WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |

Характеристика чернозема в районе Больше-Кляринского городища и Мурзихинского II могильника

Варианты опыта

Горизонт

Глубина отбора, см

Гумус, %

pH

C, %

C : N

Валовое

содержание N, %

Мурзихинский II могильник

Мк-контроль (целина)

A1

0 – 10

6,37

6,2

4,8

12,3

0,245

Мн-новообразованная почва

A1

0-35

6,5

6,3

3,4

11,5

0,367

Мп1 - погребенная почва

[A1]

70-110

6,6

6,6

3,7

11,8

0,217

Мп2 - погребенная почва

[A1]

80-120

6,6

6,7

3,8

12,2

0,256

Больше Кляринское городище

Ц – контроль (целина)

A1

10 – 40

7,72

6,9

4,5

13,7

0,266

гидроморфные горизонты

Гн - новообразованная почва

A1

20 – 40

8,0

6,4

4,6

13,2

0,409

Гнк - новообразованный коричневый слой

[ЕА1]

122-130

3,75

6,4

2,2

11,6

0,118

Гп1 - погребенная почва

[A11]

130-148

7,9

6,3

4,6

10,9

0,420

Гп2 - погребенная почва

[A12]

148-158

7,86

6,3

4,5

12,3

0,423

автоморфные горизонты

Ан - новообразованная почва

A1

20-52

5,6

6,2

3,2

14,7

0,218

Ап1 - погребенная почва

[A11]

52-77

6,45

7,9

2,1

16,9

0,222

Ап2 - погребенная почва

[A12]

77-89

6,7

8,3

3,7

17,2

0,107

Почвенные микробные сообщества исследованных объектов характеризовали по численности и активности. Определение численности микроорганизмов в почве проводили методом прямого счета в люминесцентном микроскопе по Звягинцеву и Кожевину и посева на питательные среды (Головченко и др., 1995; Кожевин, 1989; Методы …, 1991). Количественный учет грибов проводился методом Хансена в модификации Мирчинк (1988).

Активность азотфиксации в почве измеряли методом Харди в модификации Умарова (Гарусов с соавт., 2006), определение активности почвенного дыхания осуществляли на газовом хроматографе (Гарусов с соавт., 2006).

Углерод микробной биомассы рассчитывали по скорости субстрат - индуцированного дыхания с использованием коэффициента пересчета 40,04 (Anderson, Domsch, 1978).

Выделение Trichoderma из образцов почвы проводили методом серийных разведений с последующим высевом на среду с пароморфогенным веществом (Бенкен, Хацкевич, 1972).

Моноспоровые культуры грибов получали методом разведения конидиальной суспензии в различных модификациях (Васин, 1966; Кузнецов и др., 1968), (Лихачев, 1994).

Идентификация по морфологическим признакам проводилась по ключу Александровой (Александрова с соавт., 2001), Samuels (2003) и Chaverri (2003), молекулярно-генетическим методом и методом ООП (объектно-ориентированный подход) по Тарасову (2006).

Изучение морфологии поверхности спор Trichoderma проводили при помощи атомно-силового микроскопа NTEGRA Prima (NT-MDT). Изображения были получены полуконтактным методом (Миронов, 2004; Бухараев с соавт., 2006).

Выделение ДНК, ПЦР-анализ, секвенирование. ДНК было выделено из свежего мицелия фенол/хлороформным методом (Druzhinina et al., 2005).

Участки ядерной рДНК, содержащие ITS1 и 2 и ген tef1, были амплифицированы в реакции ПЦР и секвенированы с использованием комбинации праймеров: SR6R (5’-AAG TAG AAG TCG TAA CAA GG-3’) и LR1 (5’-GGT TGG TTT CTT TTC CT-3’); EF1-728F (5’-CAT CGA GAA GTT CGA GAA GG-3’) и EF1-986R (5’-TAC TTG AAG GAA CCC TTA CC-3’).

Идентификацию нуклеотидных последовательностей проводили с использованием программы TrichoMark – TrichoBLAST.

Результаты секвенирования фрагмента гена tef1 обрабатывали при помощи пакета программ Lasergene 5.03 (DNASTAR, Inc., США). Программа SeqMan использовалась для анализа сиквенсных хроматограмм. Программа MegAlign использовалась для выравнивания последовательностей и экспорта их в формате GCG.

Вегетативную совместимость моноспоровых клонов изучали по Дьякову и Долговой (1995).

Антагонистическую активность и конкурентоспособность изолятов Trichoderma определяли методом встречных культур на среде Чапека (Симонян и Мамиконян, 1982).

Гетерогенность популяций выделенных изолятов оценивали по их разделению на культурально-морфологические типы (КМТ) и появлению секторов при росте на чашках Петри (Дьяков, 1998).

Определение ксиланазной, протеазной и целлюлазной активностей изолятов Trichoderma проводили по Кониг и Скворцову (Konig, 2002, Скворцов, 2007).

