WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |

Оценка структуры политенных хромосом при воздействии бихромата калия на личинок Ch. plumosus и Ch. thummi показала, что при концентрации 0,001 мг/л у обоих видов они не несут видимых отклонений.

В концентрации бихромата калия 0,01 мг/л структура политенных хромосом у Ch. plumosus близка к норме, однако у личинок Ch. thummi была обнаружена их незначительная деструкция, хотя все хромосомы хорошо идентифицировались. Несмотря на некоторые нарушения в структуре хромосом, по-нашему мнению, шестивалентный хром в концентрации 0,01 мг/л не проявил значимого токсического действия на структуру политенных хромосом у исследованных видов хирономид.

Впервые нарушения структуры политенных хромосом обнаружились в растворе бихромата концентрацией 0,1 мг/л. У личинок Ch. plumosus стали видны пуфы и перетяжки, у Ch. thummi - деспирализация и деструкция хромосом. Таким образом, в концентрации 0,1 мг/л бихромат оказывал влияние на структуру хромосом у исследованных видов Ch. plumosus и Ch. thummi.

При концентрации бихромата калия 1,0 мг/л в политенных хромосомах у Ch. plumosus изменения в структуре политенных хромосом усиливаются. На I и III хромосомах увеличивается расстояние между дисками и междисками, II хромосома имеет “расплавленный” конец. При этом у Ch. thummi при этой концентрации бихромата калия явления деструкции в хромосомах выражены сильнее, чем у Ch. plumosus.

В концентрации бихромата калия 2,0 мг/л у личинок Ch. plumosus отмечены значительные изменения в структуре хромосом. На I хромосоме значительнее увеличивается расстояние между дисками и наблюдается образование перетяжек. У другого исследованного вида Ch. thummi нарушения в структуре хромосом в растворе этой концентрации сходны с Ch. plumosus. Четко видны большие промежутки между дисками и междисками на I и II хромосомах, отмечены пуфы с перетяжками около них.

Таким образом, сравнивая действие бихромата калия в концентрациях от 0,001 до 2,0 мг/л на структуру хромосом у Ch. plumosus и Ch. thummi, следует отметить, что изменения в структуре хромосом слюнных желез под воздействием бихромата калия более выражены у личинок Ch. thummi.

3.4. Размеры зон цитодифференцировки в эпителии хрусталика глаза радужной форели после воздействии мутагенными веществами

Методические особенности. Данный раздел работы помещен именно в результатах, т.к. определенные тонкости этой части работы решали в процессе ее выполнения. Для изучения зон дифференцировки эпителиальных клеток хрусталика мы применили фотографирование цифровой камерой отдельных фрагментов эпителия, в виде полосы от центральной части до периферии. Дальнейшее исследование проводили с помощью специально разработанной программы IC для обработки полученного материала на компьютере. Полосу эпителия делили на равные квадраты и измеряли относительную оптическую плотность клеток эпителия в разных зонах. Распределение клеток в различных зонах цитодифференцировки оценивали у сеголеток радужной форели с одинаковыми размерами эпителия хрусталика глаза (рис. 3.4).

Для выяснения степени окрашивания ядер использовали денсиметрию, позволяющую косвенно говорить об образовании гетерохроматина в дифференцирующихся клетках предэкваториальной зоны эпителия хрусталика. Клетки с наиболее окрашенными ядрами, указывающими на завершение цитодифференцировки, могут быть отнесены к дифференцированной зоне. Клетки эпителия хрусталика с высоким содержанием эухроматина отнесены нами к центральной зоне. Промежуточная зона с наибольшей градацией эу - и гетерохроматина представляет собой герминативную зону.

Результаты исследований. Изучение эпителия хрусталика рыб с отклонениями, возникшими в результате воздействия веществ, обладающих генотоксичными свойствами, за 21 сутки опыта позволяет установить влияние вредных факторов на величину его зон цитодифференцировки эпителия.

Исследование клеток эпителия сеголеток радужной форели показывает, что наименьшая плотность окраски ядер отмечена в центральной части эпителия. Герминативная зона со средней плотностью ядер в эпителии у большинства рыб характеризуется примерно одинаковой оптической плотностью. При этом выявляется градация цитодифференцировки клеток и постепенный переход в предэкваториальную зону, где находятся наиболее дифференцированные клетки (рис. 3.4.1).

При действии эпихлоргидрина и 2-нафтола в концентрациях, взятых ранее при исследовании хромосомных аберраций, в герминативной зоне эпителия хрусталика, отмечается сокращение размеров герминативной зоны по сравнению с контролем до 20–25 %.

Сравнительный анализ цитодифференцировки эпителия хрусталика у исследуемых рыб показывает, что нарушение дифференцировки клеток и сокращение размеров герминативной зоны у рыб, находящихся в действующих концентрациях эпихлоргидрина и 2-нафтола, сходны между собой. Это позволяет идентифицировать клетки эпителия хрусталика и, опираясь на размеры ядер и состояние кариоплазмы судить о размерах зоны цитодифференцировки и их изменении при действии генотоксичных факторов.

