WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |

При морфометрическом анализе щитовидной железы измеряли высоту тироцитов (Ht), площадь ядер этих клеток (Sn), площади фолликулов (Sf), и фолликулярной полости (Sk).

В ткани надпочечников определяли: толщину коры надпочечников, толщину клубочковой, пучковой и сетчатой зон коры надпочечников, объем кортикоцитов и объем ядер кортикоцитов клубочковой, пучковой и сетчатой зон коры надпочечников. Морфометрию проводили, используя цифровые фотографии, получаемые с помощью цифрового фотоаппарата «Canon zoom lens» 3 X Power Shot A 95, MegaPixels 5.0 и микроскопа «Ломо» при увеличении 10х20, 10х40, монокулярного оптического адаптера и лицензированых компьютерных программ анализа и редактирования изображений. Число измеренных клеток – 50, число измеренных ядер – 100 от каждого животного. Величину изучаемых показателей выражали в мкм.

Интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) определяли по уровню малонового диальдегида (МДА), скорости спонтанного (спПОЛ) и аскорбатзависимого (аскПОЛ) (Стальная И.Д. и др., 1977) в гомогенатах тканей щитовидной железы и надпочечников. Содержание МДА выражали в нмоль МДА/0,05 г сырого веса щитовидной железы и надпочечников, кинетические параметры – в нмоль МДА/час.

Иммуноферментным методом определяли уровень тироксина, трийодтиронина и кортикостерона в плазме крови. Определяли общую фракцию гормонов в плазме крови, результаты выражали в нмоль/л плазмы.

Активность каталазы оценивалась по методу М.А. Королюка, Л.И. Иванова (1988). Статистическая обработка полученных в ходе эксперимента данных проводилась на компьютере с использованием программ Excel 2000, Statistica 6,0. При обработке полученных данных использованы следующие показатели: расчет относительных показателей, определение средних величин, достоверности по критерию Стьюдента и коэффициента корреляции.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Динамика свободнорадикальных показателей на уровне целостного организма. Холодовое воздействие приводило к снижению степени ПГЭ. У половозрелых животных достоверно значимое снижение происходило к 90 мин холодового воздействия, у неполовозрелых с 15 по 45 мин. ПОЛ в печени под воздействием охлаждения изменялось незначительно. Происходило возрастание скорости аскПОЛ у неполовозрелых самцов крыс к 90 мин холодового воздействия, тогда как остальные показатели ПОЛ не изменялись.

Динамика уровня Т3, Т4 и КС. У неадаптированных неполовозрелых животных уровень тиреоидных гормонов при охлаждении практически не изменялся, уровень КС снижался с 45 по 90 мин холодового воздействия (Рис.1) с 1,43±0,290 до 0,70±0,08.

У адаптированных самцов крыс в контроле уровень КС у неполовозрелых животных был ниже, а у половозрелых выше в сравнении с интактными самцами. При холодовом воздействии у адаптированных половозрелых самцов крыс уровень Т4 (Табл.1) снижался на 45 и 90 мин охлаждения, уровень Т3 практически не изменялся (1,02±0,10). У адаптированных половозрелых животных холодовое воздействие приводило к возрастанию уровня КС (Табл.1) на 15 мин экспозиции (42,01±1,49), и это значение было максимальным в течение 90 минут исследования. При продолжающемся охлаждении уровень КС снижался, начиная с 30 мин и до конца воздействия. У адаптированных неполовозрелых животных холодовое воздействие приводило к увеличению уровня Т3 (Табл.1) с 15 мин по сравнению с контрольными самцами, оставаясь высоким до конца охлаждения; уровень Т4, напротив, был ниже относительно контрольной группы на всем протяжении холодового воздействия. Уровень КС у адаптированных неполовозрелых самцов крыс повышался с 15 по 30 мин холодового воздействия по сравнению с контролем, тогда как к 45 мин охлаждения уровень КС снижался (12,8±0,63).

Таблица 1

Изменение уровня Т3, Т4 и КС у адаптированных самцов крыс

Горм.

КНА

КА

15 мин

30 мин

45 мин

60 мин

90 мин

Т 3

нмоль/л

ПЛ.

0,89±0,04

1,02±0,10

1,10±0,07

1,03±0,08

1,02±0,10

0,97±0,06

0,97±0,10

НЛ.

