WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 9 |

Таким образом, данные экспериментальных исследований свидетельствуют о том, что рекомбинантный ИЛ-1 может рассматриваться в качестве эффективного средства профилактики и ранней терапии лучевых поражений, развивающихся при различных вариантах радиационного воздействия (внешнее острое и пролонгированное, сочетанное внешнее и внутреннее облучение).

Влияние интерлейкина-1 на показатели костномозгового кроветворения у мышей при внешнем - и рентгеновском облучении

На данном этапе исследования в методиках эндогенного и экзогенного колониеобразования изучалось влияние профилактического и раннего лечебного применения ИЛ-1 на число стволовых кроветворных клеток, определяющих возможность восстановления гемопоэза после облучения.

Эксперимент проводили на 400 белых беспородных мышах-самцах, 200 из которых относились к опытным группам (профилактическое и лечебное применение ИЛ-1) и 200 – к контрольным группам (облучение без применения исследуемого препарата). Животных опытных и контрольных групп подвергали внешнему рентгеновскому облучению на установке РУМ-17 в дозах 5,5 (n = 10), 6,0 (n = 10), 6,5 (n = 12), 7,0 (n = 14), 7,5 (n = 16), 8,0 (n = 18) и 8,5 Гр (n = 20).

В результате проведенных исследований установлено, что рекомби-нантный ИЛ-1 обладает радиопротекторной и ранней терапевтической активностью в отношении клеток-предшественников гемопоэза у облученных мышей (табл. 3).

Таблица 3

Количество эндогенных 9-суточных колониеобразующих единиц на селезенке белых беспородных мышей-самцов, подвергнутых внешнему однократному рентгеновскому облучению, при профилактическом (за 24 ч) и лечебном (через 1 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг (n = 10 в каждой группе)

Доза облучения, Гр

Контроль (облучение)

ИЛ-1 за 24 ч до облучения

ИЛ-1 через

1 ч после облучения

5,5

7,3 ± 1,7

10,8 ± 2,4

11,0 ± 1,6

6,0

5,8 ± 1,1

6,0 ± 1,8

8,3 ± 1,1

6,5

4,6 ± 0,9

5,5 ± 0,8

6,7 ± 0,8

7,0

3,1 ± 0,7

5,3 ± 1,2 *

6,0 ± 0,7 *

7,5

1,8 ± 0,6

3,2 ± 0,7 *

5,6 ± 1,1 *

8,0

0,8 ± 0,5

2,2 ± 1,2*

3,8 ± 0,9 *

8,5

0

2,0 ± 1,0*

1,7 ± 0,6*

* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

В условиях профилактического (за 24 ч до радиационного воздействия) применения при всех изученных дозах облучения рекомбинантный ИЛ-1 предотвращал снижение количества эндогенных КОЕ-С9 у облученных мышей. Статистически значимых отличий по сравнению с контролем (радиационным воздействием без предварительного введения рекомбинантного ИЛ-1) данный показатель достигал при облучении животных в дозах 7,0 и 7,5 Гр (СД70-80/30). При действии очень высоких доз – 8,5 Гр (СД90-100/30) – только предварительное внутрибрюшинное введение препарата позволяло сохранить колониеобразующую активность клеток на селезенках облученных мышей.

Высокую противолучевую активность по показателям эндогенного колониеобразования ИЛ-1 проявлял и при его лечебном применении через 1 ч после радиационного воздействия (табл. 3). И в этом случае при всех дозах облучения рекомбинантный ИЛ-1 предотвращал снижение числа эндогенных КОЕ-С9 у облученных мышей. Так, число КОЕ-С9 при лечебном применении препарата превышало аналогичные значения группы сравнения при облучении в дозе 7,0 Гр почти в 1,5 раза, при облучении в дозе 7,5 Гр – в 2,6 раза, при облучении в дозе 8,0 Гр – в 4,75 раза. Следует также отметить, что, как и в случае профилактического использования ИЛ-1, только его лечебное применение позволяло обнаружить рост эндогенных колоний на селезенках мышей, подвергнутых радиационному воздействию в дозе 8,5 Гр.

Влияние профилактического (за 24 ч до облучения) введения рекомбинантного ИЛ-1 в дозе 50 мкг/кг на количество КОЕ-С9 у облученных мышей изучали и в методике экзогенного колониеобразования. Эксперимент проводился на мышах различных линий: мышах линии BALB/c, обладающих высокой радиочувствительностью, белых беспородных мышах и мышах-гибридах первого поколения CBA x C57Bl, являющихся радиорезистентными.

Результаты проведенного исследования представлены в таблице 4.

