WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |

Соответствие эмпирических распределений нормальному устанавливали, используя W-критерий Шапиро-Уилка. Гипотезу равенства выборочных дисперсий проверяли по критерию Левена. Для оценки статистической значимости различий выборочных средних использовали двухфакторный дисперсионный анализ (ANOVA).При сравнении выборочных долей использовали точный критерий Фишера и критерий 2. Для анализа взаимосвязи количественных нормально распределенных признаков использовали параметрический корреляционный метод Пирсона. Расчеты и построение графиков вели в программах Statistica 6.0 и Microsoft Excel.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3. Морфофункциональная характеристика коры надпочечников рыжей полевки и мышей СВА в норме Рыжая полевка. Надпочечники полевок, использованных в нашем исследовании, обычно имели эллиптическую или, реже, округлую (почти сферическую) форму, иногда чуть сплюснутую в месте прилегания к почке. Надпочечник окружен тонкой однослойной капсулой. Под ней располагается клубочковая зона (КЗ), развитая относительно слабо. Эта зона исследованных рыжих полевок состоит из небольших групп тесно расположенных клеток с гомогенной, равномерно окрашивающейся цитоплазмой и умеренно базофильными округлыми ядрами. Далее находится зона компрессии, свойственная некоторым видам грызунов, сложенная из мелких клеток с небольшими темными ядрами, тесно прилегающих друг к другу. Пучковую зону (ПЗ) составляют крупные клетки полигональной формы, образующие радиально направленные пучки. Цитоплазма часто имеет пенистый или зернистый вид, что указывает на высокое содержание в ней липидов — предшественников стероидных гормонов. Ядра клеток пучковой зоны крупные, округлые, с хорошо выраженной структурой и заметными ядрышками. Иногда в этой зоне встречаются двуядерные клетки. У многих полевок радиальная направленность тяжей ПЗ почти не выражена, клетки плотно прилегают друг к другу. Васкуляризация ткани выражена слабо — объемная плотность кровеносных сосудов на препаратах равна 0.5 ± 0.4%. Сетчатая, или ретикулярная, зона расположена между пучковой зоной и медуллой. У рыжих полевок она не образует «классических» сетеподобных структур и складывается из плотно прилегающих небольших клеток с равномерно окрашенной цитоплазмой и темным, плотным ядром, часто неправильной формы. В синусоидных капиллярах и межклеточном пространстве сетчатой зоны (СЗ) встречается много лейкоцитов и эритроцитов, что косвенно указывает на происходящие там интенсивные процессы клеточной деструкции.

Лабораторные мыши линии СВА. Кора надпочечников мышей СВА также обладает зональностью, общей для всех млекопитающих. Надпочечник окружает тонкая однослойная соединительнотканная капсула. Клубочковая зона складывается из довольно крупных клеток со слабо окрашивающейся цитоплазмой, скомпонованных в группы арочноклубковидной формы. По сравнению с надпочечником рыжей полевки, эта зона более развита, ее клетки и их ядра крупнее. Зона компрессии у мышей СВА отсутствует, и непосредственно за клубочковой зоной следует пучковая; ее клетки образуют почти прямые, радиально ориентированные тяжи. Между тяжами проходят синусоидные капилляры, более выраженные, чем у рыжих полевок. Объемная плотность кровеносных сосудов в ПЗ у мышей СВА выше по сравнению с рыжими полевками более чем в 4 раза (р < 0.0001).

Ядра клеток ПЗ округлые, крупнее и окрашены светлее, чем ядра клубочковой зоны, а цитоплазма вакуолизирована. В ПЗ мышей СВА чаще, чем у рыжих полевок, встречаются темные клетки, причем они также большей частью расположены в нижних отделах пучковой зоны. СЗ у мышей СВА выражена хорошо и состоит из переплетающихся между собой неправильной формы тяжей клеток небольшого размера с хорошо окрашиваемой цитоплазмой и высоким клеточным и ядерным полиморфизмом.

