WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 | 4 |

На правах рукописи

Павлов Константин Анатольевич

ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

АНГИОДИСПЛАЗИЙ МЯГКИХ ТКАНЕЙ

14.00.15 – патологическая анатомия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва 2009

Работа выполнена в ФГУ «Институт хирургии имени А.В. Вишневского Росмедтехнологий»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук,

профессор Щёголев Александр Иванович

Научный консультант:

доктор биологических наук Чекмарёва Ирина Александровна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук

Серов Роман Андреевич

доктор медицинских наук,

профессор

Черняев Андрей Львович

Ведущая организация:

НИИ морфологии человека РАМН

Защита состоится «21» декабря 2009 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.072.04 при Российском государственном медицинском университете по адресу: 117997 Москва, ул. Островитянова, д. 1.

Автореферат разослан «10» ноября 2009 г.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Российского государственного медицинского университета (117997 Москва, ул. Островитянова, д. 1)

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор Щёголев А.И.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Ангиодисплазии (сосудистые мальформации, врожденные пороки развития сосудов) являются результатом нарушения формирования сосудов в эмбриогенезе. Частота их колеблется от 0,3% до 5,4% (в среднем 2,6%) среди пациентов с заболеваниями периферических сосудов, госпитализированных в специализированные отделения [Garzon M.C., 2007а; Liapis C. D. et al., 2007; Дан В.Н., 2008]. При этом реальная заболеваемость сосудистыми мальформациями, видимо, несколько выше, так как в части наблюдений они ошибочно диагностируются как сосудистые опухоли, в частности, гемангиомы [Sangeza O.P., 2003].

Ангиодисплазии представляют один из наиболее сложных видов сосудистой патологии, характеризующиеся большим разнообразием как морфологических, так и клинических проявлений, и нередко приводящие к развитию серьезных осложнений [Милованов А.П., 1978; Sangueza O.P. et al., 2003; Garzon M.C. et al., 2007б].

В последнее время среди специалистов, занимающихся вопросами диагностики и лечения ангиодисплазий, заметно возрос интерес к данной патологии, что обусловлено как большим желанием понять и объяснить патогенетические основы заболевания на более тонком уровне, так и желанием максимально использовать возможности современной медицины для разработки стратегии диагностики и лечебной тактики [Ферзаули А.Н., 2002; Tille J.C. et al., 2004; Дан В.Н., 2008; Limaye N. et al., 2009].

В настоящее время разработаны и используются различные классификации сосудистых мальформаций, прежде всего прикладные и узкоспециальные [Enjolras O. et al., 2007, Lee B.B. et al., 2007], критерии их лучевой диагностики [Ситников А.В., 2002; Галактионова Л.А., 2007], а также множество методов хирургического и консервативного лечения заболеваний данной группы [Куликов С.В., 2001; Дан В.Н., 2008; Garzon M.C., 2007; Liapis C. D. et al., 2007]. При этом лечение больных с врожденными пороками развития сосудов до сих пор считается одним из самых сложных разделов сосудистой хирургии [Mattassi R. et al., 2009].

Важно отметить, что, несмотря на значительный прогресс, достигнутый в изучении заболеваний этой группы, все еще отсутствует единое мнение специалистов по вопросам выбора тактики и рациональных сроков оперативного вмешательства при ангиодисплазиях, мало известно о причинах их возникновения и патогенезе, нет полного согласия специалистов в вопросах терминологии, не создана единая универсальная классификация данных образований, отсутствуют четкие и общепринятые критерии их дифференциальной диагностики, в том числе с новообразованиями [Дан В.Н., 2008; Мишнёв О.Д. и др., 2008; Mattassi R. et al., 2009]. Во многом сложившаяся ситуация обусловлена недостаточной изученностью морфологических особенностей сосудистых мальформаций разных типов, неполным знанием роли различных ангиогенных медиаторов и их взаимодействия в патогенезе ангиодисплазий, а также практически полным отсутствием четких и детальных описаний особенностей морфологической картины заболевания в целом и в зависимости от применяемых методов лечения.

