WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |

В кандидозе ротовой полости существенную роль играют патогенные факторы грибов С. albicans. Для C. albicans полость рта представляет собой очень благоприятную среду, кислая среда обеспечивает существование, а при достатке углеводов – и быстрое размножение в дрожжевой фазе.

Для изучения адгезивных свойств были отобраны 90 штаммов, выделенных от больных с диагнозом «фарингомикоз» четырех основных возрастных групп.

Анализ полученных результатов показал (табл. 6), что при высокой степени обсемененности C. albicans в посевах во всех группах больных отмечался умеренно высокий или высокий уровень адгезии штаммов (от 15 до 50 %).

В группе с низкой степенью обсемененности C.albicans у больных от 3 до 12 лет и от 12 до 17 лет уровень адгезии штаммов в 70% случаев не превышал 15%. В то же время для групп 17-32 лет и 32-56 лет преимущественно отмечался умеренно высокий и высокий уровень адгезии штаммов (от 15 до 50 %). Максимальную адгезивную способность проявляли штаммы, выделенные от больных при острых заболеваниях.

Таблица 6.

Адгезивные свойства штаммов, выделенных из ротовой полости у больных с диагнозом «фарингомикоз» (n=5; p<0.95)

Уровень обсемененности грибов С.albicans

Возрастные группы больных

Общее количество штаммов

Количество штаммов при различном уровне

адгезии

<15%

15-30%

30-50%

КОЕ>104 ед/мл

от 3 до 12 лет

от 12 до 17 лет

от 17 до 32 лет

от 32 до 56 лет

17

10

16

19

2

1

1

0

9

4

8

9

6

5

7

10

КОЕ<102 ед/мл

от 3 до 12 лет

от 12 до 17 лет

от 17 до 32 лет

от 32 до 56 лет

10

6

10

10

7

4

2

0

3

2

7

8

0

0

1

2

Низкий уровень адгезии (менее 5 %) и небольшое число клеток, выделенных при посеве, в ряде случаев позволили трактовать наличие гриба как кандиданосительство или контаминацию.

Характерной особенностью вагинального кандидоза является то, что грибы C.albicans входят в состав нормальной микрофлоры влагалища у женщин. Свойства C.albicans (адгезия, прорастание, рост, инвазия и т.д.) обуславливают патогенез вагинального кандидоза.

Изучены адгезивные способности 33 штаммов C.albicans, выделенных у женщин репродуктивного возраста с диагнозом «кандидоз влагалища». Результаты исследования адгезивных свойств штаммов, выделенных у женщин репродуктивного возраста с диагнозом «кандидоз влагалища» (рисунок 8) показали, что наибольшее количество штаммов проявляли высокую адгезивную способность при значительной степени обсемененности (КОЕ>105ед/мл). В то же время, даже при низкой обсемененности некоторое количество штаммов характеризовались высоким уровнем адгезии, что может указывать на высокую вероятность развития инфекции при благоприятных для этого условиях.

Рисунок 8. Адгезивные свойства штаммов, выделенных у женщин репродуктивного возраста с диагнозом «кандидоз влагалища» (n=5; p<0.95)

Таким образом, углубленное исследование адгезии показало, что адгезивные способности штаммов непосредственно связаны с местом локализации микоза. Установлено, что наиболее выраженные адгезивные свойства отмечались у штаммов, выделенных с поверхностей слизистых оболочек, как ротовой полости, так и влагалища, в то время как штаммы, выделенные с кожи и ее придатков, существенно (в 1.5-3 раза) уступают им. При этом уровень адгезии изолятов C.albicans, обнаруженных на слизистых оболочках ротовой полости, достигает 47%, тогда как штаммы, обнаруженные у больных с диагнозами “кандидоз влагалища” имели уровень адгезии от 18 до 31%.

Отличия в развитии кандидоза и как следствие – штаммовые различия в данных анатомических локусах можно объяснить уровнем рН, естественным микробным окружением и факторами местного иммунитета, а также способом питания гриба и доступностью питательных веществ.

5. Адгезивные свойства клинически незначимых штаммов C. albicans различной локализации

Известно, что при кандиданосительстве могут встречаться как непатогенные, так и патогенные штаммы. Также грибы C. albicans в небольшом количестве могут встречаться при посевах после проведенной успешно антифунгальной терапии. В связи с этим, представляет интерес изучить адгезию, один из основных факторов патогенности, у клинически незначимых штаммов.

Исследование штаммов C. albicans, выделенных от больных после успешно проведенной терапии, показало снижение уровня адгезии в 2-3 раза, вне зависимости от места локализации инфекции (табл. 7).

Таблица 7.

Адгезивные свойства штаммов C.albicans, выделенных от больных после успешно проведенной терапии.

Локализация штаммов

Среднее количество C.albicans, КОЕ/мл

Средний уровень

адгезии, %

до лечения

после лечения

до лечения

после лечения

Ротовая полость, n=24

Влагалище, n=11

Кожный покров, N=16

(4.2+0.5)х104

(5.8+0.6)х105

(2.6+0.1)х103

(2.8+0.2)х102

(1.4+0.6)х102

менее 102

53.1+3.4

23.3+1.6

14.8+1.3

13.2+1.2

10.7+1.1

6.1+0.6

Характер выявленных изменений хорошо согласуется с клиническими проявлениями заболевания и культуральными исследованиями. У больных в фазе ремиссии представительство дрожжевых грибов C.albicans в составе микрофлоры значительно снижается, приближаясь к количеству менее 102 КОЕ/мл что характерно для нормофлоры. При этом происходит снижение уровня адгезии штаммов после лечения до уровня клинически незначимых штаммов (рисунок 9). Можно предположить, что проведенная терапия, затрагивая основные жизненные функции грибковой клетки, нарушает при этом процесс синтеза адгезинов, кроме того, возможно, после проведения лечения происходит замещение штаммов на менее патогенные.

