WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

Содержание NK-клеток (CD16+) при латентной сенсибилизацией в среднем не превышало 7,0±1,5%, тогда как у здоровых лиц оно было выше - 12,8±0,7% (р<0,05).

Процент В-лимфоцитов (CD20+) составил 10,0+0,4 в группе контроля и 10,0+1,7% у лиц с латентной сенсибилизацией.

Рисунок 1. Алгоритм исследования активационных маркеров лимфоцитов для подтверждения/исключения латентной сенсибилизации

Характер изменений субпопуляций иммунокомпетентных клеток с тестированными активационными CD-антигенами указывает на ускорение дифференцировки и функциональной активности В-лимфоцитов (возрастание процента клеток с CD54+, CD23+-антигенами) с одновременным ускорением элиминации активированных иммунокомпетентных клеток (увеличение частоты экспрессии CD95+). Процент CD54+-клеток составил 20,3+2,3 против 5,5+0,6% в контроле, р<0,05; CD23+-клеток 14,5+0,7 против 5,3+0,4% в контроле, р<0,05; процент CD95+ был 11,6+2,9 против 4,7+0,3% в контрольной группе, р<0,05.

Можно предположить, что повышение апоптоза активированных лимфоцитов является одним из механизмов, предотвращающих появление клинических симптомов аллергии в условиях иммунологической перестройки, отражающей формирование сенсибилизации к аллергенам.

Иммунологическими признаками латентной сенсибилизации является аномальное (больше максимального нормативного значения) возрастание иммунокомпетентных клеток с CD54+ и/или CD95+-антигенами. У всех (т.е. у 100%) лиц с латентной сенсибилизацией, подтвержденной по результатам кожных проб, обнаруживаются именно такие изменения распределения лимфоцитов с указанными маркерами. Из этого следует, что для надежного подтверждения/исключения вероятности латентной сенсибилизации у

обследуемых пациентов следует определять процент содержание лимфоцитов именно с CD54+-антигеном, а при отсутствии изменений со стороны этой субпопуляции, целесообразно уточнить процент клеток с CD95+-антигеном (рис. 1). Подтверждение или исключение наличия указанных выше иммунологических признаков латентной сенсибилизации позволяет охарактеризовать наблюдаемую клиническую ремиссию (диагностированного в прошлом того или иного аллергического заболевания) как, соответственно, «неполноценную» или «полноценную». «Неполноценная» ремиссия, характеризующаяся наличием иммунологических признаков латентной сенсибилизации, требует уточнения (с помощью кожных проб с расширенным набором диагностических антигенов) конкретного аллергена, вызывающего описываемые иммунологические изменения. Кроме того, всех лиц с «неполноценной» (по выделенным нами иммунологическим критериям) ремиссией установленного в прошлом аллергического заболевания следует рассматривать как первоочередных кандидатов для проведения курсов профилактической терапии, направленной на укрепление Т-супрессорного звена иммунитета. Последнее заключение аргументируется тем, что латентная сенсибилизация к тем или иным аллергенам со временем переходит в клинически манифестную форму, т.е. сопровождается расширением спектра аллергенов, контакт с которыми сопровождается развитием клинических проявлений, типичных для атопических заболеваний, что означает явное усугубление аллергического статуса пациента [Horak F., 1985].

Изучение распределения субпопуляций иммунокомпетентных клеток с идентификационными CD-маркерами периферической крови больных поллинозом в обострении выявило тенденцию к увеличению относительной численности популяций Т- и В-лимфоцитов и отсутствие сезонных колебаний уровня NK-клеток по сравнению с аналогичными показателями в стадии ремиссии, которые в данном случае выступали в качестве контрольных параметров. Также выявлены изменения в субпопуляционном составе Т-лимфоцитов в обострение: достоверно снижался уровень цитотоксических CD8+Т-лимфоцитов, тогда как численность CD4+Т-хелперных клеток не менялась (табл. 1).

Так, доля CD3+Т-лимфоцитов в обострение составила 66,7+1,0%, в ремиссию - 46,9+1,9%, цитотоксических CD8+Т-лимфоцитов 19,3+1,5% в обострение, 26,5+2,2% в ремиссию (p<0,05). Интересная закономерность была выявлена при анализе относительного содержания цитотоксических Т-лимфоцитов в зависимости от длительности обострения. Уровень CD8+-клеток в начале обострения составил 22,2+1,5%, в середине - 20,7+1,7% и

Таблица 1.

