WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |

Для оценки питательного статуса пациентов использовался индекс массы тела (ИМТ), ИМТ рассчитывался по формуле ИМТ=масса тела (кг)/рост2(м).

При оценке функции внешнего дыхания использовались показатели FEV1, FVC, FEV1/FVC, VC, IC, VT, RV, TLC, RV/TLC, ERV. Исследование спирометрии проводилось путем анализа кривой «поток-объем» на компьютерном анализаторе Flowscreen фирмы Erich Jaeger, Германия.

Определение диффузионной способности легких проводилось на аппарате MasterScreen Body фирмы Jaeger, Германия. Исследовались следующие показатели: DLCO - диффузионная способность легких, DLCOva - отношение диффузионной способности легких к альвеолярному объему.

Определение силы дыхательной мускулатуры неинвазивным методом. Исследование проводилось на аппарате MasterScreen Body фирмы Jaeger, Германия. Исследовались следующие показатели: Ро1 - оценка инспираторной активности дыхательного центра, PImax – максимальная пиковая скорость вдоха, PEmax - максимальная пиковая скорость выдоха.

6-минутный тест с ходьбой проводился в соответствии со стандартным протоколом при помощи пульсоксиметра фирмы Mediaid-305 (США). Пациент должен был пройти по измеренному коридору в своем собственном темпе, стараясь пройти максимальное расстояние в течение 6 минут (Enright, 1998). До и после проведения теста определялись сатурация кислорода крови, частота сердечных сокращений и частота дыхания.

Неинвазивная оценка гемодинамики проводилась методом ЭХО-КГ с допплерографией на ультразвуковом анализаторе Vivid-7 (“General Electric, США). Оценивалось систолическое давление (СДЛА) в a. рulmonale в мм.рт.ст.

Спиральная компьютерная томография с использованием полуавтоматической программы измерения плотности легочной ткани Pulmo CT (Siemens®) проводилась на компьютерном томографе Somatom Emotion фирмы Siemens, Германия. Определялись: доля эмфиземы от общего объема легких, средняя плотность легочной ткани, распределение плотности по объему легких, выявление бронхоэктазов, булл, других изменений легочной ткани по стандартной методике сканирования (проводится на высоте вдоха с задержкой дыхания, 2-х миллиметровыми срезами с шагом в 10 мм в краниокаудальном направлении без контрастирования ).

Газовый состав артериальной крови проводился экспресс-методом на автоматическом анализаторе RapidLab-348 фирмы Bayer, Германия). Забор крови для анализа осуществлялся путем пункции лучевой артерии гепаринизированным шприцем. Определялись следующие показатели: pH, pO2, pCO2,HCO3.

Определение уровня альфа-1-антитрипсина и альфа-2 макроглобулина в сыворотке крови методом нефелометрии. Исследование проводилось при помощи нефелометра BN ProSpec фирмы DADE BEHRING, США-Германия.

Для определения активности нейтрофильной эластазы (НЭ), матриксной металлопротеиназы-9 (ММП-9, тканевого ингибитора металлопротеиназы-1 (ТИМП-1), интерлейкина-8 (ИЛ-8), фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-), трансформирующего фактора роста-бета (ТФР-), эндотелиального фактора роста (ЭФР) использовались наборы фирмы BIOSOURCE (США), Bender MS (Швейцария). Исследование проводилось методом иммуноферментного анализа в соответствии с рекомендациями производителя. Постановка реакций выполнялась методом парных сывороток.

Статистическая обработка результатов исследования проводилась с определением средних значений полученных показателей (М) и стандартных отклонений (±). Все численные данные представлены как Mean+SD. Достоверность различий количественных показателей между группами в случае непараметрического распределения определяли при помощи критерия Mann-Whitney U-test. Корреляционную зависимость рассчитывали по методу Спирмена. Доверительный интервал >95% принимался как статистически значимый. Различия считались статистически достоверными при р < 0,05.

При анализе сывороточных концентраций биомаркеров установлено их непараметрическое распределение, данные представлены как медиана, 25-75 процентиль.

Вся статистическая обработка результатов проведена при помощи пакета прикладных программ Statistica for Windows, Release 6.0 StatSoft, Inc.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1 Системные биомаркеры в сыворотке крови у больных ХОБЛ и в контрольной группе.

1.1 Уровень системных биомаркеров в сыворотке крови в группе больных ХОБЛ и в контрольной группе.