Рисунок 9. Адгезия клинически незначимых штаммов, и штаммов, выделенных от больных после успешно проведенной терапии. (n=5, p<0.05)

Тестирование адгезивных свойств клинически незначимых штаммов грибов показало, что различия между ними, в зависимости от их локализации в организме выражены в меньшей мере, по сравнению с клинически значимыми штаммами (рисунок 10). Основная группа клинически незначимых штаммов обладает адгезивной активностью от 2 до 10%, при этом для кожных штаммов характерны более низкие, чем для штаммов, выделенных со слизистой, значения адгезии, что подтверждает наши предположения, относительно влияния среды обитания на адгезивные свойства гриба.

Рисунок 10. Адгезивные свойства клинически незначимых штаммов. (n=5; p<0.95)

Таким образом, определение адгезивных свойств штамма позволяет установить этиологическую роль гриба в данном заболевании, то есть, выяснить, является он возбудителем заболевания или комменсалом. В случае обнаружения при заболевании нескольких потенциальных возбудителей, как бактериальной, так и грибковой природы, уровень адгезии штамма гриба позволяет охарактеризовать его патогенность и выбрать правильный подход к лечению данного заболевания.

6. Сопоставление адгезивных и антигенных свойств клинических штаммов - основных факторов патогенности C.albicans

Важным дополнением для подтверждения патогенности штамма является изучение взаимосвязи основных факторов патогенности грибов (адгезии и уровня антигенов) у различных клинических штаммов C. albicans. Антигены C.albicans принимают активное участие в формировании иммунного ответа и не несут специфической роли рецепторов и факторов адгезии.

Различие адгезивных способностей штаммов, выделенных со слизистой и с кожи, позволяет предположить различный механизм экспрессии факторов патогенности, в частности, адгезинов и антигенов. Поэтому, в ходе дальнейших исследований определяли количество антигена, выделяемого штаммами двух основных групп (кожные покровы и ротовая полость). Исследовано 48 штаммов C.albicans различной локализации, в том числе, 21 с кожного покрова и 27 - из ротовой полости.

Таблица 8

Содержание антигена в клетках и культуральной жидкости после роста штаммов C. albicans различной локализации

Локализация штамма

Средняя концентрация антигена

В клетках C. albicans, мг/мл

Выделенного в среду клетками C. albicans, мг/мл

Ротовая полость, n=27

Кожный покров, n=21

106,15х10-10

55,7х10-10

0,19х10-3

100х10-3

Установлено, что для штаммов, выделенных из ротовой полости, характерно повышенное содержание антигена в клетках, по сравнению со штаммами, выделенными с кожи (средние значения штаммов с высокой степенью адгезии 120х10-10и 45.7х10-10 мг/мл соответственно). В то же время, кожные штаммы выделяют значительно большее количество Аг в среду, по сравнению со штаммами, выделенными из зева (85х10-3 и 0.2х10-3 мг/мл соответственно) (табл.8). Непатогенный штамм №4 также выделял большее количество Аг в среду, чем содержал его в клетке (5.75х10-3+0.55 и 0.99х10-10+0.1).

Полученные результаты выявили взаимосвязь между количеством антигена и уровнем адгезии штамма C. albicans. Штаммы с высоким уровнем адгезии содержат и выделяют в среду количество антигена в 30 раз большее, по сравнению со штаммами с низким уровнем адгезии. При этом для штаммов, выделенных с кожных поверхностей, уровень адгезии коррелирует с концентрацией антигена в среде и в клетках, тогда как для штаммов выделенных из ротовой полости повышение уровня адгезии сопровождается в основном увеличением концентрации Аг в клетках (табл.9).

Таблица 9.

Содержание антигена в клетках и культуральной жидкости после роста штаммов C. albicans в зависимости от их адгезивной способности

Уровень адгезии штаммов C. albicans

Средняя концентрация антигена

В клетках C. albicans, мг/мл

Выделенного в среду клетками C. albicans, мг/мл

Высокий, n=18

Низкий, n=17

115,7х10-10

0,99х10-10

100,0х10-3

5,75х10-3

Таким образом, изучение адгезии как основного фактора патогенности, позволило показать наличие выраженных адгезивных свойств у штаммов, способных вызывать кандидозную инфекцию. Штаммы с высоким уровнем адгезии выявлялись даже среди штаммов-комменсалов, что свидетельствует о возможности их перехода под воздействием определенных экзогенных, эндогенных факторов в возбудителей заболевания. Использование для изучения адгезивных способностей штаммов C. albicans разработанной модели на основе нитроцеллюлозной пленки с иммобилизованным гемоглобином впервые позволило провести систематическое исследование клинических штаммов.

Кроме того, была выявлена корреляция между различными характеристиками патогенных свойств гриба. Штаммы с высоким уровнем адгезии содержали и выделяли в среду большее количество антигена.

ВЫВОДЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»