Цель исследования: провести сравнительное морфологическое изучение венозных и артериовенозных ангиодисплазий мягких тканей.

Задачи исследования:

  1. При помощи гистологических методов исследования провести сравнительное изучение артериовенозных и венозных форм ангиодисплазий.
  2. Изучить ультраструктурные особенности строения артериовенозных и венозных ангиодисплазий.
  3. При помощи иммуногистохимических методов исследования изучить особенности эндотелиальных клеток ангиодисплазий и гемангиом, а также выявить возможные молекулярные нарушения в клетках этих образований.
  4. Провести сопоставление морфологических данных с результатами иммуноферментного анализа гомогенатов ангиодисплазий.
  5. Изучить возможности иммуногистохимических методов для дифференциальной диагностики ангиодисплазий и гемангиом.

Научная новизна

Впервые на большом объеме операционного материала изучены гистологические характеристики артериовенозных и венозных мальформаций мягких тканей.

Впервые детально исследованы ультраструктурные особенности различных видов ангиодисплазий мягких тканей.

Впервые изучена экспрессия основных ангиогенных факторов роста: сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF), трансформирующего фактора роста (TGF-) и его рецептора, и маркеров пролиферации (Ki-67, нестин) в эндотелиоцитах сосудистых мальформаций мягких тканей.

Проведен сравнительный анализ гистологических и иммуногистохимических изменений ангиодисплазий и гемангиом.

Практическая значимость

Установленные морфологические (гистологические, иммуногистохимические, ультраструктурные) особенности строения ангиодисплазий подчеркивают значимость и необходимость комплексного изучения биопсийного и операционного материала больных.

В результате исследования получены новые данные о патогенезе, морфогенезе, а также иммунофенотипе сосудистых мальформаций мягких тканей.

Предложены новые дополнительные морфологические, в том числе иммуногистохимические, критерии для дифференциальной диагностики ангиодисплазий и гемангиом.

Результаты исследований могут быть использованы для разработки таргетной терапии сосудистых мальформаций мягких тканей.

Внедрение результатов работы

Результаты исследования используются в практической работе отдела патологической анатомии Института хирургии имени А.В. Вишневского Росмедтехнологий. Полученные данные о морфологических особенностях сосудистых мальформаций используются в материалах лекций и практических занятий со студентами и ординаторами на кафедре патологической анатомии лечебного факультета Российского государственного медицинского университета.

Апробация работы

Основные положения работы доложены и обсуждены на XII ежегодной сессии Научного центра сердечно-сосудистой хирургии им. А. Н. Бакулева РАМН с Всероссийской конференцией молодых ученых (Москва, 2008); 20-ом Международном конгрессе по изучению тромбоза International Congress on Thrombosis (Афины, Греция, 2008); Всероссийской научной конференции, посвященной 150-летию кафедры патологической анатомии ВМА им. С.М.Кирова (Санкт-Петербург, 2009); XIII ежегодной сессии Научного центра сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н.Бакулева РАМН с Всероссийской конференцией молодых ученых (Москва, 2009); III съезде Российского общества патологоанатомов (Самара, 2009), 22-ом Европейском конгрессе патологов (Флоренция, Италия, 2009).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, в том числе 4 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Опубликованные работы содержат полный объем информации, касающийся темы диссертации.

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 115 страницах машинописного текста, иллюстрирована 9 таблицами, 9 диаграммами и 52 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и библиографического указателя, включающего 24 отечественных и 116 зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Работа основана на морфологическом изучении операционного материала 109 пациентов, находившихся на лечении в Институте хирургии имени А.В. Вишневского в период с 2004 по 2008 год и оперированных по поводу ангиодисплазий мягких тканей периферической локализации. У 12 больных в предоперационном периоде проводилась рентгеноэндоваскулярная окклюзия гидрогелем (эмболами) в виде сфер (диаметр 0,4-0,6 мм) или цилиндров (диаметр 0,5-0,75 мм, длина 10-15 мм).

