WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 11 |

Разработка системызащиты оздоровленного картофеля от
повторного вирусногозаражения в условиях РеспубликиТатарстан

Мониторинг вирусныхболезней картофеля проводили на посадкахкартофеля в хозяйствах республики в 1993-2001гг. Листовые пробы дляанализов отбирали в июле месяце подиагонали картофельного поля в количестве50-100 штук. Серологический анализ проводилив лаборатории капельным методом и методомИФА.

Мониторинг почвенныхвирусов картофеля проводили в1987-1995 гг. Для идентификации вирусовиспользовали метод индикаторных растений,метод приманочных растений, ИФА, методэлектронной микроскопии.

Изучение динамикинарастания повторного зараженностивирусными болезнями оздоровленногосеменного картофеляпроводили на производственных посадкахоздоровленного семенного картофеля вусловиях естественного инфекционного фонас 1997 по 2007 годы. Питомники размноженияоздоровленного семенного картофелянаходились в Лаишевском районе зоныПредкамья РТ: с 1993 по 2005 год - в стационарнойточке учета «Сокуры», в 2006 году - встационарной точке учета «Кабаны»,расположенных на расстоянии 5 и 2 км от селаБольшие Кабаны, соответственно.

Оздоровленныемеристемные линии сортов картофеля(сортолинии) получали в отделесельскохозяйственной биотехнологииТатНИИСХ и приобретали от других научныхучреждений, после тестирования наотсутствие инфекций, размножаличеренкованием в лабораторных условиях,получали в защищенном грунте от нихтепличные миниклубни. Далее, в полевыхусловиях, оздоровленный семеннойкартофель выращивали в питомниках последующей схеме: тепличные миниклубни– первоеполевое поколение (ППП) – суперсуперэлита(ССЭ) –суперэлита (СЭ).

Питомники располагали спространственной изоляцией - на расстоянии1-3 км от населенных пунктов и от другихкартофельных посадок. Площади питомников ивыращиваемые в них сорта, менялисьежегодно – онипредставлены в результатах работы.

Технология выращивания- голландская с использованием комплектаимпортной полевой техники производствафирм Гримме, Амазоне. Нормы внесенияминеральных удобрений определялирасчетно-балансовым методом на получениеурожая 25 тонн/га на основе агрохимическиханализов почвы. Посадку проводили воптимально ранние сроки - обычно во второйдекаде мая, удаление ботвы проводилимеханическим способом или химическойдесикацией реглоном - в момент достижения80% клубней размера семенной фракции – 30-60мм - в наибольшемпоперечном диаметре. Семенной материалвыращивали с соблюдением всехрекомендованных защитныхмероприятий от заражения болезнями, отвредителей и крылатых тлей.

Диагностику вирусныхболезней картофеля проводилив секторе диагностики болезней картофеляЦСХБ ТатНИИСХ. Листовые пробы дляпроведения ИФА отбирали по диагоналямкартофельного поля в зависимости отразмеров участка – по 50-200 листьев. Скрытуюзараженность картофельных растенийопределяли до 2001 годакапельно-серологическим методом (поМ.С.Дунину и Н.Н.Поповой, 1967) - на вирусы M, X, Sи Y и на M+X+S (поливалентная), с 2001 года -методом иммуноферментного анализа (ИФА) надиагностических наборах, изготовленных влаборатории биотехнологии ВНИИКХ навирусы – M+X+S(поливалентная) и YBK-вирус (по методикамИ.Г.Атабекова,1985, А.Ф.Бобковой, 1983), с 2002 года- на диагностических наборах для ИФА фирмыБиореба (Швейцария).

Тестирование сорняковна скрытую зараженность Y-вирусомкартофеля проводили методомобратнотранскриптазной ПЦР в секторедиагностики ЦСХБ ТатНИИСХ. Применялисьнаборы коммерческой фирмы «Е» (г.Пущино,Россия), использовали оригинальныепраймеры, разработанные сотрудником ЦСХБЗайнуллиным А.А.

