WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

Можно предположить, что постепенное поступление ДНКЖ из комплекса с декстраном обеспечивает постоянную концентрацию NO в ходе свободнорадикального окисления и тем самым преобладание антиоксидантного действия ДНКЖ над прооксидантным. Такой эффект может реализовываться в условиях окислительного стресса благодаря усилению синтеза NO ферментативными системами, а также возможной регенерации ДНКЖ Представлены данные по исследованию влияния различных концентраций нитрита натрия на образование ТБК-реактивных продуктов в процессе свободнорадикального окисления гомогената миокарда крысы. Нитрит натрия в концентрациях 400-800 мкМ значительно ингибировал образование ТБКреактивных продуктов в нашей системе, что свидетельствует о его антиоксидантных свойствах (рис. 7). Представляется вероятным, что антиоксидантное действие нитрита натрия в нашей системе связано с восстановлением нитрит аниона до молекул NO.

В разделе 3.4. представлены результаты исследования влияние длительного перорального введения 2,(4) водорастворимой формы убихинона (3) (0) (2) Q10 и аторвастатина на 1,5 (4) (3) резистентность гомогената (0) (2) (1) миокарда к свободнорадикальному (1) окислению индуцированному 0,(3) (4) (2) (0) (1) гидропероксидом трет-бутила и метмиоглобином. Образование 0 30 ТБК-реактивных продуктов в Инкубация, мин.

гомогенате миокарда крыс было значительно снижено в группе Рис. 7. Ингибирование индуцированного животных получавших аторвастатин гидропероксидом трет-бутила (40 мкМ) и метмиоглобином (30 мкМ) ПОЛ гомогената совместно с убихиноном Q10 по миокарда крысы в присутствии различных сравнению с группой животных концентраций NaNO2. (0) – без добавок NaNO2. (1), (2), (3), (4) – концентрации получавших только аторвастатин.

NaNO2 соответственно равны 800, 400, 200, Известно, что длительная диета с 50 мкМ.

увеличенной дозой коэнзима Q, повышает уровень этого кофермента в ткани миокарда и снижает образование АФК митохондриями сердечной мышцы. В тоже время, холестеринснижающие препараты из класса ингибиторов -гидрокси--метилглутарилкоэнзим А-редуктзы (статины) подавляют не только синтез холестерина, но также и коэнзима Q. Данные свидетельствуют о важной роли коэнзима Q в защите сердечной мышцы от окислительного стресса. Приведены результаты исследования по изучению влияния доноров и метаболитов оксида азота на свободнорадикальную деструкцию К о н ц ен тр ац и я ТБК р еак ти вн ы х п р о ду к то в м к М.

убихинона в гомогенате миокарда крысы. Убихинон (у крыс представлен двумя формами Q10 и Q9) является одним из основных липофильных антиоксидантов, обладающих синергичным действием с другими антиоксидантными молекулами, а также важнейшим компонентом митохондриальной электрон-транспортной цепи.

Одним из наиболее корректных методов оценки уровня окислительного стресса является определение содержания в биологических образцах эндогенных антиоксидантов.

Снижение концентрации эндогенных липофильных антиоксидантов характеризует первую наиболее близкую к физиологическим условиям стадию свободнорадикального окисления (1) биологических липид-белковых (2) комплексов. При изучении (0) свободнорадикального перекисного 0 45 окисления гомогената миокарда Инкубация, мин.

крыс мы оценивали изменение концентрации различных форм убихинона. Перекисное окисление инициировалось добавлением гидропероксида. Концентрацию (1) (2) убихинонов оценивали методом (0) высокоэффективной жидкостной 0 45 хроматографии, отображающей Инкубация, мин.

динамику изменения суммарного, Рис. 8. Влияние соли Ангели (СА) в как окисленного, так и концентрации 600 мкМ столбец (2) на деструкцию убихинона Q9 и Q10 в ходе восстановленного пула этих индуцированного гидропероксидом третантиоксидантов. Для исследования бутила (1 мМ) окисления гомогената сердца крысы. Столбец (1) – без добавок СА.

антиоксидантных и Столбец (0) – без инкубации и окисления.

прооксидантных свойств доноров и метаболитов оксида азота в среду инкубации добавляли синтетический донор нитроксильного аниона соль Ангели, S-нитрозоглутатион, нитрит натрия, а Q 9, н г.

Q10, нг.

также динитрозильные комплексы железа, ассоциированные с бычьим сывороточным альбумином.

