WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

Для проведения лазер-индуцированной ЛФС применялась компьютеризированная спектрально-флуоресцентная диагностическая установка «Спектр-Кластер» (Рег. номер 29/05020401/3958-02). Данная установка включает в себя: волоконно-оптическое устройство доставки лазерного излучения и сбора флуоресцентного излучения; спектрометр; персональный компьютер; специализированное программное обеспечение и лазерный источник излучения для возбуждения флуоресценции. Для возбуждения аутофлуоресценции в исследовании был использован твердотельный DPPS лазер с длиной волны генерации в зеленой области (532 нм). Средняя мощность лазерного излучения, возбуждающего флуоресценцию, в данном исследовании была строго стабилизирована и не превышала 5мВт. Время записи одного спектра составляло несколько млсек, диагностический катетер находился в контакте с поверхностью слизистой оболочки при записи 30-50 спектров от 2 до 3 минут. Спектры аутофлуоресценции регистрировали в диапазоне 550-1000 нм.

В наших исследованиях применялась методика локальной флуоресцентной спектроскопии, разработанная для флуоресцентной диагностики рака слизистых оболочек полых органов (Соколов В.В. и соавт., 1998). С целью поиска значимых различий между спектрами АФ нормальной и патологически измененной слизистой оболочки бронхов анализировали следующие спектральные характеристики: интенсивность аутофлуоресценции в максимуме спектра АФ, положение максимума спектра АФ и отношение спектральных интенсивностей в различных областях.

Помимо оценки интенсивности для интерпретации спектров и получения диагностической информации в работе был использован спектрально-флуоресцентный диагностический параметр Df, который определяли по отношению интегральных интенсивностей регистрируемого спектра в диапазоне 620650 нм и 555585 нм (Cоколов В.В. и соавт., 1999). В спектрально-флуоресцентной диагностической установке «Спектр-Кластер» величина диагностического параметра Df рассчитывается с помощью специализированного программного обеспечения в реальном времени, отображается на экране монитора компьютера и вносится автоматически в протокол спектрально-флуоресцентного обследования.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась на основе общепринятых статистических методов с помощью пакета программ Statistica for Windows (2000, версия 6.0) фирмы «Statsoft Inc.» и пакета программ «Microsoft Exel» корпорации «Microsoft».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты локальной флуоресцентной спектроскопии в бронхиальном дереве контралатерального легкого.

При динамическом наблюдении больных раком легкого после комбинированного лечения в бронхиальном дереве контралатерального легкого в одном (1,5%) случае был диагностирован метахронный рак легкого, в четырех (5,9%) наблюдениях – дисплазия бронхиального эпителия II степени, у 29 (42,6%) пациентов воспаление слизистой оболочки, при этом хроническое воспаления отмечались у 20 больных, а острое – у 9 пациентов. В 34 (50%) наблюдениях патологии выявлено не было.

Анализ полученных спектров показал, что при возбуждении аутофлуоресценции в зеленой области спектра нормальный эпителий бронха интенсивно флуоресцирует, а спектры АФ имеют максимумы в районе 580 нм. Показатель интенсивности АФ в максимуме спектра для нормальной слизистой оболочки в бронхиальном дереве здорового легкого составил 1410±66,13 отн.ед.

Значения спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df в слизистой оболочке нормального эпителия бронхов стабильны и варьируют в пределах Df от 0,8 до 1,0.

При остром и хроническом воспалении в слизистой оболочке бронхов было выявлено, что спектры аутофлуоресценции имеют свой максимум на 570 нм и близки по форме к спектрам аутофлуоресценции в нормальной слизистой оболочке. Показатели интенсивности аутофлуоресценции в максимуме спектра и величина спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df при хроническом воспалении достоверно не отличались от значений, полученных при измерении в нормальном эпителии слизистой оболочки бронхов (р = 0,37).

При анализе спектров, измеренных в участках острого воспаления, были получены достоверные отличия показателей аутофлуоресценции по отношению к таковым в нормальной слизистой оболочке бронхов (р < 0,005). Отмечено падение интенсивности аутофлуоресценции в максимуме спектра до 585±78,5 отн.ед. и возрастание спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df до 1,2. Данные изменения показателей аутофлуоресценции можно объяснить утолщением слизистого слоя эпителия бронхов и гиперваскуляризацией в очагах острого воспаления, которое приводит к снижению аутофлуоресценции, за счет поглощения аутофлуоресценции гемоглобином крови (Islam S., Beamis Jr. J. F., 2005).