Средние значения исходных показателей цитокинов (ИЛ-8, ФНО-), факторов роста (ЭФР, ТФР-) и протеаз-антипротеаз (ММП-9, ТИМП-1, ААТ, НЭ, 2макроглобулин) в сыворотке крови в обеих указанных группах представлены в табл. 2.

Таблица 2

Концентрация системных биомаркеров в сыворотке крови в группе больных ХОБЛ и в контрольной группе.

Показатель

Median (25-75 percentile)

Больные ХОБЛ

Здоровые курильщики

ИЛ-8, пг/мл

12,9 (11,1-16,4)***

7,5 (6,2-9,8)

ФНО-, пг/мл

6,8 (5,4-8,6)

6,5 (6,1-7,3)

ЭФР, пг/мл

122,2 (70,7-201,4)

103,2 (87,3-119,8)

ММП-9, нг/мл

329,4 (224,0-728,3)

264,1 (208,9-289,4)

ТИМП-1, нг/мл

557,4 (468,5-640,9)

573,8 (501,5-611,7)

ААТ, г/л

1,54 (1,33-1,8)

1,39 (1,38-1,44)

ТФР-, нг/мл

1,42 (0,74-1,6)

1,15 (1,11-1,32)

НЭ, нг/мл

184,8 (117,1-465,5)*

115,9 (88,5-118,5)

ММП-9/ ТИМП-1

0,56 (0,41-1,56)

0,75 (0,62-0,83)


НЭ/ААТ

120,5 (61,9-316,6)

79,5 (64,1-86,6)


2макроглобулин, г/л

1,36 (1,18-1,54)

1,51 (1,43-1,6)

*- р<0,05 **- р<0,01 ***- р<0,001 по сравнению со здоровыми курильщиками

Обе группы достоверно отличались друг от друга по значениям ИЛ-8 (р<0,001) и НЭ (р<0,05). Также имелась тенденция превышения уровней ЭФР, ТФР-, ММП-9 в сыворотке крови больных ХОБЛ, однако, она не достигла статистически значимых величин.

1.2 Взаимосвязь уровней системных биомаркеров в сыворотке крови и клинико - функциональных показателей у больных ХОБЛ.

При изучении взаимосвязей ИЛ-8 с функциональными показателями выявлены достоверные отрицательные корреляционные связи между ИЛ-8 и FEV1% (r=-0,41), FVC% (r=-0,53), СДЛА (r=-0,66) и положительные слабой силы корреляционные взаимосвязи между ИЛ-8 и RV% (r=0,4), RV/TLC% (r=0,41), что свидетельствует о роли воспалительных хемокинов в развитии обструктивных нарушений.

Выявленные нами отрицательные корреляционные взаимосвязи уровня СДЛА с концентрацией ИЛ-8 (r=-0,66) и ФНО- (r=-0,58) совпадают с данными Puxeddu I., Dirkje S. P о том, что как ИЛ-8, так и ФНО- стимулируют экспрессию ЭФР, усиливающего сосудистый рост и снижающего величину давления в легочной артерии (Puxeddu I. et al, 2005; Dirkje S. P. et al, 2006) (рис.1).

Рис. 1 Корреляционные взаимосвязи СДЛА и системных биомаркеров в сыворотке крови у больных ХОБЛ.

Сильная прямая корреляционная взаимосвязь установлена между сывороточным уровнем ТФР- и величиной СДЛА (r=0,61) в группе больных ХОБЛ. Несмотря на то, что существуют исследования, доказывающие протективные свойства ТФР- при ХОБЛ за счет усиления синтеза эластина, стимуляции ЭФР и васкуляризацию легких (Jeon S.H. et al, 2007) известно, что при первичной легочной гипертензии имеется повреждение сигнальной системы ТФР-, создавая невозможность осуществления его протективных эффектов (Richter A. et al, 2004).

Еще одна достоверная обратная корреляционная связь в группе больных ХОБЛ установлена между СДЛА и уровнем ММП-9 (r=-0,58). Поскольку металлопротеиназы ответственны за неоангиогенез, подавление их активности приводит к нарушению сосудистого роста. Вероятно, активная васкуляризация легких под влиянием ММП-9 может объяснять обратную зависимость с величиной СДЛА (Stamenkovic I., 2003; Joyce E., 2005).

1.3 Корреляционные взаимосвязи уровней системных биомаркеров в сыворотке крови в группе больных ХОБЛ и в контрольной группе.

