WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 | 4 |

На правах рукописи

Мухамедова Наталья Анатольевна

Влияние бишофитсодержащей рапы

соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области на функциональное состояние

и свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс

03.00.13 - физиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Астрахань-2009

Работа выполнена на кафедре молекулярной биологии, генетики и биохимии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Астраханский государственный университет»

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор

Кондратенко Елена Игоревна

Официальные оппоненты - доктор биологических наук, доцент

Лазько Марина Владимировна

доктор биологических наук, доцент

Котельников Андрей Вячеславович

Ведущая организация – Ставропольский государственный университет

Защита состоится 26 июня 2009 года в 14 часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.009.01 при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, Астрахань, пл. Шаумяна, д.1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета по адресу: 414000, Астрахань, пл. Шаумяна, д.1

Автореферат разослан 25 мая 2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор биологических наук Нестеров Ю.В.

АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ

Неблагоприятная экологическая обстановка, а также стресс-обусловленная нагрузка на живой организм являются причиной развития макро- и микрополиэлементозов. Все это приводит к биохимическим и функциональным изменениям, которые негативно отражаются на состоянии здоровья, работоспособности и качестве жизни человека. Поэтому исследование зависимости физиологических процессов от обеспеченности их макроэлементами стало предметом изучения многих известных ученых (Carl, G, 1994; А.П. Авцин, 1991; Н.А. Агаджанян, Н.В. Ермакова, 1997; А.В.Скальный, А.Т.Быков, 2003)

Одним из основных макроэлементов в организме человека является магний. Существующие средства восполнения недостатка магния в организме представляют собой лекарственные препараты и пищевые добавки, которые принимаются перорально (Tsuji H. Et. Fl., 1994; Компанцева Е.В., и соавт., 2002; Забелина В.Д., 2003; Скальный А.В., 2004). Отличительной особенностью магнийсодержащих препаратов при их наружном применении является их способность снимать воспалительные реакции и болевой синдром при различны заболеваниях ОДС, оказывать мощный седативный эффект и улучшать физико-химические показатели кожи при его наружном применении (Стрельцов Д.А., 2001, 2002; Мотов А.А., 2003, 2004, 2005).

Магнийсодержащие минералы эффективно применяются в бальнеологии и косметологии ( Dyckner, Webster, 1984; Nigam S. с соавт., 1986; Смирнова, Л.А., 1994; Спасов, А.А., 2003; Щава С.Н., 2001). В этой связи особое внимание привлекает минерал бишофит, содержащий максимальное количество магния хлорида (до 95-96 % в сухом остатке). Условия существования бишофитсодержащей рапы при непосредственном контакте с окружающей средой формируют сложную органоминеральную композицию, физиологические особенности, действия которой не исследованы. В зарубежной практике данный минерал, а также содержащая его рапа Поморийского озера (Болгария) и Мертвого моря (Израиль, Иордания), используется как основа для противовоспалительных средств наружного применения. Подземные залежи бишофита имеются в Прикаспийской впадине. В Астраханской области также имеются запасы магнийсодержащих веществ в многочисленных соленых озерах, одним из которых является озеро «Малое Лиманское». Физиологические особенности действия Астраханского озерного бишофита не исследованы. Биологическая активность озерной рапы «Малое Лиманское» должна иметь ряд определенных особенностей по сравнению с подземным минеральным бишофитом. В связи с этим изучение функционального состояния организма под влиянием рапы озера «Малое Лиманское» является актуальным.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Установить влияние бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области на физиологические параметры и свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

