WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

При совместном введении 0,15 % S-метилтиомочевины и дексаметазона на ранних сроках воспаления отмечалось значительное уменьшение активности и длительности воспалительного процесса (средняя продолжительность увеита - 3,5 суток, в контрольной группе– 6,7, при изолированном их введении около 5 суток (рис.3)).

Рис.3. Динамика выраженности признаков воспаления при увеите при совместном введении S-метилтиомочевины с дексаметазоном и при изолированном их введении на ранних сроках воспаления.

Совместное введение S- метилтиомочевины и дексаметазона в момент максимальной выраженности признаков воспаления также сопровождалось уменьшением активности и длительности воспаления (при совместном введении продолжительность увеита около 4 суток, в контрольной группе– 6,5, при изолированном введении каждого из препаратов - около 5 суток).

Тонографические исследования после введения ингибиторов NO-синтазы и применения NO в газовом потоке показали отсутствие их влияния на коэффициент легкости оттока и офтальмотонус.

После однократного введения под конъюнктиву доноров NO во всех группах уже через 2 часа наблюдалось снижение истинного внутриглазного давления и значительное увеличение коэффициента легкости оттока. Важно отметить, что при введении 1,0 % раствора молсидомина отмечался более выраженный и длительный гипотензивный эффект. Через 24 часа после введения доноров NO показатели тонографии практически не отличались от уровня фоновых измерений. Результаты проведенного исследования подтверждают литературные данные о гипотензивном эффекте доноров NO.

Биохимические исследования были проведены у иммунизированных кроликов без увеита (подкожное введение разрешающей дозы сыворотки) и у иммунизированных кроликов с развитием увеита (интравитреальное введение разрешающей дозы сыворотки). У иммунизированных животных в сыворотке крови наблюдалось достоверное (р<0,01) снижение ТПА и некоторое увеличение активности 1-АТ, тогда как в группе животных, получивших разрешающую дозу антигена интравитреально отмечалось повышение активности ТПА и снижение активности АТА (p<0,005). Это свидетельствует о том, что наблюдаемые нами изменения активности 1-АТ и ТПА в крови отражают именно течение увеита, а не общую реакцию организма на иммунизацию. Что же касается ингибитора протеолиза - 2-МГ, то динамика изменения его активности в крови полностью совпадала во всех группах животных, имелись некоторые различия в амплитуде пиков. Из этого можно сделать вывод, что изменения данного показателя в большей степени отражают общую реакцию на иммунизацию.

В слезе иммунизация также вызвала увеличение АТА, тогда как развитие увеита вызывало некоторое снижение АТА по сравнению с животными, которым разрешающая доза была введена подкожно.

При данном способе иммунизации не происходит статистически значимого снижения АОА слезной жидкости. Однако при увеите отмечается достоверное (p<0,05) снижение АОА. Это снижение является следствием развития воспалительного процесса во внутренних структурах глаза.

В слезной жидкости на 4 сутки после иммунизации отмечается статистически значимое снижение активности СОД (p<0,005). После интравитреального введения разрешающей дозы происходит достоверное увеличение этого показателя (p<0,005). В крови на 1 сутки после интравитреального введения разрешающей дозы активность фермента достоверно снижается (p<0,005).

В слезной жидкости иммунизированных животных происходит статистически достоверное снижение активности каталазы, тогда как при увеите на 1-7 сутки происходит достоверное увеличение активности этого фермента (p<0,05).

Таким образом, биохимические исследования показали, что сама иммунизация вызывает как местные, так и системные изменения в протеиназно-ингибиторном балансе и состоянии антиоксидантной защиты. Развитие увеита на фоне иммунизации сопровождается изменениями этих показателей. Происходит повышение активности ТПА в крови, и снижение активности АТА в слезе и крови, снижение АОА в слезе, снижение активности СОД и увеличение активности каталазы в острый период течения воспаления.

Оценка влияния изменения уровня оксида азота в тканях глаза на биохимические показатели и морфологические изменения в глазу при увеите была проведена на примере донора оксида азота - Na нитропруссида и ингибитора NO-cинтазы - S-метилтиомочевины.

Обнаружено, что введение доноров и ингибиторов приводит к противоположным изменениям исследуемых биохимических показателей при увеите. Введение донора NO вызвало некоторое снижение ТПА в сыворотке крови, в то время как введение ингибитора NO-синтазы, напротив, вызвало увеличение ТПА на 1-14 сутки. Активность 2-МГ также имела тенденцию к снижению при введении донора NO, тогда как активность 2 - МГ в группе, получавшей ингибитор NO-синтазы, повышалась (рис.4).

