

Одним из основных положений при выборе антибиотиков для лечения простатита является чувствительность выделенных микроорганизмов к определенному препарату.

Бесконтрольное применение антибиотиков маскирует развитие действительной инфекции, изменяет резидентную микрофлору, способствует развитию других, не свойственных организму микробов с большими болезнетворными возможностями, значительно увеличивает вероятность возникновения устойчивых микроорганизмов (Славко Нейчив, 1977).

Антибиотики создают селективный фон для отбора и распространения устойчивых к ним штаммов микроорганизмов и способствуют механизму генетической передачи факторов резистентности.

Чувствительность выделенных культур микроорганизмов к антибиотикам определяли, используя чистую культуру возбудителя. При выделении двух и более видов микробов, чувствительность к антибиотикам определяли у каждого микроорганизма в отдельности.

Для определения чувствительности к 20 антибиотикам применяли метод диффузии в агар. Для этого использовали суточную бульонную культуру или смывы физиологическим раствором с суточной агаровой культуры.

Концентрация микробных клеток составляла 109/мл. Антибиотик из диска дифундирует в агар, вызывая гибель чувствительных бактерий, формируя вокруг диска зону отсутствия роста. Диаметр зоны отсутствия роста микроорганизмов измеряли с помощью линейки с точностью до 1мм. Зона задержки роста до 14мм говорит о малой чувствительности к антибиотику, от 15 до 25мм – о достаточной чувствительности, свыше 25мм – о высокой чувствительности.

В нашем исследовании применяли диски со следующими антибиотиками:

пенициллины – амоксиклав, бициллин 5, карбенициллин; цефалоспорины – цефотаксим, цефоперазон; левомицетин; тетрациклины – доксициклин;

макролиды – азитромицин, лидекамицин, спирамицин, эритромицин, джозамицин; аминогликозиды – гентамицин; фторхинолоны – норфлоксацин, офлоксацин, ципрофлоксацин, моксифлоксацин, левофлоксацин;

хинолоны – пипемидиновая кислота; нитрофураны – фуразидин.

Анализ результатов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам показал, что наибольшую активность по отношению к микроорганизмам, выделенным из секрета предстательной железы (стафилококкам, стрептококкам, кишечным бактериям, синегнойной палочке) проявляли следующие антибактериальные препараты: карбенициллин, цефотаксим, гентамицин, моксифлоксацин, офлоксацин, левофлоксацин, ципрофлоксацин. Высокий процент резистентных штаммов вышеперечисленных микроорганизмов отмечали к макролидным антибиотикам, а именно эритромицину, лидекамицину, азитромицину.

Таким образом, изучение тенденций в изменении микробного «пейзажа» урогенитального тракта клинически здоровых мужчин и мужчин с бактериальным воспалением предстательной железы, а также чувствительности выделенной микрофлоры к антибактериальным веществам, позволяет обогатить существующие представления о роли нормальной, патогенной, условнопатогенной микрофлоры и их ассоциаций в патогенезе простатитов и расширить возможности урологов в отношении их диагностики, лечения и прогнозирования исходов.

5. Клинико-иммунологическая оценка эффективности терапии ХБП Все обследованные больные были рандомизированы в две группы, основную и контрольную, которые не отличались по возрасту, данным клинического обследования, продолжительности и тяжести болезни. Критерием рандомизации служило четное или нечетное число даты рождения. Всем больным в течение месяца проводили антибиотикотерапию (АБТ): 3 препарата по 10 дней, причем половине больных каждой группы проводили лечение хронического простатита в соответствии с результатами антибиотикочувствительности (специфическая АБТ), а другой половине больных – по стандартам лечения хронического бактериального простатита (ХБП) (эмпирическая АБТ) – азитромицин, доксициклин и ципрофлоксацин/офлоксацин.