Для определения механизмов влияния друг на друга были изучены взаимосвязи цитокинов, факторов роста и протеаз – антипротеаз между собой.

В группе больных ХОБЛ были выявлены слабой силы корреляционные взаимосвязи между ФНО- и ММП-9, ТИМП-1 и ИЛ-8, что подтверждает данные о взаимном влиянии этих показателей друг на друга и их деструктивную роль при ХОБЛ, что подтверждается данными Nacamura H (Nacamura H. et al,1991).

Обнаружена умеренной силы положительная корреляционная связь между ЭФР и ТИМП-1 в группе больных ХОБЛ; в контрольной группе достоверных взаимосвязей не получено.

Также в группе больных ХОБЛ нами были получены сильные корреляционные связи между ММП-9 и НЭ, НЭ/AAT, умеренной силы между ММП-9 и ИЛ-8, слабой силы между ММП-9 и ФНО-, что подтверждает роль ММП-9 в деструктивных процессах и поддержании воспаления при ХОБЛ и стимулирующем влиянии НЭ на экспрессию ММП-9 (Campbell E.J. et al, 1991). В контрольной группе выявлена одна сильная взаимосвязь между ММП-9 и 2макроглобулином, что свидетельствует о балансе повреждающих и защитных механизмов у этих больных.

Нами выявлены значимые положительные корреляционные связи в группе больных ХОБЛ между ТИМП-1 и ЭФР, ФНО-. В контрольной группе достоверных связей не было получено.

Положительные корреляционные связи обнаружены в группе больных ХОБЛ: умеренной силы между ТФР- и НЭ, НЭ/AAT, и слабой силы корреляционная связь между ТФР- и ММП-9/ТИМП-1, а в контрольной группе статистически значимые корреляционные связи отсутствуют. Эти данные свидетельствует о роли ТФР- в развитии фибропластических процессов при ХОБЛ.

2. Различие системных биомаркеров в сыворотке крови у больных ХОБЛ 1-4 стадий.

При исследовании различий показателей цитокинов, факторов роста, протеазно - антипротеазного статуса у больных ХОБЛ 1-4 стадий в сыворотке крови выявлена статистически значимая разница по концентрациям TФР- и ИЛ-8 (рис. 2, 3).

Рис. 2 Концентрация ТФР- в сыворотке крови у больных ХОБЛ.

Рис. 3 Концентрация ИЛ-8 в сыворотке крови у больных ХОБЛ.

Высокая продукция ТФР- имеет место в начальных стадиях ХОБЛ (1 и 2 стадии), что возможно объясняется протективной функцией данного биомаркера в отношении паренхимы легких. В терминальной стадии ХОБЛ мы наблюдали резкое снижение продукции ТФР-, что, по-видимому резко нарушает регенераторную функцию легких и ведет к резкому прогрессированию болезни.

3. Системные биомаркеры в сыворотке крови у больных с гетерогенными фенотипами ХОБЛ.

    1. Уровень системных биомаркеров в сыворотки крови у больных с эмфизематозным и бронхитическим фенотипами ХОБЛ.

Достоверные отличия между группами больных с эмфизематозным и бронхитическим фенотипами выявились в таких показателях, как ИМТ (p<0,01), расстоянии, пройденном при проведении теста c 6-минутной ходьбы (p<0,05), DLCO SB (p<0,05), DLCO/VA (p<0,01), НЭ (p<0,05), НЭ/ААТ (p<0,05), ММП-9 (p<0,05), ММП-9/ТИМП-1 (p<0,01) (табл. 3).

Больные с эмфизематозным фенотипом достоверно имели более низкий ИМТ, были менее физически выносливы в тесте с 6-ти минутной ходьбой и имели более низкие показатели диффузионной способности по сравнению с больными ХОБЛ с бронхитическим фенотипом.

Таблица 3

Функциональные и клинические отличия фенотипов ХОБЛ.

Показатель

Mean±SD

Эмфизематозный фенотип

(n=25)

Бронхитический фенотип

(n=7)

FEV1%

55,2±22,7

68,5±21,9

FVC%

89,1±20,5

87,3±15,3

FEV1/ FVC

47,8±14,1

63,0±11,7

IC%

83,1±21,6

93,7±22,8

RV%

187,7±44,5

185,2±41,6

TLC%

123,2±14

123,7±14,8

RV/TLC

144,4±24,6

146,8±30,7

PI max, %

74,5±19,7

59,8±35,8

DLCO SB

59,1±16,3*

Pages:     | 1 || 3 | 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»