Рис. 4. Влияние введения донора NO и ингибитора NOS на активность 2-МГ в крови при иммуногенном увеите.

ось ординат-активность в % от уровня интактных животных

В слезе введение донора NO также вызывало снижение АТА, после введения ингибитора АТА достоверно повысилась (на 1 сутки p<0,02) и оставалась выше, чем в контрольной группе до конца эксперимента. Введение донора NO сопровождалось повышением активности 2 - МГ, тогда как при введении ингибитора она увеличивалась только в острую фазу увеита и снижалась при стихании воспалительного процесса (рис. 5).

Рис. 5. Влияние введения донора NO и ингибитора NOS на активность 2 - МГ в слезе при иммуногенном увеите.

ось ординат-активность в % от уровня интактных животных

Полученные результаты свидетельствуют о том, что введение донора NO, вызывающего усиление воспалительной реакции, сопровождается снижением антипротеолитического потенциала в слезе и крови, а применение ингибитора NO-синтазы, напротив, приводит к увеличению активности ингибиторов протеиназ, что обычно сопровождает более благоприятное течение воспалительного процесса.

Субконъюнктивальные иньекции донора NO не вызывали достоверных изменений АОА слезной жидкости. В то же время применение ингибитора NO-синтазы приводило к достоверному увеличению АОА слезной жидкости на 7 сутки увеита по сравнению с контрольной группой. Такие изменения могут свидетельствовать о положительном действии ингибитора NO-синтазы в лечении увеита.

Применение донора NO приводило к увеличению активности СОД в слезной жидкости с последующим снижением этого показателя на 7 сутки по сравнению с контрольной группой. При применении ингибитора NO-синтазы достоверных изменений активности СОД в слезе не выявлено. Указанные изменения активности СОД свидетельствуют об усилении воспаления, вызванное донором NO, что подтверждено клинически.

В сыворотке крови в обоих случаях достоверных различий между активностью СОД у леченных и нелеченных животных не выявлено.

Применение донора NO приводило к достоверному снижению активности каталазы в слезе на стадии неактивного воспаления, тогда как при введении ингибитора NO-синтазы активность каталазы снижалась в острый период, а на стадии неактивного воспаления активность каталазы была достоверно выше таковой у нелеченных животных (рис.6).

Рис. 6. Влияние введение донора NO и ингибитора на активность каталазы в слезе при иммуногенном увеите.

ось ординат-активность в % от уровня интактных животных

В сыворотке крови в обоих случаях достоверных различий между активностью каталазы у леченных и нелеченных животных не выявлено.

Повышение активности каталазы на стадии неактивного воспаления в группе, получавшей ингибитор NO-синтазы, по-видимому, является компенсаторной реакцией, направленной на снижение развития свободнорадикального окисления. Тогда как снижение активности каталазы в этот период в группе, получавшей донор NO, может свидетельствовать об усилении воспаления.

Сопоставление характера течения увеита и локальных и системных изменений антипротеолитической активности и активности ферментов антиоксидантной системы свидетельствует о более тяжелом течении увеита у кроликов, получавших донор NO и более раннем завершении острого периода увеита у кроликов, получавших ингибитор NO-синтазы.

По данным морфологического исследования в группе животных, которым вводили донор NO, выявлялись более выраженные признаки увеита переднего отрезка (массивная лимфоцитарная инфильтрация роговицы, густая лимфоплазмоцитарная инфильтрация в цилиарном теле и радужке, передние и задние синехии), по сравнению с контрольной группой.

Введение S-метилтиомочевины на ранних сроках воспаления сопровождается уменьшением воспалительной клеточной инфильтрации, отека, сосудистых реакций, дистрофических изменений тканей глаза и длительности течения воспалительного процесса.

Таким образом, проведенные нами исследования позволяют с уверенностью утверждать, что субконъюнктивальное введение 0,15% раствора S- метилтиомочевины оказывает выраженный противовоспалительный эффект даже при таком интенсивном генерализованном воспалительном процессе в глазу, каким является иммуногенный увеит. Совместное применение дексаметазона с 0,15% раствором S-метилтиомочевины потенцирует противовоспалительный эффект S-метилтиомочевины.