В использованной нами модели наиболее сильный протекторный эффект наблюдался в группах с солью Ангели и S-нитрозоглютатионом. Так, соль Ангели в концентрации 600 мкМ почти на 60% снижала деструкцию убихинона Q9 и убихинона Q10 при 90-минутной инкубации, и на 35% при 45-минутной инкубации (рис. 8).

S-нитрозоглютатион в концентрации 600 мкМ почти не оказал протекторного действия при 45-минутной инкубации. При этом, при инкубации 90 мин. этот нитрозотиол демонстрировал наиболее сильный антиоксидантный эффект по сравнению с другими (1) использованными донорами и (2) метаболитами NO. Деструкция (0) убихинона Q9 и Q10 была снижена на 0 45 70 и 60 процентов соответственно.

Инкубация, мин.

Ингибирование свободнорадикальной деструкции убихинонов Q9 и Q10 в гомогенате миокарда свидетельствует о сильном антиоксидантном эффекте (1) (2) данных доноров оксида азота и (0) нитроксильного аниона. Можно предположить, что протекторный 0 45 эффект используемых веществ, как и в Инкубация, мин.

случае ингибирования образования Рис. 9. Влияние динитрозильных ТБК-реактивных продуктов, комплексов железа связанных с бычьим обусловлен взаимодействием оксида сывороточным альбумином (DNIC-BSA) в концентрации 140 мкМ, столбец (2), на азота с алкоксильными и деструкцию убихинона Q9 и Q10 в ходе индуцированного гидропероксидом треталкилпероксильными радикалами бутила (1 мМ) окисления гомогената сердца липидов, а также взаимодействием с крысы. Столбец (1) – без добавок DNICBSA. Столбец (0) – без инкубации и редокс активным железом и окисления.

Q9, нг.

Q10, нг.

восстановлением оксоферрил миоглобина. Можно предположить, что в нашей системе происходит окисление нитроксильного аниона до оксида азота под действием внутриклеточных ферментов или ионов металлов переменной валентности. Данный факт хорошо согласуется с тем, что данные доноры и метаболиты оксида азота эффективно подавляли образование ТБК-реактивных продуктов перекисного окисления липидов в использованной нами модели.

Исходя из полученных результатов, можно сделать вывод об антиоксидантных свойствах соли Ангели и S-нитрозоглютатиона при свободнорадикальном окислении гомогената миокарда крысы. Нитрит натрия также оказал протекторный эффект в нашей системе. Действительно, нитрит натрия в концентрации 600 мкМ почти на 50% ингибировал деструкцию убихинона Q9 и на 30% убихинона Q10 при 90-минутной инкубации. Как и в случае ингибирования нитритом натрия образования ТБК-реактивных продуктов в нашей системе, мы предполагаем, что в гомогенате миокарда происходит восстановление нитрит аниона до оксида азота при участии редокс-активных компонентов клетки.

Интересно, что как и в случае с S-нитрозоглютатионом динитрозильные комплексы железа связанные с бычьим сывороточным альбумином (DNIC-BSA) не оказав заметного эффекта при 45 минутной инкубации проявили заметные протекторные свойсва при 90-минутной инкубации (рис. 9). Данные факты свидетельствуют о важной протекторной роли этих физиологических метаболитов NO и согласуются с тем, что наиболее эффективными антиоксидантами являются динитрозильные комплексы связанные с макромолекулами (например с декстраном).

В заключении подведены итоги и сформулированы выводы диссертационной работы.

ВЫВОДЫ 1. Уменьшение длительности региональной ишемии сердца крысы in vivo приводит к смешению баланса между гибелью кардиомиоцитов по механизму некроза и апоптоза в сторону последнего.

2. Соль Ангели, являющаяся источником нитроксильного аниона и синтетический донор оксида азота PAPA/NONO эффективно ингибирует перекисное окисление липидов и деструкцию убихинонов Q9 и Qиндуцированные гидропероксидом трет-бутила и метмиоглобином в гомогенате миокарда крысы.

3. Физиологические метаболиты NO - нитрит натрия, S-нитрозоглютатион и S-нитрозоцистеин эффективно ингибирует свободнорадикальное окисление гомогената миокарда крысы. S-нитрозоглутатион и нитрит натрия предотвращают деструкцию убихинона Q9 и Q10 в ходе перекисного окисления гомогената миокарда крысы.

4. Динитрозильные комплексы железа с цистеиновыми лигандами связанные с декстраном эффективно ингибируют свободнорадикальное окисление гомогената миокарда крысы.

