WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 11 |

Состояние системы ПОЛ-АОЗу животныхопределяли попоказателям: содержание в кровиконъюгированных диенов (ДК) в ед.опт.пл./мглипидов или в мкМ/л крови (Стальная И.Д.,Гаришвили Т.Г., 1977); малонового диальдегида (МДА) в мкМ/лкрови (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. 1977);содержание всыворотке крови флуоресцирующих оснований Шиффа (ОШ) вусл.ед./мл сыворотки (BidlackW.R., Tappel A.L., 1973; Malshet V.G., Tappel A.L., 1973); содержание вкрови общих и небелковых SH-групп в мМ/л(Рубина Х.М.,Романчук Л.А., 1961); содержание в сыворотке кровивитамина Е в мкМ/л (КисилевичР.Ш., Скварко С.И., 1972), ферроксидазную активность церулоплазмина (ЦП) всыворотке крови в мкМ бензохинона/лмин (Антонов М.П. с соавт., 1985);активность супероксиддисмутазы (СОД) вэритроцитахв отн.ед./мг гемоглобина(Чумаков В.Н.,Осинская Л.Ф., 1977), каталазы (КАТ) в крови в мМН2О2/лмин (Королюк М.А. с соавт.,1988), пероксидазы (ПО) в усл.ед./л крови (Плешков Б.П., 1976),глутатионпероксидазы (ГПО2) в крови в мМ восстановленногоглутатиона/лмин (Кругликова Г.О.,Штутман И.М., 1976), глутатионредуктазы (ГР) в крови в мМокисленного глутатиона/лмин(Кругликова Г.О., Штутман И.М.,1976); содержание НЭЖК в сыворотке крови вмкМ/л (Прохоров М.Ю. с соавт.,1977), в-липо-протеидов в мг% (Ледвина М., 1960),холестерина вмМ/л (Меньшиков В.В. с соавт., 1987).

Для характеристикисостояния гуморального звенанеспецифической иммунологическойрезистентности организма определяли:бактерицидную активность (%) сывороткикрови (Смирнова О.В., Кузьмина Т.А., 1966);лизоцимную (мкг/мл) (Бухарин О.В., ВасильевН.В., 1974), комплементарную (% гемолиза)активности сыворотки крови (Вагнер Г.Ф., 1966);содержание пропердина (г/л) с сывороткекрови (Томилка В.С., Старостин И.С.,1984).

В проведенииэкспериментальных инаучно-производственных исследованийиспользовали: инфузории Paramecium caudatum (36опытов, с оценкой 3-х препаратов); мышей -белых беспородных самцов и самок с массойтела 20,0±2,0 г (n=1659); белых крыс беспородных илинии Wistar самцов и самок с массой тела150,0±20,0 г (n=1780); кроликов обоего пола породышиншилла с массой тела 1,1-2,0 кг (n=44); собак(n=6); коров, откормочных быков и телятчёрно-пёстрой породы (n=286); свиней крупнойбелой, украинской пород и помесей разноговозраста и пола (n=463); кур и цыплят породылеггорн, линии хайсекс и др. (n=3450); норок,песцов и хорьков (n=12045).

Опыты на продуктивныхживотных проводили в производственныхусловиях содержания и кормления. Призаболеваниях диагнозы ставили всоответствии с утверждёнными инструкциямии методическими указаниями с привлечениемсоответствующих специалистов и данныхлабораторных исследований.

Кровь для исследованийполучали изхвоста, ярёмной, ушной вен, при декапитации, а внутренние органыили их фрагменты - при вскрытииживотных.

Полученный цифровойматериал обработан методамиматематической статистики принятыми в биологии и медицине(М.Л. Беленький, 1963; Г.Ф.Лакин, 1973; Е.В. Гублер, 1978 и др.) с использованием прикладнойстатистической программы “Statistica 5.0” (Stat Soft Inc., 1998) и электронныхтаблиц “MicrosoftExcel” на РС «Pentium IV».

