WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |

У взрослыхкрыс, подвергавшихся ИГ впервые 30 дней постнатальнойжизни, и контрольных не было различий в коцентрациикатехоламинов (норадреналина и адреналина)в плазме крови. При регистрации активности почечного симпатического нервав условиях 18-мин острой ИГ отмечалосьизменение амплитудысигнала нерва, которое модулировалось меняющимсяхеморецепторным входом.Амплитуда сигнала в нервена протяжении действияострой ИГ внормоксических игипоксических эпизодахпревышала фоновую (Рис. 3,леваяпанель).У крыс,подвергавшихсянеонатальной ИГ,реактивность симпатического нерва наоксидантный стресс – острую ИГ была повышенной. У этих крыс увеличение фоновой амплитуды болеечем на 30%происходилов 3 раза чаще, чем у контрольных крыс, приэтом она сохранялось повышенной в течение неменее десятка мин после окончаниястимула, чтосвидетельствует об измененнойпластичности ответов. Управлениеактивностью симпатического нерва посредством барорефлекторногомеханизма сразу послеприменения острой ИГ изменялось (Рис. 3, правая панель). Полученныепутем регрессионногоанализа характеристикиответов представлены в видеграфиков, описываемых уравнениями: Контрольные крысы: y= -2.71x+57.5 (острая ИГ);y= -1.18x+1.97 (нормоксия);ИГ (крысы,подвергавшиеся 30-дневной постнатальной ИГ):y= -1.26x-10.2 (острая ИГ);y= -1.38x-11.5(нормоксия). Барорефлекторнаячувствительность (вуравнениях - это коэффициент при х) уконтрольных крыс после остройИГ повышалась (Р<0.01),однако укрыс,подвергавшихся постнатальной ИГ она не изменилаcьпри том, что фоноваяактивность почечногосимпатического нерва былаповышена. Эти данные свидетельствуют о долгосрочныхпрогипертензивных изменениях всистеме симпатического контроля АД уданныхнормотензивных крыс.

1.5 Обмен катехоламинов в звеньяхавтономной дуги в условияхИГ.

Применение ИГ увзрослых крыс в течение 35 дней приводит кповышению АД (Fletcher etal., 1992). Механизмы симпатоактивацииконтролируются ИГ при непоседственном участии хеморецепторов. Дляисследования влияния ИГ наавтономнуюдугу,включающую каротидныехеморецепторы, надпочечники исимпатические ганглии был проведен анализ содержаниякатехоламинов – норадреналина и дофамина, а такжефермента ихсинтеза тирозингидроксилазы ифосфорилирования ее участков Ser19, Ser31,Ser40.Сравнение с эффектами постоянной гипоксиипоказало более выраженную латентность именьший уровень синтеза катехоламинов вкаротидных тельцах в условиях ИГ (Рис. 4).Данныепоказатели могут восить вклад вусилениехеморецепторного входа при ИГ, так как катехоламины вкаротидных тельцахподавляют их активность(Overholt and Prabhahar,1999). Рольсимпатических ганглиев, равно как и надпочечников, в синтезебиогенных аминов в условияхИГ быланезначительной. Усилениехемоафферентных влияний,определяемое ИГ, может посредствомповышения активациисимпатической нервнойсистемы приводить кгипертензивным состоянияму взрослых.

Рис. 3. Изменения вфоновой активности почечногосимпатического нервау крысы, подвергавшейсянеонатальной ИГ: эффект остройИГ (левая панель); барорецепторныйконтроль активностипочечного симпатическогонерва после остройИГ (правая панель).

Ср АД – среднее артериальное давление;АПСН - электрическаяактивность почечногосимпатического нерва, интегрированная засекунду. Изменения активности почечногосимпатического нерва (% от фона) для каждойкрысы были расчитаны при сдвигах АД отсреднего на ±25 и ±50 мм рт.ст.

1.6Постнатальная интермиттирующая гипоксия и гипертензия.