    1. Оценить токсикологическую безопасность рапы Астраханского озера «Малое Лиманское».
    2. Исследовать влияние физиологически адекватного разведения раствора рапы, вводимого внутрижелудочно, на показатели крови крыс.
    3. Изучить влияние рапы соленого озера «Малое Лиманское» на ориентировочно-исследовательское поведение крыс.
    4. Оценить эффект раствора рапы на интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по следующим показателям: содержание малонового диальдегида (МДА), скорость спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ в гомогенатах тканей печени, почек, миокарда; уровень промежуточных продуктов ПОЛ (ацилгидроперекиси, кетодиены и сопряженные триены, диеновые конъюгаты) в липидных экстрактах плазмы крови и степень перекисного гемолиза эритроцитов.
    5. Изучить влияние раствора рапы на процессы окислительной модификации белков (ОМБ) плазмы крови и миокарда (кетодинитрофенилгидразоны, алифатические альдегидо- и кетонопроизводные динитрофенилгидразонов основного характера) и сопоставить характер изменения интенсивности ПОЛ и ОМБ.
    6. Изучить изменения активности ферментативного звена антиоксидантной системы самцов крыс и активность антиоксидантного белка крови – церулоплазмина – под воздействием растворов бишофитсодержащей рапы (РАР) и Волгоградского бишофита (РВБ).
    7. Провести сравнительный анализ эффектов воздействия растворов бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области и Волгоградского бишофита на физиологические параметры и показатели свободнорадикального гомеостаза самцов крыс.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые исследован химический состав рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области. В рапе обнаружены бальнеологически значимые количества бишофита, соединений калия, брома и бора, органические компоненты и установлена ее токсикологическая безопасность.

Обнаружено влияние внутрижелудочного введения бишофитсодержащей рапы на структуру ориентировочно-исследовательского поведения самцов крыс, заключающееся в снижении показателей тревожности.

Впервые установлены тканеспецифические изменения интенсивности перекисного окисления липидов и окислительной модификации белков в условиях внутрижелудочного введения бишофитсодержащей рапы.

Показано, что бишофитсодержащая рапа соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области способствует активации ферментативного звена антиоксидантной системы самцов крыс. Специфика влияния бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области заключается в значительном снижении интенсивности окислительной модификации белков миокарда. Она не является полным аналогом Волгоградского бишофита.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Экспериментально доказана целесообразность использования рапы соленого озера «Малое Лиманское» в качестве бальнеологического средства.

Разработаны технические условия на применение бишофитсодержащей рапы в качестве косметического сырья.

Созданы рецептуры и отработана технология введения бишофитсодержащей рапы в косметические средства для волос и кожи головы.

Физиологически обоснована целесообразность применения бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области в бальнеологической практике.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

  1. Рапа озера «Малое Лиманское» при внутрижелудочном введении в изоосмотическом разведении не является токсичной, тканеспецифически изменяет про- и антиоксидантное равновесие в организме самцов крыс, способствует изменению структуры ориентировочно-исследовательского поведения животных и уменьшения уровня тревожности.
  2. Физиологические аспекты бальнеологической реакции, развивающейся под воздействием внутрижелудочного введения рапы озера «Малое Лиманское» Астраханской области, заключается в активации ферментативного звена антиоксидантной системы и уменьшении интенсивности окислительной модификации белков миокарда.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Результаты исследования доложены на конференциях и опубликованы в материалах IХ международной научной конференции «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря» (2006), II Всероссийской научной конференции «Экологические проблемы природных и урбанизированных территорий» (Астрахань, 2008), VI международной практической конференции «Человек и животные» (Астрахань, 2008), Всероссийского форума «Здравница» (Москва, 2008), XVI Российского национального конгресса «Человек и лекарство» (Москва, 2009), IV Международной (XIII Всероссийской) Пироговской студенческой научной медицинской конференции (Москва, 2009), Х Всероссийской научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Молодежь и наука ХХI века», посвященная 85-летию со дня рождения В.П. Астафьева (Красноярск, 2009), научной конференции с международным участием «Научный прогресс на рубеже тысячелетий - 2009» (Прага, 2009), Каспийском инновационном форуме (Астрахань, 2009).

