WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |

максимальное значение его антиоксидантной емкости. на 35% («Шеарзим»), на 18.1% («Целлюкласт») по сравнению с контроВодные извлечения, полученные по способу (1) с использова- лем. Применение в экстракции чаги указанных ферментных препаратов нием гидроокиси натрия из сырья разных партий, по выходу ПФК не- приводит к существенному снижению АОА как получаемых извлечезначительно отличаются от контроля (табл. 2). Вне зависимости от сы- ний («Шеарзим» - 18.63 кКл/100 г ПФК и «Целлюкласт» - 17.рья взятого на экстракцию, АОА ПФК, выделенных из извлечений, по- кКл/100 г ПФК, контроль - 29,37 кКл/100 г ПФК), так и выделенных из 13, Партия сырья Сухой остаток, г Зольность, г Выход ПФК, % Концентрация углеводов % АЕ водных вытяжек, кКл/100г ПФК АЕ водных растворов ПФК, кКл/100г ПФК них ПФК (25.00 кКл/100 г ПФК и 25.00 кКл/100 г ПФК, контроль – связано с преобладанием процессов ассоциации, чему может способст32.00кКл/100 г ПФК). вовать высокое содержание аминокислот, накапливающихся в процессе гидролиза. При более низких концентрациях ПФК (0,2 мг/мл, 0,Исследование размеров дисперсных фаз (рис. 2 А и Б) показало, что мг/мл) повышается устойчивость частиц дисперсной фазы с радиусом в этих извлечениях мицеллы имеют больший размер, чем в водном изоколо 50 нм. На основе смоделированного нами процесса, происходявлечении (рис. 1А), и во всех исследованных концентрациях ПФК дисщего в желудочно-кишечном тракте человека с водным извлечением персная фаза содержит мицеллы и субмицеллы.

чаги, показано, что формируемый в гидролизате ПФК относится к наСодержание Содержание норазмерным частицам, что обеспечивает высокую терапевтическую частиц, % частиц, % эффективность водных извлечений чаги.

110 123 Использование комплексонов и гидроокиси натрия при экстракции 95 80 125 чаги позволяет получить, ПФК с высокими АОА свойствами, что является перспективным для разработки эффективных антиоксидантов на основе чаги.

17 12 16 1 0 0,Пятая глава посвящена обработке водного извлечения чаги 0 1 2 3 4 5 0 1 2 3 4 Содержание ПФК Содержание ПФК органическими растворителями.

При обработке коллоидного раствора водного извлечения чаги А Б этилацетатом, хлороформом, хлороформ-этанольной смесью образуПо оси абсцисс, содержание ПФК : По оси абсцисс, содержание ПФК :

ются три слоя: водный - коллоидные системы (1); эмульсионный - кол1 - 0,0043 мг/мл; 2 – 0,0175 мг/мл; 1 – 0,0162 мг/мл; 2 – 0,1300 мг/мл;

лоидные системы (2) и слой органического растворителя - экстракт.

3 – 0,14 мг/мл; 3 – 0,55 мг/мл; 4 – 8,85 мг/мл Коллоидные системы (3) – получены на основе коллоидных систем (2) 4 – 0,55 мг/мл; 5 – 8,92 мг/мл путём отгонки из них органических растворителей. Обработка водного Рисунок 2 - Эффективный радиус (нм) частиц дисперсной фазы коллоизвлечения чаги петролейным эфиром приводит к образованию коллоидных систем извлечений чаги (сырьё XI), полученных с применением идной системы (1) и экстракта.

ферментных препаратов: А - Целлюкласт; Б - Шеарзим Состав липидов и фенольных веществ экстрактов и коллоидных систем (2), полученных на основе водного извлечения чаги Выделяемые продукты гидролиза целлюлозы, гемицеллюлоз и поМаксимальной экстрагирующей способностью обладает петролейлисахаридов чаги, а также высокая зольность в получаемых извлеченый эфир, которым можно извлечь 21,3% веществ от сухого остатка ниях приводят к увеличению размеров дисперсной фазы золя и снижеводного извлечения чаги. Содержание экстрактивных веществ в полунию АОА.