Перманентные нарушенияв контроле ЧСС, определяемые нарушениями в центральном, вагусном и симпатических механизмах контролясердечно-сосудистой функции, являютсяпоказателем снижения пластичности нервных механизмовконтроля АД и уменьшениякомпенсаторных возможностей в покое и при острой ИГ. Интереснымнаблюдением было то, что указанныеизменения прогипертензивнойнаправленности вбарорефлекторных механизмах у взрослых крыс Sprague-Dawley,подвергавшихся ИГ в раннем постнатальномпериоде, тем не менее, непривели к повышению АД (Рис. 5).Для оценкивозможности гипертензивныхпоследствий постнатальной ИГбыли использованы спонтанно гипертензивныекрысы (SHR) -модель генетической гипертонии. ИГ, примененнаяу SHR с 4-го по 30-ый дни жизни явилась

Рис. 4. Эффекты 14-дневной постоянной и интермиттирующей гипоксии на концентрацию в каротидномтельцедофамина (A), норадреналина (B),дигидроксифенилуксусной кислоты (C) исеротонина (D).

Среднее±m, *P<0.05; **P<0.01;***P<0.001 (нормоксические пробы: n =6;гипоксические пробы: n=15).

пусковым стимулом вразвитии болеевыраженногогипертензивногостатуса в постнатальномонтогенезе (Рис. 5). Эхокардиографическоеисследование левого

Рис. 5. Изменение систолического давленияв постнатальном онтогенезе у крыс Sprague-Dawley и SHR (среднее±m).

(1) SHR (n=5) и (3) Sprague-Dawley (n=6),подвергавшиеся неонатальной интермиттирующейгипоксии в первые 30 дней жизни (пунктирнаялиния); (2)Контрольные SHR (n=6)и (4) Sprague-Dawley(n=7), развивались в нормоксии. * -Р<0.001 для соответствующих значений награфиках 1 и 2. SHR – спонтанно гипертензивныекрысы.

желудочка у крыс, перенесшихпостнатальную ИГ, выявилоремоделирование сердца по концентрическому типу - гипертрофию левого желудочка(Табл. 2).

Одним из информативных методов оценкитонуса вегетативной нервной системыявляется анализ вариабельности сердечногоритма. Спектральный анализR-R интервалов ЭКГ вовремя сна у спонтанногипертензивных крыс, показал увеличениеотношения спектральной мощностинизкочастотного ивысокочастотного компонентов(НЧ/ВЧ) в 1.4 раза (P<0.01) у крыс,подвергавшихся постнатальной хроническойИГ по сравнению с контрольными. Так как НЧ компонент ассоциирован ссимпатическим, а ВЧ – спарасимпатическим отделом нервнойсистемы (Taskforce of the ESC and NASPE, 1996), повышениесоотношения спектральноймощности НЧ/ВЧ указывает наповышенный тонуса симпатическойнервной системы в покое у SHRпосле ИГ по сравнению сконтролем. Это могло определятьповышенное систолическое и диастолическоедавление у даннойгруппы крыс во времясна,достоверно не отличавшееся от значений АД во время бодрствования.Достоверного изменения мощности НЧ/ВЧ компонентовспектра у нормотензивных крыс, подвергавшихсяпостнатальной ИГ, ненаблюдалось. Таким образом, существенновозросший тонус симпатической нервной системы впокое после неонатальной ИГ присутствовалу взрослых SHR, но не у крыс Sprague Dawley, что моглоопределяться генетически.

Примененные в неонатальномпериоде одновременно с протоколомИГ фармакологические методы коррекции гипертензии сиспользованием миметика

Рис. 6. Изменение АД в онтогенезеSHR после неонатальнойинтермит-тирующей гипоксии.

Крысы находилисьпостоянно в условиях нормоксии (К,контроль) либо интермиттирующей гипоксии с4-го по 30-ый день жизни (ИГ). Крысы К и ИГполучали один из видов инъекций:полиэтиленгликоль (К), миметиксупероксиддис-мутазы [Mn(III) Tetrakis(1-methyl-4-pyridyl) porphyrin pentachloride] - MnTMPyP пентахлорид 10мг/кг в сут (СОДм) или блокатор L-Ca2+каналов нифедипин 5мг/кг в сут. Данные представлены каксреднее ± m; n=8/ группу; *P< 0.001 присравнении с соответствующими величинамисистолического давления в другихгруппах.

супероксиддисмутазы,блокирующего свободно-радикальные реакции инифедипина,

антигипертензивного агента,блокирующего L-Са2+каналы, обеспечило нормализациюсистолического и диастолического АД итолько частичное восстановление сердечнойфункции с большим компенсаторнымучастием нифедипина (Рис. 6; Табл. 2).