У некоторых мышей и рыжих полевок в коре надпочечника мы отмечали небольшие группы хромаффинных клеток, которые находились в отдалении от мозгового вещества (МВ), окруженные кортикоцитами. Возможно, это признак не завершившегося окончательно процесса миграции хромаффинобластов, образующих медуллу.

Кора надпочечников рыжих полевок и мышей СВА в возрасте 4 мес полностью сформирована, зональность выражена хорошо; строение коры соответствует классической трехзональной схеме, хотя и обладает определенными видовыми особенностями, что, несомненно, связано как с разницей в систематическом статусе мышей и полевок, так и с различиями в «образе жизни» диких животных и лабораторных, многие поколения которых живут в условиях питомника. Абсолютный размер коры у обоих видов был почти одинаковым (рыжая полевка — 250.2 ± 11.4, мыши СВА — 247.5 ± 9.0), но по размерам отдельных зон у мышей и полевок наблюдались определенные различия. Как у рыжих полевок, так и у мышей самой обширной зоной в коре надпочечника являлась пучковая; у полевок ее удельный объем был больше, чем у мышей — 68.2 и 58.7% от общего размера коры соответственно. Абсолютное значение ширины ПЗ у полевок также было больше (170.7 ± 10.5 мкм); у мышей — 144.7 ± 8.1 мкм (р = 0.063). КЗ и СЗ, напротив, у мышей были шире, чем у полевок (особенно СЗ, р = 0.002); больше был и удельный объем этих зон в коре. Известно, что мыши линии СВА, по сравнению с прочими линейными мышами, характеризуются наиболее низким уровнем содержания кортикостерона и наименьшим приростом уровня этого гормона в период острых стрессовых состояний (Науменко и др., 1990). Это подтверждается сниженной по сравнению с полевками шириной ПЗ, продуцирующей глюкокортикоиды, и ее удельного объема.

4. Морфометрические показатели коры надпочечников экспериментальных животных после хронического воздействия низкоинтенсивного -излучения на ранних стадиях онтогенеза Объем надпочечника, коры и медуллы. У рыжих полевок в норме объем КН больше, чем объем мозгового вещества, или медуллы (МВ). Объем МВ в разных экспериментальных группах изменяется незначительно. Динамика изменений общего объема надпочечника проявляет сильную положительную корреляцию с динамикой объема коры (p < 0.001), т. е. объем надпочечника изменяется за счет размеров коры. После облучения в дозах 4 сГр и 31 сГр объемы надпочечника (и, соответственно, коры) по сравнению с контролем почти не изменились (р > 0.05). Соотношение объемов КН и МВ в группах «Контроль» и «31 сГр» близко к единице, тогда как у полевок, облученных в дозе 4 сГр, объем кортикальной ткани по сравнению с медуллой несколько возрастает.

После иммунизации у необлученных полевок общий объем НП и КН возрастает, достигая максимальных значений (р 0.05). Так, объем НП в группе «Контроль + иммунизация» составляет 8235.3 ± 792.5 мкм3, объем КН — 4716.2±388.0 мкм3 (в контроле соответственно 7229.4 ± 484.2 мкм3 и 3940.2 ± 302.4 мкм3). Объем МВ также увеличился — 3519.1±406.мкм3 (также наибольшее значение по сравнению с другими экспериментальными группами).

Это можно расценивать как типичное проявление неспецифической реакции на введение антигена.

Иммунизация полевок, облученных в дозах 4 сГр и 31 сГр, практически не вызвала в обеих группах изменений объема коры по сравнению с контролем и облученными интактными полевками. Это может означать, что адаптивные возможности КН у облученных животных по сравнению с контрольными снижены. Невыраженная реакция кортикальной ткани на воздействие стрессового фактора может являться признаком общей функциональной недостаточности гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы.