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликовано 8 работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения и обсуждения результатов собственных исследований, выводов. Работа изложена на 125 стр., содержит 14 таблиц, 2 рисунка, список литературы включает 143 источника, из которых 57 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Санитарно-микробиологические показатели рапы соленого озера «Малое Лиманское» Лиманского района Астраханской области соответствуют установленным нормам. Токсичные компоненты содержатся в количествах, значительно меньших допустимых концентраций. Содержание в рапе радионуклидов не превышает пределов, установленных нормами радиационной безопасности (Бальнеологическое заключение ФГУ «РНЦ ВМиК Россздрава» № 14/98 от 04.03.2008 г.).

Изучение химического состава рапы проводили лазерным масс-спектральным методом на приборе ЭМАЛ-2.

Изучение токсикологической безопасности магнийсодержащей рапы озера Малое Лиманское Астраханской области проводилось двумя способами: 1) по санитарно-микробиологической оценке (инфузории-парамеции) («Методы определения токсичности» ГОСТ 13496.7-97); 2) при помощи методики определения токсичности в биопробе на лабораторных животных (мыши) («Методические указания по определению токсичности кормов, кормовых добавок и сырья для производства кормов в биопробе на лабораторных животных» », № 13-5-02/0795 от 26.06.2003г.).

Схема эксперимента. Исследования проводились на 60 белых беспородных крысах-самцах со средней массой 250 г. Возраст животных составлял 6 месяцев.

В качестве препарата сравнения был выбран хорошо изученный минеральный бишофит Волгоградского месторождения. Использовался раствор минерала бишофит, очищенный от техногенных примесей.

Самцы крыс были разделены на три группы: 1) животные, получавшие внутрижелудочно NaCl (0,9% раствор); 2) животные, получавшие внутрижелудочно раствор рапы Астраханского соленого озера в физиологически адекватном разведении; 3) животные, получавшие внутрижелудочно раствор Волгоградского бишофита. Процедура введения исследуемых веществ продолжалась в течение 10 дней (ежедневно, однократно). Внутрижелудочные введения производили с помощью зонда в

дозе 3 мл/кг. Все животные содержались в стандартных условиях вивария со

свободным доступом к воде и пище. Умерщвление животных декапитацией

проводили после предварительной наркотизации внутрибрюшинным введением этаминала натрия в дозе 4 мг/100 г массы тела.

Приготовление растворов. Раствор Астраханской рапы (РАР) и раствор Волгоградского бишофита (РВБ) разводили до получения изотонического раствора. Точку изотоничности находили с помощью теста на осмотическую резистентность эритроцитов (Кошев В.И., 2004).

До и после эксперимента оценивали вес животных. Определяли изменения относительной массы надпочечников и щитовидной железы. В крови определяли уровень гемоглобина (с помощью набора «LACHEMA») и цветовой показатель, количество эритроцитов и лейкоцитов (подсчет производили стандартным способом с помощью камеры Горяева).

Ориентировочно-исследовательская активность. Влияние раствора Астраханской рапы на ориентировочно-исследовательское поведение изучалась в условиях теста «открытое поле» (Bures Y., Buresova O., 1983), при котором регистрировали следующие показатели: количество пересеченных квадратов (горизонтальная двигательная активность), количество вставаний на задние лапы (вертикальная двигательная активность), количество обследованных отверстий (ориентировочно-исследовательская активность), число выходов в центральную зону, количество актов груминга, количество фекальных болюсов (эмоциональный фактор).

Определение активности щелочной фосфатазы в плазме крови при внутрижелудочном введении раствора Астраханской рапы проводили унифицированным методом по «конечной точке». Метод основан на образовании п-нитрофенола из п-нитрофенилфосфата в реакции со щелочной фосфатазой.

Определение активности церулоплазмина в сыворотке крови. Определение активности основного медьпротеида крови – церулоплазмина проводили по ускоренной методике, предложенной Э.В. Тен (2007). Метод основан на реакции окисления парафенилендиамина. Активность церулоплазмина измеряли в единицах оптической плотности.

Pages:     || 2 | 3 | 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»