1,41±0,17

0,95±0,06 •

1,44±0,10 **

1,30±0,10 *

0,99±0,07 °

1,35±0,09 ** °

1,65±0,11 *** °

Т 4

нмоль/л

ПЛ.

0,90±0,13

1,43±0,29

1,25±0,08

0,95±0,10 °

0,70±0,08 *

1,49±0,07 °°°

0,72±0,07 * °°°

НЛ.

1,58±0,15

1,72±0,18

0,57±0,13 **

1,26±0,15 * °°

0,79±0,14 ** °

0,48±0,05 ***

0,71±0,11 ***

КС

нмоль/л

ПЛ.

22,27±1,49

29,84±1,08 ••

42,01±1,49 ***

27,0±0,87 °°°

30,9±0,69 °°

13,3±0,66 *** °°°

21,6±0,56 *** °°°

НЛ.

25,98±1,96

16,34±1,48 ••

24,39±1,44 **

23,2±0,78 **

12,8±0,63 * °°°

16,0±0,50 °°

15,7±0,87

Условные обозначения (здесь и далее): • - достоверность различий между адаптированным и неадаптированным контролем • - р<0,05; •• - p<0,01; ••• - p<0,001; КНА – контроль неадаптированный, КА – контроль адаптированный; Пол – половозрелые животные, Неп. – неполовозрелые животные.

Рис. 1 Сравнение изменения уровня кортикостерона у адаптированных и неадаптированных животных при холодовом воздействии

Условные обозначения: НА – неадаптированные животные; А – адаптированные животные.

Таким образом, в динамике уровня гормонов были выявлены следующие особенности: 1) у неадаптированных животных холодовое воздействие не изменяло уровень тиреоидных гормонов и приводило к снижению КС на 45-90 мин; уровень всех исследуемых гормонов у неадаптированных животных выше в сравнении с адаптированными; 2) 20-дневное периодическое охлаждение способствовало возрастанию уровня КС у половозрелых животных и снижению у неполовозрелых; 3) у адаптированных животных уровень изучаемых гормонов (Т3, Т4, КС) изменялся на ранних этапах холодового воздействия (на 15 мин); 4) уровень Т4 у адаптированных животных обеих возрастных групп снижался; уровень Т3 у половозрелых животных не изменялся, у неполовозрелых – возрастал; у адаптированных неполовозрелых самцов уровень тиреоидных гормонов изменялся в противоположном направлении: Т3 возрастал, Т4 снижался; 5) у адаптированных животных обеих возрастных групп уровень КС возрастал наиболее интенсивно на 15 мин холодового воздействия, при дальнейшем охлаждении происходило его снижение; 6) у адаптированных и неадаптированных животных наблюдалась сходная динамика изменения уровня гормонов, адаптация приводила к более быстрому проявлению ответной реакции.

Морфометрические показатели щитовидной железы и надпочечников. У неадаптированных половозрелых самцов крыс при холодовом воздействии происходило увеличение относительной массы надпочечников, тогда как относительная масса ЩЖ практически не изменялась. Относительная масса надпочечников и ЩЖ у неадаптированных неполовозрелых самцов крыс имела наибольшие отличия от интактных животных к 45 мин холодового воздействия, но относительная масса ЩЖ возрастала с 0,156±0,012 до 0,242±0,012, тогда как надпочечников – уменьшалась в сравнении с контрольной группой с 0,147±0,002 до 0,220±0,001.

Рис. 2 Изменение площади фолликула и фолликулярной полости щитовидной железы неадаптированных половозрелых самцов крыс

Условные обозначения (здесь и далее): достоверность различий: * - в сравнении с контролем; - в сравнении с предыдущей группой * () - р<0,05; ** () - p<0,01; *** () - p<0,001.

У неадаптированных половозрелых самцов крыс холодовое воздействие (Рис.2) приводило к уменьшению Sf, достигая наименьшего значения на 45 мин охлаждения. К этому же времени уменьшалась и Sk. Ht возрастала к 30 мин холодового воздействия, снижаясь при более длительном охлаждении. У неадаптированных неполовозрелых животных наиболее значимое снижение морфометрических параметров наблюдалось на 30-й минуте холодовой экспозиции (Sf, Sk, Ht, Sn достоверно снижались, р0,001 в сравнении с контролем). Более длительное охлаждение приводило к увеличению Sf и Sk на 60 мин холодового воздействия (р0,001), а Ht – на 90 мин (р0,001) экспозиции относительно контрольных животных.