Мониторинг основныхпереносчиков вирусов картофеля – крылатых форм различных видов тлей - проводили на основаниисистематических наблюдений за динамикойлета и видовым составомкрылатых особей в питомникеразмноженияоздоровленного семенного картофеляТатарского НИИ сельскогохозяйства с1993 по 2007 годы.

Учеты крылатых особейразличных видов тлей проводили методомжелтых водных ловушек Мерике (А.Г. Зыкин, 1970;L.Broadbent. 1948; W.Moericke., 1951; H.Muller und Unger, 1955; Л.Иотов,1967). На участке черного пара размером неменее 5х5 м рядом с картофельным участкомустанавливали две пластмассовые чашкидиаметром 24 см и высотой 7-8 см, окрашенныеизнутри на 2 см от днаярко-желтой краской. В чашки наливали воду(немного выше края желтой краски),добавляли щепотку стирального порошка. Сборнасекомыхпроводили через 1-2 дня. Уловы тлейопределяли и классифицировали по видам влабораторииЦСХБ ТатНИИСХ по описаниям Г.Х.Шапошникова(1964), В.А.Шмыгли,Б.С.Герасимова, И.П.Дамрозе(1969,1975), А.Г.Зыкина (1970).

Определялираспространенность (Р,%) вирусной инфекциина сортовой репродукции (илистепень зараженности вирусами репродукции) по формуле:

Р=100n/N, где N – общее количестворастений в пробах, n – количество больных растений впробах.

Средневзвешеннуюстепень зараженности (СВЗ) вирусамикартофельного поля определяли последующей формуле: СВЗ= (SnPn)/Sобщ, где Sn - площадь, занимаемаяотдельным сортом (га), Pn -распространенность болезни на сорте (%),Sобщ - общаяплощадь картофельного поля (га).Необходимость в использовании СВЗвозникла при обсуждении коллекционныхучастков, в которых с различной, обычнонебольшой площадью, высажено большоеколичество сортов, которые заражены вразличной степени. СВЗ использована намидля создания объединенной характеристикиполя – до ипосле процесса переноса инфекции.

При обсуждениирезультатов производственногоразмножения возникла необходимостьприменения сокращенных наименований частоиспользуемых словосочетаний и примененияпоказателей изменения вируснойзараженности в репродукциях семенногокартофеля:

КРВЗ – коэффициент роставирусной зараженности – кратностьвозрастания вирусной инфекции втечение определенного периода - вычислялиделением конечной степени зараженностисортовой репродукции на исходнуюзараженность.

КП – критический порогчисленности крылатых особей тлей,эквивалентный 50 экземплярам персиковойтли, определенный с помощью коэффициентоввредоносности по Банадысеву С.А. (2003), последостижения которого рекомендуется удалятьботву семенного картофеля в течение 10-12дней.

СВАТ– суммарная векторнаяактивность крылатых особей тлей за вегетационный период - общееколичество крылатых особей – переносчиковвирусов картофеля, отловленных завегетационный период, и переведенных припомощи коэффициентов вредоносности вединицы, эквивалентные персиковой тле.

ОСВАТ – общая суммарнаявекторная активность крылатых особей тлейза несколько вегетационных периодов, втечение которых выращивался семеннойкартофель данной репродукции в открытомгрунте.

Разработка технологииускоренного размножения оздоровленногосеменного картофеля в условиях РеспубликиТатарстан

Факторы, повышающиекоэффициенты размножения семенногокартофеля, изучали на трех стадияхвыращивания оздоровленного материала:пробирочные растения, тепличныеминиклубни и клубни первого полевогопоколения (исходный материал).Исследования проводили в 1998-2000 гг. взащищенном грунте - в марлевых изоляторах,находящихся на территории ТатНИИСХ; воткрытом грунте – в питомнике размноженияоздоровленного картофеля, расположенноговблизи н.п.Сокуры Лаишевского района.

Схема вегетационногоопыта 1. Изучение влияниягустоты посадки пробирочных растенийкартофеля сорта Невский на коэффициентразмножения оздоровленного материала вусловиях защищенного грунта:

1 вариант – густота посадки 25растений/м2 (20х20 см),

2 вариант – густота посадки 50растений/м2 (15х15 см),

3 вариант – густота посадки 100растений/м2(10х10 см).