ченных экстрактах составляет: в хлороформном - 1,51%, в хлороформэтанольном - 8,34%, в этилацетном - 1,67%. Качественный состав нейДля определения изменений, происходящих в коллоидной системе тральных и полярных липидов в них определён с помощью тонкослойводного извлечения чаги под действием ферментов желудочно-кишечной хроматографии (ТСХ). Впервые показано присутствие в водном изного тракта, разработана методика проведения эксперимента in vitro.

влечении чаги большого спектра нейтральных липидов – моно-, ди- и При последовательном гидролизе водного извлечения чаги ферментами триацилглицеридов, высших жирных кислот и алифатических спиртов, желудочно-кишечного тракта - в условиях, близких к физиологическим, стеринов и их эфиров, углеводородов. Впервые обнаружены биологиче- в гидролизате происходит убывание белка (в 5,4 раза по сравнению с ски активные липиды: ненасыщенные жирные кислоты, витамины Е и его содержанием в водном извлечении) и накопление аминокислот (в К, кофермент Q. Очень высоко содержание стеринов – до 0,14% (от су2,4 раза выше, чем в водном извлечении). Мицеллы в гидролизате с хих веществ водного извлечения чаги). Содержание высших жирных киконцентрацией ПФК 6,52 мг/мл имеют радиус 178нм, превышающий слот в свободном или слабосвязанном состоянии составляет 0,15% от сурадиус частиц дисперсной фазы водного извлечения чаги (158нм). Это 15 хого остатка водного извлечения чаги, из них 0,004% мононенасыщенных зорциловые, 3-метокси-4-оксикоричная, 3-оксиантраниловая, ксантурежирных кислот. С помощью ГЖХ определен их качественный состав. новая, протокатеховая и галловая, простые фенолы - пирокатехин и реОбнаружено 12 высших жирных кислот, среди которых преобладают зорцин. Флавоноиды представлены мирицетином, робинетином, гипелауриновая и тридекановая кислоты. Впервые обнаружены мононенасы- рином, нортангеретином, кверцетином, диоксифлавонолом, рамнетищенные пальмитиновая, олеиновая и эйкозеновая кислоты, содержание ном, кемпферолом, апигенином, морином и нарингенином. В остатке которых составляет 30% от суммы обнаруженных кислот, а также поли- этилацетатного экстракта с помощью ТСХ обнаружены вещества, отноненасыщенные жирные кислоты – линолевая и линоленовая. Применён- сящиеся к классу циклопентаноидных монотерпенов – иридоидам, а ный подход впервые позволил определить в водном извлечении чаги также азулены. Эти соединения, обладающие выраженной биологичеполярные липиды (0,02%): фосфатидилглицерин, фосфатидилэтанола- ской активностью, определены и в петролейных экстрактах, полученмин, фосфатидилсерин, лизолецитин и цереброзиды. Состав полярных ных при обработке водного извлечения чаги.

липидов и жирных кислот отличается в экстрактах полученных из раз- Коллоидные системы, полученные на основе водного извлечения чаги ных партий сырья, что связано с метаболизмом чаги. Показаны незначи- Формирование образующихся при обработке водного извлечения тельные отличия в составе нейтральных липидов и существенные отли- чаги коллоидных систем сопровождается неравномерным распределечия в составе полярных липидов. нием веществ между коллоидными системами (1) и (2) в случае исС помощью ТСХ было показано, что в коллоидной системе (2), пользования всех органических растворителей. Большая часть сухих полученной при обработке водного извлечения чаги этилацетатом, ли- веществ водного извлечения чаги переходит в коллоидные системы (2).