Характеристика количественного состава основных субпопуляций лимфоцитов у больных поллинозом в стадию обострения

Маркеры лимфоцитов

(идентификационные антигены)

Пациенты с поллинозом в стадии ремиссия (контроль)

Доля лимфоцитов с определявшимся маркером М+m,%

(min max, %)

Пациенты с поллинозом в стадии обострения

Доля лимфоцитов с определявшимся маркером

М+m,%

Т

CD3+

46,9+1,9

(34,4 – 67,2)

57,3+2,3

CD4+

30,3+2,2

(15,4 – 44,3)

30,8±1,4

CD8+

26,5+2,2

(13,2 – 39,5)

19,3+1,5*

NK

CD16+

10,7+1,3

(3,7 – 19,9)

10,3+2,3

CD56+

8,4±1,5

(1,9 – 17,0)

6,8+1,0

B

CD20+

13,1±1,5

(4,4 – 21,5)

16,2±1,1

CD72+

7,7±1,2

(2,7 – 18,0)

12,0±0,6*

IGM

7,5±1,2

(2,5+18,7)

11,5±1,4

IGG

8,0±0,9

(1,5 – 14,9)

11,6±2,3

Примечание: *-p<0,05.

17,5+2,5% в конце, то есть увеличение срока обострения сопровождалось падением численности CD8+-лимфоцитов. Известно, что обострение поллиноза характеризуется преобладанием ответа Th2-клеток [Порядин Г.В., 2008; Pitsch T., et al., 2003]. Цитокины, синтезирующиеся хелперами второго порядка, по всей видимости, приводят к угнетению дифференцировки цитотоксических CD8+-лимфоцитов, и, следовательно, к снижению численности CD8+-клеток в периферической крови.

Относительное содержание CD4+Т-хелперных клеток не менялось и равнялось 30,3+2,2 в ремиссии, 30,8±1,4% в обострении. Вероятно, отсутствие колебаний доли Т-хелперных клеток связано с усиленной миграцией Т-хелперных лимфоцитов в слизистые оболочки конъюнктивы и верхних дыхательных путей. Это предположение подтверждается серией работ зарубежных авторов, выполненных на биоптатах слизистой оболочки носа больных поллинозом [Majori M., et al. 2001; Plevako H. et al., 2004; Brown J.L., et al., 2007]. В ходе этих исследований было обнаружено значительное накопление в слизистой носа активированных форм Т-лимфоцитов (CD3+4+).

Численность различных субпопуляций NK-клеток у больных поллинозом неподвержена сезонным изменениям и их доля не менялась в зависимости от стадии заболевания (табл. 1).

Общее процентное содержание CD20+В-лимфоцитов и В-лимфоцитов, находящихся на различных этапах дифференцировки (CD72+, IgM+, IgG+) при обострении поллиноза имело тенденцию к повышению (табл. 1). Рост процента премированных антигеном В-лимфоцитов (CD72+) носил достоверный характер - 7,7±1,2 в ремиссию против 12,0±0,6% в обострение (p<0,05). По литературным данным увеличение численности В-лимфоцитов напрямую коррелирует с увеличением концентрации общего и аллергенспецифических титров IgE и появлением клинической симптоматики поллиноза [Ohashi Y., et al., 1998].

Среднее значение функциональных активационных антигенов в период обострения поллиноза составило CD54 - 19,5±1,4%, CD23 - 13,1±3,3%, значение аналогичных маркеров в контроле было 12,6+1,8 и 6,1±0,7%, соответственно, (p<0,05). Относительное содержание дифференцировочных активационных антигенов CD25, CD71 и HLA-DR в обострении было равно 10,5±1,3, 14,5±1,5, 16,4±1,1 против 5,4+0,4, 6,2+0,5, 11,7+1,0% в контроле (p<0,05).

Рисунок 2. Характеристика динамики экспрессии активационных антигенов у больных поллинозом в стадию обострения.