Таким образом, у генетическипредрасположенных к гипертензии крыс,присутствие ИГ в раннем онтогенезе являетсяпусковым фактором для развитиидолговременных отсроченных эффектов или“программирования “ выраженной гипертензии, что связано с активациейL-Са2+ каналов сердечно-сосудистой системы в условиях оксидантного стресса.Сигнальныемеханизмы, вовлеченные визменения сердечной функции в условияхоксидантного стресса, моделирующегообструктивное апноэсна, могли приводить к последствиям,имеющим необратимыйхарактер, что при указанномсиндроме проявляется в видесердечной недостаточности, ишемическойболезни, инфарктов миокарда.

  1. Влияние свободно-радикальнойактивации рецепторов легких накардио-респираторную функцию.

В условиях оксидантного стресса,вызываемогоИГ, продукция свободных кислородныхрадикалов (О2, Н2О2, и ·ОН) повышена. Вцелях исследования

Таблица 2

Изменения в функциилевого желудочка взрослых спонтанногипертензивных крыс после неонатальнойинтермиттирующей гипоксии

Эхокардио-

графические Г Р У П П Ы К РЫ С

показатели

и К ИГ ИГ-СОДм ИГ-Ниф

Различия (%) cр. с К ср. сИГ ср. с ИГ

КДД(мм) 8.88±0.15 6.88±0.21 7.35±0.227.75±0.31

(-22.5) * (НД) (12.7) ‡

КСД (мм) 5.51±0.19 3.48±0.22 4.18±0.27.31±0.30

(-36.8) * (НД)(НД)

Тпслж (мм) 1.68±0.02 1.94±0.10 1.70±0.05 1.69±0.06 (15.5) ‡ (НД) (НД)

Тзслж (мм)1.66±0.02 2.02±0.12 1.73±0.05 67±0.06

(21.7) ‡ (НД) (-17.2) ‡

ОТслж0.38±0.01 0.58±0.04 0.47±0.02 0.44±0.03 (54.2) † (-19.3) ‡ (-14.5) ‡

ФУ 0.38±0.01 0.50±0.020.44±0.02 0.45± 0.02

(30.3)*(НД) (НД)

Vcf (с-1) 4.19±0.1 5.11±0.3 4.52±0.05 3.93±0.14

(21.9)‡ (НД) (-23.0) †

Среднее± m; Обозначениягрупп как на Рис. 6; КСД- конечно-систолический диаметр левогожелудочка сердца; КДД -конечно-диастолический диаметр левогожелудочка; Тзслж - толщина задней стенкилевого желудочка сердца; Тпслж - толщинапередней стенки левого желудочка сердца;ОТслж - относительная толщина стенкилевого желудочка сердца; ФУ - фракционноеукорочение; Vcf- средняя скорость циркулярного сокращения волоконлевого желудочка. *P<0.001; †P<0.01; ‡P<0.05; НД - не достоверно.

возможности их влиянияна рецепторный аппарат легких ииндуцирование кардиореспираторных рефлексовпроводили прямое введениеН2О2(1 µмоль в 0.1 мл 0.9% NaCl) впериферические участки легких у искусственновентилируемых кроликов со вскрытой грудной клеткой. Такая техника, в отличие от традиционного введения веществ через малый кругкровообращения, обеспечивает стимуляциюрецепторных образованийлегких и исключает возникновение другихрефлексов из сердечно-сосудистой системыили с хеморецепторов.

Н2О2приводила к усилению центральной инспираторнойактивности (Рис. 7), выражавшейсяв увеличении амплитуды и частоты вспышекдыхательных разрядов в нейрограммедиафрагмального нерва, и угнеталаактивнсть экспираторных мышц. Интересно, что реакция на Н2О2 была сходна с ранееописанной реакцией на местнуюинъекцию 0.1мл 8.1% NaCl (Yu et al., 1998), оказывающей влияния исключительно черезмеханизм блуждающего нерва путем деполяризации его рецепторных окончаний. Латентный периодответов составил 2-10 с.Влияния Н2О2 на среднее артериальное давление былослабым.АД всреднем повышалось на 5.5 ±0.7 и 6.7 ±0.6 ммрт.ст., соответственно, в ответ наинъекции Н2О2и 8.1% NaCl (n = 20;p < 0.01). Эффекты Н2О2и 8.1% NaCl устранялись билатеральной ваготомией (n=5). Таким образом, рецепторы легких вусловиях свободно-радикальной активациине оказывают симпато-активирующих влияний,а их роль ограничиваетсяпределами участия блуждающихнервов. Сопоставление эффектов Н2О2 и классического медиатора воспаления брадикинина (20µМ в0.1 мл NaCl0.9%; В6026, Sigma),вводимого локально в легкое, показало разнообразие дыхательных игемодинамических эффектови их сочетаний под действиембрадикинина.Наиболее типичным было снижение АД, повышение тонуса экспираторных мышц, усиление центральнойинспираторной активности с резкимукорочением длительности вдоха и выдоха ихарактерной динамикойразвития ответа (латентный период составлял 14 с,maxамплитуда ЭНГ достигалась через ~ 40 c)(Рис. 8).

