WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

2

8

НЛС

10

в/в

14

3

8

НЛС

5

подкожно

9

4

8

НЛС

10

подкожно

9

5

8

НЛС

10

в/в

9

6

8

НЛС

0,1

-

9

Во второй части работы изучали влияние доноров NO и ингибиторов NO-синтазы на течение воспаления при использовании различных доз и сроков введения, оценивали их влияние на показатели тонографии и исследовали влияние ингибитора NO-синтазы на течение иммуногенного увеита как при изолированном применении, так и при совместном введении с дексаметазоном.

Для изучения влияния доноров NO и ингибиторов NO-синтазы на клиническое течение иммуногенного увеита животных разделили на 18 групп по 5 кроликов (10 глаз) в каждой, где контрольная группа – увеит +субконъюнктивальное введение физиологического раствора (табл.2,3,4).

Таблица № 2. Схема эксперимента по изучению влияния доноров NO на течение иммуногенного увеита.

Группы

Препараты

Сроки введения после разрешающей дозы

Кратность введений

1

0,02 % р-р молсидомина

на 2,3 сутки

2

2

0,04 % р-р молсидомина

на 2,3 сутки

2

3

1,0 % р-р молсидомина

на 2,3 сутки

2

4

0,4 % р-р Na нитропруссида

на 2,3 сутки

2

5

1,0 % р-р L – аргинина

на 2,3 сутки

2

6

0,01 % р-р молсидомина

через 2 часа

1

7

контрольная

-

-

Таблица № 3. Схема эксперимента по изучения влияния NO-СГП на течение иммуногенного увеита.

Группы

Начало воздействия после введения разрешающей дозы

Режим воздействия NO-СГП

Кол-во

воздействий

8

на 2 и 3 сутки

конц.NO 300 ppm, экспозиция 10 сек.

2

9

через 2 часа

конц.NO 300 ppm, экспозиция 10 сек.

1

Изучаемые препараты были выбраны из различных групп доноров оксида азота. В качестве экзогенных доноров NO использовали молсидомин, Na нитропруссид, относящиеся к группе периферических вазодилататоров, L – аргинин, являющийся представителем гуанидинов, и NO-содержащий газовый поток (NO-СГП), производимый аппаратом «Плазон».

Ингибиторы индуцибельной NO-синтазы были выбраны также из различных групп: аминогуанидин - производный гуанидина, S-метилтиомочевина - относится к группе амидиновых производных, N-нитро- L-аргинин - производный L-аргинина. Известно, что аминогуанидин и S-метилтиомочевина (SMT) селективны к индуцибельной NO-синтазе, а N-нитро- L-аргинин (L-NNA) ингибирует и индуцибельные, и конститутивные формы фермента.

Таблица № 4. Схема эксперимента по изучению влияния ингибиторов NO-синтазы на течение иммуногенного увеита.

Группы

Препараты

Сроки введения после разрешающей дозы

Кратностьвведений

10

7,0 % р-р L-NNA

через 0,5 часа

1

11

1,5 % р-р аминогуанидина

через 3 часа

1

12

0,015% р-р SMT

через 3 часа

1

13

0,15% р-р SMT

через 3 часа

1

14

1,0% р-р SMT

через 3 часа

1

15

р-р дексаметазона

через 3 часа

1

16

0,15% р-р SMT + дексаметазон

на 2,3 сутки

2

17

р-р дексаметазона

на 2,3 сутки

2

18

0,15% р-р SMT

на 2,3 сутки

2

Для введения препаратов были выбраны разные сроки воспаления: ранние - первые 3 часа после введения разрешающей дозы (до начала действия индуцибельной NO – синтазы и выработки эндогенного оксида азота) и в момент максимальной выраженности воспалительного процесса - на 2 и 3 сутки после введение разрешающей дозы (при активном эндогенном синтезе оксида азота индуцибельной NO – синтазой). Дозировки препаратов были выбраны исходя из рекомендуемых доз для экспериментальных животных из литературных данных.

Препараты растворяли в физиологическом растворе и вводили субконъюнктивально в количестве 0,2 мл.

Тонографию интактным животным проводили до воздействия, через 2 часа и через 24 часа после введения препаратов или после воздействия NO-СГП в указанных концентрациях. В работе использовали тонометр, тонограф ТНЦ-100-С № 9156. До введения препаратов проводили тонографию в течение двух дней два раза в день для оценки естественных колебаний истинного внутриглазного давления и коэффициента легкости оттока (фоновое исследование).

