WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |

терного текста. Состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 1 главы собственных экспериментальных и клинических исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы и приложения. Иллюстрирована 65 рисунками и 17 таблицами. Библиография включает 342 источника литературы, из которых 244 работы отечественных и 98 зарубежных авторов.


СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ


I. Материалы и методы исследования

Экспериментальная часть выполнена на 140 крысах обоего пола. Исследования проведены в соответствии со статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.).

Исследование влияния реамберина, рексода и их сочетания на слизистую оболочку полости рта в условиях экспериментального пародонтита у крыс осуществляли по методу, описанному Polson A.M. и соавт. (1983).

Реамберин применяли в виде орошения полости рта 1,5% раствором и внутрибрюшинным введением крысам в дозе 50 мг/кг в течение 12 дней.

Рексод применяли в виде орошения полости рта приготовленным раствором и внутрибрюшинного введения крысам в дозе 50 мг/кг.

В качестве ТЛ использовали орошение полости рта раствором фурациллина (0,02%), внутримышечное введение линкомицина (30% раствор 0,1 мл на 100 г), наложение десневых повязок, включающих метилурацил (0,5 г), метронидазол (0,25 г), анестезин (1,0 г), каротолин (1,0 мл) и водный дентин (1,0 г) - в течение 12 дней

Исследование влияния реамберина, рексода и их сочетания на пролиферативную активность остеобластов (теменной кости) и фибробластов (кожи) крыс проводили с помощью МТТ-теста, описанного В.П.Фисенко и соавт. (2000) и Т. Mossman (1983).

Для оценки действия веществ на остео- и фибробласты в условиях гипоксии применяли химические анализаторы, описанные В.В.Соколовским (1971) и А. Laborit (1970): 2,4-динитрофенол (2,4-ДНФ) в конечных концентрациях 0,2 и 0,5 мМ и цианид Na в конечных концентрациях 0,2 и 2,0 мМ. Оптическую плотность образцов регистрировали при длине волны 530 нм на анализаторе иммуноферментных реакций «УНИПЛАН» АИФР-01.

Изучение влияния реамберина, рексода и их сочетания на перекисное окис-

ление липидов остеобластов и фибробластов крыс определяли по уровню активных продуктов 2-тиобарбитуровой кислоты (ТБК). Из лунок с исследуемыми веществами и клетками, инкубируемыми в течение суток, удаляли среду и добавляли по 100 мкл раствора Тритона Х-100 (0,1%.) и 100 мкл 17% водного раствора трихлоруксусной кислоты. Содержимое лунок переносили в пробирки Эппендорф. Осадок отделяли центрифугированием в течение 10 минут при 4 000 об/мин. К надосадочной жидкости добавляли по 100 мкл 0,8% водного раствора ТБК и помещали пробы на 10 мин в кипящую водяную баню. В качестве контроля использовали раствор Хенкса. После развития розовой окраски пробы охлаждали, переносили по 200 мкл в планшеты и измеряли оптическую плотность при длине волны 530 нм на анализаторе «Пикон», сопоставляя её с контрольной пробой. Результаты выражали в % от контроля.

Исследование влияния реамберина и СОД (рексода) на показатели цитолитических, энергетических и антиоксидантных процессов в ишемизированной коже крыс проводили по методу, описанному ранее (Галенко-Ярошевский В.П. и соавт., 2005). Определяли содержание коэнзима Q10, ферментативную активность сукцинатдегидрогеназной (СДГ), сукцинат-убихинон-редуктазной и NADH-убихинон-редуктазной систем, содержание убихинона, активность креатинфосфокиназы (КФК), ферментов системы антиоксидантной защиты. Для определения активности АлАТ и АсАТ использовали наборы «Био-Ла-Тест» («Lachema»), лактатдегидрогеназы - тест системы "Диахим". Оценивали скорость генерации супероксидного аниона (Chen N.et al., 2000).

Статистическую обработку экспериментальных данных проводили с помощью t критерия Стьюдента, а также программы "STAT Soft", при этом различия считали достоверными при р < 0,05.