пиды находятся в связанном с дисперсной фазой (ПФК) состоянии. Для При использовании хлороформа и хлороформ-этанольной смеси изучения их состава был применён щелочной гидролиз исследуемого большее количество зольных элементов остаётся в коллоидных систеобъекта. Состав нейтральных липидов коллоидных систем (2) аналоги- мах (1). При применении этилацетата водный слой имеет наименьшую чен соответствующему составу липидов этилацетатных экстрактов. По- зольность по сравнению со всеми объектами исследования, что перлярные липиды при проведении гидролиза разрушаются. С помощью спективно использовать для разработки на его основе препаратов, ГЖХ в исследуемых объектах (два вида сырья) идентифицированы ми- предназначенных для профилактики и лечения предраковых заболеваристиновая (С14:0), пальмитиновая (С16:0), олеиновая (С18:1) и линолевая ний. В коллоидных системах (1) и (3), полученных при применении (С18:2) кислоты. В коллоидной системе (2) (сырьё XI) обнаружены также хлороформа и хлороформ-этанольной смеси, устойчивость дисперскаприловая (С8:0), каприновая (С10:0), лауриновая (С12:0), линоленовая ных фаз (ПФК) по отношению к хлористоводородной кислоте имеют (С18:3) и эйкозеновая (С20:1), а в коллоидной системе (2) (сырьё XII) три- коллоидные системы (3), а при использовании этилацетата - коллоиддекановая (С13:0), пентадекановая (С15:0), гептадекановая (С17:0) и стеа- ная система (1). Кроме того, ККМ золей (1) и (3) лежат в разных диапариновая (С18:0) кислоты. зонах концентраций ПФК и существенно различаются между собой и Для определения состава фенольных и терпеновых соединений вод- отличаются от коллоидной системы водного извлечения чаги, что ного извлечения чаги использован этилацетатный экстракт, который свидетельствует о различной организации исследуемых объектов.

последовательно обрабатывали NaHCO3 и NaOH, а затем органиче- Эффективный радиус мицелл в системах, сформировавшихся при скими растворителями. Применённая схема разделения позволяет из- обработке водного извлечения чаги хлороформом, этилацетатом и петвлечь до 97,3% содержащихся в этом экстракте веществ от его сухого ролейным эфиром, меньше чем при обработке хлороформ-этанольной остатка. Половина проэкстрагированных веществ представлена фенол- смесью (рис. 3 А и Б). Размер мицелл в полученных коллоидных систекарбоновыми кислотами и сопутствующими им соединениями. Коли- мах зависит не только от количества и природы удаляемых органичечество фенолкарбоновых кислот составляет 1,82%, а простых фенолов скими растворителями из водного извлечения чаги компонентов, но и 0,96% от сухих веществ водного извлечения чаги. Разделение содер- от дисперсионной среды, в которой происходит их формирование. Разжащихся в экстрактах веществ проведено с помощью бумажной и тон- мер мицелл во всех коллоидных системах (1) и (3) не выходит из диапакослойной хроматографии. Определены фенолкарбоновые кислоты – зона высокодисперсных частиц.

ванилиновая, сиреневая, п- и м- оксибензойные, п-кумаровая, - и - ре 17 Все ПФК, выделенные с помощью хлористоводородной кислоты, АОА ПФК связано с качественным составом удаляемых из водного изимеют близкие ИК спектральные характеристики. От них отличаются влечения соединений. Происходит иная компоновка мицеллы с образоспектры ПФК, выделенные этанолом из коллоидной системы (2). В этих ванием дополнительных центров, способных проявлять антиоксидантПФК количество карбоксилат-ионов превалирует над количеством ную активность.

свободных карбоксильных групп, что связано с большим количеством Для объяснения существенной разницы в проявлении антиоксизольных элементов в коллоидных системах (2), а также со специфично- дантных свойств ПФК, полученных с применением этилацетата: коллостью действия этанола как осаждающего агента. идная система (2) (ПФК2) - 18,2 кКл/100гПФК, коллоидная система (1) (ПФК1) - 46,0 кКл/100гПФК, и ПФК водного извлечения - 27,кКл/100гПФК, - исследованы их парамагнитные характеристики.

