WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 |

22,8±3,5*

33,1±5,2*

38,4±5,0

рФVIIa серия №2

(n=4)

42,9±8,3*

41,3±9,2

57,1±3,5

68,7±4,0

рФVIIa серия №3

(n=4)

55,9±3,8

51,6±5,3

72,1±6,5

76,2±4,2

рФVIIa серия №4

(n=4)

65,7±9,9

44,3±4,5

62,5±5,6

70,2±7,2

«НовоСэвен»

(n=9)

84,9±3,6

54,6±5,2

66,6±6,8

62,0±5,6

Физраствор

(n=6)

78,5±6,9

95,7±4,2

92,9±5,5

94,6±7,1

Объем кровопотери, %

рФVIIa серия №1

(n=4)

100

35,9±5,2

33,5±3,5

21,9±4,5

27,6±3,7

рФVIIa серия №2

(n=4)

53,8±8,3*

47,2±4,9

15,8±8,9*

32,7±3,7

рФVIIa серия №3

(n=4)

57,5±6,6

29,2±4,6

37,6±5,5

54,8±8,4

рФVIIa серия №4

(n=4)

55,8±8,6

32,3±5,8

55,2±6,3

44,0±11,4

«НовоСэвен»

(n=9)

86,4±3,5

46,8±5,5

44,6±9,1

66,5±13,4

Физраствор

(n=6)

73,5±8,5

76,0±7,2

91,2±5,3

95,2±6,3

* - различия значений параметров гемостаза в сравнении со соответствующими значениями в группе экспериментов с применением препарата «НовоСэвен» статистически достоверны при р<0,05

Исследование способности отечественного рФVIIa купировать гепарин-индуцированную гипокоагуляцию

Первой группе животных внутривенно вводили среднемолекулярный гепарин в дозе 500 МЕ/кг. Второй группе наряду с гепарином вводили препарат «НовоСэвен» в дозе 90 мкг/кг. Третьей группе помимо гепарина инфузировали отечественный рФVIIa серии №1 в дозе 90 мкг/кг. Для оценки антикоагулянтного действия отечественного рФVIIa использовали такие показатели коагулограммы как АЧТВ и ВСЦК.

В результате эксперимента было отмечено, что до введения веществ статистически значимых различий между средними значениями АЧТВ в сопоставляемых группах не наблюдалось и они составляли 17,2±1,2, 16,6±1,9 и 19,9±1,8 сек, соответственно. В дальнейшем через 30 минут после инъекции гепарина значение АЧТВ в трех группах удлинилось и составляло 176,2-193,7 секунд. Через 60 минут у животных, получивших только гепарин, данный показатель достиг своего максимума и составил 210,4±9,0 сек., в то время как АЧТВ во второй и третьей группе составляло 68,5±5,9 и 111,5±12,3 сек, соответственно. Сокращение данного показателя прослеживалось у второй и третьей группы до 120 минутного интервала эксперимента. Спустя 180 минут после инъекций значения АЧТВ в трех группах сравнялись (21,1-23,1 сек).

Время свертывания цельной крови до инъекций составляло 139-145 сек. После проведения инфузии гепарина венозная кровь животных каждой группы не сворачивалась в течение более 30 минут (1800 сек.). Спустя 60 минут после инъекций первой группе цельная венозная кровь не приобрела способность к свертыванию. В тоже время образцы крови второй и третьей групп животных, образовывали сгусток на 1583±112 и 1521±132 сек, соответственно. Эффект сокращенного ВСЦК проявлялся во второй и третьей группе к 90 минуте наблюдения. При этом значения ВСЦК в первой, второй и третьей группах составили 1562±98, 1269±83 и 1292±78 сек, соответственно. На 120 и 180 минуту наблюдения значения ВСЦК между тремя группами не отличались.