Итак, хроническое воздействие -излучения в ранние периоды онтогенеза не вызвало значимых изменений объема НП у рыжих полевок. Статистически достоверные различия (р < 0.05) по объему НП отмечены между иммунизированными необлученными и облученными полевками. Это свидетельствует о значительных изменениях адаптивного потенциала облученных животных.

По динамике объема НП, КН и МВ мыши СВА отличаются от рыжих полевок. Отношение объемов кора/медулла в группе «Контроль» составило 1.1. Объем КН превышает объем МВ во всех группах. У облученных мышей объем КН по сравнению с контрольными животными незначительно повысился.

Дисперсионный анализ не выявил статистически значимых различий по объемным показателям надпочечника между облученными и необлученными мышами, а также между интактными и иммунизированными.

Иммунизация вызвала слабое снижение объема коры во всех экспериментальных группах. Снизилось и соотношение «объем коры/объем мозгового вещества». Корреляции между изменяющимися объемными показателями у мышей СВА не выявлено (р = 0.505); это означает, что изменения объема НП в данном случае зависят в равной степени от изменений объема КН и МВ.

Морфометрические показатели КН и ее зон. У облученных рыжих полевок ширина КН оказалась выше, чем у контрольных, хотя и статистически недостоверно; у животных, получивших меньшую дозу (группа «4 сГр»), этот показатель увеличился сильнее. Рост КН произошел за счет пучковой зоны (r = 0.987, р = 0.0001), ширина которой также увеличилась в обеих группах. КЗ и СЗ, напротив, несколько уменьшились; это уменьшение более заметно в группе «4 сГр».

Интактные Иммунизированные Рис. 1. Ширина пучковой зоны надпочечника у интактных и иммунизированных рыжих полевок. Средние невзвешенные значения. 1 — контроль, 2 — 4 сГр, 3 — 31 сГр. Вертикальные метки (здесь и в последующих графиках) обозначают 95%-ный доверительный интервал.

Ширина пучковой зоны, мкм Результаты дисперсионного анализа морфометрических показателей КН рыжих полевок показали, что после иммунизации у необлученных животных ширина коры (и, соответственно, ПЗ) достоверно увеличивается (р = 0.0096); это явление соответствует неспецифической реакции на острое воздействие стресс-фактора (рис. 1). У облученных полевок этот показатель после иммунизации, напротив, уменьшается и в группе «4 сГр + иммунизация» достигает минимального значения (различие достоверно по сравнению с группой «4 сГр», р = 0.0118). Поскольку клетки КН (и, в частности, ПЗ) находятся под контролем адренокортикотропного гормона гипофиза (АКТГ), разнонаправленность изменения ее размеров в результате воздействия стресс-фактора указывает на существенные отличия в функциональном состоянии гипоталамо-гипофизарно-адренокортикального звена эндокринной системы облученных и необлученных полевок.

Таким образом, факторы «излучение» и «иммунизация» по отдельности значимо не влияют на ширину КН полевок, но эффект их совместного действия становится статистически значимым (р = 0.0016). По-видимому, уменьшение размеров КН и ПЗ у облученных животных в ответ на иммунизацию является признаком не только глубоких функциональных изменений в адренокортикоцитах, но также недостаточной активности гипоталамогипофизарного звена в результате нарушения нормальной нейроэндокринной регуляции, поскольку в течение длительного периода излучение воздействовало на весь организм в целом и затронуло не только надпочечник, но и развивающиеся структуры мозга.

Интактные Иммунизированные Рис. 2. Ширина пучковой зоны надпочечника у интактных и иммунизированных мышей СВА. Средние невзвешенные значения. 1 — контроль, 2 — 4 сГр, 3 — 31 сГр.