Размножение ивыращивание пробирочных растенийпроводили согласно «Методическимуказаниям по оздоровлению и ускоренномуразмножению картофеля» (1976, 1985) и«Инструкции по технике проведения работ помикроклональному размножению картофеля»(1998). Был проведен структурный анализполученного урожая тепличных миниклубней,с разделением на следующие фракции: 1– 5 г; 6 – 10 г; 11 – 20 г и более 20 г.

Опыты по изучениюкоэффициентов размножения тепличныхмини-клубней и исходных клубней проводилив открытом грунте в питомнике размноженияоздоровленного материала ТатНИИСХ. Почваопытного участка светло-серая лесная,средне-суглинистая. Удобрения вносили напланируемую урожайность 20 тонн. Посадкупроводили вручную в предварительнонарезанные борозды. Агротехникавыращивания картофеля – общепринятая дляреспублики с элементами голландскойтехнологии. Опытыдвухфакторные, повторностьчетырехкратная. В каждой повторности высаженопо 50 клубней сорта Невский. Размещениеделянок систематическое.

Схема опыта 2. Изучение влияния густоты посадки имассы тепличных миниклубней накоэффициент размножения оздоровленногокартофеля в открытом грунте:

Сорт Невский -тепличные миниклубни.

Фактор А– густота посадки: 48; 57; 72 ; 95тыс. клубней на 1 га (схема посадки: 70 х 30, 70 х 25, 70 х 20 и70 х 15 см соответственно).

Фактор В – масса тепличныхминиклубней: 2; 6; 10; 15 г.

Схема опыта 3. Изучение влияния густоты посадки имассы исходных семенных клубней накоэффициент размножения оздоровленногокартофеля в открытом грунте:

сорт Невский – исходные клубни (клубни первого полевого поколения)

Фактор А– густота посадки: 45; 55; 65; 70тысяч клубней на 1 га (схема посадки: 70 х 31, 70х 26, 70 х 21, 70 х 20 см).

Фактор В – масса исходныхклубней: 20, 40, 60, 80 г.

Опыты закладывали ипроводили в соответствии с методическимиуказаниями Б.А.Доспехова (1985) и ВНИИКХ (1961).Уборка опытов проводилась вавгусте-сентябре месяцах вручную. Учетурожая проводился поделяночно: выкапывали50 кустов, подсчитывали количество ивзвешивали массу полученных клубней.Одновременно с учетом общей массы клубнейопределяли их фракционный состав.Полученные клубни были разделены наследующие фракции: менее 25 г; 25-50 г; 51-80г; более 80 г. Статистическаяобработка результатов исследованийпроведена методомдисперсионного анализа по Б.А.Доспехову (1985) с использованиемкомпьютерных программ «Agros», поГ.Ф.Лакину (1990), расчетыэкономической и энергетической эффективности – на основетехнологических карт по действующимнормативам ирасценкам.

РЕЗУЛЬТАТЫИССЛЕДОВАНИЙ

Мониторинг источниковповторного заражения вирусами
оздоровленного семенного картофеляв Республике Татарстан

Для предотвращенияповторного заражения вирусамиоздоровленного семенного картофелянеобходимы сведения об основныхисточниках инфекции в даннойприродно-климатической зоне. Порасстоянию, на которое источники инфекцииудалены от посадок картофеля их можноподразделить на внешние и внутренние.Внешние источники - производственныепосадки картофеля с высокой степеньюзараженности вирусами, личные подсобныеучастки; внутренние источники – больные растениявнутри посадок оздоровленного семенногокартофеля. В республике нами выявленыследующие возбудители вирусных болезнейна картофеле: Y-вирус картофеля (УВК), М-вирус картофеля (МВК), Х-вирус картофеля(ХВК), S-вирус картофеля ( SВК), вирусскручивания листьев картофеля (ВСЛК), вирусметельчатости верхушки картофеля (ВМВК),вирус погремковости табака (ВПТ), а такжевироид веретеновидности клубней картофеля(ВВКК).