Исследование способности отечественных образцов рФVIIa купировать варфарин-индуцированную гипокоагуляцию

Задачей данного раздела работы было исследование способности отечественного рФVIIa при его внутривенном введении в дозе 90 мкг/кг купировать антикоагулянтный эффект, вызванный трехдневным пероральным введением варфарина в дозе 0,15 мг/кг.

В данном исследовании определено ВСЦК и ПВ. В серии острых экспериментов оценивали время остановки кровотечения и объем кровопотери животных с варфарин-индуцированной гипокоагуляцией после внутривенного введения им отечественного образца рФVIIa в дозе 90 мкг/кг.

Рисунок №1

Изменение ПВ после введения отечественного рФVIIa или препарата «НовоСэвен» животным с варфарин-индуцированной гипокоагуляцией

Результаты исследования показали, что при экспериментальной варфарин-индуцированной коагулопатии время свертывания цельной крови увеличивалось с 238±21 секунд до 458±16 секунд, а ПВ – с 9,2±0,2 секунд до 15,8±0,3 секунд.

В результате сравнения значений ПВ при применении отечественного рФVIIa и препарата «НовоСэвен» не было выявлено достоверных различий между ними (Рис. №1). При этом оба вещества сокращали данный показатель до 5,2-5,6 сек. (30 минут после инъекции). Данный эффект сохранялся в обеих группах животных до конца наблюдения (180 мин). Исследование гемостатической активности отечественного рФVIIa при его внутривенном введении в дозе 90 мкг/кг животным с варфарин-индуцированной гипокоагуляцией показало, что уже через 30 минут после инъекции происходило сокращение времени остановки кровотечения в 2 раза, что совпадает с данным показателем при применении препарата «НовоСэвен» (2,1 раза). Спустя 60 и 120 минут наблюдения время остановки кровотечения составляло 56,1±6,8% и 54,3±5,9%, а при применении препарата «НовоСэвен» 34,1±4,8 и 30,1±5,5. К концу эксперимента время остановки кровотечения было равно 53,1±6,3%, а при использовании препарата «НовоСэвен» показатель составлял 44,2±3,6% от исходного значения. Также было зафиксировано сокращение объема кровопотери. Так, на интервалах 30, 60 и 120 минут после введения отечественного рФVIIa объем кровопотери сокращался до 36,1±7,5, 45,7±7,3 и 55,7±5,8%, а при использовании препарата «НовоСэвен» данный показатель сократился до 51,5 ± 4,2, 30,9 ± 3,9 и 29,6 ± 5,1 % на соответствующих временных интервалах. Объем кровопотери через 180 минут после инъекций составлял 55,5±4,5% и 24,4±2,0%, соответственно. Таким образом, внутривенная инфузия отечественного рФVIIa животным с варфарин-индуцированной гипокоагуляцией приводила к существенному сокращению как времени остановки кровотечения, так и объема кровопотери.

Оценка местной кровоостанавливающей активности композиций на основе применения факторов свертывания крови и их активаторов

В настоящем разделе работы на раневой поверхности печени кролика исследовалась гемостатическая активность белков крови: тромбина, фибриногена, фибрин-мономера «ООО Технология Стандарт», препарата «НовоСэвен» («Novo Nordisk») и отечественного рФVIIa, изготовленного в Институте Биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН. Также в данном разделе было проведено исследование гемостатической активности рФVIIa при сочетании его воздействия системно и местно.

Эксперименты по определению гемостатической активности отечественного рФVIIa при его внутривенном введении в дозе 90 мкг/кг и местной аппликации в количестве 263 мкг/см2 в остром опыте на животных показали, что через 60 минут после внутривенного введения отечественного рФVIIa время остановки кровотечения сократилось примерно в 2 раза и составляло 123±19 секунды. Местная аппликация на раневую поверхность порошка отечественного рФVIIa в дозе 263 мкг/см2 на фоне введенного внутривенно отечественного рФVIIa в дозе 90 мкг/кг приводила к уменьшению времени остановки кровотечения до 45±10 секунд и резкому снижению объема кровопотери - до нескольких капель крови (Рис. №2).