Больные основной (I) группы дополнительно получали регуляторный пептид системного действия имунофан курсом №10 по 1 суппозиторию ежедневно ректально на ночь. Предлагаемая лекарственная форма – свечи – наиболее доступный, безопасный, безболезненный способ введения лекарства в организм. Известно, что в прямой кишке процессы всасывания происходят наиболее активно через кровеносную и лимфатическую системы, которые здесь особенно развиты. Обеспечивается быстрая доставка действующих веществ в кровоток, а также мягкость и достаточная длительность их действия. При такой аппликации удается избежать ряда побочных эффектов, наблюдающихся при инъекционном введении.

Больные контрольной (II) группы не получали иммунотропной терапии.

Результаты исследований через 3 недели после проведенного лечения показали, что использование имунофана в комплексе с препаратами специфической АБТ приводило к клинико-лабораторному выздоровлению пациентов в 95,8% случаев, в то время как из 25 больных контрольной группы, не получавших имунофан, но получавших специфическую АБТ нормальный мазок секрета простаты зафиксирован лишь в 80% случаев. При сравнении эффективности лечения пациентов основной и контрольной группы обнаружено, что имунофан статистически достоверно повышает эффективность эмпирической АБТ с 56% до 80%. (Табл. 9).

Таблица 9. Результаты микробиологического исследования секрета простаты пациентов двух групп до и после лечения.

Наимено Основная группа, n=50 Контрольная группа, n=вание с имунофаном без имунофана показателя До После АБТ До После АБТ лечения лечения специфи- эмпири- специфи- эмпири- ческой, n=25 ческой, n=25 ческой, n=25 ческой, n=лейк. <10 - 96 80 - 80 бакт. «-» лейк. >15 - 4 8 - 4 бакт. «-» лейк. >100 - 12 100 16 бакт. «+» Примечание. В таблице представлено количество пациентов, выраженное в процентах. n – число больных в группах.

Таким образом, исходя из полученных данных, следует, что специфическая антибактериальная терапия в комплексе с регуляторным пептидным препаратом имунофаном обладает наибольшей эффективностью в отношении лечения больных хроническим неспецифическим бактериальным простатитом.

Можно предполагать, что более высокий эффект проводимой антибактериальной терапии в группе больных с имунофаном по сравнению с группой контроля частично достигается за счет способности препарата преодолевать множественную лекарственную устойчивость – эффект, доказанный ин витро на линиях опухолевых клеток (Новиков C.А., 2008).

Таким образом, регуляторный пептид имунофан целесообразно включать в лечение заболеваний, вызванных условно-патогенной флорой с целью повышения эффективности специфической терапии. Побочных реакций или индивидуальной непереносимости препарата не наблюдали.

6. Динамика иммунологических показателей в процессе лечения.

Как хорошо известно, развитие воспалительной реакции сопровождается изменениями регуляции иммуногенеза (Лебедев В.В., Тутельян А.В., 2001, Кузник Б.И., 2004), в котором важное значение имеет состояние клеточного иммунитета и изменение функциональной активности фагоцитов. В этой связи представляло интерес оценить иммунный статус и функциональное состояние фагоцитирующих лейкоцитов больных хроническими неспецифическими бактериальными простатитами.

При обращении к урологу результаты иммунологического обследования больных демонстрировали снижение абсолютного количества В-лимфоцитов (CD20), Т-хелперов/индукторов (CD4) и естественных киллеров (CD16) на 39, 33% и 14%, соответственно. Иммунорегуляторный индекс был снижен по сравнению с нормальными значениями на 19%. Отмеченные нарушения Т- и Вклеточного иммунитета характеризуют наличие иммунодефицитного состояния (ИДС) у больных ХНБП. После проведения курса антибиотикотерапии с введением иммунотропного регуляторного пептида зафиксирована нормализация иммунологических показателей: статистически достоверное увеличение общего количества хелперов-индукторов (CD4), рост хелперносупрессорного соотношения (CD4/CD8), восстановление показателей гуморального иммунитета (CD20) и естественной резистентности (CD16).

Хорошо известно, что модуляторами функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов являются не только вещества микробного происхождения, иммунные комплексы, медиаторы клеток крови и ткани, но и фармакологические препараты (Маянский А.Н., 1992, Нестерова И.В., 2004).

Pages:     | 1 | 2 || 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»