WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 11 |

ДостоверностьР<0,01

Сроки

исследований

Показатели

Вакцина «Овикон»

Контроль (Непривитые)

Довакцинации

1 месяцпосле 1-й вакцинации

2-я вакцинация

1 месяцпосле 2-й вакцинации

Доначала опыта

1 месяцпосле начала опыта

1 месяцпосле начала опыта

Иммуно-глобулины Jg (мг/мл)


Ig G

17,24±1,15

18,24±1,34

19,63±2,05

16,98±1,05

17,08±1,20

17,06±1,05


Ig M

1,57±0,40

1,98±0,18

2,27±0,21

1,52±0,35

1,61±0,09

1,61±0,46

Популяции

Лимфоцитов

(%)


B-

23,73±0,96

26,15±1,17

28,93±1,68

23,85±1,17

23,92±1,05

23,87±1,05


T-

12,04±0,85

14,58±1,15

17,12±2,04

12,36±0,75

12,74±0,98

12,45±0,95

Фагоцитарная активность ФА (%)

26,22±1,29

31,44±2,15

32,75±2,05

26,43±1,15

26,72±0,85

27,15±0,98

Фагоцитарное число ФЧ (м.т.)

4,85±1,75

5,87±0,97

6,14±1,24

4,88±1,05

5,91±0,95

5,92±1,05

Фагоцитарный индекс ФИ (м.т.)

4,38±0,98

5,73±1,15

6,52±1,05

4,39±0,95

4,51±0,85

4,48±1,05

Таблица 10

Технологическая схемапроизводства инактивированныхассоциированных вакцин: противнекробактериоза

конечностей крупногорогатого скота «НЕКОВАК» и противинфекционных заболеваний конечностей овец«ОВИКОН»

Ампулыс производственными штаммами




Наработкапосевного материала D. nodosus


Наработкапосевного материала A. pyogenes


Наработкапосевного материала S. aureus


Наработкапосевного материала F. necrophorum


Наработкапосевного материала C. Perfringens т.А







Приготовление антигена, включаякультивирование в реакторе,концентрирование и инактивацию

Приготовление анатоксина включаякультивирование в реакторе,концентрирование и инактивацию


Промежуточный контроль антигена ианатоксина F. necrophorum,

антигена D. nodosus,

окончательный контрольантигена A. Pyogenes, антигенов и анатоксинов S.Aureus, F. necroforum, C. perfringens




Составление серии вакцины

Расфасовка,укупорка,

маркировка


Этикетировка


Складирование


Взятиеобразцов для контроля

F. necrophorum иD. nodosusвыращивалась на питательной среде,состоящей из смеси печеночного экстракта иодного из переваров мяса (ферментативногоили казеинового) в соотношении 1:3. Это оченьдорогостоящая среда.

В исследованиях,проведенных сотрудниками ФГУП«Ставропольская биофабрика» вместе савторами препаратов, модифицировалипитательные среды с целью экономиидорогостоящих инградиентов, а такжеполучения максимального накоплениямикробных клеток.

Работу провели в двухнаправлениях: разработка промышленныхспособов культивирования аэробныхмикроорганизмов Staphylococcus aureus,Actinomyces pyogenes, при этом намиставилась задача перейти откультивирования этих микроорганизмов наплотных питательных средах к глубинному– в ферментерахна жидких питательных средах. С этой целью,в сравнительном аспекте были исследованыследующие питательные среды: бульонХоттингера и сложно-компонентнаяпитательная среда, состоящая из основногоперевара Хоттингера, ферментногогидролизата кровяных сгустков (отходов отпроизводства нормальной сыворотки КРС иовец), ферментативного гидролизата казеинаи гидролизата печени КРС. В испытываемыхсредах устанавливали рН 7,6-7,8, аминный азот170-180 мг%. Во время культивирования вреакторах культур Staphylococcusaureus и Actinomycespyogenes в питательную средудробно добавляли 40% раствор глюкозы спериодической корректировкой рН до 7,2-7,4.Время культивирования 18 часов.

Были получены следующиерезультаты культивирования по накоплениюбактериальной массы на сложнокомпонентной питательной среде: S. aureus –20108 м.т./мл., A. pyogenes – 9108 м.т./мл.

В тоже время, прикультивировании указанныхмикроорганизмов в матрасах с 2,5% агаромХоттингера, накопление A.pyogenes составило 4 млрд.м.т. в мл.Такое количество антигенов по старойтехнологии культивировании в матрасах с 2,5%агаром Хоттингера мы могли получать с 1000– 2000 матрасов (5– 10культивирований по 250 матрасов).

На втором этапе приизыскании питательных сред длякультивирования анаэробныхмикроорганизмов F.necrophorum и D.nodosus, перевар Хоттингера изсостава питательной среды был исключен.Вместо экстракта печени использовался еёгидролизат. Согласно инструкции поизготовлению, на 100 л экстракта печенинеобходимо 100 кг печени КРС, а дляизготовления 20 л гидролизата печени – всего 15 кг.Гидролизат печени добавляли в количестве 2%к основному объему питательной среды. Вконструировании питательной среды такжеиспользовали гидролизаты казеина:кислотный и ферментативный,ферментативный гидролизат кровяныхсгустков.

Готовая питательнаясреда имела следующие биохимическиепоказатели: рН – 7,8 -8,0, аминного азота 150-180 мг%.

В результатепроведенных исследований сравнительногокультивирования анаэробныхмикроорганизмов на экспериментальной(сложно компонентной питательной среде) иконтрольной среде (среда МППБ на основеперевара Хоттингера), нами былоустановлено, что накопление бактериальноймассы на экспериментальной среде в 1,5 разапревышало этот показатель контрольнойсреды. Замена основного перевараХоттингера гидролизатом печени в сложнокомпонентной среде позволила снизить в 6раз затраты на производство ростовыхсред.

Успешное испытаниеопытно-промышленной серий ассоциированныхвакцин «Нековак», «Нековак-стимул» и«Овикон» в неблагополучных поинфекционным болезням конечностейкрупного и мелкого рогатого скотаживотноводческих хозяйствах РФ, а такжеразработка и усовершенствованиепромышленной технологии изготовленияуказанных препаратов позволили:

1. Оформить патенты наассоциированную вакцину «Овикон» противинфекционных заболеваний конечностейовец, и на ассоциированную вакцину«Нековак» против некробактериозаКРС;

2. Утвердить постояннуюдействующую нормативную документацию науказанные препараты;

3. Зарегистрировать в РФуказанные препараты;

4. Продолжить серийноепроизводство указанных вакцин на ФГУП«Ставропольская биофабрика».

5. Сертифицироватьвыпуск этих препаратов;

6. Провести испытанияэффективности промышленных серийассоциированных вакцин «Нековак»,«Нековак-стимул» и «Овикон» внеблагополучных по инфекционным болезнямконечностей крупного и мелкого рогатогоскота животноводческих хозяйствахРФ.

2.9. Испытаниеэффективности промышленных серийассоциированных вакцин «Нековак»,«Нековак-стимул» «Овикон». Разработкасистемы мероприятий по борьбе синфекционными заболеваниями конечностейкрупного и мелкого рогатого скота.

Утверждение НормативнойДокументации на ассоциированные вакцины«Нековак», «Нековак-стимул» и «Овикон» иначавшееся на ФГУП «Ставропольскаябиофабрика» промышленное производствоуказанных препаратов позволили перейти киспытанию эффективности промышленныхсерий этих вакцин в неблагополучных понекробактериозу и копытной гнилиживотноводческих и овцеводческиххозяйствах Российской Федерации.

Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»