Рисунок №2

Изменение гемостатического эффекта от сочетания системного и местного воздействия отечественного рФVIIa

Следующим этапом работы явилось проведение сравнительного исследования гемостатической активности препарата «НовоСэвен» и отечественного рФVIIa наносимых в форме порошка на раневую поверхность печени интактного кролика. При аппликации порошка препарата «НовоСэвен» на раневую поверхность в дозе 263 мкг/см2 происходило резкое сокращение времени остановки кровотечения до 25,3% при контроле 100%. В результате местного нанесения порошка отечественного рФVIIa в той же дозе время остановки кровотечения сокращалось до 28%.

При исследовании местной кровоостанавливающей способности аппликаций на основе белков крови, было показано, что нанесение порошка фибриногена в различных дозах на раневую поверхность печени не приводило к выращенному гемостатическому эффекту из-за низкой адгезивной способности, которая не позволяла веществу удерживаться на кровоточащей раневой поверхности, а фиксация вещества марлевой салфеткой оказалась неэффективной. В результате исследования местной гемостатической активности различных порошка тромбина, в дозах соответствующих 125, 250 и 500 NIH в момент нанесения на раневую поверхность смывались током крови и не оказывали влияния на гемостатический эффект. Нанесение на кровоточащую рану печени порошка тромбина 750 и 1250 NIH приводило к быстрому образованию тромбов, но отсутствие фиксирующей основы не позволяло осуществить законченный гемостаз. Фиксация порошка тромбина в дозе соответствующей 500 NIH на ране при помощи марлевой салфетки, приводило к укорочению времени остановки кровотечения в два раза по сравнению с контрольным значением. Увеличение количества тромбина до 625, 750 и 1250 NIH приводило к существенному сокращению времени остановки кровотечения до 42,7±6,4, 33,4±4,0 и 31,4±3,4%, соответственно.

Исследование местного апплицирования порошка фибрин-мономера в дозах 25 и 50 мг/см2 показало низкий гемостатический эффект, так как вещество смывало током крови. Однако, увеличение дозы лиофилизата фибрин-мономера (100, 125, 150, 200 мг/см2) сокращало время остановки кровотечения до 17,3±1,6%, 17,8±1,6%, 16,2±1,0%, 14,9±1,6%, соответственно. В результате проведения эксперимента была отмечена выраженная адгезивная способность фибрин-мономера, которая проявилась эффективным гемостазом без фиксации субстанции на кровоточащей ране. Добавление эпсилон-аминокапроновой кислоты в состав композиции из текстильного носителя и белка крови фибрин-мономера приводило к укорочению времени остановки кровотечения до 12,3±7,2% от контрольного значения.

В следующей группе экспериментов была исследована гемостатическая активность некоторых активаторов свертывания крови, в качестве которых были использованы фирмы «Технология Стандарт». Были исследованы следующие вещества: анцистрон, эхитокс, лебитокс. Анцистрон, обладая тромбиноподобным действием, превращает фибриноген в фибрин, однако при этом отщепляя только фибринопептиды А. Еще одной особенностью является то, что он не активирует XIII фактор свертывания крови и не блокируется антитромбином, а также комплексом «гепарин-антитромбин III». Лебетокс – осуществляет запуск свертывания крови путем активации фактора X. Эхитокс, обладает прямым активирующим действием на протромбин. При этом получившийся тромбин в отличие от физиологического тромбина малоподвержен инактивации гепарином и комплексом «антитромбин III – гепарин».

Это послужило основанием для испытания данных веществ на способность останавливать экспериментальное кровотечение. Однако, выполняя настоящий раздел работы, мы не пытались рекомендовать именно эти вещества как гемостатические средства местного действия. Однако в случае выраженного эффекта какого-либо соединения мы считали бы целесообразным в дальнейшей работе провести испытания кровоостанавливающего действия нетоксичных дериватов этих белков в условиях местной аппликации.

Pages:     | 1 | 2 || 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»