Третья часть работы: изучение влияния донора NO и ингибитора NO -синтазы на биохимические показатели слезной жидкости и сыворотки крови. Измеряли общую антиокислительную активность (АОА), трипсиноподобную (ТПА), антитриптическую активность (АТА) и уровень 2- макроглобулина (2--МГ), активность ферментов антиоксидантной системы - супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы.

Животных разделили на 5 групп по 5 кроликов (10 глаз) в каждой. 1 группа – иммунизированные животные, без увеита, 2 группа – увеит +субконъюнктивальное введение физиологического раствора, 3 группа – увеит с введением донора, 4 группа - увеит с введением ингибитора, 5 группа - интактная для контроля биохимических показателей.

В четвертой части работы исследовали влияние донора NO и ингибитора NO-синтазы на морфологические изменения тканей глаза при иммуногенном увеите. Для этого животных разделили на 4 группы по 5 кроликов (10 глаз) в каждой. 1 группа - увеит без лечения, 2 группа - увеит и введение донора NO, 3 группа - увеит и введение ингибитора NOS, 4 группа - контроль, субконъюнктивальное введение физиологического раствора.

Все полученные в ходе работы цифровые данные были статистически обработаны с использованием коэффициента Стъюдента.

Результаты исследований и их обсуждение.

В результате изучения характера течения увеита при различных способах его воспроизведения для дальнейших исследований была выбрана рабочая модель иммуногенного увеита, отличающаяся простотой выполнения, активным и длительным течением воспалительного процесса.

Для постановки этой модели кроликам подкожно вводили 5 мл нормальной лошадиной сыворотки, а затем, на 9-ый день, вводили 0,1 мл разрешающей дозы лошадиной сыворотки интравитреально.

Проведенные исследования показали, что NO активно влияет на течение экспериментального иммуногенного увеита. Установлено, что воздействие оксидом азота в виде газового потока в низкой дозе - концентрация 300 ppm с экспозицией 10 секунд - в первые часы воспаления и в момент максимальной выраженности признаков воспаления (на 2, 3 сутки после введения разрешающей дозы сыворотки) приводит к активации воспалительного процесса и увеличивает длительность его течения (воспалительный процесс в контрольной группе длился около 6,5 суток, в опытных группах - на трое суток дольше). У животных, которым проводили воздействие NO-СГП, воспаление сопровождалось более выраженной экссудативной реакцией (массивный выброс фибрина, гипопион во всех глазах) по сравнению с контрольной группой. Усиление воспалительной активности продолжилось и после повторного воздействия NO-содержащим газовым потоком (на 3 сутки с момента введения разрешающей дозы сыворотки (рис.1)).

Рис.1. Динамика выраженности признаков воспаления при увеите после двукратного воздействия NO-СГП на 2 и 3 сутки с момента введения разрешающей дозы.

Важно отметить, что при введении доноров NO на ранних сроках воспаления и в момент максимальной выраженности воспалительной реакции также наблюдалось более тяжелое (массивный выброс фибрина, гипопион, выраженные передние и задние синехии) и длительное течение воспалительного процесса по сравнению с контрольной группой (воспалительный процесс в опытных группах длился около 9 суток, в контрольной группе около 6,5 суток).

Влияние молсидомина носило дозозависимый эффект, т.е. чем выше была концентрация препарата, тем тяжелее и длительнее протекала воспалительная реакция у животных (рис.2).

Рис.2. Динамика выраженности признаков воспаления при увеите, после субконъюнктивального введения молсидомина двукратно на 2 и 3 сутки после введения разрешающей дозы.

Результаты исследования влияния ингибиторов NO-синтазы - L-NNA и аминогуанидина показали, что эти ингибиторы практически не влияли на интенсивность и длительность течения воспалительного процесса: средняя продолжительность увеита после введения L-NNA составила 7,3 суток, при введении аминогуанидина - 6,4, тогда как в контрольной группе - 6,5 суток.

Результаты изучения влияния ингибитора NO-синтазы S-метилтиомочевины на ранних сроках воспаления показали, что после введения S-метилтиомочевины в различных концентрациях (0,015 %, 0,15 %) отмечалось значительное уменьшение активности и длительности воспалительной реакции (средняя продолжительность увеита в группах, где животным вводили S-метилтиомочевину, была около 5 суток, в контрольной группе – 6,5). Необходимо отметить, что проявлялся и дозозависимый эффект вещества: при введении 0,15% раствора S-метилтиомочевины, воспалительная реакция протекала легче, чем у животных, которым вводили 0,015% раствор.

Однако при введении 1,0 % раствора S-метилтиомочевины обнаружилось отсутствие влияния на интенсивность и длительность течения воспалительного процесса: средняя продолжительность увеита после введения S-метилтиомочевины составила 6,3 суток, тогда как в контрольной группе - 6,5 суток.

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»