Установленное сокращение герминативной зоны эпителия хрусталика сеголеток радужной форели под воздействием исследованных веществ позволяет проводить сравнительный анализ других поллютантов и судить по этому показателю об их гено- или цитотоксичности.

3.5. Ингибиторы клеточной пролиферации в хрусталиках глаза рыб и амфибий

3.5.1. Влияние 2-нафтола на темп клеточной пролиферации в эпителии хрусталика глаза радужной форели

Влияние 2-нафтола на темп клеточного деления оценивали по митотической активности в различных зонах цитодифференцировки эпителия хрусталика глаза в хроническом опыте (табл. 3.5).

Таблица 3.5

Митотический индекс в клетках эпителия хрусталика глаза радужной форели через 21 сут. после воздействии различных концентраций 2-нафтола

Концентрация

2-нафтола, мг/л

Митотический индекс в различных зонах цитодифференцировки эпителия

предэкваториальная

герминативная

центральная

0,1

1,15±0,12

3,24±0,18

0,64±0,06

0,2

0

2,30±0,21

0

0,4

0,58±0,06

3,52±0,35

0,57±0,07

0,6

1,07±0,10

6,33±0,40

0,62±0,08

0,8

1,78±0,15

8,17±0,66

0,76±0,05

Контроль

1,82±0,17

7,75±0,36

0,91±0,08

Жирным шрифтом выделены результаты, достоверно различающиеся по критерию Стьюдента (p 0,01).

Бензольное соединение с генотоксичными свойствами - 2-нафтол, оказывает влияние на величину митотической активности эпителия хрусталика двояко. Низкие концентрации оказывают ингибирующее действие. Особенно резко уменьшается митотический индекс при концентрации 0,2 мг/л в дифференцированных зонах эпителия. В промежутке от 0,1 до 0,4 мг/л митотический индекс остается на самом низком уровне, а дальнейшее увеличение концентрации 2-нафтола, наоборот, приводит к повышению этого показателя до величин, близких к контролю.

При действии 2-нафтола в зонах цитодифференцировки эпителия хрусталика сеголеток радужной форели наибольшие изменения митотического индекса наблюдали при концентрации 0,2 мг/л.

По пространственному распределению митотического индекса в эпителии хрусталика глаза сеголеток радужной форели наибольший в центральной зоне цитодифференцировки (табл. 3.5.1).

Таблица 3.5.1

Влияние 2-нафтола в концентрации 0,2 мг/л на величину митотического индекса в различных зонах цитодифференцировки эпителия хрусталика глаза радужной форели от периферии (0) до центра (1,6)

Показатель

Расстояние от периферии до центра, мм

Митотический индекс

0

0,1

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

1,4

1,6

Контроль

0

0

1,9

1,8

7,3

7,2

1,6

1,4

1,5

1,2

Опыт

0

0

0

0,8

2,1

2

0,6

0,3

0

0

3.5.2. Действие рентгеновского излучения на клеточную пролиферацию в различных зонах цитодифференцировки эпителия хрусталика глаза

Воздействие рентгеновского излучения на митотическую активность в различных зонах цитодифференцировки эпителия хрусталика сеголеток радужной форели оценено по его влиянию на отдельные участки эпителия хрусталика. Установлено, что экспозиционная доза, равная 500 P, оказывает активное воздействие на клеточную пролиферацию у сеголеток радужной форели. Результаты, полученные на 21 сутки после облучения, глаз сеголеток форели, представлены в табл. 3.5.2.

Таблица 3.5.2

Распределение митозов в различных зонах цитодифференцировки хрусталика глаза сеголеток радужной форели на 21 сут. после рентгеновского облучения

Показатель

Расстояние от периферии зоны до центра, мм

Митотический индекс

0

0,1

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

1,4

1,6

Контроль

0

0

1,9

1,8

7,3

7,2

1,2

1,4

1,5

1,2

Опыт

0

0

0

0,38

2,3

2,3

0,25

0,16

0

0

Рассматривая действие активной дозы лучей Рентгена на митотическую активность в клетках различных зон цитодифференцировки эпителия хрусталика, можно заключить, что оно сходно с воздействием токсикантов, влияющих на митотическую активность в эпителии хрусталика.

3.5.3. Связь между хромосомными аберрациями и митотической активностью при действии различных концентраций эпихлоргидрина

Изучали влияние эпихлоргидрина как на митотическую активность в различных зонах эпителия хрусталика глаза, так и появление при этом аберративных митозов в зависимости от зон дифференцировки его клеток. Данные о количестве хромосомных аберраций и митотического индекса в различных зонах цитодифференцировки эпителия хрусталика глаза сеголеток радужной форели в этом варианте приведены в табл. 3.5.3.

Таблица 3.5.3

Митотический индекс и число хромосомных аберраций в эпителии хрусталика глаза радужной форели при действии различных концентраций эпихлоргидрина на 21 сутки опыта

Кон-

цент-рация, мг/л

Митотический индекс и число хромосомных аберраций в клетках различных зонах цитодифференцировки эпителия

предэкваториальная

герминативная

центральная

сред-ние

Хромо-сом-

ные аберра-ции

сред-ний

мито-

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»