Таблица 4

Число миелокариоцитов и количество экзогенных 9-суточных колониеобразующих единиц на селезенке мышей, подвергнутых внешнему однократному рентгеновскому облучению, при профилактическом (за 24 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг (n = 20 в каждой группе)

Лабораторные животные

Показатель

Условия эксперимента

без облучения

контроль

(облучение)

ИЛ-1 за 24 ч до облучения

ИЛ-1 без облучения

Мыши линии BALB/c

число миелокариоцитов,

x 106/бедро

18,5 ± 1,6

18,2 ± 1,4

18,5 ± 1,2

18,0 ± 1,5

число КОЕ-С9

в 1 бедре

80 ± 8

11 ± 1

32 ± 3 *

320 ± 34 * **

число КОЕ-С9

на 106 миелокариоцитов

4,1 ± 0,5

0,6 ± 0,2

1,7 ± 0,3 *

17,7± 2,0 * **

Белые беспородные мыши

число миелокариоцитов,

x 106/бедро

18,0 ± 1,5

18,4 ± 1,4

20,0 ± 1,2

18,4 ± 1,6

число КОЕ-С9

в 1 бедре

220 ± 56

80 ± 32

164 ± 29 *

400 ± 94 *

число КОЕ-С9

на 106 миелокариоцитов

24,4 ± 6,1

8,7 ± 3,2

15,4 ± 3,0 *

43,4 ± 9,9 *

Мыши-гибриды первого поколения

CBA x C57B1

число миелокариоцитов,

x 106/бедро

21,0 ± 1,8

20,5 ± 1,4

20,0 ± 1,9

19,3 ± 1,6

число КОЕ-С9

в 1 бедре

358 ± 19

38 ± 8

107 ± 12 *

404 ± 21 *

число КОЕ-С9

на 106 миелокариоцитов

18,0 ± 1,1

1,2 ± 0,2

5,2 ± 0,3 *

22,5 ± 0,2 *

* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

** – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с уровнем до облучения

Установлено, что радиационное воздействие вызывало существенное снижение количества колоний, выросших на селезенках облученных животных: до 15 % от исходного уровня у мышей линии BALB/c, до 36 % – у белых беспородных и до 10 % – у гибридов F1 (CBA x C57Bl).

Профилактическое (за 24 ч до облучения) внутрибрюшинное введение рекомбинантного ИЛ-1 в дозе 50 мкг/кг позволяло в значительной степени предотвратить постлучевое снижение числа экзогенных КОЕ-С9 у облученных мышей. При этом, радиозащитный эффект препарата в отношении клеток-предшественников проявлялся вне зависимости от радиочувствительности различных линий мышей. Число колоний на селезенках облученных животных под влиянием препарата в среднем увеличивалось в 2-3 раза. Так, у мышей линии BALB/c, получавших ИЛ-1 в качестве радиопротектора, количество колоний, по сравнению с незащищенными облученными животными, выросло в 2,8 раза и составило 42 % от уровня облученного контроля. У белых беспородных мышей число колоний выросло в 1,8 раз (до 63 % от уровня облученного контроля), у мышей-гибридов – в 4,3 раза (до 29 % от уровня облученного контроля).

Таким образом, результаты исследований показали, что рекомбинантный ИЛ-1 влияет на миграционную и пролиферативную активность ранних предшественников гемопоэза, увеличивая ее. Применение данного препарата за 24 ч до облучения или через 1 ч после радиационного воздействия способствует сохранению жизнеспособности значительного числа кроветворных клеток-предшественников гемопоэза, о чем свидетельствуют данные, полученные при исследовании противолучевой эффективности ИЛ-1 в методиках эндогенного и экзогенного колониеобразования.

Влияние интерлейкина-1 на количественный состав лейкоцитов периферической крови облученных мышей и крыс

На данном этапе исследования в экспериментах на 120 белых беспородных мышах-самцах проводили изучение влияния ИЛ-1 на пострадиационную динамику содержания лейкоцитов в периферической крови. Животных подвергали внешнему относительно равномерному однократному -облучению в дозе 6 Гр (СД70/30) с мощностью дозы 130 Р/мин.

Как видно из данных, представленных в таблице 5, острое -облучение в дозе 6 Гр вызывало у мышей развитие панцитопении с выраженными проявлениями миелодепрессии. Введение ИЛ-1 животным до облучения существенно не влияло на темп развития постлучевой лейкопении в 1-е сутки, однако уже к 3-м суткам после облучения у мышей, получавших препарат, общее число лейкоцитов в периферической крови сохранялось на более высоком уровне по сравнению с контролем. Начало восстановления числа лейкоцитов у леченых животных отмечалось через 8 сут после облучения, тогда как в контроле этот процесс развивался лишь к 12 сут (табл. 5).

Таблица 5

Динамика общего числа лейкоцитов в периферической крови белых беспородных мышей, подвергнутых острому -облучению в дозе 6 Гр при профилактическом (за 24 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг, х 109/л (n = 10 в каждой группе)

Условия эксперимента

Сроки исследования, сут

до облучения

1

3

8

12

20

Контроль (облучение)

7,5 ± 0,5

1,2 ± 0,2

0,3 ± 0,2

0,4 ± 0,1

0,7 ± 0,3

7,0 ± 0,5

ИЛ-1 за 24 ч до облучения

9,3 ± 0,4 *

1,3 ± 0,2

0,8 ± 0,1*

1,5± 0,2*

1,8± 0,2*

7,6 ± 0,3

* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

Таким образом, под влиянием ИЛ-1 выраженность пострадиационной лейкопении была меньше, чем у облученного контроля, а также наблюдалось более быстрое восстановление числа лейкоцитов в периферической крови.

Оценка влияния ИЛ-1 на количественный состав лейкоцитов периферической крови крыс проводилась при пролонгированном -облучении лучами Co-60 в дозе 10 Гр (мощность дозы облучения составила 1 Р/мин). Обследование экспериментальных животных опытных и контрольных групп с оценкой гематологических показателей проводили до облучения (дважды), а также через 3 сут и далее каждые 5-е сутки в течение 30 сут после облучения.

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 9 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»