.

Рис. 7.Одинаковые дыхательные игемодинамические реакциина инъекцию 0.1 мл 8.1% NaCl (верхняяпанель) или 1 мкмоль Н2О2(нижняя панель) в периферическую областьправого легкого у анестезированныхискусственно вентилируемых кроликов соткрытой грудной клеткой.

ЭНГ-электронейрограмма левогодиафрагмального нерва; ЭНГ -интегрированная электронeйрограмма; Pтр -давление в трахее; АД – среднееартериальное давление. Три отметки наверхууказывают на моменты введения иглы влегкое, начало и окончание инъекции.

Рис. 8. Пример типичного дыха-тельного и сердечно-сосудистого эффектов брадикинина.

Обозначения – как наРис.7.

Эффектыбрадикинина определялисьволокнами проводников двухвидов – вагуса и невагусных висцеральных нервов. Снижение АД поддействием брадикинина было связано суменьшением активностисимпатических нервных волокон.Эффект сохранялся после ваготомии(Рис. 9). Рецепторы легких, такимобразом, в условиях их активации свободными кислороднымирадикалами не играютконтролирующей роли в отношениисимпатической нервной системы. Рефлекторные реакции в этихусловиях осуществляются только черезблуждающие нервы.

Рис. 9. Активность волокон почечногосимпатического нерва (АПСН) в ответ налокальную инъекцию брадикинина (1 мкг в 0.1 мл 0.9%NaCl) в легочную паренхиму до (A) и после (B) шейнойбилатеральной ваготомии укролика.

Обозначения - как наРис. 7.

3. Исследование эффектовинтермиттирующей гипоксии на эректильнуюфункцию и половое поведение умышей методом телеметрии.

У взрослых мышей с имплантированными в bulbus penisтелеметрическими датчикамиисследовали эректильную иполовую поведенческую активность после 5-8недель ИГ ипоследущегоприменениятадалафила(Табл. 3; Рис. 10). Тадалафил (Сialis), стимуляторэректильной функции, ингибирует фосфодиэстеразу5 и повышает уровень цГМФ,необходимого для нормальныхэрекций.

ИГ вызвала снижение числаспонтанных эрекций на 40% через 1 неделю,которое сохранялось в течение всего периода ИГ иоставалось ниже фонового уровня после 6недель нормоксии. Нарушениябыли компенсированы тадалафилом. Этоможет свидетельствовать.ововлечении быстрого нервного механизма подавления спонтанныхэрекций.

Таблица 3

Число спнтанныхэрекций за сутки и давлениев bulbuspenis усамцов мыши во времякопулятивного теста после 5 недельинтермиттирующей гипоксии и примененияТадалафила

Показатели Фон ИГ ИГ+Тадалафил

Спонтанные эрекции/сут(n) 28±2 17±2 *25±2*

Давление покоя (ммрт.ст.) 9±2 11±3 9±1

(Flaccid)

Давление наполнения (мм рт.ст.) 61±3 55±7 77±5 *

(Tumescence)

Мax давление (мм рт.ст.) 376±25 345±48 389±11

*P<0.05 при ср. с ИГ;среднее±m

Под влиянием 30 –дневной ИГсущественно изменилась поведенческаяактивность мышей в контактных тестах ссамками (Рис.10). Применение тадалафила у мышей после ИГвосстанавливало поведенческий паттерн(Рис. 10).

ИГ достоверно снижала пикидавления в bulbus penis,регистрируемые в ходе 20 мин бесконтактноготеста с самками, что указывало на резкоеснижение психогенной

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»