Анализируя данные пораспространенности вирусов напроизводственных посадках картофеля вколлективных хозяйствах в 1993-2001 гг., мыобнаружили, что до 1998 года отечественныйсеменной картофель в хозяйствахреспублики, практически независимо отрепродукции, был заражен вирусами на 60-100%,причем, наиболее распространенными былиХВК и МВК, что совпадает с даннымиисследований, проведенных в республике вконце 60-х годов (Н.И.Благовещенский,Н.П.Капитонова, 1970). Оздоровленный семеннойкартофель, производимый лабораториейТатНИИСХ и поступающий в хозяйства с 90-хгодов, в последующие годы обнаруживалтенденцию к преобладающему заражениюY-вирусом картофеля.

Два почвенных вирусабыли обнаружены нами на частных посадкахкартофеля: ВПТ (переносчики – нематоды семействаTrihodoridae )– вокрестностях г. Казани на участках слегкими по механическому составу почвами,ВМВК (переносчик – гриб Spongosporasubterranea) – во всех обследованных районах -независимо от типа почв. На посадкахобщественного сектора почвенные вирусыбыли обнаружены в единичных случаях.Зараженность клубней ВПТ составляла наотдельных участках от 33 до 43%. При этомнекротические повреждения, вызванные ВПТ,стабильно проявлялись в потомстве у 60-70%растений, но внутри клона некрозыпроявлялись в среднем у 22-28% клубней. Вотдельные годы признаки некрозов внутриклона полностью исчезали, но на следующийгод могли вновь проявиться у 50% клубней.Наиболее чувствительным к заражению ВПТоказался сорт Невский: на поверхностиклубней наблюдались четкие кольцадиаметром до 0,5 см и кольцевидныенекротические узоры.

Симптомы ВМВК обычнонаблюдали у 3-15% клубней. Реакция назаражение вирусом в виде четких кольцевыхнекрозов на поверхности клубнейнаблюдалась у сортов Бронницкий, Жуковскийранний, Невский, Резерв. Нами впервые наевропейской территории был обнаружен иописан случай проявления на картофелесимптомов «птичьего глаза», вызываемого,по нашим данным, при первичном зараженииВМВК. В отдельные годы в январе наблюдалосьмассовое проявление симптомов «птичьегоглаза» на клубнях, достигавшее уровня 50-60%выборки, что свидетельствует о высокойстепени скрытой зараженности почвеннымвирусом переносчика и картофеля в условияхТатарстана. Обнаружено, что в защищенномгрунте может происходить заражениеоздоровленных клубней вирофорным грибомSpongospora subterraneaбез видимых симптомов вирусного заражения.В этом случае симптомы имеют вид пустул безразвития вокруг него волдыреобразногокольца. Поэтому первичные симптомыпоражения ВМВК в защищенном грунтемогут быть не замечены, проявляясь только на следующий год в поле в виде вторичных симптомов - кольцевыхузоров наклубнях.

Вироидверетеновидности клубней картофеля (ВВКК)был обнаружен нами только на материале,выращенном из инфицированных пробирочныхрастений завозного происхождения. Вусловиях открытого грунта нами не отмечалось массовогоперезаражения оздоровленного материала отисточников -зараженных вироидом растений. Приинфицировании вироидом ВКК в условияхреспублики, происходит сильное угнетениерастений картофеля, сопровождающееся снижением илиполным отсутствием клубнеобразования, чтовызывает в дальнейшем самоуничтожениепотомства больных растений.

В производственном размножениимы также не наблюдали интенсивного повторного зараженияоздоровленного семенного картофеля персистентнымвирусом скручиваниялистьев картофеля (ВСЛК). Основной причинойэтого являются низкая численность переносчикавируса –персиковой тли. Следующейпричиной, по нашемумнению, является сильноеугнетение зараженных растений картофеля,происходящее в континентальных условияхреспублики -как и в случаес ВВКК, что вызывает низкийкоэффициент размножения больных растенийи в итоге -самоуничтожение зараженныхрастений в потомстве.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»