5. Динитрозильные комплексы железа, ассоциированные с BSA, ингибируют деструкцию убихинона Q9 и Q10 в ходе перекисного окисления гомогената миокарда крысы.

6. Динитрозильные комплексы железа с цистеиновыми лигандами быстро разрушаются под действием АФК и при перекисном окислении гомогената миокарда крысы проявляют прооксидантный эффект.

Результаты диссертационной работы изложены в следующих публикациях:

1. Гудков Л.Л., Шумаев К.Б., Каленикова Е.И., Губкина С.А., Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Анитиоксидантное и прооксидантное действие доноров и метаболитов оксида азота// Биофизика, 2007, т. 52, №3, 503-509.

2. Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Лакомкин В.Л., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Взаимодействие связанных с альбумином динитрозильных комплексов железа и активных форм кислорода// Биофизика, 2007, т. 52, №3, 534-538.

3. Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Свиряева И.В., Тимошин А.А., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Взаимодействие динитрозильных комплексов железа с интермедиатами окислительного стресса // Биофизика, 2006, т. 51, №3, 472-477.

4. Шумаев К.Б., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф., Рууге Э.К., Ланкин В.З. Возможные механизмы регенерации оксида азота из продуктов его взаимодействия с активными формами кислорода // XV Международная конференция и дискуссионный научный клуб. “Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармокологии и экологии.”. Ялта-Гурзуф. мая - 9 июня 2007. Т. 9. С. 403-405.

5. Шумаев К.Б., Свиряева И.В., Кривова Т.С., Рууге Э.К., Гудков Л.Л., Ланкин В.З., Топунов А.Ф. Действие оксида азота на дыхательную цепь митохондрий сердца. 5-я национальная научно-практическая конференция с международным участием “Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека”. Смоленск. 18-22 сентября 2007. Сборник трудов. С. 197-199.

6. Рууге Э.К., Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Свиряева И.В., Топунов А.Ф. Влияние ионов железа и железосодержащих белков на взаимодействие метаболитов оксида азота с активными формами кислорода.

Международная научная конференция «Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем» (Минск, 21-23 июня 2006).

Сборник статей. Т. II. С.236-238.

7. Гудков Л.Л., Шумаев К.Б., Губкина С.А., Космачевская О.В., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Влияние синтетических доноров оксида азота и его физиологических метаболитов на процессы свободно-радикального окисления в гомогенате миокарда крысы. VI Ежегодная международная молодежная конференция ИБХФ РАН-ВУЗЫ. Москва 24-27 ноября 2006. С. 46-48.

8. Шумаев К.Б., Губкина С.А., Губкин А.А., Гудков Л.Л., Ланкин В.З., Ванин А.Ф. Антиоксидантные и прооксидантные свойства метаболитов оксида азота // XIV Международная конференция и дискуссионный научный клуб. “Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармокологии и экологии.” Ялта-Гурзуф. 31 мая - 9 июня. 2006. Т. 8. С. 416-417.

9. Шумаев К.Б., Ванин А.Ф., Топунов А.Ф., Губкина С.А., Губкин А.А., Гудков Л.Л., Каленикова Е.И., Городецкая Е.А., Ланкин В.З., Рууге Э.К. Взаимодействие с активными формами кислорода как механизм антиоксидантного действия динитрозильных комплексов железа и S-нитрозоглутатиона. IV международная научно-практическая конференция с международным участием “Активные формы кислорода, оксид азота антиоксиданты и здоровье человека”. Смоленск.

26-30 сентября. 2005. Сборник трудов. С. 114-115.

10. Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Каленикова Е.И., Топунов А.Ф., Рууге Э. К. Антиоксидантная роль производных оксида азота содержащих катион нитрозония. // Евразийский конгресс по медицинской физике и инженерии. Медицинская физика. 21-24 июня 2005. С. 375.

11. Гудков Л.Л., Губкин А.А., Шумаев К.Б. Антиоксидантные процессы и активные формы азота в ткани сердечной мышцы // Международная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых по фундаментальным наукам “Ломоносов-2005” апрель 2005. Сборник тезисов. Т. 1. С. 201.

12. Гудков Л.Л., Александрушкина Н.И., Каленикова Е.И., Городецкая Е.А., Шумаев К.Б. Роль апоптоза в ишемическом/реперфузионном повреждении миокарда и формировании эффекта ишемического прекондиционирования. // III съезд биофизиков России. Воронеж, 24-29 сентября 2004. Сборник тезисов. С.

385-386.

Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»