WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||

В результате токсического действия тетрахлорметана в печени нарушается обмен липидов, что сопровождается, повышением продукции триглицеридов (ТРГ).

Рис. 15. Активность ЩФ в сыворотке крови при остром ССl4 гепатозе

Норма содержания ТРГ в гомогенате печени крыс составляет 30,6±3мкмоль/г. В группе негативного контроля уровень ТРГ повысился в два раза. Концентрацию триглицеридов, повышенную токсикантом, препарат содержащий регуляторный белок снизил незначительно. При применении карсила уровень ТРГ снижен на 25% по сравнению с соответствующим показателем в группе негативного контроля (рис.16).

Рис. 16. Содержание ТРГ в гомогенате печени при остром ССl4 гепатозе

Нуклеиновые кислоты рассматриваются в качестве маркера белково-синтетической функции печени. Норма содержания нуклеиновых кислот в гомогенате печени крыс составляет 45,59±3,76 мкг. При остром токсическом гепатите наблюдалось достоверное снижение содержания нуклеиновых кислот на 13,93%. Введение карсила нормализует уровень нуклеиновых кислот. При применении исследуемого препарата уровень нуклеиновых кислот снижен на 17% по сравнению с уровнем при ССl 4-гепатозе (рис.17).

Рис.17. Содержание нуклеиновых кислот при остром ССl4 гепатозе

У животных с гепатитом наблюдалось нарушение белково - синтетической функции печени, что проявлялось в повышении концентрации общего белка крови на 21,9%. При применении исследуемого препарата и карсила содержание общего белка не превысило 9% нормы (рис. 18).

Рис. 18. Содержание общего белка в сыворотке крови при остром ССl4 гепатозе

При интоксикации тетрахлорметаном происходит угнетение глюконеогенеза и усиление гликогенолиза, уровень гликогена печени снизился более чем в три раза. При введении исследуемого препарата содержание гликогена печени увеличивалось на 170% по сравнению с соответствующим показателем при ССl4-гепатозе (рис. 19).

Рис. 19. Содержание гликогена печени при остром ССl4 гепатозе

Разработанное лечебно-профилактическое средство способно оказывать комплексное терапевтическое влияние, затрагивая различные звенья патогенеза токсических поражений печени.

Выводы

  1. Разработана современная биотехнологическая схема производства исходной субстанции регуляторных белков гепатопротекторного действия из печени крупного рогатого скота и проведено усовершенствование основных этапов ее производства.
  2. Выбраны оптимальные технологические условия на этапе экстракции: способ экстрагирования - двухступенчатая ремацерация; способ измельчения – резание на части размером 2-5 мм; общее количество экстрагента составляет 1,5 по отношению к объему сырья; состав экстрагента: 147 мМ NaCl; 4 мМ KCl; 2,25 мМ CaCl2; 1мМ HEPES; температура экстрагирования: +3, +4 С. длительность экстрагировании 4 часа при pH – 8,3.
  3. Установлены и экспериментально обоснованы параметры каждой из ступеней очистки полученного извлечения: центрифугирование со скоростью 14500g, высаливание в течение 35часов, диализ с использованием магнитной мешалки в течение двух часов.
  4. Доказано, что оптимальной формой введения регуляторных белков гепатопротекторного действия в организм являются тритурационные таблетки. Определен состав вспомогательных веществ, обладающий необходимыми структурно-механическими свойствами и имеющий предельное напряжение сдвига 300*10-2 Па : лактоза, увлажнитель - 10% водный раствор колидона-25, вводимый в количестве 18% от массы сухого вещества, ароматизатор «Лимон».
  5. Разработана технологическая схема производства тритурационных таблеток, а также единая сочетанная схема, сконфигурированная с учётом требований GMP и с акцентом на биотехнологических операциях - очистке супернатанта и изоэлектрофокусировании.
  6. Разработана и реализована методика контроля функциональной активности раствора кислого регуляторного белка печени с помощью культуры микроорганизмов Paramecium caudatum. Подтверждена зависимость «доза-эффект» для регуляторных белков печени и установлены концентрации при которых наблюдаются пики активности.
  7. Выполнены фармакологические исследования субстанции регуляторного белка и разработанных тритурационных таблеток. Проведена оценка терапевтической эффективности субстанции и лечебно-профилактического средства « Гепотрит» на модели экспериментального острого токсического гепатита крыс. Показано, что гепатопротекторная активность предложенных таблеток сопоставима с эффектом таблеток гепатопротектора « Карсил».
  8. Разработана нормативная документация на тритурационные таблетки «Гепотрит» и проведена их технологическая апробация в производственных условиях.

Список опубликованных работ

1. Привалов, И.М. Исследование возможности использования регуляторных пептидов для создания парафармацевтических средств с гепатопротекторным эффектом / И.М. Привалов // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины. Материалы 65 юбилейной открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием. Волгоград, 2007. С. 206.

2. Привалов, И.М. Исследование адгезивного белка вигерон для создания парафармацевтических средств с гепатопротекторным эффектом / И.М. Привалов // Известия Высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Проблемы фармации, фармакологии и рациональной терапии. Спец. выпуск Естественные науки. Ростов на Дону, 2007. С.106107.

3. Привалов, И.М. Исследование гепатопротекторного действия регуляторного белка вигерон для создания на его основе парафармацевтических средств / И.М. Привалов // Международная выставка конгресс «Аптека 2007». Москва, 2007. С.144145.

4. Привалов, И.М. Технологическое и биохимическое исследование регуляторного белка вигерон и поиск путей использования / И.М. Привалов, В.П. Ямскова // Фармация из века в век. Труды научно - практической конференции. Санкт-Петербург, 2008. С.107112.

5. Привалов, И.М. Разработка состава и технологические исследования гепатопротекторного средства на базе биотехнологического сырья / И.М. Привалов // Конгресс «Человек и лекарство». Тезисы докладов. Краснодар, 2008. С 7273.

6. Привалов, И.М. Разработка оптимальной технологии экстрагирования регуляторного белка гепатопротекторного действия из биотехнологического сырья / И.М. Привалов, Э.Ф. Степанова, В.П. Ямскова // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П.Павлова. Рязань, 2009. №2. С.145151.

7. Привалов, И.М. Изучение гепатопротекторной активности регуляторного белка печени in vitro с использованием первичной культуры гепатоцитов / И.М. Привалов, Э.Ф. Степанова // Вестник новых медицинских технологий. Тула, 2009. №2. С.184185.

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

Подписано в печать__________г. Формат бумаги 60х84 1/16.

Бумага книжно-журнальная. Печать ротапринтная. Усл. печ. л. 1,0.

Тираж 100 экз. Заказ №______

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ПЯТИГОРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНТСТВА ПО ЗДРАВООХРАНЕНИЮ И СОЦИАЛЬНОМУ РАЗВИТИЮ»

357533, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»