WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 ||

Группа В представлена двумя копиями элемента. Одна из них (обозначенная на рис. 4 как 80F9+) находится в гетерохроматическом прицентромерном районе левого плеча третьей хромосомы, проксимальнее подсекции 80F9, а положение второй (обозначенной №26) определить точно невозможно, поскольку она окружена последовательностями МГЭ micropia и F-элемента. Эти копии наиболее близки к канонической последовательности gtwin.

Копии, относящиеся к группе А, сильнее отличаются от канонической последовательности gtwin. Наибольший интерес представляют мутации в сайте, с которым связывается лизиновая тРНК, участок которой служит затравкой на одной из стадий обратной транскрипции. Можно было бы предположить, что эти изменения должны дать преимущество другому, не измененному, варианту gtwin, однако полученные нами данные свидетельствуют об обратном. Группа неканонических gtwin в линии Г32 гораздо более многочисленна, чем группа канонических gtwin. Таким образом, амплификации подверглись именно элементы с мутантным сайтом отжига РНК-затравки.

В настоящее время gtwin не перемещается в линии Г32, следовательно неканонический вариант этого ретротранспозона попал под влияние клеточных механизмов регуляции. В основе таких механизмов могут быть пути РНК-интерференции с участием коротких РНК, взаимодействующих с белками семейства Piwi (piРНК).

Активизироваться они могут, если новый мобильный элемент попадет в регуляторный локус, который служит источником таких коротких РНК.

Как следует из таблицы 4, одна из выявленных в линии Г32 копий gtwin присутствует в мастерлокусе регуляции активности МГЭ. Данная копия из локуса 2RHet:2829193 относится к группе неканонических копий элемента. Вполне возможно, что сайленсинг gtwin в линии Г32 связан с инсерцией элемента в такой локус.

Канонические копии gtwin не активны в линии Г32. Одна из таких копий содержит инсерцию F-элемента в 3’-ДКП, что говорит о ее нефункциональности. Другая каноническая копия локализована в прицентромерном гетерохроматическом регионе, в котором базовый уровень экспрессии сильно снижен. Видимо, по этой причине gtwin из данной области также не может служить источником новых копий.

ВЫВОДЫ 1. В линии Г32 обнаружена и картирована крупная комплексная хромосомная аберрация, затрагивающая оба плеча третьей хромосомы. Показано, что аберрация встречается в линии с высокой частотой и не элиминируется с течением поколений.

2. Методом гибридизации in situ исследовано распределение сайтов локализации ретротранспозона gtwin на политенных хромосомах личинок линии Г32. Показано, что аберрантная третья хромосома содержит значительно больше копий элемента, чем нормальные.

3. Распределение копий gtwin на политенных хромосомах линии Г32 постоянно, что свидетельствует о том, что в настоящее время элемент не перемещается.

4. Проведена точная локализация большинства копий gtwin в геноме линии Г32.

Показано, что копии элемента находятся преимущественно в эухроматических участках генома.

5. Помимо канонического, в линии Г32 обнаружен новый вариант gtwin, имеющий ряд отличий от ранее известного, наиболее интересными из которых являются мутации в сайте отжига тРНК-затравки. Показано, что именно этот новый вариант сильно амплифицирован в линии.

6. Обнаружены экстрахромосомные кольцевые копии gtwin в линии Г32. Показано, что эти структуры вероятнее всего образовались из линейных интермедиатов ретротранспозиции элемента.

7. Обнаружена инсерция gtwin в предполагаемый мастерлокус регуляции активности МГЭ, что могло послужить причиной прекращения его ретротранспозиций в линии Г32.

Pages:     | 1 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»