Идентичным для всех ЭПР спектров ПФК является наличие сигнала с g=2.00, отвечающего за органическую компоненту этих объектов, сигнала с g=2.10, который, характеризует парамагнитные свойства как органической, так и неорганической компоненты объектов. В ЭПР спектрах ПФК2 (при 143К) и ПФК1(при 290К) появляются сигналы с g факторами, равными 3.90 и 3.85, характеризующие парамагнитные свойства ионов железа. Отличие g факторов и форма линий данных сигналов в спектре свидетельствует о том, что в ПФК1 ионы Fe3+ имеют большее координационное число, чем в ПФК2, то есть ионы Fe3+ в них А Б По оси абсцисс, содержание ПФК: По оси абсцисс, содержание имеют различное окружение. Во всех исследуемых образцах после озо1 – 0,37мг/мл – обработка смесью ПФК:

ления с помощью бумажной хроматографии показано присутствие ио хлороформ-этанол; 1 – 1,08 мг/мл – контроль;

нов Fe3+. Несмотря на возрастание парамагнитных свойств органиче2 – 0,03 мг/мл – контроль; 2 – 1,99 мг/мл – обработка ской компоненты сигнала с g=2.00 в ПФК ПФК1 ПФК3 – 0,06 мг/мл – обработка хлороформом; этилацетатом;

4 – 0,04 мг/мл –обработка этилацетатом; 3 – 1,38 мг/мл – обработка (11.11.4), высокое значение АОА ПФК1 связано с появлением 5 – 0,05 мг/мл – обработка петролейным эфиром смесью хлороформ-этанол только в его спектре дополнительного ПМЦ (g=3.85), с более равномерным, возможно, радиальным распределением ПМЦ и, соответственно, Рисунок 3 Эффективный радиус (нм) частиц дисперсной фазы А - с максимально плотной упаковкой компонентов в ПФК/меланине. Исколлоидных систем (1) и Б - коллоидных систем (3) после обработки следуемые ПФК/меланины различаются по подвижности входящих в водного извлечения чаги органическими растворителями в сравнении с них компонентов: ПФК1ПФКПФК2. В этой последовательности частицами дисперсной фазы водного извлечения чаги (контроль) убывают их антиоксидантные свойства. Проявлению высоких антиоксидантных свойств ПФК1 также способствует его меньший размер (Rэфф Антиоксидантные свойства полученных коллоидных систем (1) и = 80 нм) по сравнению с ПФК (Rэфф = 148 нм). Согласно данным РСА, (3) возрастают по сравнению с коллоидной системой водного извлечевсе исследуемые образцы (ПФК, ПФК1, ПФК2 и ПФК3) имеют аморфния чаги. Максимальное увеличение АОА в пять-шесть раз по сравненую структуру. В двух из них - ПФК и ПФК1 - обнаружен хлорид канию с водным извлечением чаги (10,74 кКл/100гПФК) наблюдается для лия, находящийся в ассоциатах в кристаллическом виде.

коллоидных систем (1) и (3), полученных с применением хлороформа Обработка водного извлечения чаги органическими растворителями (67,54и 56,42кКл/100гПФК соответственно).

позволила определить липиды и фенольные соединения, находящиеся в Выделенные из коллоидных систем (1) ПФК обладают АОА, в 1,5 - свободном и слабосвязанном с его дисперсной фазой состоянии. Мно2 раза превышающей АОА ПФК, полученного из водного извлечения гие из них относятся к биологически активным, что позволяет объясчаги. Максимальное увеличение антиоксидантной активности наблюданить терапевтическую эффективность водных извлечений чаги. Примеется для ПФК, выделенного из коллоидной системы (1), полученной с нённый подход позволил получить несколько коллоидных систем на применением петролейного эфира (64,0 кКл/100гПФК). Увеличение 19 основе водного извлечения чаги, различающихся составом и антиокси- Электрофорез водного извлечения чаги в ацетатном буфере позводантной активностью, что перспективно для разработки на их основе лил обнаружить как отрицательно, так и положительно заряженные БАД и лекарственных препаратов. фракции, подвижные в электрическом поле.

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»