Клиническая часть выполнена на материале наблюдения 181 больного в возрасте от 36 до 57 лет с диагнозом ХГП средней (135 человек) и тяжелой (46 человек) степени тяжести в сочетании с аномалиями и деформациями зубных рядов и прикуса. Пациенты были сопоставимы по возрасту, полу и клинической патологии. Среди больных было 98 женщин и 63 мужчины. Давность заболеваний составляла от 7 лет и более.

Ортодонтическая патология проявлялась наличием аномалий зубных рядов (39 человек) в трансверзальном, сагиттальном и сочетанном направлениях. Вторичные деформации зубов, зубных рядов и прикуса (142 человека).

Пациенты с ХГП были разделены на две группы: основную (119 человек) и группу сравнения (62 человека). Пациентам группы сравнения проводили общепринятое традиционное медикаментозное лечение (ТЛ).

Основная группа пациентов состояла из трёх подгрупп.

1-й подгруппе (38 человек) дополнительно к ТЛ был назначен субстратный ан-

тиоксидант/антигипоксант - реамберин (1,5% раствор для инфузий) внутривенно капельно по 200 мл, курсом 15 дней.

2-й подгруппе (40 человек) к ТЛ был назначен препарат рекомбинантной СОД человека рексод внутримышечно по 4 мг (1 600000 ЕД). Лиофилизат растворяли ex tempore в 2 мл 0,9% раствора NaCl, курсом 15 дней.

3-й подгруппе (41 человек) дополнительно к ТЛ был назначен препарат рексод в сочетании с реамберином по описанным выше схемам.

Местно: основной группе - введение в пародонтальные карманы мази на основе нанокластерного серебра и СОД - «Содерм», пациентам группы сравнения метилурациловая мазь курсом 15 дней.

Для оценки пародонтологического статуса применяли пародонтальный индекс (ПИ) (Russel A.A., 1967), папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс (ПМА) (Parma C., 1960) и индекс Кечке (Kotzsche H., 1969). Гигиеническое состояния отмечали по индексу Ю.А. Федорова В.В Володкиной (ИГ) (1970). Степень воспаления десны оценивали с помощью пробы Шиллера-Писарева.

Для измерения глубины и топографии пародонтальных карманов использовали пуговчатый градуированный зонд, рекомендованный ВОЗ (1980).

Эффективность лечения изучали в динамике: до лечения, через 1, 6 и 12 месяцев, согласно алгоритму И.А.Баранникова и соавт. (1990).

Ортодонтическое направление в обследовании проводили по общепринятой в ортодонтии методике (Хорошилкина Ф.Я., 1999; Персин Л.С., 2004).

Комплексное лечение больных с ХГП в сочетании с зубочелюстными аномалиями и деформациями складывалось из четырёх этапов.

Первый этап - подготовительный (общие и специальные мероприятия по санации полости рта, временное шинирование).

Второй пародонтологическое лечение (проведение местной и общей медикаментозной терапии ХГП).

Третий ортодонтическое лечение (активный период).

Четвёртый ортопедическое лечение (ретенционная стабилизация, шинирование, рациональное протезирование).

Ортодонтическое лечение у пациентов с ХГП проводили на несъемной технике прописи Roth с применением малых ортодонтических сил длительного воздействия. При ХГП тяжелой степени начинали ортодонтическое лечение с дуги 0.014" Ni-Ti (SE), длительность этого периода составляла в среднем 2 месяца. Далее переходили на дугу 0.016" Ni-Ti (SE), что исключало негативное влияние ортодонтической системы на ткани пародонта. Длительность этого периода лечения составляла в среднем 3 4 месяца. При достижении хорошего выравнивания положения зубов и зубного ряда последующей ортодонтической дугой чаще была 0.0160.022" Ni-Ti (SE).

Заключительной дугой являлась 0.0160.022" ТМА или Ss (нержавеющая сталь).

Для визуальной оценки результатов лечения использовали: фото- кинокамеру «Sony DCR-TRV 40Е». Полученный материал обрабатывали при помощи программы PIXELA Image Mixer Ver.1.0 for Sony, Adobe Photoshop 9,0.

Рентгенологические методы исследования включали изучение дентальных рентгенограмм зубов, ортопантомограмм (ОПТГ) и анализ телерентгенограмм (ТРГ), полученных при одинаковых физико-технических условиях.

Измерение периодонтальной щели проводили на дентальных рентгенограммах по разработанной нами методике, используя компьютерную морфометрию.