Определение фитотоксичности культуральной жидкости и почвы проводили на семенах растений (Методы …, 1991).

Статистическую обработку результатов проводили с помощью электронных таблиц Microsoft Excel, Statgraphics plus 2.1.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ

1. Микробиологическая характеристика выщелоченных черноземов в районе расположения археологических памятников: 1) Больше-Кляринского городища (Камско-Устьинский район) и Мурзихинского II могильника (Алексеевский район)

Нами были исследованы такие показатели как численность и микробная биомасса, количественная и функциональная структура сообщества микроорганизмов, респираторная активность и интенсивность азотфиксации.

1.1. Оценка биологической активности современных горизонтов в районе расположения археологических памятников: 1) Больше-Кляринского городища (Камско-Устьинский район) и Мурзихинского II могильника (Алексеевский район)

До описания погребенных почв нами были охарактеризованы современные фоновые почвы в районе расположения памятников: 1) Больше-Кляринского городища (Камско-Устьинский район) и Мурзихинского II могильника (Алексеевский район) (табл. 1).

Сравнительный микробиологический анализ современных горизонтов фоновых почв показал, что выщелоченные черноземы Камско-Устьинского района характеризуются более высоким уровнем интенсивности дыхания (в 3 раза выше), азотфиксации (в 2 раза), биомассы и численности отдельных групп микроорганизмов: гетеротрофов (в 2 раза), бактерий, потребляющих минеральные формы азота (в 1,5 раза) и олиготрофов (в 1,5 раза) по сравнению с исследованными почвами в Алексеевском районе. Микроорганизмов - педотрофов и спорообразующих бактерий, численно преобладавших в последнем районе, в 2 и 5 раз выше, соответственно, чем в черноземах Камско-Устьинского района. Наблюдаемые нами различия вероятно связаны с физико-химическими параметрами почв и географическим расположением исследуемых объектов (Звягинцев, 2005; Марфенина, 2001; Мирчинк, 1988) (табл. 1).

Таким образом, при равных одинаковых типах черноземов (выщелоченных) в современных целинных почвах нами отмечается различие в содержании гумуса, что коррелирует с активацией различных групп микроорганизмов.

1.2. Микробиологический анализ погребенных и новообразованных почв в районе Больше-Кляринского городища

1.2.1. Микробиологическая характеристика почв Больше-Кляринского городища, трансформировавшихся в гидроморфных условиях водного режима

Сравнительный анализ современной фоновой, новообразованной на поверхности вала и погребенной почв городища, трансформировавшихся в гидроморфных условиях водного режима, показал, что в погребенной почве возрастает численность спорообразующих, сульфатредуцирующих бактерий, бактерий рода Azotobacter и Clostridium на фоне увеличения респираторной активности и процессов минерализации органического вещества.

По данным Заварзина (2003) активность микроорганизмов может возрастать при уменьшении размера структурных агрегатов почвы и увеличении их поверхности. Структурно-агрегатный состав является одним из важных показателей, характеризующих состояние почвы, и может служить важным признаком при выявлении изменений, которым подверглась почва, погребённая под толщей вала, главным образом, её верхний горизонт (А1) (Копосов, 2004, Мельников, 2007). Показано, что на территории городища со временем в результате диагенеза, происходит изменение структурного состава в сторону укрупнения структурных отдельностей (глыбистый состав). Отмечено некоторое уменьшение содержания фракций среднего размера в образцах погребённой почвы в пользу фракций более крупного размера. Анализ же состава водопрочных агрегатов показал резкое уменьшение содержания крупных фракций и увеличения более мелких, что особенно заметно в гидроморфном образце. Наблюдаемое нами возрастание потенциальной респираторной активности можно объяснить уменьшением размеров структурных агрегатов в палеопочве (Мельников, 2007).

В погребенном слое количество микроорганизмов - активных гумусообразователей ниже, чем в новообразованном (на 20%). В новообразованной по сравнению с погребенной почвой отмечено возрастание гетеротрофных, потребляющих минеральные формы азота и денитрифицирующих микроорганизмов и увеличение метаболического коэффициента. Можно отметить возрастание жизнеспособности и активности в новообразованной почве и снижение активности в палеопочве автохтонной микрофлоры, участвующей в процессе гумусоразложения.

По данным численности микроорганизмов «коричневый слой» характеризуется наименьшей напряженностью процессов, за исключением молочно - кислых бактерий – деструкторов, кислотообразователей. По данным коэффициентов педотрофности, олиготрофности в коричневом слое отмечена и слабая функциональная активность. Выявлена также тенденция к снижению интенсивности азотфиксации и дыхания в коричневом слое по сравнению с современной и погребенной почвами. Этой слой можно рассматривать как промежуточный от стадии разрушения и образования минералов к накоплению органического вещества с последующим формированием гумусового слоя.

1.2.2. Микробиологическая характеристика почв Больше-Кляринского городища, трансформировавшихся в автоморфных условиях водного режима

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»