У неполовозрелых неадаптированных животных происходило значительное увеличение толщины коры надпочечников и всех ее зон на всем протяжении холодового воздействия. Изменение площади кортикоцитов и площади ядер кортикоцитов зон коры надпочечников зависело от длительности охлаждения и было разнонаправленным.

У адаптированных контрольных животных происходило увеличение Sf и Sk. У адаптированных половозрелых животных наибольшие изменения морфометрических показателей ЩЖ при холодовом воздействии происходили на 15 мин экспозиции холодом, когда Sf и Sk возрастали, а Ht и Sn, наоборот, снижались по сравнению с контролем. На 60 мин холодовой экспозиции все морфометрические показатели возрастали в сравнении с контрольной группой. Sn изменялась на всем протяжении холодового воздействия разнонаправлено. У адаптированных неполовозрелых животных холодовое воздействие приводило к возрастанию всех изучаемых морфометрических показателей ЩЖ. При этом наиболее значимые различия происходили на 30 мин охлаждения, когда были максимальны Sf, Sk и Ht, и на 60 мин экспозиции площадь Sn была максимальна, а Sf и Sk минимальны.

Рис.3 Изменение толщины коры и зон коры надпочечников адаптированных половозрелых самцов крыс

У адаптированных самцов крыс в контроле происходило возрастание коры надпочечников у половозрелых животных за счет увеличения пучковой зоны, а у неполовозрелых – сетчатой и клубочковой зон коры надпочечников в сравнении с интактными самцами. Холодовое воздействие у адаптированных неполовозрелых животных приводило к снижению толщины коры надпочечников к 60 мин экспозиции (Рис.3). Изменение толщины зон коры надпочечников у адаптированных неполовозрелых самцов крыс зависело от длительности холодового воздействия. Толщина клубочковой и пучковой зон возрастала на 30-45 мин охлаждения и снижалась в остальные временные интервалы. Толщина сетчатой зоны снижалась в начальный период холодового воздействия до 30 мин. Холодовое воздействие у адаптированных половозрелых самцов крыс приводило к снижению коры относительно контрольной группы с 15 по 45 мин. У адаптированных половозрелых животных толщина клубочковой зоны снижалась на всем протяжении холодового воздействия, толщина пучковой зоны снижалась до 45 мин воздействия, тогда как толщина сетчатой зоны возрастала на 15 и 45 мин охлаждения. Относительная масса ЩЖ и надпочечников у адаптированных животных обеих возрастных групп при охлаждении практически не изменялись.

Таким образом, были выявлены следующие особенности морфометрических показателей: 1) холодовое воздействие вызывало ответную реакцию со стороны эндокринных органов: происходило реагирование со стороны ЩЖ и надпочечников, начиная с 15 минуты холодовой экспозиции; 2) в период 20-дневной адаптации происходила гистоструктурная перестройка ЩЖ и надпочечников к последующему воздействию: в ЩЖ – накопление коллоида, в надпочечниках – увеличение толщины коры; 3) адаптация приводила к снижению реакции коры надпочечников на холодовое воздействие: у неадаптированных животных происходило увеличение толщины коры надпочечников, тогда как у адаптированных самцов крыс толщина коры при холодовом воздействии снижалась; 4) у адаптированных половозрелых животных активации коры надпочечников на острое холодовое воздействие отсутствовала, у адаптированных неполовозрелых животных - снижалась; 5) в ЩЖ адаптация способствовала более раннему проявлению ответной реакции (у неадаптированных животных рост показателей происходил лишь к 60 мин, у адаптированных на 15-30 мин); 6) у адаптированных животных наибольшие морфометрические изменения в ЩЖ наблюдались на 60 мин холодового воздействия: у половозрелых животных происходило максимальное возрастание всех изучаемых параметров, у неполовозрелых – Sk и Sf возрастали, а Sn и Ht – снижались.

Динамика ПОЛ. Содержание МДА в ЩЖ у неадаптированных неполовозрелых самцов крыс снижалось на 45 мин холодового воздействия; скорость спПОЛ уменьшалась на всем протяжении охлаждения за исключением 30 мин, скорость аскПОЛ снижалась к 15 мин холодового воздействия, тогда как дальнейшее охлаждение способствовало возрастанию показателя. В надпочечниках при охлаждении изменялись лишь кинетические показатели ПОЛ - происходило снижение спПОЛ и аскПОЛ с 45 по 90 мин холодового воздействия.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»