WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 12 |

При разработкетехнологии получения ферментативныхгидролизатов одной из сложных задачявляется очистка гидролизата отбалластных веществ. Использованиетрадиционных методов очистки, включающихобработку гидролизатов при различныхзначениях рН, не обеспечивало получениегидролизата сои с высокой степеньюпрозрачности. Очевидно, это связано с тем,что в сое, помимо белковых веществ,содержится целый комплексвысокомолекулярных соединений (целлюлоза,гемицеллюлоза, анионные полисахариды),которые могут образовывать с белкомэлектростатические комплексы, снижающиевеличину рН (В.Б.Толстогузов, 1987). Врезультате часть белков и другихвысокомолекулярных веществ, растворимыхпри повышенных температурах, проходятсквозь фильтровальную перегородку и приохлаждении выпадают в осадок. Изучениевлияния рН и термической обработки наполноту осаждения белковых и другихвысокомолекулярных веществ показало, чтоподщелачивание гидролизата после первойфильтрации до рН 8,3-8,6, термообработка при70-800С в течение15-30 минут и охлаждение перед фильтрацией до20-400Собеспечивало высокую прозрачностьгидролизата. Отклонение от указанныхпараметров исключало возможностьполучения препарата заданного качества.Очищенный гидролизат получали в видесухого препарата путемконцентрирования и высушивания методомраспыления, при температуре на входе всушильную камеру 180-2000С, на выходе – 100-1100С.

Сухой гидролизат соисодержал 2,3±0,2% аминного азота, 9,2±0,2% общегоазота, 56,0±5,0% пептонов, 0,45±0,1% триптофана,20,0±3,0% углеводов, 7,3±0,8% хлоридов, 5,4±0,8%влаги. Аминокислотный состав былпредставлен 17 аминокислотами.

Наличие в соевомгидролизате такого комплекса питательныхвеществ характеризовало его каквысокопитательную основу, что былоподтверждено данными биологическихисследований (табл. 6).

Из данных таб. 6 видно,что разработанный гидролизат обладалвысокой чувствительностью по отношению кштаммам, относящимся к различнымтаксономическим группам и не уступал покачеству соевому гидролизату фирмы «Merck».

Разработка защищенапатентом №2295249. Промышленный выпуск сухогогидролизата сои позволит расширитьассортимент коммерческих питательных средна его основе.

При внедрениитехнологии получения экстракта кормовыхдрожжей (ЭКД) по способу, предложенномурядом авторов (Л.Б.Бендас, Б.М.Раскин,А.К.Баранова, 1974; А.К.Баранова, 1978) выявленыследующие недостатки: длительностьпроцесса фильтрации и невысокая степеньпрозрачности растворов препаратов. С цельюих устранения проведен комплексисследований по усовершенствованиютехнологии получения экстракта кормовыхдрожжей.

Таблица 6

Сравнительныепоказатели чувствительности жидкой средына основе созданного гидролизата сои прикультивировании различныхтест-штаммов

Тест-штаммы

Разработанный гидролизат сои

Соевый гидролизат фирмы «Merck»(контроль)

чувствитель-ность

времяинкубации посевов (ч)

чувствитель-ность

времяинкубации посевов (ч)

S.pyogenes Dick1

10-4

36-40

10-4

36-40

E. faecalis775

10-6

20-22

10-6

20-22

S. epidermidis ATCC14990

10-6

20-22

10-6

20-22

S. entericaTyphi H901

10-6

20-22

10-6

20-22

S. flexneri 1a8516

10-6

18-20

10-6

18-20

S. aureusWood-46

10-6

20-22

10-6

20-22

S. enterica Typhimurium79

10-6

18-20

10-6

18-20

C. albicans885

10-6

40-48

10-6

40-48

B. cereus 2010

10-6

18-20

10-6

18-20

C. xerosis1911

10-6

36-48

10-6

36-40

S.sonneiS-form

10-6

18-20

10-6

18-20

L. monocytogenes56

10-6

20-24

10-6

20-24

P. aeruginosa27/99

10-7

18-20

10-7

18-20

E. coli 3912/41(O55:K59)

10-7

18-20

10-7

18-20

K. pneumoniae3534

10-7

18-20

10-7

18-20

E. aerogenes1006

10-7

18-20

10-7

18-20

Для удаления основноймассы взвешенных частиц использовалиметод отстаивания, который обычноприменяют в качестве первичного процессаразделения неоднородных систем.Установлено, что в течение 18-24 чпроисходило полное расслоение экстрактана уплотненный осадок и осветленнуюжидкость, которая представляла собойтонкодисперсную систему. Для очисткиэкстракта от мелкодисперсных частициспользовали гель фосфата кальция.Известно, что он снимает заряд коллоидныхчастиц, в результате чего между частицамивозникают силы сцепления, приводящие кобразованию крупных пористых частиц ипроцесс разделения существенно ускоряется(Я.Я.Шкоп, Н.В.Фомченко, 1981). Нами определеныоптимальные концентрации хлористогокальция и фосфорнокислого натрия,обеспечивающие образование геля фосфатакальция в количестве достаточном длякоагуляции частиц дисперсной фазы (3-4гNa2HPO4 и 2,1-2,8г CaCl2 на 1 л экстракта).