Выводы

  1. Воспроизведена модель экспериментального иммуногенного увеита с выраженной и длительной воспалительной реакцией.
  2. Иммуногенный увеит сопровождается локальными и системными изменениями протеиназно-ингибиторного баланса (повышением протеолитической активности в крови и повышением активности 2 - МГ в слезе) и активности антиоксидантных ферментов (снижение активности СОД и увеличение активности каталазы в острый период, то есть снижением эндогенного антиоксидантного потенциала) по сравнению с иммунизированными животными.
  3. Субконъюнктивальные инъекции доноров NO и ингибиторов NO-синтазы оказывают влияниие на протеиназно-ингибиторный баланс и состояние антиоксидантной системы как в слезной жидкости так и в крови.
  4. Морфологические исследования, характер локальных и системных изменений протеиназно-ингибиторного баланса, общей антиокислительной активности, компонентов антиоксидантной системы свидетельствуют о более тяжелом течении увеита у кроликов при применении доноров NO.
  5. Доноры оксида азота обладают выраженным гипотензивным действием, в то время как NO-содержащеий газовый поток и ингибиторы NO-синтазы не влияют на коэффициент легкости оттока и офтальмотонус.
  6. Изучение влияния ингибиторов NOS на течение иммуногенного увеита у кроликов показало, что наибольшей противовоспалительной активностью обладает 0,15 % раствор метилтиомочевины при введении его как на ранних сроках воспаления, так и в момент максимальной выраженности воспалительного процесса.
  7. Морфологические исследования, характер локальных и системных изменений протеиназно-ингибиторного баланса, общей антиокислительной активности, компонентов антиоксидантной системы свидетельствуют о более легком течении увеита у кроликов при применении ингибиторов NO-синтазы.
  8. Сравнительное исследование влияния 0,15 % раствора S-метилтиомочевины, дексаметазона и их совместное применение обнаружило, что при сочетанном их применении наблюдается наиболее выраженный противовоспалительный эффект.
  9. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о перспективности применения селективного ингибитора NO-синтазы S-метилтиомочевины при увеите.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

  1. Применение доноров оксида азота и ингибиторов NO-синтаз при увеитах, травмах и другой офтальмопатологии. / Нероев В.В., Давыдова Г.А., Перова Т. С. // Клиническая офтальмология. - 2005. - № 4., Том 6. - С. 172-174.
  2. Моделирование иммуногенного увеита у кроликов. / Нероев В.В., Давыдова Г.А., Перова Т.С. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2006. - №11, Том142. - С. 598-600.
  3. Влияние экзогенных доноров оксида азота - молсидомина и нитропруссида Na на течение увеита у кроликов. / Нероев В.В., Чеснокова Н.Б., Давыдова Г.А., Перова Т.С. // Сборник научных трудов, посвященных 80-летию Уфимского НИИ ГБ «Проблемы современной офтальмологии». - 2006. - С. 136-137.
  4. Изучение влияния молсидомина на течение воспалительного процесса в глазу у кроликов. / Давыдова Г.А., Нероев В.В., Чеснокова Н.Б., Перова Т.С. // Сборник научных трудов всероссийской научной конференции молодых ученых «Актуальные проблемы офтальмологии». - 2006.- С.384-386.
  5. Изучение влияния нитропруссида Na на течение воспалительного процесса в глазу у кроликов. / Давыдова Г.А., Нероев В.В., Чеснокова Н.Б., Перова Т.С. // Сборник научных трудов всероссийской научной конференции молодых ученых «Актуальные проблемы офтальмологии». - 2006.- С.386-387.
  6. Влияние NO-содержащего газового потока на течение экспериментального иммуногенного увеита у кроликов. / Нероев В.В., Кваша О.И., Давыдова Г.А., Перова Т.С. //Сборник материалов конгресса 14 российского национального конгресса «Человек и лекарство». - 2007.- С.855.
  7. Влияние донора оксида азота нитропруссида Na на течение иммуногенного увеита у кроликов и биохимические показатели слезы и крови. / Нероев В.В., Чеснокова Н.Б., Давыдова Г.А., Давыдова Н.Г., Перова Т.С., Столярова Е.П., Безнос О.В. // Сборник материалов конгресса 14 российского национального конгресса «Человек и лекарство». - 2007.- С.855.
  8. Влияние доноров оксида азота нитропруссида Na и L-аргинина на течение экспериментального увеита, антиоксидантный и антипротеолитический потенциал слезной жидкости и крови в эксперименте / Нероев В.В., Чеснокова Н.Б., Давыдова Г.А., Давыдова Н.Г., Перова Т.С., Столярова Е.П., Безнос О.В. // Вестник Офтальмологии, № 3, 2007. - С. 22- 25.
  9. Результаты применения NO-содержащего газового потока при иммуногеном увеите у кроликов / Т.С. Перова, В.В. Нероев, О.И. Кваша, Г.А. Давыдова // 11 Всероссийская научная конференция молодых ученых с участием иностранных специалистов «Актуальные проблемы офтальмологии» Москва.
    Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»