Денситометрический анализ ОПТГ проводили, изучая динамику изменений в костной ткани описанную O.Ratib, Y.Ligier, C.Girard et al., (1994) с использованием программ «ВидеоТест Мастер» («Морфология»). Выравнивание оптической плотности отсканированных ОПТГ осуществляли с помощью программы «Аdobe Photoshop» (версия 9,0). Сравнивали характеристики плотности изображений между изучаемыми снимками. Строили таблицу цифровых значений плотности. Полученные данные анализировали с помощью пакета прикладных программ математического анализа «Еxel».

Статистическую обработку результатов клинических исследований проводили по методам, описанным А.М.Мерковым, Л.Е.Поляковым (1974), В.И.Сергиенко и И.Б.Бондаревой (2001). Различия считали статистически достоверными при р 0,05 (Самойлов Н.Н., 1970).

Отдаленные результаты лечения анализировались через 24, 36 и 48 месяцев после его окончания у пациентов, явившихся на профилактические осмотры и поддерживающую терапию.

Морфологические методы исследования. Для морфологических (включая гистохимические) исследований использовались биоптаты участков слизистой десны пришеечной области зубов у 60 больных ХГП средней и тяжелой степени в стадии обострения. Биоптаты брали при первом обращении и на 30 день после начала лечения. Биоптаты фиксировались в 10% растворе нейтрального формалина и заливались в парафин по общепринятой методике (Меркулов Г.А., 1969). Парафиновые срезы окрашивались гематоксилином и эозином, а также применялся комплекс гистохимических методов окраски. Для элективного окрашивания коллагеновых и эластических волокон, базальных мембран микрососудов, тучных клеток, гликопротеидов, мышечной ткани, эритроцитов применяли способ комбинированной окраски альдегид-фуксином хромотропом анилиновым синим (Фаустов Л.А., 2007), альциановым синим и нейтральным красным после предварительного их окисления кислым раствором перманганата калия (Сычева Н.Л., Сычев В.А., 2002). Лаброциты изучали на препаратах, окрашенных альдегид-фуксином. Кислые гликозаминогликаны выявляли альциановым синим при рН 2,5 (Лилли Р., 1969). Нейтральные гликозаминогликаны окрашивали методом Мак Мануса - Хочкисса (Пирс Э., 1962).

Изучение микропрепаратов осуществляли на микроскопе МБИ 15 ЛОМО. Для микрофотографирования использовали систему анализа изображения Nikon eclipse

E200, с цветной цифровой камерой Olympus DP 10.

Для объективизации результатов исследования применялась морфометрия (Автандилов Г.Г., 1984). На вертикальных срезах десны окулярмикрометром измеряли толщину эпителиального покрова.

Цифровые результаты исследования обработали разностным методом вариационной статистики (Ойвин И.А., 1960). Достоверными считали различия при значениях р < 0,05.


II. Результаты исследования и их обсуждение

Экспериментальные исследования. Установлено, что при экспериментальном пародонтите в опытах на крысах наиболее выраженное лечебное действие, определяемое по снижению регистрируемых признаков патологического процесса в пародонтальных тканях и количеству десневой жидкости (после 12-ти дневного лечения), проявляет комплекс реамберин + рексод + ТЛ, значительно превосходя (в 1,7, 2,0, 2,3, и 1,5 раза соответственно) в этом отношении ТЛ, реамберин, рексод, реамберин + ТЛ, рексод + ТЛ и реамберин + рексод (рис. 1).



Рис. 1. Сравнительная эффективность (по количеству десневой жидкости КДЖ) «традиционного» лечения (ТЛ), реамберина (Рн), рексода (Рд), сочетаний ТЛ + Рн, ТЛ + Рд, Рн + Рд и ТЛ + Рн + Рд при экспериментальном пародонтите (П) у крыс.

*р < 0,05, **р < 0,02, ***р < 0,001по отношению к данным на 31-й день.

Спустя 1 месяц (на 73 день исследования) после проведенного лечения сочетанием ТЛ + реамберин + рексод состояние пародонта у крыс с моделированным пародонтитом существенно не отличалось от такового у интактных животных, тогда как после ТЛ и отдельно взятых реамберина и рексода признаки патологических процессов в пародонте сохранялись.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»