В ходе исследования было выявлено, что для периода обострения поллиноза характерны однонаправленные изменения экспрессии «ранних» CD25 и CD71 активационных антигенов. Так, в начале обострения их уровень резко повышался, а затем он постепенно снижался. Понижение экспрессии CD25 и CD71-антегенов сопровождалось возрастанием доли зрелых HLA-DR+-клеток (рис. 2). Мы считаем, что эти изменения могут свидетельствовать об усилении темпов пролиферации и дифференцировки лимфоцитов в период сезона пыления и накоплении зрелых иммунокомпетентных клеток по мере увеличения длительности обострения поллиноза.

Единственный активационный маркер, содержание которого не повышалось в период обострения поллиноза, был CD95. Напротив, была выявлена тенденция к снижению экспрессии данного антигена. Так, в ремиссию число клеток, несущих молекулу CD95, составило 9,0+0,9%, в обострение его содержание уменьшилось на треть, среднее значение равнялось 6,8±0,8%. Причем по мере увеличения длительности обострения происходило существенное падение процента CD95+-клеток - 8,6+0,9 в начале обострения и 3,1+0,5% в конце. Торможение экспрессии Fas-антигена на лимфоцитах, вероятно, связано с эффектами, вызываемыми IL-4. По данным Vella A., (1998) IL-4, секретируемый Th2-клетками, ингибирует мРНК Fas-антигена, индуцируя, таким образом, выживание активированных форм лимфоцитов [Vella A., et al., 1998].

Изучение доли активационных маркеров лимфоцитов в обострение поллиноза, выходившими за верхнюю или нижнюю границы нормативного интервала, рассчитанного в контрольной группе больных поллинозом в стадии ремиссии, выявило у всех обследованных больных аномально возросшее содержание CD71+-клеток.

Полученные данные позволяют заключить, что CD-маркером обострения может считаться молекула CD71, экспрессия которой в исследуемой группе повышалась в 100% случаев. Соответственно, одним из ведущих механизмов перехода от состояния ремиссии к обострению, вероятно, является увеличение потребности пролиферирующих Т- и В-лимфоцитов в железе (Fe).

Основываясь на результатах настоящего исследования можно констатировать, что поступление специфических аллергенов в организм больных поллинозом провоцировало усиленное образование иммунокомпетентных клеток на фоне снижения их элиминации. Активация клеточного иммунитета сопровождалась увеличением доли аллерген-специфичных клонов Т- и В-лимфоцитов, дисбалансом в субпопуляционном составе Т-лимфоцитов, усилением активности Th2-клеток и снижением численности цитотоксических Т-лимфоцитов.

Отсутствие клинических симптомов вне периода пыления создает картину полного благополучия у больных поллинозом. Однако, полученные в ходе исследования результаты, позволяют утверждать, что у пациентов в стадии ремиссии имеются существенные сдвиги иммунных показателей. Они выражаются снижением общей доли Т-лимфоцитов, увеличением уровня В-лимфоцитов и относительного содержания отдельных субпопуляций NK-клеток по сравнению с группой контроля, которую составили здоровые лица.

Так, общая доля Т-клеток, несущих CD3+-антиген резко снижена: 66,7+1,0% в контроле и 46,9+1,9% - больные в ремиссии поллиноза (р<0,05). Понижение содержания популяции Т-лимфоцитов наблюдалось у 61,9% больных. Также был выявлен существенный дисбаланс в субпопуляционном составе Т-лимфоцитов: падала численность CD4+Т-хелперных лимфоцитов (36,7+1,3% контроль, 30,3+2,2% поллиноз ремиссия, р<0,05) на фоне нормального содержания цитотоксических CD8+Т-лимфоцитов.

Интересным, на наш взгляд, явился тот факт, что в самом начале ремиссии (продолжительностью от 1 до 3-х недель) все больные имели сниженное содержание (<min значения в контроле) цитотоксических Т-лимфоцитов (рис. 3). По всей видимости, это было следствием падения численности данной субпопуляции в обострение. Увеличение сроков ремиссии сопровождалось приростом CD8+-лимфоцитов, уровень которых аномально повышался в самом конце ремиссии перед началом сезона пыления.

Рисунок 3. Динамика изменения содержания CD8+-лимфоцитов у больных поллинозом.

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»