3.Собственные исследования

3.1. Общаяфармако-токсикологическая характеристикасинтетических олигопептидов

3.1.1. Опыты на Paramecium caudatum

Токсическое действие наодноклеточных оценено по двум параметрам:дозозависимому и временному. Тимоген инеоген в диапазоне доз от 0,001 до 1,0 мг/млсреды не оказывают влияния нажизнеспособность инфузорий. Седатин в дозе1,0 мг/мл среды проявляет протистоцидныйэффект.

Испытанные олигопептиды, независимоот аминокислотного состава и структурымолекулы способствуют повышениюсопротивляемости клеток кмембраноповреждающему действиюгипертонического раствора натрияхлорида.Установлены существенные различия междупрепаратами в зависимости от дозы. Тимоген и неоген по активностиблизки между собой, хотяпоследний повсем соответствующим дозам активнеесвоего аналога на 8,0-21,0%.

Седатин в дозах от 0,001 до0,1 мг/мл, хотя и менее значительно, чемнеоген, повышает сопротивляемость клеток кповреждению. Но в высокой концентрации (0,1мг/мл) он её существенно, на 25,0 %, снижает.По сравнению с неогеном, разницасоставляет 86,7 %.

Изучаемые синтетическиеолигопептиды при добавлениив питательную среду оказываютвыраженное стимулирующее влияние наскорость деления инфузорий,находящихся в экспоненциальной фазе роста. Препараты повышают интенсивностьделения на 65,0-125,0 % по сравнению с контролемв зависимостиот дозы. Оптимум у неогена и тимогенаоказался в пределах 0,01-0,1 мг/мл, а у седатина0,001- 0,01 мг/мл. Вдозе 0,1 мг/мл и выше седатинвызывал угнетение роста на 40,0 %.

3.1.2.Характеристика токсического действияпрепаратов

3.1.2.1. Остраятоксичность. Вопытах на белых мышах установлено, чтопрепараты ни в одной из испытанных доз (250,0;500,0; 1000,0; 5000,0 и 10000,0 мкг/кг массы тела) непроявили общетоксического действия и невызывали гибели мышей.

Внутримышечные и внутрибрюшинныеинъекции белым крысамолигопептидов в тех жедозах не вызывали признаков интоксикации. Лишь применениеседатина в дозе 10000,0 мкг/кг в течениепервых 3-4 часов вызывало угнетение подвижности иуменьшение тактильной чувствительности. К5-му часу этипризнаки исчезали и опытные животные неотличались от контрольных.

Внутримышечное введение неогенасобакам в дозе в 1000,0 мкг/кг не оказываетотрицательного влияния на клиническоесостояние животных и не вызывает их гибели.Не изменяются поведение, аппетит,состояние кожных покровов и слизистыхоболочек, не изменяются показателитемпературы, пульса и дыхания.

3.1.2.2. Хроническаятоксичность. Во всех опытахбелым мышам и крысам растворы подкожно, асобакам внутримышечно растворыолигопептидов вводили в течение 3-х месяцевежедневно в дозах 10,0-1000,0 мкг/кг. Длительноеприменение тимогена, неогена и седатина невызвало гибели животных и несопровождалось клиническими изменениямиза весь период наблюдений.

Длительное применениеседатина в дозе 1000,0 мкг/кг изменялоповеденческие реакции животных, уже на 5-есутки после начала его применения опытныеживотные становились более спокойными,меньше реагировали на внешниераздражители (табл.1).

3.1.2.3. Местноераздражающее действие. Установлено, что нанесениена коньюктиву глаза кроликов 0,01 %; 0,1 % и 1,0 %растворов изучаемых пептидов не оказываетзаметного влияния на клиническоесостояние животных, их поведение, аппетит,температуру тела.

Препараты как приоднократном, так и при длительномнанесении отрицательно не влияли насостояние слизистой оболочки глаз.

Как при однократном, таки при длительном нанесении растворовизучаемых пептидов на выстриженную ивыбритую кожу не установлено заметноговлияния на клиническое состояние кроликов,их поведение, аппетит у кроликов, невызывала изменений цвета, упругости итемпературы при аппликации на участкикожи. При этом седатин в концентрации 0,1% и 1,0 % при ежедневном двухнедельномнанесении на кожу проявил выраженноестимулирующее влияние на рост шерсти укроликов.