Испытанияразработанного способа предварительнойочистки экстракта в производственныхусловиях показали его высокуюэффективность, что выражалось в увеличениискорости фильтрации от 80 до 200 л/час см2 фильтрующейповерхности и в получении продукта высокойстепени прозрачности.

Сухой экстрактсодержал 1,6±0,3% аминного азота, 6,0±0,2% общегоазота, 8,0±1,5% углеводов, 7,2±1,2 % хлоридов, 5,2±1,2% влаги, рН-0,5% раствора 6,5±0,3.

Экстракт кормовыхдрожжей, полученный по разработанномуспособу, обладал ростстимулирующейактивностью в отношении микроорганизмовауксотрофных по витаминам В1, В3, В5, В6и не уступал по данномупоказателю экстракту, полученному потрадиционному способу (табл. 7). В настоящеевремя препарат выпускается в НПО«Питательные среды» согласно регламентупроизводства №1937-00. Разработка защищенапатентом РФ №227158.

Таблица 7

Сравнительные данныепо ростстимулирующей активности

экстрактов кормовыхдрожжей в отношении тест-штаммовауксотрофных повитаминам группы В

Тест-штаммы

Оптическая плотность культуральнойжидкости через 48 ч инкубации посевов при280С

Экстракт дрожжей, полученный поразработанному способу

Экстракт дрожжей, полученный

традиционнымспособом

Контрольная

среда Ридер ссахарозой

Saccharomyces cerevisiae 1168 (В1)

0,28±0,02

0,26±0,02

0,02

Debaryomycesdisporus 1575 (В6)

0,14±0,01

0,15±0,01

0,02

Kluyveromyces marxianus 1148 (В3)

0,32±0,03

0,34±0,3

0,02

Pichiafermentans 1375 (В5)

0,13±0,02

0,12±0,02

0,02

Зарубежные фирмы Oxoid,Merck для определения лецитиназнойактивности микроорганизмов выпускаютжелточную эмульсию в виде коммерческогопрепарата –Egg-Yolk Emulsion Sterile. В РФ аналогичный препарат невыпускается, что вынуждает бактериологовиспользовать желточную эмульсию,изготовляемую непосредственно в условияхлаборатории. При этом она неконтролируется на микробиологическуючистоту и имеет ограниченный срокхранения.

В связи с этимпроведена разработка технологии получениястерильной желточной эмульсии в готовом купотреблению виде с длительным срокомхранения.

Первый этап работывключал подбор оптимальных соотношенийжелтка и физиологического раствора дляполучения гомогенной эмульсии. Выявлено,что соотношения желтка и физиологическогораствора равное – 1:2,0-2,5 обеспечивало получениежелточной эмульсии заданного свойства. Придругих соотношениях получались сильноразбавленные эмульсии, в результате чегопроисходило ее расслоение, либоконцентрированные, затрудняющиетехнологический процесс на стадиифильтрации.

Следующий этап включалразработку способа стерилизациипрепарата, основываясь на методехимической стерилизации с помощьюхлороформа, который обычно используетсядля консервирования биологическихжидкостей, содержащих белки (М.О.Биргер, 1982;Л.Я.Телишевская, 2000).

Суть разработанногоспособа заключалась в следующем: эмульсиюяичного желтка фильтровали через 4 слоястерильной марли, фильтрат разливали встерильные флаконы, добавляли 1,0%хлороформа, оставляли на сутки притемпературе окружающей среды, затемпрогревали при 56-580С в течение 2 ч для удаленияхлороформа. Флаконы закрывали стерильнымипробками, герметизировали металлическимиколпачками и повторяли режим прогрева.

В табл. 8 представленырезультаты определения лецитиназнойактивности микроорганизмов на питательномагаре, содержащем желточную эмульсию,после 6-ти месячного хранения.

Таблица 8

Определениелецитиназной активности микроорганизмовна питательном агаре, содержащем желточнуюэмульсию после 6-ти месячногохранения

Тест-штаммы

Наличие зонлецитиназной активности

S. aureusWood-46

+

S. aureus FDA 209P

+

S. aureus 25923

+

B. cereus8035

+

B. cereus2010

+

B. cereus96

+

Cl. perfringensTAB6K28

+

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 12 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»