Во всех случаях морфологически подтвержденной дисплазии II степени эпителия слизистой оболочки бронхов в контралатеральном легком при проведении локальной флуоресцентной спектроскопии регистрировалось снижение показателей интенсивности аутофлуоресценции, среднее значение которого составило 687±60,6 отн.ед, однако, оценка величины спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df показала, что данный параметр варьируют в пределах Df от 0,9 до 1,0, таким образом, нам не удалось выявить существенные отличия в спектрах АФ полученных в очагах дисплазии бронхиального эпителия II степени и нормальной слизистой оболочке бронхов.

В одном наблюдении (1,5%) методом эндоскопической локальной флуоресцентной спектроскопии выявлен случай метахронного рака в бронхе контралатерального легкого, который был подтвержден морфологически. Проведенное исследование выявило достоверные различия между интенсивностью аутофлюоресценции нормального и малигнизированного бронхиального эпителия (рис.1). Показано, что в участках рака наблюдается резкое (до 10 раз) падение интенсивности АФ относительно здоровой слизистой оболочки эпителия бронхов, что согласуется с данными мировой и отечественной литературы (Profio A. E et al., 1977; Lam S. Et al., 2000; Соколов В.В. и соавт., 2005).

Наряду с падением интенсивности аутофлуоресценции в очагах злокачественной опухоли бронха происходит достоверное возрастание величины спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df относительно величины Df в морфологически подтвержденном нормальном бронхиальном эпителии.

Рис.1. Спектры аутофлуоресценции нормальной слизистой оболочки верхнедолевого бронха и злокачественной опухоли среднедолевого бронха справа (метахронный рак легкого). 18 мес после пульмонэктомии слева по поводу рака легкого. Максимальная интенсивность спектров АФ нормального бронхиального эпителия варьирует в диапазоне 1000 2500, злокачественной опухоли – в диапазоне 100250. Величина параметра Df составляла: в спектрах АФ здоровой ткани – 1,10 ± 0,01, в очаге рака - 1,31±0,03. На представленных спектрах помимо спектров АФ в области 550-800 нм присутствует обратно рассеянный от слизистой оболочки бронха сигнал возбуждающего лазерного возбуждения c длиной волны 532 нм.

Результаты локальной флуоресцентной спектроскопии в слизистой оболочке культи резецированного бронха.

Пациентам, включенным в данное исследование, основным этапом лечения выполнялось радикальное оперативное вмешательство с ИОЛТ в дозе 15 Грей, что является достаточно агрессивным видом воздействия и приводит к морфо-функциональным изменениям в бронхиальном эпителии культи бронха (Добродеев А.Ю., 2005). В связи с этим нами был проведен подробный анализ спектров АФ в слизистой оболочке культи резецированного бронха с целью выявления их особенностей при нормальном бронхиальном эпителии слизистой оболочки культи резецированного бронха и развитии в ней патологических изменений с последующим сравнением полученных результатов с данными аутофлуоресценции в бронхах контралатерального легкого.

При динамическом наблюдении больных раком легкого после комбинированного лечения в слизистой оболочке культи резецированного бронха было выявлено: в трех (4,4%) случаях диагностирован рецидив рака, в пяти (7%) наблюдениях – дисплазия бронхиального эпителия II степени, у 48 (70,6%) пациентов воспаление слизистой оболочки, при этом хроническое воспаления отмечались у 34 больных, а острое – у 6 пациентов, в 8 наблюдениях обнаруживались гранулемы культи с выраженной воспалительной инфильтрацией. У 12 (17,6%) пациентов патологических изменений в слизистой оболочке культи резецированного бронха не отмечалось.

При проведении локальной флуоресцентной спектроскопии в патологически неизмененной слизистой оболочке культи резецированного бронха регистрировалась интенсивная аутофлуоресценция с максимумом в районе 578-580 нм. Интенсивность АФ в слизистой оболочке культи резецированного бронха была сопоставима с интенсивностью аутофлуоресценции в нормальном эпителии слизистой оболочки бронхов в контралатеральном легком.