Таблица 1

Поведенческие реакциибелых крыс при длительномприменении

седатина в дозе 1000,0мкг/кг

Сутки от начала

введенияседатина

Реакция

Тактильная

чувствительность

возбуждение

торможение

усилена

ослаблена

5

±

±

10

±

+

15

+

+

20

±

±

25

±

30

Примечание: – нет; + есть; ±промежуточное состояние

3.1.2.4.Аллергенные свойства. Морским свинкам в правую ушнуюраковину внитрикожно однократноинъецировали по 0,1 мл 0,01 % стерильныхрастворов тимогена, неогена и седатина.Контрольным свинкам вводили стерильныйфизраствор. Через 12 дней вконъюнктивальный мешок правого глазазакапывали по 1-й капле тех же растворов.Одновременно животным субплантарно вправые лапки вводили по 0,1 мл этих же растворов. Учитываливоспаление конъюктивы и отёк лап.Установлено, что все испытуемыесинтетические олигопептиды не обладаюталлергизирующим действием.

3.1.2.5.Эмбриотоксическое и тератогенноедействие. Приприменении самцам белых крыс передспариванием в течение двадцати днейежедневно раствора седатина внутримышечнов дозах 10,0; 100,0 и 1000,0 мкг/кг установлено, чтоолигопептид в дозе 10,0 мкг/кг не оказалвлияния на оплодотворяющую способностьсамцов. У самок по количеству жёлтых тел,живых и мёртвых плодов не выявленосущественных отличий от контрольных.Отмечена несколько меньшаядоимплантационная и постимплантационнаягибель плодов при применении препарата. Необнаружено уродливых и аномальных живыхплодов.

Установлено, что неогени седатин не обладают эмбриотоксическим итератогенным действием при многократномих применении самкам белых крыс в диапазоне доз 10,0-1000,0 мкг/кг. Уживотных, получавших седатин в дозе 10,0мкг/кг, живых эмбрионов было примерно на 5,0 %больше, а постимплантационная гибельплодов не отличалась от контроля(табл.2).

Количество живых имёртвых эмбрионов у крыс, получавшихпрепарат в дозе 100,0 мкг/кг не отличалось отконтрольных, но предимплантационная иобщая эмбриональная смертность былинесколько ниже.

Применение седатина вдозе 1000,0 мкг/кг, а это выше возможнойлечебной или профилактической доз в 100-1000раз, также не оказало существенноговлияния на процесс плодоношения самок исостояние эмбрионов.

Таблица 2

Влияние седатина насостояние яичников и эмбрионов у белыхкрыс

Показатели

Контроль

Седатин,мкг/кг

10,0

100,0

1000,0

Количество беременныхсамок

10

10

10

10

Количество желтых тел на1 самку

17,4±1,2

18,1±1,5

17,0±1,8

17,9±1.5

Количество живыхэмбрионов у 1 самки

10,9±0,6

11,4±1,1

11,0±0,8

10,8±1,3

Количество мертвыхэмбрионов на 1 самку

4,0±0,3

4,2±0,1

4,0±0,5

4,4±0,4

Общее количествоимплантировавшихся эмбрионов на 1самку

14,9±1,1

15,6±1,3

15,2±1,4

15,4±1,2

Предимплантационнаягибель, %

14,4

13,8

10,6

14,0

Постимплантационнаягибель, %

2,7

2,7

2,6

2,9

Общая эмбриональнаясмертность, %

17,1

16,5

13,2

16,9

Самки, получавшие весьпериод беременности седатин в разных дозахне отличались от контрольных и родившиесяот них крысята не отличались друг от друга.Уродств и других аномалий развития плодовпрактически не было. Применение седатинабеременным животным способствует рождениюболее физиологичного приплода (табл. 3).

Таблица3

Рождаемость ианатомическое состояние новорожденныхкрысят
при длительномприменении седатина беременнымсамкам

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»