WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

Поскольку флуоресцентный анализ не позволил исследовать организацию актина в ядре, нами был проведен детальный ультраструктурный анализ с использованием фиксации, специфически выявляющей актиновые микрофиламенты (Parfenov et al., 1995). Электронно-микроскопический анализ показал, что актин в ядре ооцитов ксенопуса присутствует в виде филаментов, представляющих собой скрученные нити толщиной около 0,1 мкм и длиной до нескольких микрон (рис. 9, в), которые образуют сеть, пронизывающую все внутриядерное пространство. Актин-содержащие филаменты часто располагаются вблизи ядерной оболочки и контактируют с ядрышками и баскет-структурами ядерных пор (рис. 9, г). При инкубации ооцитов с латрункулином, деполимеризующим актин, мы отмечали нарушения морфологии ядра и строения ядерной оболочки. Наши результаты, в совокупности с биохимическими данными, позволяют предполагать, что актин-содержащие филаменты, соединяя внутриядерные структуры напрямую с ядерными порами, могут обеспечивать путь для направленного транспорта молекул внутри ядра и между ядром и цитоплазмой. Недавно в составе ядерной оболочки были выявлены белки-несприны, которые могут связываться с актином как внутри ядра, так и в цитоплазме (Warren et al., 2005; Worman, Gundersen, 2006). Не исключено, что ядерная оболочка опосредует связь между ядерным матриксом и цитоскелетом, обеспечивая согласованное функционирование клетки как единого целого.

Рис. 9. Актин-содержащие филаменты в ядрах ооцитов ксенопуса. а, б – целый ооцит и изолированное ядро ооцита ксенопуса, окрашенные на актин флуоресцентно меченым фаллоидином (интенсивная окраска наблюдается в ядре ооцита; неокрашенные включения сферической формы внутри ядра соответствуют ядрышкам; ц – цитоплазма; я – ядро); в, г – ультраструктура актин-содержащих филаментов в ядрах ооцитов амфибий и их контакт с баскет-структурами ядерных пор (стрелки отмечают актин-содержащие филаменты; я – ядро).

ВЫВОДЫ.

1. Увеличение площади поверхности и объема мембран эндоплазматического ретикулума в околоядерной области ооцита на 3-й стадии оогенеза может быть обусловлено сборкой новых фрагментов растущей ядерной оболочки.

2. Пористые пластинки, входящие в состав ЭПР и содержащие цитоплазматические поры, могут сливаться с наружной мембраной ядра и служить источником мембран и нуклеопоринов для собирающейся ядерной оболочки и ядерных пор.

3. В цитоплазме ранних ооцитов амфибий впервые выявлены миелиноподобные структуры, которые могут выполнять роль депо мембран для ЭПР на стадиях интенсивного роста и развития ооцита.

4. Сборка ядерных поровых комплексов происходит через формирование промежуточных структур. Блокирование встраивания нуклеопорина р62 в ядерную пору нарушает начальные этапы ее сборки в растущих ооцитах.

5. Предложена модель сборки ядерной оболочки в растущих ооцитах амфибий за счет слияния пузырьков ЭПР с наружной ядерной мембраной и перемещения части мембраны пузырька через мембранный компонент ядерной поры внутрь ядра. Далее два фрагмента мембраны пузырька сближаются и формируют новый участок ядерной оболочки, в котором инициируется сборка новых ядерных пор.

6. Электронно-микроскопический анализ выявил в ядрах ооцитов актин-содержащие филаменты, контактирующие с ядрышками и ядерными поровыми комплексами. Деполимеризация этих филаментов нарушает морфологию ядра. Предполагается, что данные филаменты вовлечены во внутриядерный и ядерно-цитоплазматический транспорт, а также в сборку новых фрагментов ядерной оболочки.

Список основных публикаций по теме диссертации.

  1. Семакова К.Н., Киселева Е.В. Миелино-подобные структуры как возможный источник гладкого эндоплазматического ретикулума в ранних ооцитах амфибий. Цитология. 2003. 45(8) : 246-257.
  2. Morozova K., Kiseleva E. New model of nuclear envelope assembly using endoplasmic reticulum vesicles. 8th Asia-Pacific Conference on Electron Microscopy (8APEM). Kanazawa, Japan, 2004. P. 76.
  3. Morozova K., Kiseleva E. Cytoplasmic annulate lamellae are specific organelles of actively growing and rapidly dividing cells. Materials of Russian-Chinese Symposium “Life Science”. Puschino, Russia, 2004. P. 122.
  4. Морозова К.Н., Аллен Т.Д., Киселева Е.В. Исследование механизмов формирования внутренней ядерной мембраны в растущих ооцитах амфибий. III съезд ВОГиС Генетика в XXI: современное состояние и перспективы развития. Москва, 2004. Т.II С. 263.
  5. Morozova K.N., Kiseleva E.V. Striking myelin-like structures unwrapping in Xenopus oocytes: a source of membranes or the store of their excess 7th Multinational Congress on Microscopy. Portoro, Slovenia, 2005. Abstract book. P. 27.
  6. Kiseleva, E, Morozova, K., Goldberg, M.W., Rutherford, S., Allen, T.D. New mechanism of nuclear envelope and nuclear pore assembly in growing nuclei. Abstract Book of the EMBO/FEBS Conference on Nuclear Structure and Dynamics. La Grande Motte, France, 2005. P. 81.
  7. Морозова К.Н., Губанова Н.В., Киселева Е.В. Структурная организация и возможная функциональная роль пористых пластинок, содержащих цитоплазматические поры. Цитология. 2005. 47(8) : 667-678.
  8. Morozova K.N., Kiseleva E.V. Defects in nucleo-cytoplasmic transport and nuclear pore complexes assembly caused by immunodepletion of p62 nucleoporin. Materials of 16th International Microscopy Congress. Sapporo, Japan, 2006. P. 369.
  9. Губанова Н.В., Морозова К.Н., Киселева Е.В. Структурная организация, функция и динамика ядерных пор. Цитология. 2006. 48(11) (принята в печать).
  10. Морозова К.Н., Киселева Е.В. Морфометрический анализ динамики эндоплазматического ретикулума в растущих ооцитax амфибий. Цитология. 2006. 48(12) (принята в печать).
Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»