Ширина, мкм У мышей СВА морфометрические показатели КН в ответ на облучение изменились незначительно (рис. 2). Изменения размера КН также, как у полевок, происходили за счет ПЗ (r = 0.921, р = 0.009). Ширина КН у мышей, облученных при мощности доз 4 и 31 сГр, уменьшилась, причем у животных, облученных при меньшей мощности дозы (4 сГр), ширина коры снизилась на 4.2% по сравнению с контролем, а у облученных при мощности дозы 31 сГр — всего на 1.5%. Снизились и относительные размеры пучковой и сетчатой зон (за исключением группы «31 сГр», где СЗ увеличилась на 2.4%). Все эти изменения статистически незначимы. В отличие от рыжих полевок, иммунизация облученных и необлученных мышей СВА вызывает практически однонаправленные изменения ширины ПЗ; различие заключается лишь в степени их выраженности. Так, после введения эритроцитов кролика контрольным мышам, ширина их ПЗ достоверно снижается (р = 0.028), но у облученных мышей подобный эффект наблюдается только в группе «31 сГр + иммунизация», причем в значительно более слабой степени (р > 0.05). Возможно, поскольку мыши СВА обладают изначально низкой кортикальной секрецией, реакция на стресс у них прошла быстро и не интенсивно; так как стимуляция КН находится под управлением АКТГ, гипотрофия коры после иммунизации может быть объяснена недостаточным воздействием гипоталамогипофизарного компонента. По данным дисперсионного анализа, факторы «облучение» и «иммунизация» не оказали какого-либо значимого воздействия на ширину КН (и, соответственно, ПЗ) мышей СВА. Выявлено лишь статистически достоверное различие по ширине ПЗ между группами «Контроль» и «Контроль + иммунизация» (р = 0.025).

Таким образом, характер изменений стресс-реактивности коры надпочечников, вызванных низкоинтенсивным -излучением на ранних стадиях онтогенеза, зависит от видовой принадлежности организма и его гормонального статуса.

Кариометрические показатели клеток пучковой зоны. У рыжих полевок хроническое воздействие -излучения в использованных дозах вызвало недостоверное снижение среднего диаметра ядер в кортикоцитах ПЗ (рис. 3). Иммунизация эритроцитами кролика привела к еще более заметному снижению этого показателя. Наименьший диаметр ядер ПЗ отмечен в группе «31 сГр + иммунизация» (р = 0.007). Уменьшение диаметра ядер указывает на снижение процессов синтеза белка в адреналовой коре. Таким образом, у иммунизированных полевок, в отличие от интактных, изменение диаметра ядер в пучковой зоне совпадает с редукцией коры.

У мышей СВА хроническое -излучение в дозе 4 сГр вызвало незначительное увеличение диаметра ядер пучковой зоны, а в дозе 31 сГр – почти не повлияло на этот показатель (рис. 4). Иммунизация усилила наметившуюся тенденцию – в группе «4 сГр + иммунизация» диаметр ядер увеличился, а в группе «31 сГр + иммунизация», напротив, снизился. По данным дисперсионного анализа, эти изменения статистически незначимы.

5,5,5,5,5,5,5,5,5,4,4,Интактные Иммунизированные Рис. 3. Диаметр ядер (мкм) кортикоцитов пучковой зоны надпочечника у интактных и иммунизированных рыжих полевок. Средние невзвешенные значения. 1 — контроль, 2 — 4 сГр, — 31 сГр.

5,5,5,5,5,5,5,5,5,Интактные Иммунизированные Рис. 4. Диаметр ядер (мкм) кортикоцитов пучковой зоны надпочечника у интактных и иммунизированных мышей СВА. Средние невзвешенные значения. 1 — контроль, 2 — 4 сГр, 3 — 31 сГр.

Итак, введение эритроцитов кролика выявило скрытые функциональные различия между облученными и необлученными животными. Снижение объема ядер кортикоцитов в важДиаметр, мкм Диаметр, мкм нейшей зоне КН — пучковой (ответственной за выработку глюкокортикоидов) после воздействия -излучения и иммунизации может быть признаком пониженной синтетической активности гормонпродуцирующих клеток.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»