Отбор и систематизацию клинического материала проводили на основе совместного с клиницистами (проф. В.Н. Дан, д.м.н. С.В. Сапёлкин) изучения данных историй болезни и результатов комплексного морфологического изучения операционного материала. Установление вида сосудистого поражения производилось на основании результатов морфологического исследования и данных клинико-инструментальных исследований, включающих УЗИ, компьютерную томографию, магнитно-резонансную томографии, ангиографию.

Венозные мальформации были выявлены в 78 наблюдениях, артериовенозные – у 23 больных. У 8 пациентов были диагностированы гемангиомы.

Среди пациентов с венозными мальформациями преобладали женщины (54 наблюдения) в возрасте от 15 до 56 лет (средний возраст – 28,7 г). Возраст мужчин с венозными мальформациями (24 наблюдения) варьировал от 14 до 46 лет (средний возраст – 29,1 г). Наиболее часто венозные мальформации поражали нижние конечности (41 больной), реже – верхние конечности (20), туловище (9) и область головы и шеи (8). В 2 наблюдениях (2,5%) венозных мальформаций пациентам было проведено лечебное хирургическое вмешательство в виде рентгенэндоваскулярной окклюзии приносящих артерий образования. В 6 наблюдениях (7,7%) венозных ангиодисплазий имел место рецидив заболевания, развившийся в течение 3-5 лет после первичного хирургического вмешательства.

Среди пациентов с артериовенозными мальформациями также преобладали женщины (17 наблюдений) в возрасте от 16 до 47 лет (средний возраст – 31,2 г). Возраст мужчин с артериовенозными мальформациями (6 наблюдений) варьировал от 14 до 38 лет (средний возраст – 27,6 г). Основной локализацией артериовенозных мальформациий были верхние конечности (14 пациентов), реже – нижние конечности (4), туловище (3), область головы и шеи (2). Рентгенэндоваскулярная окклюзия приносящих артерий и артериовенозных шунтов была выполнена у 10 больных (43,5%). В 3 наблюдениях (13,1%) артериовенозных мальфомаций был отмечен рецидив заболевания, развившийся в течение 1-3 лет с момента первичного хирургического вмешательства.

Гемангиомы (в 5 наблюдениях капиллярные и в 3 кавернозные) мягких тканей диагностированы у 5 женщин в возрасте от 14 до 33 лет (средний возраст - 22,2 г) и 3 мужчин в возрасте от 14 до 48 лет (средний возраст 24,4). Гемангиомы локализовались в области верхних конечностей у 4-х пациентов, в области нижних конечностей – у 2-х, в области головы и шеи – у 2-х больных.

Полученные кусочки тканей фиксировали в 10% нейтральном формалине. Гистологическое исследование проводили на парафиновых срезах, окрашенных гематоксилином и эозином. Иммуногистохимическое исследование проводили по общепринятым методикам на депарафинированных срезах толщиной 3 мкм, расположенных на стеклах, покрытых L-полилизином. Предварительную демаскировку антигена проводили путем кипячения образцов в растворе цитратного буфера с pH 6.0. Блокирование эндогенной пероксидазы - путем обработки срезов 0,3% раствора перекиси водорода в течение 15 минут. В качестве фонового красителя использовали гематоксилин. Перечень использованных антител представлен в таблице 1.

Таблица 1. Первичные антитела, использованные при

иммуногистохимических исследованиях

Антитело

Клон

Разведение

Фирма-производитель

Ki-67

MIB-1

1:150

Dako

bFGF

bFGF88

готовое

BioGenex

VEGF

VG1

1:50

Diagnostic BioSystems

TGF-

polyclonal

1:1000

Diagnostic BioSystems

CD105

4G11

1:30

BioGenex

Эластин

BA-4

1:100

Novocastra

S-100

polyclonal

1:200

Pages:     || 2 | 3 | 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»