В результате проведенного исследования было выявлено, что в течение первых 6 месяцев после операции отмечается значительный разброс показателей интенсивности АФ, что отражает процесс восстановления бронхиального эпителия в послеоперационном периоде. В более позднем периоде интенсивность аутофлуоресценции в культе резецированного бронха в максимуме спектра возрастает, и становиться сравнимой с интенсивностью АФ бронхиального эпителия в контралатеральном легком (рис.2). Это говорит о том, что по прошествию 6 месяцев после операции становится возможным выявление рецидива рака в культе резецированного бронха по общепризнанному диагностическому признаку, которым является интенсивность аутофлуоресценции. Ранее считалось, что низкая интенсивность АФ по линии резекции бронха является ложноположительным результатом.

Интенсивность АФ, отн.ед.

норма до 6 мес после 6 мес

Рис.2. Показатели интенсивности аутофлуоресценции нормального бронхиального эпителия слизистой оболочки культи резецированного бронха в зависимости от срока после операции в сравнении с показателями интенсивности бронхов контралатерального легкого.

Значения спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df в патологически неизмененном бронхиальном эпителии в зоне культи резецированного бронха достоверно не отличались от таковых в нормальном бронхиальном эпителии слизистой оболочки бронхов контралатерального легкого ( р > 0,05), его среднее значение в культе составило 0,95 ± 0,04.

В участках слизистой оболочки культи оперированного бронха с признаками острого воспаления, так же как и в контралатеральном легком, наблюдалось достоверное падение интенсивности аутофлуоресценции в максимуме спектра и возрастание спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df. по отношению к показателям в нормальной слизистой оболочке (p < 0,05).

Исследование показателей аутофлуоресценции методом локальной флуоресцентной спектроскопии показало, что в очагах хронического воспаления слизистая оболочка культи резецированного бронха так же как и в бронхах контралатерального легкого интенсивно флуоресцирует и показатели интенсивности в максимуме спектра достоверно не отличаются от данных полученных в патологически неизмененной слизистой оболочке (р = 0,63).

В участках дисплазии бронхиального эпителия II степени в слизистой оболочке культи резецированного бронха регистрировалась интенсивная аутофлуоресценция с нормальными значениями диагностического параметра, т.е. так же как и в случае дисплазии бронхиального эпителия II степени, диагностированной в бронхах контралатерального легкого нами не были выявлены достоверные различия в интенсивности АФ между нормальным и дисплазированным эпителием.

В 8 (11,8%) случаях при эндоскопическом обследовании в культе резецированного бронха были выявлены различной формы экзофитные образования с гладкой слизистой оболочкой, которые были расценены как гранулемы культи. Морфологическое исследование фрагментов биопсии из образований культи подтвердило наличие грануляционной ткани, при этом в большинстве биоптатов обнаруживалась выраженная воспалительная инфильтрация.

Анализ спектров аутофлуоресценции, измеренных в области гранулем, показал, что более, чем в половине спектров аутофлуоресценции регистрировались крайне низкие значения интенсивности АФ (< 250 отн.ед ). В то время как, величина спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df достоверно возрастала относительно нормальных значений. То есть, по двум оцениваемым параметрам данные спектры соответствовали спектрам злокачественных опухолей. Таким образом, было получено, что 50 % случаев интенсивность аутофлуоресценции в гранулеме является ложноположительными результатами, что согласуется с данными других авторов.

В случаях диагностированного рецидива злокачественной опухоли в культе резецированного бронха, так же как и в случае метахронного рака регистрировалось падение интенсивности аутофлуоресценции относительно здоровой слизистой оболочки и достоверное возрастание величины спектрально-флуоресцентного диагностического параметра Df (р < 0,005).

Таким образом, проведенное исследование аутофлуоресценции в слизистой оболочке бронхов выявило достоверные отличия в показателях аутофлуоресценции при раке, остром воспалении и нормальной слизистой оболочке. При этом следует отметить, что данные показатели в слизистой оболочке культи резецированного бронха по прошествию 6 месяцев после операции становятся сопоставимы с показателями в бронхах контралатерального легкого.

При проведении корреляционного анализа выявлена положительная корреляционная взаимосвязь между показателями аутофлуоресценции слизистой оболочки культи резецированного бронха и бронхов контралатерального легкого с результатами морфологического исследования при развитии в слизистой оболочке очагов рака (r = 0,31; p < 0,001) и острого воспаления (r = 0,49; p < 0,001).

Разработка алгоритма эндоскопического наблюдения больных, получивших комбинированное лечение по поводу рака легкого.

На основании проведенного исследования с целью раннего выявления рецидива рака легкого, дисплазии бронхиального эпителия, воспалительных изменений был разработан диагностический алгоритм наблюдения больных, получивших комбинированное лечение по поводу рака легкого (рис.3).

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»